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环磷酰胺不同剂量及停药周期构建小鼠卵巢早衰动物模型比较研究

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生殖医学杂志 2024年第3期33卷 365-372页

作者：莫金桦胡鸿颜秋霞李鹏东陈彩蓉广州医科大学附属清远医院(清远市人民医院)生殖医学中心清远511500 广州医科大学附属清远医院(清远市人民医院)中心实验室清远511500

目的比较环磷酰胺(CTX)不同剂量和停药周期构建的小鼠卵巢早衰(POF)动物模型,寻找最佳造模方式,为进一步研究POF提供更为适用的实验模型。方法8周龄动情周期规律的C57BL/6雌性小鼠共40只,随机分成5组:CON(对照组),CTX80(80 mg·kg^(-1)... 详细信息

目的比较环磷酰胺(CTX)不同剂量和停药周期构建的小鼠卵巢早衰(POF)动物模型,寻找最佳造模方式,为进一步研究POF提供更为适用的实验模型。方法8周龄动情周期规律的C57BL/6雌性小鼠共40只,随机分成5组:CON(对照组),CTX80(80 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX100(100 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX120(120 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX150(150 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续腹腔注射10 d,CON组注射生理盐水,其余组注射不同剂量CTX。记录小鼠体重、动情周期和卵巢脏器系数等,比较得出CTX诱导POF模型最佳暴露剂量。使用最佳CTX暴露剂量重新造模,随机分为模型组和对照组,分别在停药后第1、2、3、4周,检测血清性激素,计数各级卵泡等,比较得出CTX诱导POF模型最佳停药周期。结果(1)研究最佳造模剂量时,CTX150死亡2只,而CTX80小鼠仍有完整的动情周期,说明这两种剂量并非最佳。CTX各组在暴露过程中体重呈进行性下降,停止暴露后体重开始回升,但至停药第7天各组体重仍显著低于CON组(P0.05)。考虑到尽量缩小药物对实验动物伤害的伦理要求,得出CTX诱导卵巢早衰模型的最佳暴露剂量为100 mg·kg^(-1)·d^(-1)×10 d。(2)研究最佳停药周期时,模型组停药后第1、2、3、4周血清抗苗勒管激素(AMH)水平、雌二醇(E_(2))水平、原始卵泡、初/次级卵泡均显著低于同期对照组(P<0.05),卵泡刺激素(FSH)水平在第1、3、4周均显著高于同期对照组(P<0.05),而第1、2、4周的闭锁卵泡计数均显著高于同期对照组(P<0.05),均表现出POF典型特征。随CTX停药周期延长,模型组小鼠原始卵泡、初/次级卵泡、成熟卵泡计数呈进行性下降,闭锁卵泡计数升高(P<0.05),CTX对卵巢功能损害呈进行性加重。比较得出CTX停药1周是诱导POF模型最佳成模周期。结论CTX100 mg·kg^(-1)·d^(-1)连续暴露10 d是建立CTX诱导小鼠POF模型的最佳造模剂量,最佳成模周期为停药后1周。

关键词：卵巢早衰动物模型环磷酰胺

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噬菌体展示技术筛选bFGF结合肽

噬菌体展示技术筛选bFGF结合肽

作者：颜秋霞暨南大学

学位级别：硕士

目的：利用噬菌体展示技术获得与bFGF特异性靶向结合肽。研究其是否具有bFGF促分裂活性的激动作用或拮抗作用，并通过该短肽探讨FGFR上的bFGF结合位点及bFGF-FGFR相互作用关系，以寻求可拮抗bFGF活性的小分子短肽，探讨小分子短肽作为... 详细信息

