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人参皂苷的酶转化及其抗炎活性研究

人参皂苷的酶转化及其抗炎活性研究

作者：周凯璐长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究应用分子生物学技术,在大肠杆菌中克隆、表达了来源于Streptomyces *** G7菌的β-糖苷酶Srglu1,并对Srglu1进行纯化及酶学性质表征。同时,将Srglu1应用于人参皂苷的酶转化中,利用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱联用技... 详细信息

目的:本研究应用分子生物学技术,在大肠杆菌中克隆、表达了来源于Streptomyces *** G7菌的β-糖苷酶Srglu1,并对Srglu1进行纯化及酶学性质表征。同时,将Srglu1应用于人参皂苷的酶转化中,利用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS),对Srglu1转化人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3和Rc的过程进行定性和定量研究,鉴定其转化产物的化学结构,同时建立该酶转化以上四种人参皂苷的最适反应条件及最佳工艺参数,阐明转化路径及转化机制。此外,我们建立斑马鱼尾鳍截肢炎症模型,探究人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3和Rc及其转化产物对斑马鱼中性粒细胞向损伤部位迁移活动的影响,为人参皂苷进一步的药理活性研究以及开发高疗效,低毒副作用的抗炎新药物和临床应用提供科学依据。方法:1.应用分子生物学技术,克隆、表达了来源于菌的β-糖苷酶Srglu1。2.采用镍柱亲和层析方法对重组β-糖苷酶Srglu1进行分离纯化,利用SDS-PAGE凝胶电泳分析,确定重组β-糖苷酶Srglu1的纯度及分子量。Streptomyces *** G73.使用紫外分光光度法对Srglu1的酶活力及酶学性质(包括最适温度及温度稳定性、最适p H及p H稳定性,底物选择性、有机溶剂和金属离子对酶活力的影响等参数)进行研究。4.使用薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)对Srglu1转化人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc的产物进行结构鉴定,同时分析其转化路径及转化机制。5.建立斑马鱼尾鳍截肢的急性炎症模型,通过荧光显微镜观察人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、F2、C-O+C-Y、C-Mc-1+C-Mc、C-Mx-1+C-Mx对中性粒细胞向损伤组织的迁移活动,初步探索以上人参皂苷的抗炎活性。结果:1.我们对来源于Streptomyces *** G7菌的重组β-糖苷酶Srglu1进行了克隆,表达及纯化,经序列同源性比对分析及系统发育学分析,β-糖苷酶Srglu1属于糖苷水解酶家族一(GH1),纯化后的重组蛋白经SDS-PAGE检测,蛋白分子量为48k Da,该分子量与预测分子量一致。2.对重组β-糖苷酶Srglu1进行酶学性质表征,确定了Srglu1是一种同时具有β-D-吡喃葡萄糖苷和β-D-吡喃乳糖苷活性的双功能酶,其最适温度为56℃,最适p H为7.4;同时发现Srgu1在宽范围内具有较好的热稳定性和p H稳定性。3.通过TLC、HPLC及HPLC-MS对转化后的人参皂苷结构鉴定,确定重组β-糖苷酶Srglu1水解人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3和Rc的转化路径如下:Rb1→Gyp XVII→F2,Rb2→C-O→C-Y,Rb3→C-Mx-1→C-Mx,Rc→C-Mc-1→C-Mc,以上四种皂苷底物在3 h内均被转化完全。Srglu1对人参皂苷的转化机制分析表明:该酶能够定向水解人参皂苷Rb1,Rb2,Rb3、Rc的C-3位葡萄糖,C-20位外侧葡萄糖,生成稀有皂苷Gyp XVII、F2、C-O、C-Y、C-Mx-1、C-Mx、C-Mc-1和C-Mc。4.建立斑马鱼尾鳍截肢炎症模型,探讨人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc及其转化产物的抗炎活性,结果显示:人参皂苷Rb1及其产物F2、人参皂苷Rb2及其产物(C-O+C-Y)、人参皂苷Rb3及其产物(C-Mx-1+C-Mx)、人参皂苷Rc及其产物(C-Mc-1+C-Mc)均可抑制中性粒细胞向损伤部位的迁移,呈现较好的抗炎效果。结论:来源于Streptomyces *** G7菌的β-糖苷酶Srglu1属于GH1家族,该酶可以在大肠杆菌中大量可溶性表达,并且可应用简单方便的镍柱亲和层析纯化,Srglu1反应条件范围广泛,为酶的工业化应用提供选择。我们采用了HPLC及HPLC-MS的分析方法对人参皂苷转化产物及其路径进行确定,发现Srglu1能够定向水解人参皂苷Rb1,Rb2,Rb3、Rc的C-3位葡萄糖,C-20位外侧葡萄糖,生成稀有皂苷Gyp XVII、F2、C-O、C-Y、C-Mx-1、C-Mx、C-Mc-1和C-Mc。鉴于Srglu1在转化稀有人参皂苷的过程中具有催化效率快,专一性高,无副产物的优势,在稀有人参皂苷工业应用方面具有很大的应用潜力。此外,我们建立斑马鱼炎症模型,对酶转化人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc及其产物进行抗炎活性的初步探讨,可为开发相关天然抗炎药物提供理论支撑。

