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环丙沙星对博来霉素诱导小鼠真皮纤维化的抑制作用

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中华皮肤科杂志 2015年第8期48卷 559-563页

作者：陈艳雷铁池史赢徐世正武汉大学人民医院皮肤科 430060

目的：观察环丙沙星对博来霉素诱导实验性硬皮病小鼠模型真皮胶原合成及致纤维化基因表达的影响。方法用博来霉素连续4周皮下注射 BALB/c 小鼠背部建立实验性硬皮病小鼠模型，随后分为3组，分别给予1%环丙沙星乳膏（环丙沙星组）、2.5%... 详细信息

目的：观察环丙沙星对博来霉素诱导实验性硬皮病小鼠模型真皮胶原合成及致纤维化基因表达的影响。方法用博来霉素连续4周皮下注射 BALB/c 小鼠背部建立实验性硬皮病小鼠模型，随后分为3组，分别给予1%环丙沙星乳膏（环丙沙星组）、2.5%积雪草苷乳膏（积雪草苷组）以及乳膏基质（模型组）连续外擦5周，另外，于小鼠背部皮下注射磷酸盐缓冲液后外擦乳膏基质设立空白对照（对照组）。连续治疗5周后取各组皮肤标本行 HE 染色、Masson 染色、Ⅰ型胶原蛋白以及基质金属蛋白酶1（MMP1）和金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）免疫组化分析；同时用半定量逆转录 PCR 技术测定结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子1（TGFβ1）和 Smad3基因的表达水平，碱水解-分光光度法测定皮肤羟脯氨酸含量。各组间比较采用单因素方差分析，模型组和各处理组间两两比较采用 LSD 检验。结果博来霉素模型组小鼠注射区真皮厚度[（432.76±93.74）μm]较对照组[（301.69±79.47）μm]明显增厚（P 〈0.01），Masson 染色可见真皮胶原纤维束粗大致密，排列错乱，符合硬皮病真皮纤维化表现。环丙沙星和积雪草苷组小鼠皮肤胶原总含量、Ⅰ型胶原、TIMP1、MMP1染色强度比模型组明显减少（F 值分别为1628.54、33.29、84.82、224.81，均 P 〈0.01），但真皮厚度改变不明显（均P 〉0.05）。与模型组比较，积雪草苷不同程度下调 CTGF、TGFβ1和 Smad3基因表达水平（均 P 〈0.05），而环丙沙星仅抑制 TGFβ1（P 〈0.05）和 Smad3（P 〈0.05）的表达,对 CTGF 基因表达作用不明显（P 〉0.05）。结论环丙沙星可抑制 TGFβ1/Smad3通路，改变失衡的 MMP1和 TIMP1表达，显示抗真皮纤维化作用。

关键词：环丙沙星硬皮病,局部性纤维化胶原博来霉素模型,动物

^14C放射性核素标记硫脲嘧啶掺入法测定黑素小体转移

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中华皮肤科杂志 2008年第6期41卷 380-383页

作者：周琼雷铁池徐世正武汉大学人民医院皮肤科 430060

目的建立用^14C放射性核素标记的硫脲嘧啶（^14C—TU）掺入定量测定黑素小体转移的方法。方法^14C—TU被黑素细胞摄入后能迅速与黑素生成中间产物特异性地结合而掺入新生黑素中，用经^14C-TU预标记过夜的melan—a小鼠黑素细胞（MC）与S... 详细信息

