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作者：高冠论南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景：慢性髓性白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是常见的起源于多能造血干细胞的恶性克隆性疾病,其主要特征是第9号与第22号染色体互相易位导致BCR-ABL融合基因的形成。1999年之前,普遍的观点认为异基因造血干细胞移植(allog... 详细信息

研究背景：慢性髓性白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是常见的起源于多能造血干细胞的恶性克隆性疾病,其主要特征是第9号与第22号染色体互相易位导致BCR-ABL融合基因的形成。1999年之前,普遍的观点认为异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)是CML最佳的治疗手段,尤其是近10年来,由于减低剂量预处理或者小清髓移植的改进和进展,及抗真菌剂抗病毒新药的出现,使移植及感染相关病死率也明显下降,研究报道低危CML患者5年存活率可达到84.2%,截止目前大部分学者仍认为allo-HSCT是唯一可以治愈CML的治疗方案。伊马替尼(Imatinib, IM)是一种分子靶向药物酪氨酸激酶抑制剂,2006年伊马替尼与干扰素国际随机临床研究(IRIS)报道IM治疗新诊断慢性期(chronic phase,CP) CML患者的12个月内完全血液学缓解率、完全细胞遗传学缓解率、主要细胞遗传学缓解率分别为96%、69%和85%,仅有7%的患者进展到加速期(accelerated-phase, AP)或急变期(blast crisis,BC),5年无事件生存率(event free survival, EFS)和总生存率(overall survival, OS)分别为83%和89%,国外其他临床实验及国内研究均提示伊马替尼有较好的血液学缓解率及遗传学缓解率。这些临床数据及较好的临床疗效使IM迅速成为CML-CP初治的一线方案。虽然IM对CML有显著的疗效,但也存在问题,一方面它始终无法根除白血病干细胞,且目前仍无大宗病例报道表明可以停药。另一方面部分患者产生原发性或继发性耐药。IRIS I临床试验发现,5年中IM耐药有关事件总发生率为18%,对于进展期患者,IM作为挽救治疗,耐药发生率和复发率非常高,CML-AP的耐药发生率75%,CML-BC耐药发生率为95%。因此从这个意义上说,IM仍无法治愈CML。目前已有伊马替尼联合异基因造血干细胞移植治疗慢性髓性白血病治疗的相关报到,两者联合治疗可提高患者血液学及细胞遗传学缓解率。关于两种治疗方式对患者疗效及生存影响,目前国外虽有报道伊马替尼治疗慢性髓性白血病疗效优于异基因造血干细胞移植的治疗。但我国大样本相关研究报道不多,因此,本课题第一部分通过收集本中心近10年慢性髓性白血病患者服用伊马替尼或接受异基因造血干细胞移植治疗的相关情况,进一步分析两者疗效及生存,希望对临床治疗慢性髓性白血病治疗方式的选择提供依据,以最优化的方式提高患者长期生存率,使患者最大获益。目前认为,CML患者伊马替尼治疗过程中仍有10%-25%患者产生耐药,其中ABL激酶区点突变是产生耐药主要机制之一。50%-90%伊马替尼耐药患者是由于ABL激酶区突变导致,点突变主要发生于P环、A环及比邻区。已有报道ABL激酶区突变位点广泛、性质多样,部分是多位点突变同时存在,对伊马替尼耐药程度也不同,不同突变类型对患者疗效及生存影响也不同,因此对ABL激酶区进行突变检测变得越来越重要,本课题第二部分通过对CML患者骨髓或外周血采用巢式PCR扩增ABL基因激酶区的基因片段检测突变,来探讨此区域突变与IM耐药的关系及临床意义。 ASS基因是精氨基琥珀酸合成酶的编码基因,称为精氨基琥珀酸合成基因,位于染色体9q34.1,与ABL基因相距大约200kb,全长56kb,有13-16个编码的外显子,9%-28%CML患者伴有含有ASS基因的9q34区段的缺失,Huntly等研究表明仅有48%CML染色体9q34缺失患者接受伊马替尼治疗后可以获得主要细胞遗传学反应,说明der(9)断裂位点片段缺失与伊马替尼的疗效有一定的关系,der(9)断裂位点片段缺失患者伊马替尼疗效欠佳。其他研究报道CML患者伴有ASS基因片段缺失提示患者预后较差,但关于是否ASS基因缺失对伊马替尼治疗CML产生耐药尚不明确。因此,本课题第三部分收集CML患者标本,检测ASS基因表达情况,并初步探讨其与CML耐药机制及临床疗效相关分析。研究目的： 1、分层对比分析伊马替尼与异造血干细胞移植治疗CML-CP I临床疗效。 2、分析CML患者ABL点突变与伊马替尼耐药的关系及ABL点突变与临床疗效的关系。 3、ASS基因与CML耐药机制及临床疗效的分析。研究方法： 1、收集2002年2月至2012年12月在南方医院接受伊马替尼或造血干细胞移植治疗的198例CML-CP患者,所有患者均经骨髓细胞形态学及细胞遗传学确诊。伊马替尼组：115例CML患者年龄中位为36(9-60)岁,其中男性77例、女性38例,伊马替尼初始剂量为400mg/d,之后依据血象及

