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线粒体Rho蛋白1对无镁致痫大鼠海马神经元的作用及其机制研究

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线粒体Rho蛋白1对无镁致痫大鼠海马神经元的作用及其机制研究

作者：高延伦郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的癫痫(epilepsy,EP)是由多种原因引起的,以反复出现神经元异常放电所致的短暂性脑功能障碍为特征的一组病变。长期、反复发作的癫痫严重影响着患者的生活和工作,也给家庭,社会带来了较大的负面影响。癫痫发病机制的复杂性,使... 详细信息

背景与目的癫痫(epilepsy,EP)是由多种原因引起的,以反复出现神经元异常放电所致的短暂性脑功能障碍为特征的一组病变。长期、反复发作的癫痫严重影响着患者的生活和工作,也给家庭,社会带来了较大的负面影响。癫痫发病机制的复杂性,使得至今尚未能了解其全部机制,因而进一步明确癫痫的发病机理及寻求新的诊治靶点具有重要意义。线粒体具有为细胞生理活动提供能量和调控信号传导等重要作用。因此近年来成为癫痫发病机制的研究热点。以往研究经证实癫痫发作可使线粒体功能受损,造成大量的变性蛋白质和受损细胞器堆积在细胞内。同时使损伤的线粒体膜电位降低,并发生通透性转运,释放凋亡相关因子,最终引起细胞凋亡,形成神经元对癫痫损伤更加敏感的恶性循环。因此,及时清除受损线粒体和维持线粒体正常功能显得至关重要。线粒体移动在清除受损线粒体和维持线粒体正常功能中发挥重要作用:线粒体移动可将受损线粒体逆行运动至胞体被降解和回收,同时将正常线粒体顺向运动至神经元的作用部位而发挥功能,以保证病理状态下线粒体在细胞中占领正确的位置及分布,来应对病理损伤。然而,关于线粒体是如何移动的机制并不明确,一些相关研究证实存在一部分与线粒体移动密切相关联蛋白质分子,如为线粒体移动提供驱动力的马达分子Kinesin(驱动蛋白)、Dynein(动力蛋白)和Myosin(肌球蛋白);将马达分子与线粒体相连的衔接蛋白如Miro1/2(mitochondrial Rho-GTPase 1/2)、Milton和Syntabulin。Miro蛋白是小GTPase家族中的一员,它的N端和C端各有一个GTPase结构域,同时含有与Ca2+相结合的EF手型结构域,其通过C端跨膜区域与线粒体定向结合。以往研究发现,Miro可与Milton形成复合物,然后与Kinesin肌球重链(KHC)连接,进而调控线粒体沿微管的快速移动。目前,大量国内外研究证实癫痫过程中存在线粒体功能及结构损伤。但线粒体移动异常在癫痫神经元线粒体功能结构受损中发挥何种作用;能否通过调控线粒体移动而发挥神经保护作用仍然未知。因此,本课题在前期实验的基础上,通过体外原代培养海马神经元及无镁诱导建立癫痫放电模型,同时构建腺病毒真核表达质粒干预Miro1表达,通过观察Miro1介导的线粒体移动对无镁致痫的海马神经元细胞形态、细胞活性、神经元损伤和凋亡的影响,探讨是否通过调控线粒体移动,减少线粒体损伤,抗凋亡级联发挥癫痫神经保护作用,并通过检测神经元中Bax、caspase-3及Bcl-2表达水平的变化,初步探讨其中的可能机制。材料与方法取新生24h内Sprague-Dawley大鼠,75%酒精浸泡消毒后,断头取脑,分离双侧海马组织,制成单细胞悬液,体外进行大鼠海马神经元的原代培养。于倒置相差显微镜下观察海马神经元在培养过程中的形态学变化,选取培养至10d的神经元细胞,采用免疫荧光的方法进行神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)神经元纯度鉴定。同时构建表达大鼠Miro1基因的重组腺病毒真核表达质粒(r Ad-Miro1)以及不表达任何外源基因的对照腺病毒载体(r Ad),并鉴定。取培养至14d的海马神经元随机分为对照组(CON组)、无镁诱导组、无镁诱导+r Ad转染组、无镁诱导+r Ad-Miro1转染组四组,后三组按照Sombati细胞模型方法,进行无镁细胞外液处理3h后恢复至正常细胞培养液,其中无镁诱导+r Ad转染组、无镁诱导+r Ad-Miro1转染组在无镁细胞外液诱导前48h分别转染r Ad及r Ad-Miro1进行预处理。造模成功24h后通过MTS试剂盒分别测定各组海马神经元细胞活性变化,取各组中部分细胞采用TUNEL法检测神经元凋亡情况,剩余细胞采用QT-PCR法测定Miro1 m RNA的表达,Western blot法检测Miro1、Bax、Bcl-2及Caspase 3的表达。结果1.细胞形态学观察:倒置差相显微镜下可观察到刚种植于细胞培养板内的大鼠海马神经元为较小体积的单个细胞,呈圆形,饱满,透亮,且散在分布。部分神经元细胞在培养3h后开始贴壁,几乎所有的神经元细胞培养至24h后均贴壁生长,并且有明显的长短不一的突起长出。培养至7d时,典型的神经元轴突与树突即可被观察到,且胞体立体感强,细胞核呈空泡状,但神经元与神经元之间尚未形成突触,大多为单个细胞。培养至10d左右大鼠海马神经元之间开始形成网状联系。培养至14 d时神经元胞体最大,轴突、树突清晰,细胞间网络变得密集。培养至至4w时,维持液中开始有大量细胞碎片出现,细胞逐渐凋亡。2.海马神经元纯度鉴定:取培养至10d的海马神经元细胞爬片,采用免疫荧光细胞化学方法进行鉴定,结果显示:海马神经元纯度达93.1%。3.神经元活性测定:MT