目的：利用噬菌体展示技术获得与bFGF特异性靶向结合肽。研究其是否具有bFGF促分裂活性的激动作用或拮抗作用，并通过该短肽探讨FGFR上的bFGF结合位点及bFGF-FGFR相互作用关系，以寻求可拮抗bFGF活性的小分子短肽，探讨小分子短肽作为血管生成抑制剂的可行性，从而为新型的抗肿瘤药物的开发奠定基础。方法：以bFGF为靶标，对噬菌体随机7肽库进行3轮生物淘选。采用ELISA检测单克隆噬菌体对bFGF的亲和性和特异性，选取阳性克隆进行DNA测序，推导其展示的肽序列。通过对多组候选肽的序列分析和特性预测，找寻具有与FGFR的一致序列或同源序列的先导肽。再通过竞争抑制实验，分析先导肽噬菌体与bFGF的竞争结合活性。采用MTT法检测先导肽噬菌体和人工合成的先导肽对由bFGF诱导的Balb／c3T3细胞增殖的抑制作用，并用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管生成实验检测先导肽抑制血管生成的作用。结果：对7肽库进行3轮的筛选后，阳性率逐步提高并达到30％，阳性噬菌体都能特异性与bFGF结合。从富集的噬菌体中获得12个高亲和、高特异的阳性克隆。测序结果表明，获得11种不同序列的候选7肽，其中2个克隆为一致序列。一致序列呈酸性，与FGFR2 D3的255～261氨基酸残基具有较高的相似性，并有着相似的疏水轮廓。先导肽噬菌体能够特异地与bFGF结合，呈剂量依赖性。先导肽噬菌体与固相bFGF的结合能被游离的bFGF竞争抑制。细胞实验和CAM实验表明先导肽对Balb／c 3T3细胞增殖和血管生成有一定的抑制效应。结论：从噬菌体随机7肽库中筛选到与bFGF有高亲和力的阳性噬菌体克隆，噬菌体表达的7肽可能模拟FGFR2 D3的bFGF结合序列，与跨膜FGFR2竞争结合bFGF，阻断bFGF-FGFR2通路，从而抑制了bFGF的促Balb／c 3T3细胞增殖和促鸡胚CAM血管生成作用。这为进一步定位FGFR2的bFGF结合区域，设计血管抑制肽，开发抗肿瘤肽类新药提供了有力的基础。

关键词：噬菌体展示技术（PDT）碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）成纤维细胞生长因子受体（FGFR）结合肽绒毛尿囊膜（CAM）

PACAP及其衍生物治疗糖尿病及其并发症的研究进展

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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中国生物工程杂志 2018年第1期38卷 62-68页

作者：颜秋霞马义洪岸暨南大学细胞生物学系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心广州510632 广州医科大学附属第六医院/清远市人民医院生殖医学中心清远511518

垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）是近年新发现的神经多肽,属于促胰液素/胰高血糖素/血管活性肽（VIP）家族中的新成员,广泛分布于脑和外周组织器官,尤其在内分泌胰腺、性腺、呼吸和生殖系统,在能量代谢、神经保护、免疫系统等发挥重要... 详细信息

垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）是近年新发现的神经多肽,属于促胰液素/胰高血糖素/血管活性肽（VIP）家族中的新成员,广泛分布于脑和外周组织器官,尤其在内分泌胰腺、性腺、呼吸和生殖系统,在能量代谢、神经保护、免疫系统等发挥重要生理学功能。糖尿病是一种常见的主要以高血糖为特征的慢性代谢性疾病,糖尿病并发症日益严重威胁着人们的身体健康,已成为导致糖尿病患者致死、致残的主要原因。主要对PACAP治疗糖尿病及其并发症国内外研究的最新进展进行论述。

关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽糖尿病糖尿病并发症

囊胚的发育天数及质量对冻融周期单囊胚移植的临床结局影响

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中华生殖与避孕杂志 2023年第10期43卷 1004-1011页

作者：颜秋霞周秀琴乔静赵晓英冯玲朱振杰张国志胡鸿陈彩蓉广州医科大学附属第六医院清远市人民医院生殖医学中心清远511518

目的探讨囊胚的发育天数及质量对冻融周期单囊胚移植的临床结局影响,为冻融周期单囊胚移植的选择策略提供依据。方法回顾性队列研究分析2013年1月至2021年6月期间在清远市人民医院生殖医学中心进行单囊胚解冻移植治疗的患者资料,共893... 详细信息