关键词：糖苷酶生物转化人参皂苷抗炎活性斑马鱼

上汽集团数字化转型对企业财务绩效的影响研究

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上汽集团数字化转型对企业财务绩效的影响研究

作者：赵雯璐河北经贸大学

学位级别：硕士

近年来,国内外大数据、人工智能等数字技术飞速发展,我国的数字经济规模逐年增加,与此同时,国家也出台了相应政策加大了对相关产业与数字化融合的鼓励支持力度。因此,企业实施数字化转型战略,转变传统生产和运营模式,是顺应新时代产业... 详细信息

近年来,国内外大数据、人工智能等数字技术飞速发展,我国的数字经济规模逐年增加,与此同时,国家也出台了相应政策加大了对相关产业与数字化融合的鼓励支持力度。因此,企业实施数字化转型战略,转变传统生产和运营模式,是顺应新时代产业变革的必然选择,也是落实我国大政方针,提升我国综合创新实力的必由之路。目前,国内外学者针对数字化转型与企业财务绩效分析相结合的研究较少,细化到具体行业的分析也较为单一,在数字化转型对财务绩效的影响方面,国内外学者也没有一致的观点,目前已有的研究难以为相关行业或企业提供可以借鉴和参考的方法论。虽然我国的汽车行业布局数字化转型战略比较早,也已经拥有了相对成熟的数字化运营模式,但仍处于成长阶段,转型面临着许多困难和瓶颈,数字化转型仍然有很长的路要走。所以本文将数字化转型与财务绩效相结合进行研究,在已有文献的基础上,结合具体案例,分析数字化转型对企业财务绩效的影响效果,总结转型存在的不足,并提出相应建议。本文采用了文献研究法和案例研究法,总结了国内外学者近几年关于数字化转型和财务绩效的相关研究成果,并结合技术创新、委托代理等相关理论,首先分析了汽车行业数字化转型的发展现状;其次以上汽集团为例,介绍了上汽集团的基本概况,阐述了上汽集团的数字化转型战略的动因和数字化转型的发展历程,探讨了上汽集团数字化转型的路径;再次,运用财务指标分析法,对转型前后企业内部和行业均值进行对比分析,针对数字化转型对绩效产生的影响进行研究,分析上汽集团数字化转型后中存在的问题;最后针对上汽集团数字化转型过程中存在的问题提出了改进建议,希望可以为上汽集团以及汽车行业中其他布局数字化转型战略的企业提供借鉴与参考。

关键词：数字化转型财务绩效财务分析汽车行业上汽集团

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中国式现代化及世界意义研究

中国式现代化及世界意义研究

作者：刁璐中共黑龙江省委党校

学位级别：硕士

现代化是当代人类历史发展的一种趋势,也是世界各国努力寻求发展与进步的必经之路和普遍追求。随着世界各国现代化进程的不断演进,现代化的道路和模式在创新发展中不断丰富、在具体实践中不断接受检验。中国式现代化是中国共产党坚持以... 详细信息

