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一株肉桂炭疽病病原菌分离鉴定及生防菌筛选

北方园艺 2024年第8期 102-108页

作者：王洁梁丽婷谢欣怡黄荣韶姚绍嫦谭小明广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学壮瑶药重点实验室广西南宁530200 广西中医药大学广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室广西南宁530200

以广西防城港人工栽培的肉桂病叶为试材,采用内生真菌分离纯化法、形态学观察、ITS测序和平板对峙等方法,研究了肉桂炭疽病病原菌的分类地位及其拮抗菌株的筛选,以期为肉桂炭疽病生防菌开发提供参考依据。结果表明:从广西防城港肉桂病... 详细信息

以广西防城港人工栽培的肉桂病叶为试材,采用内生真菌分离纯化法、形态学观察、ITS测序和平板对峙等方法,研究了肉桂炭疽病病原菌的分类地位及其拮抗菌株的筛选,以期为肉桂炭疽病生防菌开发提供参考依据。结果表明:从广西防城港肉桂病叶中分离出6株真菌(B1~B6),B6明显致病。通过形态和分子生物学鉴定该菌株为炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides。平板对峙结果表明,RG256拮抗效果最佳,抑制率为77.05%±5.06%,鉴定为Gliocladiopsis sp.。综上所述,明确广西防城港肉桂炭疽病的病原真菌为炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),并筛选到对肉桂炭疽病病原真菌有拮抗作用的生防菌株,为肉桂炭疽病的绿色防治提供参考依据。

关键词：肉桂炭疽病菌内生真菌拮抗菌株

氮磷钾肥对有柄石韦生理及绿原酸合成积累的影响

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广西植物 2024年第5期44卷 972-980页

作者：步园园潘志芳崔祥祥周笑陈建桦黄荣韶李良波广西中医药大学药学院南宁530200 广西中医药大学广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室南宁530200

为探讨氮磷钾3种养分对有柄石韦生理及有效成分绿原酸合成积累的影响,该研究以有柄石韦组培苗为材料,分别用低养分(不施肥:N_(0),P_(0),K_(0))、正常施肥(N:0.20 g·kg^(-1),P:0.15 g·kg^(-1),K:0.15 g·kg^(-1))和高养分(N 1:0.40 g·... 详细信息

为探讨氮磷钾3种养分对有柄石韦生理及有效成分绿原酸合成积累的影响,该研究以有柄石韦组培苗为材料,分别用低养分(不施肥:N_(0),P_(0),K_(0))、正常施肥(N:0.20 g·kg^(-1),P:0.15 g·kg^(-1),K:0.15 g·kg^(-1))和高养分(N 1:0.40 g·kg^(-1),P 1:0.30 g·kg^(-1),K 1:0.30 g·kg^(-1))3个浓度梯度,设置7个处理分别为NPK、N_(0)PK、N_(1)PK、NP_(0)K、NP_(1)K、NPK_(0)、NPK_(1),测定不同处理下有柄石韦的抗性生理指标、绿原酸(CGA)含量及其合成关键酶活性。结果表明:(1)氮磷钾肥对有柄石韦的抗性生理有显著的影响,超氧化物歧化酶(SOD)在高氮和低钾处理中活性显著增加,而3种养分的低浓度和高浓度处理均会导致过氧化氢酶(CAT)活性显著上升。(2)不同养分水平氮、磷和钾对有柄石韦CGA含量存在显著影响,正常施肥的CGA含量最高,达到12.92 mg·g^(-1);高钾施肥的CGA含量最低,为7.79 mg·g^(-1);钾肥对CGA含量影响最显著。(3)CGA合成关键酶活性在不同施肥处理中差异显著,CGA含量与奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(HQT)和4-香豆酰辅酶A连接酶(4CL)活性呈显著正相关,与莽草酸羟基肉酰转移酶(HCT)活性显著负相关,HQT、4CL和HCT是导致CGA含量差异的关键因素。该研究结果为有柄石韦药材的人工栽培提供了理论依据。

关键词：有柄石韦氮磷钾肥生理绿原酸积累

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氮素种类对牛大力根系生长及植株生理特性的影响

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时珍国医国药 2024年

作者：陈少容李岱霖莫燕兰欧一忠陈明权利达朝姚绍嫦李良波陈建桦黄荣韶海南正生堂食品科技有限公司广西大学广西中医药大学桂林亦元生现代生物技术有限公司广西南宁市广泽农业开发有限公司广州白云山陈李济药厂有限公司

目的探究不同的氮素种类对牛大力生长及其产量性状的影响,为牛大力大田栽培中的肥料合理使用提供理论指导。方法以“广泽一号”牛大力为研究对象,采用温室盆栽方式,进行不同的氮素处理:磷酸一铵(T1)、硫酸铵(T2)、硝酸钙(T3)、尿素(T... 详细信息