目的建立用^14C放射性核素标记的硫脲嘧啶（^14C—TU）掺入定量测定黑素小体转移的方法。方法^14C—TU被黑素细胞摄入后能迅速与黑素生成中间产物特异性地结合而掺入新生黑素中，用经^14C-TU预标记过夜的melan—a小鼠黑素细胞（MC）与SP-1小鼠角质形成细胞（KC）建立共培养体系，并在共培养后的不同时间，采用二次差异胰酶消化法再将两种细胞分离，用液体闪烁计数仪测定KC内被转移的放射活性量以示黑素小体转移量。同时，应用此方法初步观察毛喉素（一种PKA激动剂）和烟酰胺对黑素小体转移的影响。结果①相同数目（2．5×10^5）的MC和Kc分别用1μCi ^14C-TU标记12h或48h，放射活性测定显示，MC的放射活性（c／min）分别是KC的80或66倍，表明^14C—TU能高度特异地标记新生黑素，是一理想示踪黑素小体转移的标记物。②与未处理对照组相比，20μmol／L毛喉素能增加黑素小体转移近2．3倍，而1g／L烟酰胺能抑制黑素小体转移达0．67倍。③MC与KC共培养8～12h，MC树突伸展良好，并已有黑素小体发生转移，此时尚未观察到毛喉素诱导的MC增殖。二次差异胰酶消化法用于共培养体系中的KC分离能获得满意的效果（KC纯度约为84．5％）。结论建立体外的MC和KC共培养结合^14C—TU掺入法能定量观察毛喉素和烟酰胺对黑素小体转移的影响。

关键词：黑素细胞角蛋白细胞黑色素小体同位素标记

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Sézary综合征1例报告及文献复习

中国皮肤性病学杂志 2006年第11期20卷 688-690页

作者：夏育民余胜斌王巧玲雷铁池武汉大学人民医院皮肤科湖北武汉430060 武汉市新洲区人民医院皮肤科湖北武汉430400 武汉大学人民医院血液内科湖北武汉430060

目的归纳、分析S啨zary综合征的临床表现特征,提高对该病的诊疗水平。方法报告1例S啨zary综合征患者,并复习相关文献。结果患者男59岁,以全身皮肤潮红伴瘙痒为主要特征,外周血淋巴细胞达171.9×109/L,骨髓中异常淋巴细胞达33.5%,经大剂... 详细信息

目的归纳、分析S啨zary综合征的临床表现特征,提高对该病的诊疗水平。方法报告1例S啨zary综合征患者,并复习相关文献。结果患者男59岁,以全身皮肤潮红伴瘙痒为主要特征,外周血淋巴细胞达171.9×109/L,骨髓中异常淋巴细胞达33.5%,经大剂量糖皮质激素等治疗后缓解。1994年至今国内共报道11例S啨zary综合征患者,男性10例占90.9%,平均年龄56.9±19.1岁,以红皮病、剧痒为显著皮肤表现。结论S啨zary综合征是一种较罕见的T细胞淋巴瘤,多见于老年男性,早期皮肤损害显著但不典型,易被误诊为神经性皮炎、湿疹等。

关键词： Sezary综合征皮肤表现鉴别诊断

以人羊膜为支架的表皮黑素细胞培养与生物活性鉴定

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中华皮肤科杂志 2011年第2期44卷 117-120页

作者：佘小光刘小明雷铁池武汉大学人民医院皮肤科 430060

目的从吸引疱疱顶微小皮片建立人表皮黑素细胞（MC）原代培养,以人羊膜为支架培养MC,观察羊膜对MC黏附、增殖和树突发育的影响.方法用负压吸疱法分离疱顶微小皮片,多巴染色后对取自同一个体下腹部和前臂屈侧皮片的MC进行计数.皮片经... 详细信息