关键词：白血病髓系慢性伊马替尼移植突变 ASS基因

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阿卡替尼增强利妥昔单抗生物类似药HLX01对非GCB型DLBCL耐药细胞株的杀伤效果

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中国病理生理杂志 2022年第1期38卷 11-19页

作者：申晗高冠论许艳丽张星杜庆华李庆山华南理工大学医学院广东广州510006 暨南大学附属广州红十字会医院血液科广东广州510220 华南理工大学附属第二医院血液科广东广州510180

目的:探索阿卡替尼(Aca)联合利妥昔单抗(RTX)生物类似药HLX01增强对耐RTX的非生发中心B细胞样(非GCB型)弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞株杀伤效果的相关机制。方法:(1)采用RTX浓度梯度递增结合大剂量间断冲击的方法在体外构建耐RTX的人非... 详细信息

目的:探索阿卡替尼(Aca)联合利妥昔单抗(RTX)生物类似药HLX01增强对耐RTX的非生发中心B细胞样(非GCB型)弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞株杀伤效果的相关机制。方法:(1)采用RTX浓度梯度递增结合大剂量间断冲击的方法在体外构建耐RTX的人非GCB型DLBCL细胞株NU-DUL-1-R。流式细胞术检测RTX补体依赖的细胞毒性(CDC)及抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(ADCC)作用下耐药株和亲本株的死亡率,并检测亲本株和耐药株的生长曲线、细胞周期及表面抗原CD20、CD55和CD59表达。(2)用浓度为2.5、5、10、20、40和80μmol/L的单药Aca分别处理NU-DUL-1-R细胞48 h后,采用CCK-8法检测细胞活力抑制率,并计算半数抑制浓度(IC50)。再以20%新鲜正常人血清为补体来源,羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记肿瘤细胞后建立外周血单个核细胞与肿瘤细胞(效靶比为5∶1)体系,采用7-氨基放线菌素D(7-AAD)流式染色检测Aca联合RTX处理NU-DUL-1-R细胞后CDC及ADCC效应诱导的细胞死亡率,ELISA法检测白细胞介素17(IL-17)的表达,流式细胞术分析Th17细胞的比例。结果:(1)RTX对耐药株的CDC及ADCC效应均减弱;与亲本株相比,耐药株生长速度减慢,细胞周期分布改变,G1期细胞数目增加,S期细胞数目减少(P0.05)。(2)Aca对NU-DUL-1-R细胞的IC50为12.51μmol/L;Aca与RTX联用组对NU-DUL-1-R细胞的CDC及ADCC作用均强于单药组(P论:耐RTX的人非GCB型DLBCL细胞株NU-DUL-1-R较亲本株生长速度减慢,细胞周期分布改变,表面CD20抗原表达减少;Aca增强了RTX生物类似药HLX01对非GCB型DLBCL耐药细胞株的杀伤作用,其机制可能与Aca减少IL-17的分泌有关。

关键词：利妥昔单抗生物类似药非生发中心B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤阿卡替尼 Th17细胞白细胞介素17

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原发性血小板增多症及真性红细胞增多症患者炎性指标与血栓事件的相关性研究

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天津医药 2022年第1期50卷 78-83页

作者：高冠论魏婷许娜周璇张星李庆山广州市红十字会医院(暨南大学附属广州红十字会医院)血液科 510220 南方医科大学南方医院血液科

目的分析原发性血小板增多症(ET)及真性红细胞增多症(PV)患者炎性指标与血栓事件的关系,为血栓形成判断及治疗提供依据。方法回顾性分析97例骨髓增殖性肿瘤患者(ET 54例,PV 43例)的临床资料,根据患者是否发生血栓事件分为血栓组(52例)... 详细信息

