检索结果-南通市图书馆

细胞型朊蛋白在猪繁殖与呼吸综合征病毒侵染Marc-145细胞中作用的研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞型朊蛋白在猪繁殖与呼吸综合征病毒侵染Marc-145细胞中作用的...

作者：马小元中国农业科学院

学位级别：硕士

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)是当今制约全球养猪业发展的最主要的病原。细胞型朊蛋白(Cellular Prion Protein,PrPc)是一种在哺乳动物细胞表面广泛表达的膜糖蛋白,参与众... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)是当今制约全球养猪业发展的最主要的病原。细胞型朊蛋白(Cellular Prion Protein,PrPc)是一种在哺乳动物细胞表面广泛表达的膜糖蛋白,参与众多细胞事件。本实验室前期初步研究结果表明,PrPc可能在PRRSV侵染宿主细胞中起作用,但关于PrPc在PRRSV感染细胞中的具体作用还不明晰,本论文进一步探索了PrPc在PRRSV感染细胞中的作用。本论文通过2型PRRSV毒株QH-08感染不同处理的非洲绿猴肾细胞Marc-145,分析细胞在野生型、过表达PrPc蛋白以及阻断PrPc功能情况下对PRRSV复制的影响,实验获得了如下结果:(1)qPCR检测结果表明PRRSV在感染野生型Marc-145细胞24 h时,PrPc的mRNA水平达到最高峰,激光共聚焦显示PRRSV与PrPc发生了共定位。而与病毒脱衣壳和释放核酸功能有关的PRRSV受体CD163的mRNA水平在感染48 h时达到最高峰,并与PRRSV发生了共定位。这些实验结果表明,PrPc可能在PRRSV感染Marc-145的早期阶段起作用。(2)以pcDNA3.1/Myc-His(-)B为表达载体,构建含有PrPc编码基因的重组质粒,转染Marc-145细胞,对比处理前后感染的PRRSV mRNA含量的变化。结果表明,在Marc-145细胞过表达PrPc蛋白之后,PRRSV的m RNA水平显著上升。(3)以PrPc的单克隆抗体SAF-32阻断Marc-145细胞的PrPc功能,分析接种病毒后PRRSV mRNA含量的变化。结果表明,在SAF-32与Marc-145细胞孵育1 h之后再接种PRRSV 24 h时病毒mRNA的水平明显下降,并且与阻断剂呈现剂量依赖性关系。本研究运用不同的实验方法初步证明了PrPc在PRRSV感染Marc-145细胞早期过程发挥作用,其具体作用机制还有待进一步研究。该些结果为深入解析PrPc在PRRSV感染中的作用奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞型朊蛋白 Marc-145细胞 CD163

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

猪血发酵菌株的筛选及其产蛋白酶特性的研究

食品研究与开发 2012年第6期33卷 182-184页

作者：马小元吉林农业工程职业技术学院教务处吉林四平136000

为提高猪血蛋白的利用率,从实验室现有菌种中筛选具有优良猪血发酵性能的菌株。研究结果表明,黑曲霉HF-1发酵160 h后,蛋白水解程度最高,pH下降幅度也最高,具有最佳的发酵性能。酸性蛋白酶是在猪血蛋白水解过程中起主要作用的蛋白酶。黑... 详细信息

为提高猪血蛋白的利用率,从实验室现有菌种中筛选具有优良猪血发酵性能的菌株。研究结果表明,黑曲霉HF-1发酵160 h后,蛋白水解程度最高,pH下降幅度也最高,具有最佳的发酵性能。酸性蛋白酶是在猪血蛋白水解过程中起主要作用的蛋白酶。黑曲霉HF-1具有更好的发酵猪血的性能,可能也与其分泌酸性蛋白酶的能力有关。