目的从吸引疱疱顶微小皮片建立人表皮黑素细胞（MC）原代培养,以人羊膜为支架培养MC,观察羊膜对MC黏附、增殖和树突发育的影响.方法用负压吸疱法分离疱顶微小皮片,多巴染色后对取自同一个体下腹部和前臂屈侧皮片的MC进行计数.皮片经胰酶消化后自基底面轻刮表皮细胞建立原代MC培养,将培养的第2～4代MC接种至新鲜或冻存羊膜上共孵育不同时间后,倒置显微镜下观察MC形态和树突发育.行石蜡包埋组织切片,HE染色后观察MC对羊膜的黏附.用MTT比色法测定接种在羊膜上的MC存活率.结果前臂屈侧吸引疱疱顶皮片多巴染色阳性细胞个数为（1543.1±113.3）个/mm2,腹部皮片为（857.4±101.7）个/mm2.在4周内建立MC原代培养至少需要从2个疱顶（面积约25.1 mm2）的前臂皮片获取的表皮细胞.倒置显微镜下观察,与单纯接种细胞培养皿的MC比较,接种至新鲜或冻存羊膜上继续培养4、8、12 d的MC形态多为两极,树突细长延伸.HE染色示MC能黏附并均匀分布在羊膜的基底膜层表面.MTT法测定结果示,羊膜对MC的分裂增殖有抑制,但冻存羊膜与新鲜羊膜对MC增殖抑制差异无统计学意义（P＞0.05）.结论人前臂屈侧皮肤富含活性MC,是获取吸引疱疱顶微小皮片建立MC原代培养的较好部位.人羊膜支持MC黏附生长和树突发育,有望成为一种能荷载体外培养扩增MC的人源生物支架.

关键词：黑素细胞细胞培养技术白癜风

真皮成纤维细胞MC1R表达减少可能关系到瘢痕疙瘩皮损过度的胶原合成

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真皮成纤维细胞MC1R表达减少可能关系到瘢痕疙瘩皮损过度的胶原合...

2013年湖北省暨武汉微生物学会会员代表大会暨学术年会

作者：雷铁池 Department of Dermatology Renmin Hospital of Wuhan University

Activation of the a melanocyte stimulating hormone(aMSH) / melanocortin 1 receptor(MCIR) signaling pathway exerts antagonistic actions on cutaneous inflammatory and fibrogenic responses in addition to promoting pigment ***,the expression of MCIR by keloid derived fibroblasts and keloid scar tissue was investigated using a range of *** mRNA expression levels in five different keloid fibroblast cell lines were significantly reduced to less than half compared with five normal fibroblast cell lines(P<0.05). Immunohistological analysis of tissue samples indicated that MCR1 immunoreactivity in both epidermal and dermal compartments of five keloid tissue samples was dramatically decreased compared with normal skin(P < 0.05).Insufficient expression of MCIR on human dermal fibroblasts might abolish the MSH mediated suppression of collagen production and myofibroblast transformation elicited by the profibrotic cytokine transforming growth factor *** of reduced MCIR by dermal fibroblasts may lead to novel scar reducing therapeutic approaches for treating this refractory fibrotic disease.

关键词：

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脱色剂的研究进展

脱色剂的研究进展

中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会

作者：雷铁池武汉大学人民医院

随着生活水平的提高,去除颜面部位的不协调色素增加斑甚至使皮肤色度增自已成为亚洲女性追求的趋势。传统皮肤增白剂(skin whitening agents)主要是指以氢醌(对苯二酚)及其衍生物(如熊果苷)等为代表酪氨酸酶抑制型皮肤脱色剂(depigmenta...

随着生活水平的提高,去除颜面部位的不协调色素增加斑甚至使皮肤色度增自已成为亚洲女性追求的趋势。传统皮肤增白剂(skin whitening agents)主要是指以氢醌(对苯二酚)及其衍生物(如熊果苷)等为代表酪氨酸酶抑制型皮肤脱色剂(depigmentary agents)。近年来,针对黑素小体转移以及降解,促进表皮角质层细胞蜕皮(desquamation)等环节已经设计和开发出许多新型非酪氨