目的分析原发性血小板增多症(ET)及真性红细胞增多症(PV)患者炎性指标与血栓事件的关系,为血栓形成判断及治疗提供依据。方法回顾性分析97例骨髓增殖性肿瘤患者(ET 54例,PV 43例)的临床资料,根据患者是否发生血栓事件分为血栓组(52例)和非血栓组(45例)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及正五聚蛋白3(PTX3)对血栓形成的预测价值。比较血栓组和非血栓组患者的临床特征差异,多因素Logistic回归分析患者发生血栓事件的危险因素。结果52例(53.61%)发生血栓事件的患者中,ET组、PV组分别有28例(51.85%)和24例(55.81%)。ROC曲线结果显示,NLR、hs-CRP及PTX3的最佳截断值分别为3.14、1.75 mg/L、0.915μg/L,高水平的NLR、hs-CRP及PTX3组较低水平组血栓事件发生率高(χ2分别为15.715、15.255和18.657,P论高水平hs-CRP、PTX3及NLR的ET和PV患者血栓事件的发生率较高,年龄和PTX3水平可以作为评估患者血栓形成的重要指标。

关键词：真性红细胞增多症血栓形成血小板增多,原发性超敏C反应蛋白正五聚蛋白3 中性粒细胞/淋巴细胞比值

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慢性髓性白血病衍生9号染色体ASS基因缺失与非缺失患者的临床特征

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肿瘤防治研究 2023年第3期50卷 283-287页

作者：高冠论周璇许娜刘晓力魏婷李庆山广州市红十字会医院(暨南大学附属广州红十字会医院)血液科广州510220 南方医科大学南方医院血液科广州510515

目的探讨慢性髓性白血病(CML)慢性期衍生9号染色体ASS基因缺失与非缺失患者的临床特征及疗效。方法分析初始治疗方案为伊马替尼并采用BCR/ABL1/ASS13色融合探针检测ASS基因是否缺失的CML患者的临床资料,分为缺失组(n=27)和非缺失组(n=9... 详细信息

目的探讨慢性髓性白血病(CML)慢性期衍生9号染色体ASS基因缺失与非缺失患者的临床特征及疗效。方法分析初始治疗方案为伊马替尼并采用BCR/ABL1/ASS13色融合探针检测ASS基因是否缺失的CML患者的临床资料,分为缺失组(n=27)和非缺失组(n=92),分析其临床特征、治疗效果及预后。结果119例患者平均年龄37.22±12.72岁,缺失组和非缺失组患者的sokal评分差异有统计学意义(χ^(2)=4.304,P=0.038),其他一般特征差异无统计学意义(P>0.05)。缺失组的3个月完全细胞遗传学反应(CCyR)率及6个月CCyR率、BCR-ABL^(IS)≤1%率均低于非缺失组(均P论伊马替尼治疗的CML慢性期患者中ASS基因缺失导致治疗疗效不佳及预后不良,且更易出现疾病进展。

关键词：白血病慢性 ASS基因伊马替尼预后

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慢性髓性白血病患者ABL激酶区点突变及其与临床疗效的关系

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中华血液学杂志 2014年第8期35卷 703-707页

作者：高冠论许娜阴常欣周璇肖雅娟李玲廖立斌曹睿徐丹孟凡义刘晓力南方医科大学南方医院血液科广州510515

目的研究慢性髓性白血病（CML）患者ABL酪氨酸激酶区点突变类型与伊马替尼耐药及预后的关系.方法收集70例伊马替尼耐药患者骨髓或外周血标本,采用巢式PCR扩增ABL激酶区,纯化后进行双向测序并与同源序列对比,结合患者临床资料进行统计... 详细信息

目的研究慢性髓性白血病（CML）患者ABL酪氨酸激酶区点突变类型与伊马替尼耐药及预后的关系.方法收集70例伊马替尼耐药患者骨髓或外周血标本,采用巢式PCR扩增ABL激酶区,纯化后进行双向测序并与同源序列对比,结合患者临床资料进行统计学分析.结果 70例患者中32例（45.7％）检测出ABL酪氨酸激酶区点突变,慢性期、加速期及急变期突变患者分别为16、6、10例,共检测出11种突变类型,分别为T315I、E255K、C475Y、Y253H、G321W、G250E、F317L、E258K、F359V、E459K、***评分中高危和Ph＋染色体伴复杂核型改变是点突变重要的危险因素,点突变与无点突变患者5年累计生存率差异无统计学意义（78.1％对84.2％,P=0.985）,但两组无事件生存率差异有统计学意义（34.4％对68.4％,P=0.034）.对于点突变患者,异基因造血干细胞移植较二代酪氨酸激酶抑制剂药物或联合化疗有更高的完全细胞遗传学反应率（P=0.001）.结论 CML ABL激酶区点突变患者较无突变患者有较差的疗效及预后,及时检测CML慢性期患者ABL激酶区点突变有助于患者治疗方案调整及改善预后,对于疾病进展期点突变患者,异基因造血干细胞移植有相对较好的疗效.