关键词：癫痫神经元 Miro1 神经保护原代培养

脑小血管病认知障碍患者Hcy、hs-CRP、PLR水平变化及其临床意义

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中国实用医刊 2023年第18期50卷 41-44页

作者：王红旭高延伦王苗苗平顶山市第一人民医院神经内科平顶山467000

目的探讨脑小血管病(CSVD)认知障碍患者同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)水平变化情况及其临床意义。方法抽取2020年1月至2022年12月平顶山市第一人民医院收治的182例CSVD患者,根据蒙特利尔认知量... 详细信息

目的探讨脑小血管病(CSVD)认知障碍患者同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)水平变化情况及其临床意义。方法抽取2020年1月至2022年12月平顶山市第一人民医院收治的182例CSVD患者,根据蒙特利尔认知量表(MoCA)评分进行分组,MoCA评分<26分的100例认知功能障碍患者纳入研究组,MoCA评分≥26分的82例无认知功能障碍患者纳入对照组。比较两组Hcy、hs-CRP、PLR等指标变化,分析其与脑小血管患者出现认知障碍的相关性。结果研究组血Hcy、hs-CRP、PLR水平均高于对照组,高密度脂蛋白水平低于对照组(P<0.05)。研究组腔隙性脑梗死数量及脑白质病变评分均高于对照组(P均<0.05)。经Logistic回归分析结果显示,血Hcy、hs-CRP、PLR是CSVD患者出现认知功能障碍的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线结果显示,Hcy、hs-CRP、PLR单独及联合检测预测CSVD患者出现认知功能障碍的曲线下面积分别为0.811、0.886,0.881、0.955。结论联合检测血Hcy、hs-CRP、PLR对预测CSVD患者出现认知功能障碍有较高的应用价值。

关键词：脑小血管病认知障碍同型半胱氨酸超敏C反应蛋白血小板与淋巴细胞比值危险因素

急性脑梗死静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗预后不良的风险预测列线图模型构建研究

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齐齐哈尔医学院学报 2023年第3期44卷 209-213页

作者：高延伦王艳晖薛文俊平顶山市第一人民医院神经内科二病区河南平顶山467000 平顶山市第一人民医院消化内科二病区河南平顶山467000

目的探讨急性脑梗死(ACI)静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗预后不良的影响因素,并依此建立列线图预测模型。方法回顾性分析2018年1月—2022年1月本院收治的243例ACI患者的临床资料,根据预后情况将其分为预后良好组(172例)和预后... 详细信息