目的探讨囊胚的发育天数及质量对冻融周期单囊胚移植的临床结局影响,为冻融周期单囊胚移植的选择策略提供依据。方法回顾性队列研究分析2013年1月至2021年6月期间在清远市人民医院生殖医学中心进行单囊胚解冻移植治疗的患者资料,共893个周期。根据囊胚发育天数分为第5天(day 5,D5)组和第6天(day 6,D6)组,再根据囊胚质量分为四个亚组,分别为D5优质胚胎亚组(n=423)、D5非优质胚胎亚组(n=129)、D6优质胚胎亚组(n=196)、D6非优质胚胎亚组(n=145),比较各组的一般资料、临床结局和新生儿结局。结果①D5组的临床妊娠率[60.14%(332/552)]、着床率[60.14%(332/552)]和活产率[47.64%(263/552)]均显著高于D6组[45.75%(156/341)、45.75%(156/341)、36.36%(124/341),均P0.05),此外,两组的新生儿出生体质量、低出生体质量发生率、巨大儿发生率和男女性别比等新生儿出生结局差异均无统计学意义(均P>0.05)。②D5优质胚胎亚组、D5非优质胚胎亚组、D6优质胚胎亚组、D6非优质胚胎亚组的临床妊娠率分别为61.00%(294/482)、54.29%(38/70)、51.00%(127/249)、31.52%(29/92),活产率分别为48.96%(236/482)、38.57%(27/70)、41.37%(103/249)、22.83%(21/92),组间差异均有统计学意义(均P0.05),而低出生体质量发生率分别为5.08%(12/236)、0(0/27)、4.85%(5/103)、23.81%(5/21),差异有统计学意义(P=0.014)。③D5非优质胚胎亚组的临床妊娠率和活产率与D6优质胚胎亚组比较差异均无统计学意义(均P>0.05),进一步比较两亚组中不同级别的囊胚,D5非优质胚胎亚组的4BC临床妊娠率和活产率均略低于D6优质胚胎亚组的4AA、4AB、4BA,流产率均略高于D6优质胚胎亚组的4AA、4AB、4BA,但差异均无统计学意义(均P>0.05);D5非优质胚胎亚组的4BC临床妊娠率和活产率均比D6优质胚胎亚组的4BB略高,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论冻融周期单囊胚移植时,建议优先选择D5优质囊胚,当面临D5非优质囊胚和D6优质囊胚时,最优的囊胚移植顺序可能是D64AA>D64BA>D64AB>D54BC>D64BB。

关键词：单囊胚移植冻融周期囊胚质量临床妊娠率活产率

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营造童趣课堂,让农村小学音乐课堂活起来

营造童趣课堂,让农村小学音乐课堂活起来

精子顶体相关蛋白Dkkll在小鼠睾丸组织中的表达研究

2018年“教育教学创新研究”高峰论坛

作者：颜秋霞四川省雷波县城关小学

＜正＞农村小学由于地理位置的缺陷和资源的缺乏,音乐教学课堂上无法与时俱进地运用一些新型素材,国家给农村学校配备的新型的多媒体设备也并不能广泛地使用,从而导致学生的视野、综合素质等各个方面都稍落后于城市。长期以来,农村小学...

＜正＞农村小学由于地理位置的缺陷和资源的缺乏,音乐教学课堂上无法与时俱进地运用一些新型素材,国家给农村学校配备的新型的多媒体设备也并不能广泛地使用,从而导致学生的视野、综合素质等各个方面都稍落后于城市。长期以来,农村小学的音乐课堂都是以教师为中心,把音乐教育禁锢在固定的区域内,使学生处于被动的地位,学生的

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国男科学杂志 2013年第10期27卷 3-7页

作者：颜秋霞郭晓燕陈彩蓉李介华蔡志明唐爱发暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院生殖中心清远511518 暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院检验科深圳大学第一附属医院暨深圳市第二人民医院

目的：研究顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的Dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测Dkkl1基因在小鼠不同... 详细信息

