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水母雪莲黄酮合成酶FNSII基因克隆及其在3种细胞系中的表达

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生物工程学报 2015年第12期31卷 1720-1727页

作者：王冰洁李厚华王亚杰高艳付婉艺魏新翠西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100 宝鸡海升现代农业有限公司陕西宝鸡721100 浙江大学农业与生物技术学院浙江杭州310000

水母雪莲是中国传统珍稀药材,其主要活性成分之一木犀草素具有预防和治疗癌症的功效。以水母雪莲绿色细胞系为试材,采用RT-PCR和RACE-PCR方法获得1个水母雪莲FNSII基因cDNA全长,命名为SmFNSII(GenBank登录号为KF170286)。序列分析结果表... 详细信息

水母雪莲是中国传统珍稀药材,其主要活性成分之一木犀草素具有预防和治疗癌症的功效。以水母雪莲绿色细胞系为试材,采用RT-PCR和RACE-PCR方法获得1个水母雪莲FNSII基因cDNA全长,命名为SmFNSII(GenBank登录号为KF170286)。序列分析结果表明:SmFNSII全长1 710 bp,包含34 bp的5?非编码区、125 bp的3?非编码区和1个长度为1 551 bp编码516个氨基酸的开放阅读框。氨基酸序列分析表明SmFNSII属于细胞色素P450 CYP93B亚家族单氧化酶。序列比对和系统进化分析表明,SmFNSII氨基酸序列与同科植物毛山柳菊的亲缘关系最近,相似性达87%以上。实时荧光定量PCR分析表明,SmFNSII在白色、绿色和红色细胞系均有表达,红色系中的表达量最高,白色系中表达量最低,此结果与高效液相色谱分析3种颜色细胞系中木犀草素含量结果一致。构建pET-SmFNSII原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达,诱导蛋白大小与预期一致。通过筛选FNSII基因表达水平高、高产木犀草素的水母雪莲细胞系和植株,可培育抗炎抗癌活性较高、具有高保健功能的雪莲生药新品种。

关键词：水母雪莲黄酮合成酶FNSII 基因克隆表达分析原核表达

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‘雪球’海棠组织培养体系的建立与优化

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2015年第3期43卷 77-82页

作者：王冰洁李厚华阙怡魏新翠王亚杰西北农林科技大学林学院陕西杨凌712100 重庆大学城市科技学院建筑学院重庆402167

【目的】建立‘雪球’海棠离体植株组织培养快繁体系,并对组织培养体系进行优化。【方法】以‘雪球’海棠当年生茎段为起始接种材料,获得无菌苗,利用无菌苗和试管苗叶片为材料,以MS为基础培养基,采用正交试验研究不同激素及其配比对雪... 详细信息

【目的】建立‘雪球’海棠离体植株组织培养快繁体系,并对组织培养体系进行优化。【方法】以‘雪球’海棠当年生茎段为起始接种材料,获得无菌苗,利用无菌苗和试管苗叶片为材料,以MS为基础培养基,采用正交试验研究不同激素及其配比对雪球组培苗扩繁、植株再生和组培苗生根的影响。【结果】用2g/L HgCl2处理‘雪球’海棠茎段外植体是较为恰当的消毒及获得无菌苗的方法。在MS+2.5mg/L 6-BA+0.3mg/L IBA培养基中组培苗的总增殖倍数最高,为9.11,为最适增殖培养基;在MS+0.5mg/L 6-BA+0.3mg/L IBA培养基中组培苗的总增殖倍数为6.38,分化的芽生长良好,无玻璃化,为获取叶盘不定芽再生试验用叶片的最适培养基。在MS+0.2 mg/L TDZ+0.1mg/L NAA培养基(以山梨醇为碳源)中,叶盘不定芽再生效率最高,为60.71%,为不定芽再生最适培养基。‘雪球’海棠生根容易,在1/2 MS+0.2mg/L IBA培养基中,组培苗培养7d开始生根,生根率为100.0%。【结论】建立了‘雪球’海棠组织培养体系,明显提高了其繁殖速率,使其生根率可达到100.0%。