关键词：

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不对称干细胞分裂与银屑病表皮持续增殖相关

不对称干细胞分裂与银屑病表皮持续增殖相关

2013年湖北省暨武汉微生物学会会员代表大会暨学术年会

作者：雷铁池 Department of Dermatology Renmin Hospital of Wuhan University

Excessive expansion of the transit amplifying(TA) cell compartment is a distinct morphological characteristic of psoriatic epidermal *** order to examine the activation of basal stem cells to replenish such an enlarged compartment of TA cells in psoriatic epidermis,we utilized a bromodeoxyuridine (BrdU) labeling method to monitor mitotic stem cells in mouse psoriasiform dermatitis induced by *** results show that perpendicular and parallel cell division characteristic for dividing stem cells exists in such an inflamed epidermis. When we analyzed template-DNA strand segregation in trypsin-dissociated human psoriatic keratinocytes using BrdU pulse-chase labeling,we found that the percentage of asymmetric segregation of BrdU label was significantly increased in the cell pairs of psoriatic epidermal cells compared with normal epidermal *** we examined the effects of IL-17A and IL-22 cytokines on keratinocyte differentiation, we found that both cytokines had synergistic actions on cultured keratinocytes and on passage-one epidermal cell sheets derived from skin explants to maintain the undifferentiated stem cell phenotype of *** results elucidate the mechanism that prevents the stem cell population from premature exhaustion in hyperproliferative psoriatic epidermis.

关键词：

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药物过敏反应中的病毒感染

药物过敏反应中的病毒感染

中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会

作者：雷铁池武汉大学人民医院

大多数低分子量的药物分子属于半抗原(hapten),一旦进入体内需与大分子的载体蛋白、多糖或氨基酸等结合形成完全抗原,通过与抗体有关变态反应(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)或通过与致敏淋巴细胞有关的变态反应(Ⅳ型)诱导产生药疹。由于各种药物引起过...

大多数低分子量的药物分子属于半抗原(hapten),一旦进入体内需与大分子的载体蛋白、多糖或氨基酸等结合形成完全抗原,通过与抗体有关变态反应(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)或通过与致敏淋巴细胞有关的变态反应(Ⅳ型)诱导产生药疹。由于各种药物引起过敏反应的抗原决定簇复杂,使患者对药物的反应表现形式出明显差异。近年来发现一些人类疱疹病毒(human herpes viruses,HHV),

关键词：

多巴色素异构酶突变对体外培养黑素小体成熟和抗氧化应激能力的影响

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中华医学杂志 2009年第24期89卷 1707-1710页

作者：万静刘小明雷铁池徐世正武汉大学人民医院皮肤科 430060

目的研究多巴色素异构酶（Dct）突变对黑素细胞黑素小体成熟和活性氧基（ROS）清除能力的影响。方法用透射电子显微镜技术和Fontana—Masson嗜银染色观察小鼠Dct突变slaty黑素细胞和野生型melan—a黑素细胞胞内黑素小体发育及嗜银着色... 详细信息

目的研究多巴色素异构酶（Dct）突变对黑素细胞黑素小体成熟和活性氧基（ROS）清除能力的影响。方法用透射电子显微镜技术和Fontana—Masson嗜银染色观察小鼠Dct突变slaty黑素细胞和野生型melan—a黑素细胞胞内黑素小体发育及嗜银着色的优黑素颗粒分布；用分光光度计法和蛋白印迹技术测定酪氨酸酶活性和酪氨酸酶，酪氨酸酶相关蛋白1（Tyrp-1）和Dct蛋白表达水平；用二氯荧光素标记法测定两种黑素细胞在3J／cm^2长波紫外线（UVA）照射前后胞内ROS水平的变化。结果透射电子显微镜观察发现slaty黑素细胞胞内缺乏成熟的Ⅳ期黑素小体，Fontana—Masson嗜银染色也证实slaty黑素细胞胞质几乎完全缺乏嗜银染阳性的优黑素颗粒。与melan—a黑素细胞相比，slaty黑素细胞的离心团块颜色变浅，但slaty细胞的酪氨酸酶活性及蛋白质表达水平与melan—a细胞接近。UVA照射前slaty和melan-a细胞胞内的ROS相对荧光强度分别为8．9±0．7和8．9±2．5，但照射后slaty细胞胞内的ROS相对荧光强度急剧增加，与melan—a黑素细胞相比，差异有统计学意义（18．0±0．3比13．6±3．0，P=0．024）。结论Dct突变导致黑素细胞低色素化表型，影响黑素小体的发育成熟和降低细胞对氧化应激的抵抗能力，尤其是在UVA诱导氧化应激存在时更为明显。

关键词：异构酶类氧化性应激突变黑素小体