关键词：白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性 DNA突变分析治疗结果伊马替尼

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以措施分类为基础的护理模式在急性髓系白血病缓解后化疗患者中的应用

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齐鲁护理杂志 2022年第9期28卷 14-17页

作者：徐燕欢刘春梅黄喜离高冠论广州市红十字会医院广东广州510220

目的:探讨以措施分类为基础的护理模式在急性髓系白血病缓解后化疗患者中的应用效果。方法:选取2017年5月1日~2019年8月31日收治的80例急性髓系白血病缓解后化疗患者为研究对象,随机分为对照组38例和观察组42例,对照组给予急性髓系白血... 详细信息

目的:探讨以措施分类为基础的护理模式在急性髓系白血病缓解后化疗患者中的应用效果。方法:选取2017年5月1日~2019年8月31日收治的80例急性髓系白血病缓解后化疗患者为研究对象,随机分为对照组38例和观察组42例,对照组给予急性髓系白血病缓解后化疗常规护理,观察组给予以措施分类为基础的护理模式;比较两组生活质量[采用健康调查简表(SF-36)]、心理疲乏状态[采用癌因性疲乏量表(CFS)]、睡眠质量[采用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)]及不良反应发生情况。结果:干预后,观察组SF-36评分高于对照组(P论:对急性白血病缓解后患者给予以措施分类为基础的护理模式,可提升患者生活质量、睡眠质量,改善心理疲乏状态,减少不良反应的发生。

关键词：以措施分类为基础急性髓系白血病癌因性疲乏不良反应睡眠质量

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干扰素治疗慢性骨髓增殖性肿瘤的临床意义

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肿瘤防治研究 2015年第4期42卷 385-388页

作者：丁莉许娜黄彬涛高冠论肖雅娟周璇卢绮思李琳李玉玲黄继贤刘晓力南方医科大学南方医院血液科广州510515 韶关市粤北人民医院血液科韶关512000

目的评价干扰素-α(IFN-α)对慢性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者的临床疗效。方法回顾性分析110例进展期MPN病例,其中包括76例JAK2V617F突变阳性或阴性原发性血小板增多症(ET)患者,34例JAK2V617F突变阳性真性红细胞增多症(PV)患者,分别接受I... 详细信息

目的评价干扰素-α(IFN-α)对慢性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者的临床疗效。方法回顾性分析110例进展期MPN病例,其中包括76例JAK2V617F突变阳性或阴性原发性血小板增多症(ET)患者,34例JAK2V617F突变阳性真性红细胞增多症(PV)患者,分别接受IFN-α及羟基脲(HU)治疗半年以上,分析其临床数据,评价疗效和不良反应,并进行随访。结果 JAK2V617F(+)的ET及PV患者,IFN及HU治疗组间总缓解率差异无统计学意义(89.5%vs.85.7%;87.5%vs.83.3%,P>0.05),但IFN治疗组5年无疾病进展生存率显著高于HU治疗组(84.2%vs.52.4%;87.5%vs.50.0%,P0.05)。IFN治疗组患者治疗过程中血栓事件、脾肿大、骨髓纤维化发生率均较HU治疗组低,且HU治疗组血液学(1~2级)不良反应较IFN组更多见,差异有统计学意义(P论 JAK2V617F突变阳性的ET和PV患者使用干扰素治疗可获得较好的无疾病进展生存,且对JAK2V617F阳性PV患者摆脱静脉放血治疗效果理想。

关键词：慢性骨髓增殖性肿瘤干扰素-α 疗效 JAK2V617F突变

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重型再生障碍性贫血合并鼻脑型毛霉菌病1例

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广东医学 2014年第1期35卷 46-46页

作者：陶媛杜庆峰高冠论肖雅娟南方医科大学珠江医院血液科广州51028

患者，女，24岁，因双下肢反复瘀斑2个月余，加重伴发热，咽痛1周于2011年12月15日入院。

关键词：重型再生障碍性贫血毛霉菌病鼻脑型双下肢

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甲磺酸伊马替尼和异基因造血干细胞移植治疗慢性髓细胞白血病慢性期的疗效分析

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中华医学杂志 2013年第38期93卷 3035-3039页