目的探讨急性脑梗死(ACI)静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗预后不良的影响因素,并依此建立列线图预测模型。方法回顾性分析2018年1月—2022年1月本院收治的243例ACI患者的临床资料,根据预后情况将其分为预后良好组(172例)和预后不良组(71例)两组。采用多因素Logistic回归分析法分析ACI静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗预后不良的影响因素并绘制列线图模型,列线图的预测效能和预测能力分别用受试者工作特征(ROC)曲线评估和Bootstrap法检验。结果年龄>65岁、责任大动脉病变、OCSP分型为完全前循环梗死、NHISS评分高、发病至溶栓时间长、FBG水平升高均为ACI静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,根据多因素分析构建的列线图模型预测ACI静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗预后不良的曲线下面积、灵敏度和特异度分别为0.848(95%CI:0.796-0.890)、77.46%、82.56%;经Bootstrap法进行内部验证,其一致性指数(C-index)为0.821,校正曲线与标准曲线贴合度较好。结论基于风险因素的列线图模型具有良好的校准度,有助于在进行静脉溶栓联合早期应用替罗非班注射液治疗的ACI患者中筛选出预后不良者。

关键词：急性脑梗死静脉溶栓替罗非班预后不良列线图预测模型v

企业数字化转型与年报可读性:治理效应抑或噪音效应?

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投资研究 2024年第2期43卷 121-144页

作者：高延歌成都大学商学院

基于年报文本信息披露质量视角,研究企业数字化转型与年报可读性之间的关系。研究发现企业数字化转型显著改善了年报可读性。机制检验显示,提升公司内部治理水平和增强分析师对企业的监督力度是数字化转型提升年报可读性的主要渠道。异... 详细信息

基于年报文本信息披露质量视角,研究企业数字化转型与年报可读性之间的关系。研究发现企业数字化转型显著改善了年报可读性。机制检验显示,提升公司内部治理水平和增强分析师对企业的监督力度是数字化转型提升年报可读性的主要渠道。异质性分析发现数字化转型对年报可读性的提升作用在国有属性、管制行业及经济政策不确定性低的公司中更为显著。本研究不仅丰富了数字化转型理论研究,也为改善企业文本信息披露质量提供了经验证据。

关键词：企业数字化转型文本信息披露年报可读性公司治理

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面向“一带一路”企业技术标准联盟适用情境

科学学研究 2024年

作者：周青叶瑾陈佩夫高延孝杭州电子科技大学数据科学与智能决策实验中心杭州电子科技大学管理学院浙江工业大学管理学院

面向“一带一路”企业技术标准联盟模式多元且存在显著差异，根据具体情境选择合作模式是联盟高质量发展的重要抓手，也是亟待研究的重要理论问题。基于TOE框架，利用模糊集定性比较分析方法，从组态视角对具体联盟情境与模式间的匹配... 详细信息

面向“一带一路”企业技术标准联盟模式多元且存在显著差异，根据具体情境选择合作模式是联盟高质量发展的重要抓手，也是亟待研究的重要理论问题。基于TOE框架，利用模糊集定性比较分析方法，从组态视角对具体联盟情境与模式间的匹配关系进行探索。结果表明，“组织相似-标准差异”、“技术相似-环境差异”联盟情境适用于标准共商应用型模式；“技术基础佳-标准差异” 联盟情境适用于标准共建研发型模式；“技术相似-环境差异缺失”、“技术相似-组织关联”联盟情境适用于标准共享互补型模式；“技术相似-环境差异”、“技术相似-环境差异-组织相关”联盟情境适用于标准迭代升级型模式。本文丰富了面向“一带一路”企业技术标准联盟模式相关研究，并对联盟高质量具有重要实践价值。

关键词：面向“一带一路”企业技术标准联盟适用情境 TOE框架高质量发展 fsQCA

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企业ESG表现与“存贷双高”异象

当代财经 2024年第5期 142-153页

作者：高延歌冯建成都大学商学院四川成都610036 西南财经大学会计学院四川成都610074

近年来,上市公司同时持有高额现金和进行短期借款的异象成为社会各界关注的焦点。以2011—2021年A股上市公司为样本,研究了企业ESG表现对“存贷双高”异象的影响。研究发现,企业ESG表现好能显著抑制“存贷双高”异象。机制分析发现,企业... 详细信息

近年来,上市公司同时持有高额现金和进行短期借款的异象成为社会各界关注的焦点。以2011—2021年A股上市公司为样本,研究了企业ESG表现对“存贷双高”异象的影响。研究发现,企业ESG表现好能显著抑制“存贷双高”异象。机制分析发现,企业ESG表现好能提高企业的信息透明度、降低企业的代理成本和缓解企业的融资约束,从而能抑制企业的“存贷双高”异象。异质性分析发现,在竞争程度高的行业和市场环境差的地区,企业ESG表现对企业“存贷双高”异象的抑制效应更显著。经济后果分析发现,企业ESG表现抑制了“存贷双高”异象,从而降低了企业的股价崩盘风险。为此,要有效治理企业的“存贷双高”异象,推动资本市场有序运行和经济高质量发展,企业应积极践行ESG。