关键词：猪血发酵黑曲霉蛋白酶

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

GPS-RTK技术在高速公路测量中的应用

品牌与标准化 2011年第6期 49-50页

作者：马小元中油辽河工程有限公司测绘院

GPS（Global Positioning System）全球定位系统是美国研制并在1994年投入使用的卫星导航与定位系统。其应用技术已遍及国民经济的各个领域。RTK（Real Time Kinematic）技术又称载波相位动态实时差分技术，能够实时地提供测量点在指定... 详细信息

GPS（Global Positioning System）全球定位系统是美国研制并在1994年投入使用的卫星导航与定位系统。其应用技术已遍及国民经济的各个领域。RTK（Real Time Kinematic）技术又称载波相位动态实时差分技术，能够实时地提供测量点在指定坐标系中的三维坐标，并达到cm级精度。

关键词： RTK技术公路测量应用 GPS 全球定位系统卫星导航国民经济差分技术

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

应用食物交换份法编制食谱

吉林特产高等专科学校学报 2004年第1期13卷 20-22页

作者：马小元吉林农业工程职业技术学院

本文阐述了一种新的编制食谱方法。这种方法科学、简便、易学 ,稍有一点营养学知识的人就能掌握。

关键词：编制食谱食物交换份法平衡膳食营养素

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

口蹄疫病毒的抗原结构学的研究进展

中国预防兽医学报 2016年第3期38卷 253-256页

作者：刘亚丽丁耀忠马小元张杰张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,完整的病毒粒子由衣壳包裹着单股正链RNA构成。FMDV基因组全长约为8.5 kb,主要分为5＇端非编码区、编码区、3＇端非编码区和多聚腺苷酸（poly（A））。5... 详细信息

口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,完整的病毒粒子由衣壳包裹着单股正链RNA构成。FMDV基因组全长约为8.5 kb,主要分为5＇端非编码区、编码区、3＇端非编码区和多聚腺苷酸（poly（A））。5＇端非编码区的5端共价连接病毒自身编码的非结构蛋白（VPg）,而且还包含有S-片段、

关键词：口蹄疫病毒 FMDV 抗原结构非结构蛋白衣壳抗原位点正链病毒科病毒粒子编码区

美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7的原核表达及免疫原性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2017年第2期25卷 267-273页

作者：欧云文马炳马小元王俊丁耀忠张永光张杰中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室世界动物卫生组织(OIE)/国家口蹄疫参考实验室甘肃农业大学动物医学院

猪(Sus scrofa)繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是造成猪出现繁殖与呼吸障碍症状的主要病原之一,N蛋白作为该病毒主要的结构蛋白和抗原蛋白。为了研究美洲型猪繁殖与呼吸障碍综... 详细信息

猪(Sus scrofa)繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是造成猪出现繁殖与呼吸障碍症状的主要病原之一,N蛋白作为该病毒主要的结构蛋白和抗原蛋白。为了研究美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(NA-PRRSV)N蛋白的免疫原性,本研究以NAPRRSV QH-08毒株的RNA为模板,扩增获得372 bp的目的片段,扩增产物克隆入p ET30a(+)原核表达载体,构建p ET30a-NA-PRRSV-ORF7重组质粒,转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3);在37℃,以1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达6 h;采用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,并用不同浓度的尿素对纯化蛋白进行复性;复性后重组N蛋白作为免疫原,经背部多点免疫新西兰大耳白兔(Oryctolagus cuniculus),采用Western blot检测兔血清抗体特异性。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析表明,该ORF7编码基因在大肠杆菌中得到表达,蛋白大小约为24 k D;Western blot检测结果表明,该重组N蛋白与NA-PRRSV阳性猪血清发生特异性反应,与猪细小病毒1型(Porcine parvovirus type 1,PPV1)和PCV2猪血清不发生交叉反应,制备的NA-PRRSV兔抗血清与重组N蛋白发生特异性反应。该实验成功构建了NA-PRRSV-ORF7原核表达载体,实现了ORF7基因在大肠杆菌中的表达,纯化后的复性蛋白具有较好的免疫原性,为NA-PRRSV检测方法建立或试剂盒的开发提供了理论依据。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV) 美洲型 ORF7基因原核表达免疫原性