目的探究不同的氮素种类对牛大力生长及其产量性状的影响,为牛大力大田栽培中的肥料合理使用提供理论指导。方法以“广泽一号”牛大力为研究对象,采用温室盆栽方式,进行不同的氮素处理:磷酸一铵(T1)、硫酸铵(T2)、硝酸钙(T3)、尿素(T4),以施用清水为对照(T0),对其农艺性状、光合参数、生理指标、根系生长指标进行观察和检测。结果硫酸铵能显著增强牛大力叶片净光合速率,促进其侧根的形成及膨大,其处理的根鲜重、膨大根鲜重及干重、膨大根条数、根长、地上鲜重皆为最大,较对照分别显著增加了31.79%、24.48%、29.51%、71.18%、6.93%、27.29%。硫酸铵、硝酸钙均显著提高牛大力叶片可溶性糖、可溶性蛋白含量,增强其硝酸还原酶(NR)与谷氨酰胺合成酶(GS)活性,硝酸钙的根系生长指标均与对照无显著差异。结论硫酸铵对牛大力的生长及根系膨大具有良好的促进作用。

关键词：牛大力氮素生理特性根系

15种中药基原豆科植物查尔酮合酶基因的生物信息学分析

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分子植物育种 2023年

作者：陈靖余林婵明如宏黄鼎谭勇黄荣韶姚绍嫦广西中医药大学药学院广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室

查尔酮合酶(chalcone synthase， CHS)是植物类黄酮生物合成途径的关键限速酶之一。为了比较不同豆科植物CHS的氨基酸序列结构特征及预测其在调控类黄酮化合物的生物合成过程中发挥的作用，本研究利用生物信息学分析15种中药基原的豆科... 详细信息

查尔酮合酶(chalcone synthase， CHS)是植物类黄酮生物合成途径的关键限速酶之一。为了比较不同豆科植物CHS的氨基酸序列结构特征及预测其在调控类黄酮化合物的生物合成过程中发挥的作用，本研究利用生物信息学分析15种中药基原的豆科植物CHS基因的编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、蛋白二级结构与系统发育树。结果表明，15种CHS蛋白均呈酸性，属于亲水性蛋白，大部分为稳定蛋白，定位于细胞质，无跨膜结构与信号肽，磷酸化位点总数51～62个；α螺旋与无规则卷曲是豆科植物CHS蛋白中主要存在的结构原件；15个豆科CHS基因均有CHS＿like的保守序列，其中5个属于PLN03172基因家族，其他的属于PLN03173基因家族；CHS的氨基酸序列高度同源，同源度为79.42%，均具有3个保守的蛋白催化位点、2个高度保守结构域、2个底物特异性残基与1个丙二酰辅酶A结合部位；系统进化树结果显示15种豆科植物CHS被分为3个分支，与植物分类学基本一致。基于上述结果，15种中药基原的豆科CHS具有较高的保守性和稳定性，推测可能执行类似的功能，研究结果为豆科植物CHS的功能及作用机制研究提供了理论依据。

关键词：中药基原植物豆科查尔酮合酶类黄酮生物信息学

野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能

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广西植物 2023年第7期43卷 1182-1192页

作者：姚裕群兰可黄荣韶吴炫柯广西科技大学医学部广西柳州545006 柳州市农业气象试验站广西柳州545003 广西中医药大学南宁530200

有益微生物组能帮助宿主植物防御病害。越南槐的根、茎和种子在野外环境下健康发芽生长,而栽培越南槐各组织极易感病。为了探明利用野生越南槐有益内生真菌组防治宿主病害的可能,该文在分离健康野生越南槐根、茎和种子内生真菌的基础上... 详细信息