关键词： ESG表现存贷双高股价崩盘风险

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基于EAformer街道场景轻量化语义分割研究与应用

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基于EAformer街道场景轻量化语义分割研究与应用

作者：高延生长春工业大学

学位级别：硕士

随着深度学习发展,轻量化语义分割成为自动驾驶应用中核心技术,由于自动驾驶所针对场景大多为街道场景,而街道场景具有场景复杂,目标类别较多,图片尺寸较大等特性,同时自动驾驶在现实生活中要求实时分割图片,因此对语义分割实时性和准... 详细信息

随着深度学习发展,轻量化语义分割成为自动驾驶应用中核心技术,由于自动驾驶所针对场景大多为街道场景,而街道场景具有场景复杂,目标类别较多,图片尺寸较大等特性,同时自动驾驶在现实生活中要求实时分割图片,因此对语义分割实时性和准确率都有要求。为满足实时性和准确率需求,当前轻量化语义分割通过结合卷积神经网络计算效率和Vision Transformer全局特征提取能力在计算消耗和准确率中取得良好权衡,但是Vision Transformer和卷积神经网络和Vision Transformer结合方法存在如下问题:首先,Vision Transformer自注意力拥有全局感受野特性,只能提取全局特征,无法嵌入具体感受野下上下文信息,例如3×3或者5×5卷积核感受野大小下的上下文信息。其次,在卷积神经网络中下采样过程存在细节信息丢失问题。除此之外,当前轻量化语义分割方法通过加法或者交叉注意力等方法来融合特征,会导致语义歧义问题。同时当前轻量化语义分割模型中针对编码器预训练范式直接将编码器通过大规模数据集进行预训练,这种方法在下游轻量化语义分割预训练任务上效果较差。上述问题导致了当前轻量化语义分割方法无法在计算量和准确率之间取得一个良好权衡。为解决这些问题,本文具体工作如下:(1)提出一种轻量化语义分割框架EAformer。EAformer使用编码器-解码器架构,编码器包含一个骨干网络和4个Enhanced Atrous Transformer模块,解码器包含门控注意力模块和分割头。通过编码器中Enhanced Atrous Transformer模块来将不同感受野下上下文信息嵌入到全局特征中,同时利用骨干网络来提取局部特征。解码器通过门控注意力模块来融合和过滤局部特征和含有不同感受野下上下文信息全局特征,在减少语义歧义同时融合下采样过程中丢失细节信息,在准确率和计算量之间实现了良好平衡。(2)本文提出改进空洞自注意力算法,结合自注意力和不同空洞率空洞卷积,通过不同空洞率空洞卷积来提取不同感受野下上下文信息,同时通过SILU函数来实现动态融合不同感受野下上下文信息。之后通过自注意力不同感受野下上下文信息嵌入到全局特征中,进而提高多尺度全局特征表示能力。(3)本文提出门控注意力模块,门控注意力模块利用Tanh和hsigmoid激活函数来生成门控,即一个0到1权重,通过将权重和局部特征以及全局特征相乘方式进行信息过滤,最后通过加法进行特征融合。门控注意力通过信息过滤方式来减少语义歧义,同时在融合过程中融合了局部特征,因此能够解决下采样过程中信息丢失问题。(4)本文提出了一种新针对于轻量化语义分割预训练范式,基于多尺度有监督预训练范式,通过改变EAformer编码器输出维度,在ImageNet上进行预训练方法来增加不同尺度的特征提取能力。(5)本文在常见语义分割数据集以及街道场景数据集(包括ADE20K、COCO-stuff、PASCAL Context、Cityscapes、UaVid、Potsdam、Vaihingen、LoveDA)中进行大量实验,证明EAformer在街道场景下能够在计算成本和准确率之间实现良好权衡,同时证明了 EAformer泛化能力强。同时通过在ImageNet和Cityscapes上进行实验,验证了本文提出基于多尺度有监督训练范式能够有效地提高模型特征提取能力以及针对下游轻量化语义分割任务有效性。