现代化是当代人类历史发展的一种趋势,也是世界各国努力寻求发展与进步的必经之路和普遍追求。随着世界各国现代化进程的不断演进,现代化的道路和模式在创新发展中不断丰富、在具体实践中不断接受检验。中国式现代化是中国共产党坚持以宽广的视野,对世界现代化理论和人类现代化历史实践作出的创新发展,是马克思主义科学的世界观和方法论与中国的具体实际和时代特征相结合的产物,既遵循世界现代化发展的普遍性规律,又从自身国情出发而形成的最新理论成果和创新实践。本文以中国式现代化为研究对象,主要从以下几个方面来进行分析:第一,阐述西方现代化的形成过程,通过比较中国式现代化与西方现代化模式的差异,来对西方现代化的特点进行总结,在此基础上论述了西方现代化存在的局限性;第二,研究中国式现代化的生成基础,对中国式现代化进行理论溯源,着眼于分析马克思主义现代化理论和对中华民族优秀传统文化的传承,以及列宁对社会主义现代化的构想;与此同时,按照时间的维度对中国式现代化的探索历程进行了梳理,并总结为开辟、初步形成以及深化拓展阶段,来分析中国式现代化产生的理论基础;第三,挖掘中国式现代化的鲜明特色,彰显了其较之于西方式现代化的独特优势,在此基础上系统全面的阐明了中国式现代化的五个重要特征;第四,对中国式现代化进行意义总结。主要是从中国式现代化对丰富和发展马克思主义现代化思想,对西方现代化模式的手段和性质层面都实现了突破和超越,对促进广大发展中国家积极探索符合自身国情的现代化以及助力于世界文明的发展等四个方面进行了意义阐述。

关键词：中国式现代化西方现代化马克思主义世界意义

槲皮素通过MAPK/ERK信号通路对瘢痕疙瘩角质形成细胞作用及机制的研究

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槲皮素通过MAPK/ERK信号通路对瘢痕疙瘩角质形成细胞作用及机制的...

作者：周欣璐南昌大学

学位级别：硕士

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面向智能合约的重入攻击检测

面向智能合约的重入攻击检测

作者：付嘉璐广州大学

学位级别：硕士

以太坊区块链和智能合约技术的不断发展为各种不同领域和行业提供了更大的扩展空间,随之而来的是不断出现在以太坊区块链中的安全事件。重入攻击作为以太坊区块链上主要的攻击行为之一,从2016年开始在以太坊区块链上频发,不断造成用户... 详细信息

以太坊区块链和智能合约技术的不断发展为各种不同领域和行业提供了更大的扩展空间,随之而来的是不断出现在以太坊区块链中的安全事件。重入攻击作为以太坊区块链上主要的攻击行为之一,从2016年开始在以太坊区块链上频发,不断造成用户或项目方财产损失、去中心化应用正常执行逻辑被破坏。虽然当前有很多对于重入攻击行为的研究,但是随着以太坊区块链不断更新和发展,这些研究的缺点也日益暴露,因此对重入攻击行为的深入研究仍然具有重要意义。本文主要完成对重入攻击机理层面的研究,将重入攻击行为集中于状态变量的读写冲突问题进行讨论和分析,设计并实现了重入攻击检测框架,本课题的研究内容主要有以下三点:(1)提出重入攻击行为理论模型,本文从重入攻击机理层面对重入攻击行为进行研究和分析,将重入攻击的关键因素集中于状态变量的读写冲突问题上,根据读写行为的不同执行特点,提出新的重入攻击行为分类以及行为特征,在此基础上构建重入攻击行为理论模型;(2)提出基于理论模型的重入攻击检测技术,本文提出动态重入攻击行为检测技术,包括从交易字节码中提取语义信息,构建合约动态调用树,使用动态污点追踪技术完成并分析交易执行过程中数据流的变化过程,根据不同类型重入攻击行为的特征设计对应的攻击检测算法;(3)设计并实现重入攻击检测系统,本文从数据同步、数据处理、攻击行为检测以及结果输出等方面设计了完整的重入攻击检测系统,并完成实验以及系统检测效果的评估。本文对重入攻击行为从机理层面研究并分析,提出基于状态变量读写冲突问题的重入攻击分类方式,并从交易字节码层面完成对重入攻击的动态检测,提供了一个较为全面的重入攻击理论研究和较为完整的检测系统,不仅能实现对重入攻击行为的有效检测,更能为以太坊区块链中重入攻击行为甚至是其他攻击行为的研究和检测提供参考。

关键词：以太坊区块链智能合约重入攻击攻击行为分析

乡村振兴背景下乡村文化和旅游深度融合发展路径研究

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农业经济 2024年第8期 76-78页

作者：彭璐璐中原科技学院

乡村文化和旅游深度融合发展是实现乡村全面振兴的重要路径。文章通过分析乡村振兴背景下乡村文化和旅游深度融合发展的意义、现有优势及困难所在，探索以深度挖掘乡村文化内涵、着力加强急需人才队伍建设、不断创新发展模式、持续加大... 详细信息