有益微生物组能帮助宿主植物防御病害。越南槐的根、茎和种子在野外环境下健康发芽生长,而栽培越南槐各组织极易感病。为了探明利用野生越南槐有益内生真菌组防治宿主病害的可能,该文在分离健康野生越南槐根、茎和种子内生真菌的基础上,并结合形态学和ITS序列特征鉴定内生真菌,通过系统发育树、α-多样性指数和β-多样性指数分别分析各内生真菌组的系统进化、多样性和相似性,通过琼脂块法和平板对峙法测试内生真菌组的体外抗病原菌功能。结果表明:(1)从越南槐根、茎和种子内生真菌组分别分离鉴定131株23个分类单元、108株23个分类单元、64株11个分类单元;(2)特有属多且所有种均为特有种显示根、茎和种子内生真菌组在属种进化上具有组织特异性;(3)根-茎/根-种子/茎-种子间极低的β-多样性显示根、茎和种子各内生真菌组间的物种相似性极低;(4)高的α-多样性显示越南槐根、茎和种子均有丰富多样的内生真菌组;(5)各内生真菌组三分之一以上的分类单元在体外均能拮抗供试病原菌,根茎内生真菌组显示了强广谱的体外抗病原细/真菌功能,种子内生真菌组显示了强广谱的体外抗病原真菌功能。该研究结果表明健康野生越南槐根、茎和种子内部均存在有益内生真菌组,其具有生物多样性、组织特异性以及强广谱的体外抗病原菌功能,在宿主各组织的抗病性方面可能发挥重要作用。这些结果将为进一步利用有益真菌组防治栽培越南槐各组织病害提供了材料和实验基础。

关键词：野生越南槐有益内生真菌组生物多样性组织特异性抗病功能

越南槐根系内生真菌组的结构及其宿主相似抑菌功能分析

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南方农业学报 2022年第12期53卷 3489-3497页

作者：姚裕群兰可黄荣韶吴炫柯广西科技大学基础医学部广西柳州545006 广西中医药大学广西南宁530200 柳州市农业气象试验站广西柳州545003

【目的】分析比较越南槐野生与栽培根系内生真菌组的结构及宿主相似抑菌功能,为利用有益内生真菌组改善栽培宿主药材质量提供参考。【方法】采用组织块法分别从野生和栽培根系分离内生真菌,结合形态学和ITS序列特征鉴定内生真菌;分别采... 详细信息

【目的】分析比较越南槐野生与栽培根系内生真菌组的结构及宿主相似抑菌功能,为利用有益内生真菌组改善栽培宿主药材质量提供参考。【方法】采用组织块法分别从野生和栽培根系分离内生真菌,结合形态学和ITS序列特征鉴定内生真菌;分别采用琼脂块法和平板对峙法,以人体病原菌和丝状病原真菌为靶标菌,测定根系内生真菌组各分类单元的抑菌圈和抑制率。【结果】从越南槐野生和栽培根系分别分离鉴定得到234株36个分类单元和48株10个分类单元的内生真菌。野生根系内生真菌组的属、优势属、特有属、种、特有种的数目为栽培根系内生真菌组的3~5倍,其α多样性指数显著高于栽培根系内生真菌组(P<0.05),而两者间的β-多样性指数均极低。对于宿主相似抑菌活性分类单元的数目,野生根系内生真菌组是栽培根系内生真菌组的6~10倍,其中,分类单元Colletotrichum simmondsii对3种人体病原菌的抑菌圈直径均大于或等于阳性对照,Aspergillu.flavus、Phoma sp.、Purpureocillium lilacinum、Trichoderma asperellum、Trichoderma sp.、Talaromyces funiculosus、Fomitopsis sp.、Fusarium solani和Rhexocercospo-ridium sp.等9个分类单元对3种丝状病原真菌的抑制率均超过50%。【结论】越南槐野生根系内生真菌组具有生境特异性,生物多样性更丰富,且有强广谱的宿主相似抑菌功能,有益于在宿主根系合成结构独特、生物活性多样的代谢产物,进而赋予宿主药材独特的药效,可应用于改善栽培宿主药材质量。

关键词：越南槐内生真菌组生物多样生境特异性宿主相似抑菌功能

越南槐内生真菌JXRPH-20的鉴定及其体外抗真菌功能

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分子植物育种 2022年

作者：姚裕群黄丽谢正轶罗宇黄荣韶吴炫柯柳州市农业气象试验站广西科技大学基础医学部广西中医药大学

广西著名道地药材山豆根抗真菌作用显著，其基源植物越南槐根系内生真菌可能具有宿主相似的抗真菌功能。为了从越南槐根系内生真菌获得抗真菌活性菌株，本研究以4种重要病原真菌，人体病原真菌Candida albicans和植物病原真菌Fusarium s...