关键词：街道场景轻量化语义分割有监督多尺度预训练

AlO陶瓷材料飞秒激光加工损伤分子动力学模拟

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激光与光电子学进展 2024年

作者：谢丽娴高延峰张华上海工程技术大学机械与汽车工程学院上海市大型构件智能制造机器人技术协同创新中心

为了探索飞秒激光加工的物理机制，本文着重探讨了飞秒激光辐照Al2O3陶瓷材料加工损伤的微观形成机理，并通过结合分子动力学与连续方程的模拟的方法，分析了飞秒激光对Al2O3陶瓷造成的烧蚀现象。对比了烧蚀阈值以下和更高能量密度的飞... 详细信息

为了探索飞秒激光加工的物理机制，本文着重探讨了飞秒激光辐照Al2O3陶瓷材料加工损伤的微观形成机理，并通过结合分子动力学与连续方程的模拟的方法，分析了飞秒激光对Al2O3陶瓷造成的烧蚀现象。对比了烧蚀阈值以下和更高能量密度的飞秒激光作用下Al2O3陶瓷表面原子的运动情况，研究了Al2O3陶瓷内部温度以及粒子数和压强的变化情况。结果表明，当能量密度高于烧蚀阈值时，在温度和压力共同作用下导致了靶材断裂，而烧蚀范围和熔化范围主要受热输入时间的影响。研究结果为实现飞秒激光精密加工电介质材料提供了理论指导。

关键词： Al O 陶瓷飞秒激光分子动力学加工损伤

山东省多城市快递驿站空间布局规律挖掘与优化研究

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山东省多城市快递驿站空间布局规律挖掘与优化研究

作者：高延辉山东交通学院

学位级别：硕士

随着快递行业的不断发展,线上购物逐渐成为主流的购物模式,而快递的最后一公里问题则直接影响消费者对线上购物与线下寄递服务的体验。因而优化最后一公里快递末端服务逐渐成为获取客户信任、提高企业竞争力的关键。山东省是转型中国的... 详细信息

随着快递行业的不断发展,线上购物逐渐成为主流的购物模式,而快递的最后一公里问题则直接影响消费者对线上购物与线下寄递服务的体验。因而优化最后一公里快递末端服务逐渐成为获取客户信任、提高企业竞争力的关键。山东省是转型中国的典型缩影,以它为对象研究末端快递驿站布局特征不但对促进山东省快递末端发展具有重要意义,而且对中国快递发展也具有重要研究价值。本研究旨在探讨山东省入选便民生活圈试点名单城市的快递驿站宏观空间布局、中观企业对比以及微观选址优化特征,以便为山东省快递驿站布局优化提出对策,进而推动便民生活圈建设。研究首先通过主成分分析方法选取多个城市作为样本进行研究;其次通过相关性分析方法从经济、人口、交通、土地四个层面对样本城市快递驿站布局的影响因素进行分析,同时利用空间分异驱动因子分析方法对所得结果进行验证,以保证研究结果的可靠性;再次利用核密度估计、标准差椭圆等方法,从经济社会和地理位置两个维度对样本城市进行对比分析,探讨不同因素对样本城市快递驿站布局的影响机制,以总结共同的发展规律;最后利用选址模型对微观典型区域快递驿站空间布局进行优化分析。研究结果得出:第一,从宏观空间布局层面来看,菜鸟驿站集聚特征明显,多为经济发达的城市中心或沿海地区,中国邮政分布则比较均匀,基本覆盖整个样本城市区域,尤其是一些岛屿也有分布;第二,从中观企业对比层面来看,菜鸟驿站和中国邮政在服务模式和定位上存在差异,中国邮政受政府影响较大,整体的布局较为均衡,主要依托邮政支局、三农服务站等,而菜鸟驿站受市场影响较大,能够很好的与其他业态进行融合发展;第三,从微观选址优化层面来看,部分菜鸟驿站服务范围出现重叠,造成资源浪费,还有部分菜鸟驿站快递业务承压较大,驿站服务规模不足。因此本研究针对存在的问题,利用相关选址模型,以菜鸟驿站为例,对典型区域快递驿站布局进行优化,同时结合新零售相关企业,对出现服务范围重叠等问题的的菜鸟驿站进行合并或拆除,对可与菜鸟驿站融合的新零售相关企业进行选取,从新业态、新视角优化菜鸟驿站布局,为山东省快递末端发展提出针对性建议,推动一刻钟便民生活圈建设。

关键词：快递驿站空间布局规律挖掘布局优化