关键词： '雪球’海棠组织培养植株再生生根诱导

凤丹牡丹ANS(PoANS)基因克隆、特性及表达

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东北林业大学学报 2016年第7期44卷 64-69页

作者：李果李厚华张延龙辛转霞魏新翠唐豆豆西北农林科技大学杨凌712100 济南市学大教育培训学校

通过RT-PCR技术,从凤丹牡丹花瓣中克隆出编码ANS基因的c DNA序列,并对其进行生物信息学分析。对不同开花阶段的凤丹花瓣进行实时荧光定量及总花青素质量分数测定,构建原核表达载体PET-28aANS,并转化大肠杆菌BL21感受态,经IPTG诱导进行... 详细信息

通过RT-PCR技术,从凤丹牡丹花瓣中克隆出编码ANS基因的c DNA序列,并对其进行生物信息学分析。对不同开花阶段的凤丹花瓣进行实时荧光定量及总花青素质量分数测定,构建原核表达载体PET-28aANS,并转化大肠杆菌BL21感受态,经IPTG诱导进行体外表达。结果表明:该序列编码区域共1 065 bp,编码354个氨基酸,其蛋白相对分子质量为40 475.5,亚细胞定位为细胞质的可能性最大;表达分析显示,ANS基因表达水平与不同开花时期的总花青素质量分数及花色相关,原核表达得到相对分子质量约为44 000的ANS-His-tag融合蛋白,与预测蛋白大小相一致。

关键词：凤丹牡丹 ANS基因表达分析原核表达

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15种红果肉海棠多酚及抗氧化活性分析

食品工业科技 2015年第20期36卷 133-136,144页

作者：魏新翠李厚华蔡雪雁梁峥唐豆豆西北农林科技大学林学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100 山西省农业科学院玉米研究所山西忻州030000

以15种红果肉海棠为材料,采用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基、清除[2,2′-连氨-（3-乙基并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐]（ABTS）自由基法对其进行了抗氧化活性评价。Folin-Ciocalteau法测其多酚含量,高效液相色谱（high performance liqu... 详细信息

以15种红果肉海棠为材料,采用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基、清除[2,2′-连氨-（3-乙基并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐]（ABTS）自由基法对其进行了抗氧化活性评价。Folin-Ciocalteau法测其多酚含量,高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）分析其酚类物质的组成与含量,相关系数法分析多酚、黄酮与抗氧化活性间的相关性。结果表明,其多酚含量为318.14~838.83 mg GAE/100 g干重,黄酮含量为367.64~1821.37 mg RE/100 g干重。印第安魔力海棠、红巴伦海棠、红园海棠和印第安夏天海棠的多酚和抗氧化能力均较高。检测出矢车菊素-半乳糖苷、矢车菊素-阿拉伯糖苷和芦丁等10种多酚类物质。

关键词：红果肉海棠多酚黄酮抗氧化单体酚

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紫叶桃叶片色素的定性及定量分析

西北林学院学报 2015年第3期30卷 206-210,223页

作者：蔡雪雁李厚华李玲高艳阙怡于航魏新翠西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨陵712100 西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100 上桥镇人民政府宁夏吴忠751100

通过紫外可见分光光度法,对紫叶桃叶片色素种类进行初步鉴定,同时对叶绿素、类胡萝卜素和总黄酮含量进行计算;通过高效液相色谱法,对单体酚种类和含量进行了定性定量分析,旨在为食品、药品行业筛选更具前景的天然色素。结果表明:紫叶桃... 详细信息

通过紫外可见分光光度法,对紫叶桃叶片色素种类进行初步鉴定,同时对叶绿素、类胡萝卜素和总黄酮含量进行计算;通过高效液相色谱法,对单体酚种类和含量进行了定性定量分析,旨在为食品、药品行业筛选更具前景的天然色素。结果表明:紫叶桃叶片中主要含有矢车菊素半乳糖苷、矢车菊素、槲皮素、芦丁、叶绿素、类胡萝卜素、杨梅素、绿原酸、儿茶素、表儿茶素、木犀草素、二氢杨梅素、二氢槲皮素、对香豆酸等。其中,矢车菊素及矢车菊素半乳糖苷为其叶片呈现红色的主要色素,含量分别为122.30 mg·kg-1和507.60 mg·kg-1,相对含量占检测色素总含量的1.81%,是一种良好的天然色素。叶绿素起着使紫叶桃叶片颜色加深的作用,类胡萝卜素、槲皮素、芦丁等起着辅助成色的作用。