目的：研究顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的Dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测Dkkl1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况，采用免疫组化方法检测Dkkl1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后，筛选得到1个差异表达杂交点，通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Dkkl1基因。RT-PCR结果表明Dkkl1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达，在出生31d小鼠睾丸开始高表达，在成年前达到高峰。Dkkl1蛋白主要定位在睾丸精母细胞和圆形精子细胞。结论 Dkkl1基因存在发育的表达调控，为小鼠年龄依赖性表达基因，其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性，且具有睾丸特异性表达的特征，因此我们推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。

关键词：基因芯片 Dkkl1基因精子发生

“互联网+”金融信用风险体系构建的对策研究——以互联网银行为例

维普期刊数据库评论

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时代金融 2017年第8期 66-67页

作者：颜秋霞广东外语外贸大学广东广州510000

在这个变革的时代里,现代商业银行已经呈现出银行业务网络化的发展趋势。伴随着市场经济不断发展,互联网银行业的信用风险凸显,出现了银行传统风险新特征和互联网银行新特征。究其原因是逆向选择和道德风险所造成。众所周知,互联网银行... 详细信息

在这个变革的时代里,现代商业银行已经呈现出银行业务网络化的发展趋势。伴随着市场经济不断发展,互联网银行业的信用风险凸显,出现了银行传统风险新特征和互联网银行新特征。究其原因是逆向选择和道德风险所造成。众所周知,互联网银行对外开放程度高、风险危害程度高,所以我国十分迫切需要从建立信用法律体系、建立信用评级系统和提高数据安全等方面建立的信用体系,以保障互联网银行业的健康发展。

关键词： “互联网+”金融互联网银行信用风险体系

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专递课堂为村小孩子插上音乐的翅膀

专递课堂为村小孩子插上音乐的翅膀

内源性技术创新和外源性技术获取对高技术产业技术进步的影响机理——基于中国省级动态面板数据系统GMM方法的实证分析

2018年“教育教学创新研究”高峰论坛

作者：颜秋霞胡天凤四川省雷波县城关小学

＜正＞随着教育改革的不断深入,涌现了许多新型的课堂,如:"翻转课堂""专递课堂"等。"专递课堂",指的是利用网上同步上课的方式,使边远地区上不齐课、上不好课的农村学校与拥有相对丰富教育资源的城市中心学校同上一堂课,以共享优质教育...

＜正＞随着教育改革的不断深入,涌现了许多新型的课堂,如:"翻转课堂""专递课堂"等。"专递课堂",指的是利用网上同步上课的方式,使边远地区上不齐课、上不好课的农村学校与拥有相对丰富教育资源的城市中心学校同上一堂课,以共享优质教育资源。对于偏远地区的村级小学,由于教育资源的匮乏,没有配备专业的音乐教师,孩子们从来没有上过音乐课,小学音乐专递课堂的开展给他们带来了全新的音乐

关键词：

来源： cnki会议评论

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财经理论研究 2018年第3期 15-25页

作者：陈昭颜秋霞广东外语外贸大学经济贸易学院广东广州510006

本文采用2003-2015年中国高技术产业29个省的面板数据,通过面板单位根检验、协整检验,运用系统GMM回归方法,实证分析我国内源性技术创新与外源性技术获取对技术进步的影响。本文以内源性和外源性视角为切入点进行分析,内源性创新努力包... 详细信息

本文采用2003-2015年中国高技术产业29个省的面板数据,通过面板单位根检验、协整检验,运用系统GMM回归方法,实证分析我国内源性技术创新与外源性技术获取对技术进步的影响。本文以内源性和外源性视角为切入点进行分析,内源性创新努力包括R&D资本投入和人力投入,外源性技术获取包括国外技术引进吸收以及贸易开放度产生的技术溢出。实证结果显示:R&D资本投入对新技术经济效益有着非常显著的正向作用;尽管人力资本投入在当期对技术进步有抑制作用,但滞后二期后依然会产生积极的正向效应。国外技术获取和贸易开放对新技术供给也有着明显的积极作用。因此,中国当前应该注重内部研发投入与创新,重视自主研发与人才培养,加强对国内外相关技术的吸收和改造,与企业实际技术需求相结合,且要不断提升对外开放的程度。

关键词：内源性技术创新外源性技术获取高技术产业系统GMM方法