广西著名道地药材山豆根抗真菌作用显著，其基源植物越南槐根系内生真菌可能具有宿主相似的抗真菌功能。为了从越南槐根系内生真菌获得抗真菌活性菌株，本研究以4种重要病原真菌，人体病原真菌Candida albicans和植物病原真菌Fusarium solani、Colletotriehum gloeosporioides、Alternaria panax为靶标菌，采用琼脂块法和平板对峙法筛选拮抗病原真菌的活性菌株，以菌丝生长法和微量肉汤稀释法测定其代谢产物的抗真菌活性，根据结合形态学和ITS序列特征鉴定活性菌株。结果表明：菌株JXRPH-20活菌块对C. albicans的抑菌圈直径为22 mm且比阳性对照大，对F. solani、C. gloeosporioides、A. panax的抑制率分别为58%、78%、60%；其代谢产物对这3种植物病原真菌菌丝生长抑制率均值为91%～100%，抑制效果约等于或大于阳性对照，对C. albican的最小抑菌浓度为4 μg/mL，对F. solani、C. gloeosporioides、A. panax的最小抑菌浓度为1～2 mg/mL，仅为阳性对照和宿主山豆根提取物的4～16倍和0.16～0.8倍；该菌株初步鉴定为曲霉菌Aspergillus sp. JXRPH-20。本研究为抗真菌的新型抗生素的开发研究提供参考。

关键词：

广西莪术实时荧光定量PCR内参基因筛选和验证

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分子植物育种 2023年

作者：李颖洁零唯明如宏谭勇黄荣韶黄鼎广西中医药大学药学院广西中医药大学广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室

为了分析广西莪术不同组织中倍半萜合成酶基因的表达水平，本研究选取10个候选内参基因(EF1α， eIF4α， Actin， PP2A， GAPDH， TUB6， TIP41， CYP2， SAND， UBC9)，以广西莪术的叶、不育苞片、花瓣、须根、块根和根茎六个不同组... 详细信息

为了分析广西莪术不同组织中倍半萜合成酶基因的表达水平，本研究选取10个候选内参基因(EF1α， eIF4α， Actin， PP2A， GAPDH， TUB6， TIP41， CYP2， SAND， UBC9)，以广西莪术的叶、不育苞片、花瓣、须根、块根和根茎六个不同组织为材料，利用qRT-PCR检测候选内参基因表达情况，应用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder分析各候选内参基因的稳定性，并通过检测倍半萜合成酶基因CwTPS32在不同组织中的表达情况，验证内参基因的可靠性。结果表明：geNorm、NormFinder和BestKeeper分析显示最稳定的内参基因分别是SAND、TIP41和Actin，RefFinder综合分析结果表明SAND是最稳定的内参基因。CwTPS32基因在SAND、TIP41和SAND+TIP41+eIF4α校正下表达模式与转录组数据相同，但以TUB6为内参时CwTPS32基因表达趋势与转录组数据相比有较大差异。综上，SAND和TIP41可作为广西莪术不同组织中基因表达分析的内参基因。本研究为开展广西莪术不同组织中功能基因的表达分析提供参考。

关键词：广西莪术内参基因实时荧光定量PCR 倍半萜合成酶

三七皂苷类自毒物质降解细菌分离及其降解特性

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广西植物 2023年第7期43卷 1173-1181页

作者：向维韦小兰曹科鑫李良波黄荣韶湖南农业大学园艺学院长沙410128 广西中医药大学药学院南宁530200 广西大学农学院南宁530004

三七是我国的名贵药材,但由于连作障碍发生严重,因此土壤中自毒物质的积累成为导致三七连作障碍发生的主要原因之一。生物降解土壤中的自毒物质是缓解连作障碍的有效措施,为筛选并利用降解菌使土壤中皂苷类自毒物质快速消减,该研究以皂... 详细信息

三七是我国的名贵药材,但由于连作障碍发生严重,因此土壤中自毒物质的积累成为导致三七连作障碍发生的主要原因之一。生物降解土壤中的自毒物质是缓解连作障碍的有效措施,为筛选并利用降解菌使土壤中皂苷类自毒物质快速消减,该研究以皂苷类自毒物质为筛选靶标,采用富集和驯化策略,从连作三七根际土壤中分离、筛选三七皂苷类自毒物质降解细菌,结合16S rRNA基因测序对高活性菌株进行分类鉴定,并对筛选得到的高活性菌株SC3的降解特性进行了研究。结果表明:(1)从三七根际土壤中成功分离出8株潜在自毒物质降解细菌,初筛评价结果显示SC3菌株对三七总皂苷的降解率最高,达87.42%。(2)通过16S rRNA基因序列分析,编号SC3的高活性菌株被鉴定为寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)细菌。(3)在相同培养条件下,菌株SC3对单体皂苷Rb_(1)的降解效果强于对Rg_(1)的降解。(4)在液体培养条件下,底物浓度、接种量和培养温度均会显著影响SC3菌株对单体皂苷Rb_(1)的降解效果。综上表明,采用富集和驯化策略可以有效筛选自毒物质降解细菌,SC3菌株具有消除连作土壤中皂苷类自毒物质的潜力。该研究结果为连作土壤修复提供了生物资源,并为今后深入研究皂苷降解机制提供了理论依据。

关键词：三七自毒作用自毒物质皂苷生物降解