乡村文化和旅游深度融合发展是实现乡村全面振兴的重要路径。文章通过分析乡村振兴背景下乡村文化和旅游深度融合发展的意义、现有优势及困难所在，探索以深度挖掘乡村文化内涵、着力加强急需人才队伍建设、不断创新发展模式、持续加大各项保障力度等四个方面推进乡村文化和旅游深度融合发展，助力乡村全面振兴。

关键词：乡村文化乡村旅游乡村振兴深度融合发展路径

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西周穆王征淮夷銘文整理與研究

西周穆王征淮夷銘文整理與研究

作者：竇璐璐曲阜师范大学

学位级别：硕士

西周穆王時期征討淮夷的銘文涉及到西周軍事史的重要內容,淮夷族群作爲西周時期重要的外邦族群影響著西周王朝中期以後的興衰。班簋、臤尊、或簋、(?)方鼎二、(?)甗、彔(?)卣、彔簋、(?)鼎、(?)卣、競卣等銘文的内容皆以時人實錄的形式... 详细信息

西周穆王時期征討淮夷的銘文涉及到西周軍事史的重要內容,淮夷族群作爲西周時期重要的外邦族群影響著西周王朝中期以後的興衰。班簋、臤尊、或簋、(?)方鼎二、(?)甗、彔(?)卣、彔簋、(?)鼎、(?)卣、競卣等銘文的内容皆以時人實錄的形式分別記載了穆王時期對淮夷大大小小的征戰,對西周史的研究尤爲重要。以往學界的考釋與研究成果十分豐碩,但大都零散難成一體,且多有歧説。目前從字詞考證、銘文釋讀的角度對這批資料進行全面爬梳與系統研究的著作尚爲缺乏,故本文在前賢研究成果的基礎上對銘文進一步整理,以期对西周金文研究的推进有所裨益。研究部分則是在集釋的基礎上對十篇金文中的相關問題進一步考論。其一,对銘文中所載的地名,(?)自、繁、蜀、巢、堂自、棫林、道、胡等進一步考辨,這些地名为师雍父戍守之地。其二,對淮夷、東夷關係的辨析。狹義上的淮夷當爲淮上之民;廣義上的淮夷從考古學意義上來說,即部分東夷族群經過夏商周三代的不斷遷徙,至淮水流域與當地土著居民融合而形成的區別於東夷族群的新族群。其三,對穆王征戰淮夷銘文中的人物關係、職官高低、征戰時間、征戰路線等全面分析,在此基礎上探討征戰事件的時間先後等問題。人物關係中主要對師雍父、伯雍父、(?)的關係作了進一步界定,即師雍父、伯雍父、(?)為同一人。職官方面,從身份變化、對揚對象以及蔑曆與賞賜對象三方麵看,或遵王命抵禦淮夷,軍事長官身份明顯,作戰時間在前。師雍父帶領遇、(?)等征戰且身兼行政事務(蔑曆與賞賜)身份象征大於(?),作戰時間次之。彔爲師雍父下級,征戰時間最晚。征戰時間方面,穆王征淮夷相關銘文先後順序爲(?)方鼎二、(?)簋、(?)甗、(?)鼎、(?)卣、班簋、競卣、臤尊、彔(?)卣、彔簋。最後是對周人與淮夷關係的探討:穆王之前,周王室注意力集中在征服東土,對淮水流域無過多關注,周淮關係平和無太多戰爭紛擾;西周中後期,淮夷集團迅猛發展,與此同時周王室開始經略南土,雙方多處於戰爭狀態;西周末年宣王時期,淮夷被徹底征服,周淮關係以淮夷族群融入華夏民族而結束。

关键词：西周穆王淮夷南征集釋

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我国涉案企业合规不起诉制度研究

我国涉案企业合规不起诉制度研究

作者：王纯璐南昌大学

学位级别：硕士

室旁核H2S对自发性高血压大鼠IRE1α/TRAF2/NF-κB通路影响的研究

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室旁核H2S对自发性高血压大鼠IRE1α/TRAF2/NF-κB通路影响的研究

作者：苏嘉璐佳木斯大学

学位级别：硕士