作者：高冠论许娜周璇肖雅娟丁莉卢绮思魏永强张钰徐丹孙竞刘启发刘晓力南方医科大学南方医院血液科广州510515

目的比较甲磺酸伊马替尼和异基因造血干细胞移植治疗慢性髓细胞白血病（CML）慢性期的疗效。方法选取南方医科大学南方医院血液科2002年2月至2012年12月198例CML慢性期接受甲磺酸伊马替尼或异基因造血干细胞移植治疗的患者，评价两种治... 详细信息

目的比较甲磺酸伊马替尼和异基因造血干细胞移植治疗慢性髓细胞白血病（CML）慢性期的疗效。方法选取南方医科大学南方医院血液科2002年2月至2012年12月198例CML慢性期接受甲磺酸伊马替尼或异基因造血干细胞移植治疗的患者，评价两种治疗方法的疗效、生存及疾病进展和不良反应情况。其中甲磺酸伊马替尼组115例，初始剂量400mg／d，此后依据血象及疗效调整剂量，所有患者每1～3个月复查骨髓细胞学及遗传学1次，以此判断血液学反应和细胞遗传学反应。移植组共83例，移植采用清髓性预处理方案，常规采用甲氨蝶呤加环孢素A进行移植物抗宿主病（GVHD）的预防，部分联合应用麦考酚酸酯和抗胸腺细胞球蛋白，移植后常规检测植活证据、细胞及分子遗传学缓解情况。结果伊马替尼组86例患者中59例（68．6％）在12个月获得完全细胞遗传学缓解（CCyR），而移植组移植后12个月70例患者中67例（95．7％）获得CCyR。伊马替尼组与移植组累计复发率分别为14．8％（17／115）、12．3％（10／81）。移植组GVHD发生率及感染率较高，而伊马替尼组患者不良反应大多可耐受。患者伊马替尼组10年累计生存率高于移植组（93．9％比77．1％，P=0．015）；10年无疾病进展生存率两组分别为86．1％、88．0％（P=0．508），差异无统计学意义。对于Sokal评分中、高危患者的累计生存率，伊马替尼组均高于移植组（96．4％比68．0％，P=0．049；92．6％比57．1％，P=0．017），而无疾病进展生存率两组差异均无统计学意义（89．3％比88．0％，P=0．942；70．4％比85．7％，P=0．405）；低危患者总生存率与无疾病进展生存率两组差异均无统计学意义。对年龄≥30岁的患者，伊马替尼组累计生存率高于移植组（94．7％比73．5％，P=0．009），而两组无疾病进展生存率分别为84．2％、94．1％（P=0．147），差异无统计学意义。结论CML慢性期患者伊马替尼治疗较异基因造血干细胞移植有较好的疗效。

关键词：白血病, 髓样, 慢性期造血干细胞移植伊马替尼疗效

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荧光原位杂交联合染色体核型分析在骨髓增生异常综合征诊断中的应用

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热带医学杂志 2014年第5期14卷 639-642,650页

作者：肖雅娟黄园鹭许娜曹睿廖立斌林榕周璇高冠论宋兰林刘晓力南方医科大学南方医院血液科广东广州510515 南方医科大学南方医院妇产科广东广州510515

目的了解细胞遗传学检查在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中荧光原位杂交技术(FISH)的应用指征,并探索其可完善的方向。方法随机抽取104例确诊为MDS的患者的骨髓标本进行染色体核型分析和荧光原位杂交,并收集患者临床资料。根据WHO及IPSS... 详细信息

目的了解细胞遗传学检查在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中荧光原位杂交技术(FISH)的应用指征,并探索其可完善的方向。方法随机抽取104例确诊为MDS的患者的骨髓标本进行染色体核型分析和荧光原位杂交,并收集患者临床资料。根据WHO及IPSS对病例进行分组。结果 104例患者常见的染色体异常依照出现的频率由大至小依次是+8,-7/7q-,-5/5q-,t(1)/1q-,-20/20q-,-13/13q-,-17,Y。细胞24 h培养后分裂相不足共14例。分裂相不足病例在IPSS分组中差异无统计学意义(P>0.05)。FISH检查阳性结果:-5/5q-11例,-7/7q-11例,+8 12例,-20/20q-6例,-Y 2例。FISH结果与染色体核型分析结果不符的共4例。结论 MDS的染色体异常异质性高,使得针对特定染色体改变的FISH检查较核型分析阳性率低。FISH适用于核型分析分裂相不足的病例,分裂相足够尤其是复杂核型,患者做FISH检查的意义较小。

关键词：骨髓增生异常综合征荧光原位杂交染色体核型分析细胞遗传学

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