关键词：紫叶桃花青苷矢车菊素半乳糖苷

氨溴索雾化吸入对高原慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并慢性肺心病患者排痰疗效的观察

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中华肺部疾病杂志（电子版） 2014年第3期7卷 76-77页

作者：种银侠魏新翠房银萍李亚娟吉艳琴解放军第四医院兰州军区呼吸内科中心西宁810007

高原地区对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）和慢性肺心病（chronic cor pulmonary,CCP）患者积极排痰,有效地清除气道分泌物是提高高原COPD和CCP救治成功的关键措施之一.近年来,我科采用氨溴索雾化吸... 详细信息

高原地区对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）和慢性肺心病（chronic cor pulmonary,CCP）患者积极排痰,有效地清除气道分泌物是提高高原COPD和CCP救治成功的关键措施之一.近年来,我科采用氨溴索雾化吸入辅助治疗高原COPD急性加重期（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD）合并CCP患者取得了良好效果,现作一报道.

关键词：肺疾病慢性阻塞性高原肺心病排痰氨溴索

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微笑是老师的真表情

新课程学习(上) 2014年第12期 245-245页

作者：魏新翠河北省石家庄市正定县诸福屯学区蟠桃小学

"用爱的微笑去征服学生的心灵"。作为实施愉快教育的途径之一,会收到良好的效果。一个笑意盎然的校园,才是一个人文校园所具备的标志之一。一、微笑——老师自信、宽容的镜子微笑是教师教学的王牌。微笑表明老师具有良好的人格修养,充... 详细信息

"用爱的微笑去征服学生的心灵"。作为实施愉快教育的途径之一,会收到良好的效果。一个笑意盎然的校园,才是一个人文校园所具备的标志之一。一、微笑——老师自信、宽容的镜子微笑是教师教学的王牌。微笑表明老师具有良好的人格修养,充满自信。面带微笑,表明自己有能力,有充分的信心,以不卑不亢的态度与学生交往,使学生产生信任感,容易使学生真正接受。微笑是一个老师真情最直接的流露,待人真心实意,而非虚情

关键词：微笑自信

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如何养成良好的小学语文学习习惯

中华少年 2016年第15期 99-页

作者：魏新翠河北省正定县诸福屯镇蟠桃小学

小学阶段是生活习惯、卫生习惯、学习习惯等各种习惯养成的最佳时期,良好的习惯对人生的发展有重要作用,习惯能造就人的性格,而性格能决定人的命运。小学阶段要注重培养良好的语文学习习惯,好的学习习惯能学生们在学习路上收益匪浅,语... 详细信息

小学阶段是生活习惯、卫生习惯、学习习惯等各种习惯养成的最佳时期,良好的习惯对人生的发展有重要作用,习惯能造就人的性格,而性格能决定人的命运。小学阶段要注重培养良好的语文学习习惯,好的学习习惯能学生们在学习路上收益匪浅,语文学习习惯是很重要的。小学阶段要着重帮助学生养成预习、多读书、善于观察、勤于动笔、独立思考勇于质疑、善于利用工具书、勤于背诵、良好的书写等习惯,为以后的语文学习打下良好的基础。

关键词：小学语文学习习惯

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小学语文个性化阅读教学研究

中国校外教育 2015年第6期 124-124页

作者：魏新翠河北省正定县诸福屯镇蟠桃小学

所谓个性化教学,即以"以人为本"为指导思想,尊重学生的个性差异,如性格、兴趣、爱好,并以此为出发点,使学生的自主学习能力、认知水平、性格等在教师的指导与教育下得到充分的发展。小学语文是一门非常重要的学科,在小学语文教学中进行... 详细信息

所谓个性化教学,即以"以人为本"为指导思想,尊重学生的个性差异,如性格、兴趣、爱好,并以此为出发点,使学生的自主学习能力、认知水平、性格等在教师的指导与教育下得到充分的发展。小学语文是一门非常重要的学科,在小学语文教学中进行个性化教学要基于学生实际水平,突出学生主体地位,运用多种教学方法提高学生语文能力,从而实现学生个性化发展。

关键词：小学语文阅读教学个性化