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作者：陈颖盈华东师范大学

学位级别：硕士

“社会变形虫”盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)是一种单细胞真核生物。营养充足时盘基网柄菌二分裂繁殖;饥饿时单细胞分泌cAMP信号诱导形成多细胞体,最后分化成由柄细胞和孢子细胞组成的子实体。由于盘基网柄菌是单倍体基因组,... 详细信息

“社会变形虫”盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)是一种单细胞真核生物。营养充足时盘基网柄菌二分裂繁殖;饥饿时单细胞分泌cAMP信号诱导形成多细胞体,最后分化成由柄细胞和孢子细胞组成的子实体。由于盘基网柄菌是单倍体基因组,相比于其他模式生物在基因操作方面具有更大的优势。单基因的突变不会被等位基因所掩盖,即使是隐性性状也很容易鉴别,拥有非常丰富的突变型细胞。目前被认为是一种可用以研究细胞趋化性运动、胞间信号转导、细胞类型分化和细胞发育调控等的新型模式动物。盘基网柄菌细胞表面的粘附分子gp150(由lagC基因编码)对多细胞发育和细胞分化极为重要。gp150蛋白缺失细胞不能完成多细胞发育。在细胞分化过程中gp150蛋白的分布存在差异:主要分布在前柄细胞区(最终分化成柄细胞),并随着发育进程逐渐增加;在前孢子区(分化成孢子细胞)内基本没有gp150蛋白分布。粘附分子能传递细胞内或细胞外的信号。但是目前为止只有少数关于gp150蛋白参与胞内相关信号通路的报道。gp150蛋白突变细胞不能完成形态学上发育的同时,是否还影响到其它与发育有关的信号通路呢?近十多年的研究发现,盘基网柄菌依赖cAMP的蛋白激酶(DdPKA)参与细胞分化及细胞形态的发育。那么,在多细胞发育的过程中DdPKA与gp150蛋白是否有相互作用?目前国内外都没有相关报道,因此有必要进行深入研究。本论文利用反相离子对高效液相技术(RP-HPLC)检测DdPKA反应后ATP的残留量,并根据酶活定义来计算DdPKA活性。以盘基网柄菌野生型细胞(KAx-3)和突变型细胞(AK127)为实验材料,每隔2小时分别收集10-24h发育细胞;并利用Percoll密度梯度离心技术获得蛞蝓体(发育16-20h)中的前柄细胞和前孢子细胞。分别提取不同发育阶段细胞的DdPKA,加入反应液检测其磷酸化能力。盘基网柄菌进入多细胞发育阶段后,KAx-3细胞发育10-24h的DdPKA活性分别为94.54U、149.44U、101.67U、183.54U、89.57U、119.59U、110.25U、162.10U:AK127细胞的DdPKA活性分别为109.79U、123.97U、162.52U、194.75U、194.01U、182.31U、149.72U、187.24U。实验数据显示,盘基网柄菌野生型细胞的DdPKA活性在12h、16h和20h有所升高,其变化趋势与细胞形态学上的分化有关。突变型AK127细胞的DdPKA活性则一直保持在较高水平,直至22h才略有下降。但KAx-3细胞和AK127细胞发育24h的DdPKA活性都再一次升高,值得注意的是,此时KAx-3细胞中已检测不到gp150蛋白。总体上,AK127细胞的DdPKA活性要比KAx-3细胞高。研究结果显示,细胞可能因缺失gp150蛋白而导致DdPKA活性调控失去一定控制。在细胞分化过程(16-20h)中,前柄细胞DdPKA活性依次为130.53U、161.48U、72.10U,在16-18h之间缓慢上升,但在20h急速下降;前孢子细胞DdPKA活性则为:155.79U、109.65U、149.83U,在18h略有下降,但在20h又迅速恢复,活性约为前柄细胞的两倍。由于前柄细胞最终将凋亡形成只有支撑孢子囊作用的空泡状柄细胞,且凋亡过程涉及受PKA抑制的caspase凋亡通路,因此20h前柄细胞DdPKA活性的大大降低,与细胞为顺利完成凋亡过程有密切联系,凋亡细胞需要抑制DdPKA对caspase凋亡通路的影响,gp150蛋白很可能在其中起到一定作用,因为发育20h的突变细胞DdPKA活性还是很高的。经典信号通路模型指出,胞内DdPKA主要受到膜蛋白腺苷酸环化酶的调控,粘附分子gp150很可能作为信号通路中的一个关键蛋白,通过调节膜上各种腺苷酸环化酶来最终调控DdPKA的活性。为进一步研究gp150蛋白和DdPKA的关系,本论文利用激光共聚焦技术开展细胞内gp150蛋白和DdPKA各亚基的共定位研究。结果发现gp150蛋白与DdPKA-R亚基在空间位置上更为靠近。由于发育12h和16h的细胞形态和分化程度差异明显,同时其DdPKA活性的差异也很巨大,因此本研究主要采用这两个时间段的细胞进行共定位研究。发育12h细胞中gp150蛋白与DdPKA各亚基均弥散分布在细胞质中,但没有明显的重叠。DdPKA的两种亚基弥散分布在除细胞核之外的胞质部分,也没有在细胞膜附近形成堆积;gp150蛋白的染色结果相对集中于核区附近,很可能是该蛋白进行翻译的场所,或者是转运蛋白的小泡结构。发育16h细胞gp150蛋白的免疫染色集中出现在细胞膜附近,此时DdPKA亚基的分布出现差异:DdPKA-C亚基几乎分布在细胞各个部分,但靠近细

关键词：粘附分子gp150 依赖cAMP的蛋白激酶盘基网柄菌蛋白间相互作用

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民族地区中小学教育惩戒的社会支持研究 ——以凉山彝族自治州为例

民族地区中小学教育惩戒的社会支持研究 ...

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作者：陈颖盈西华师范大学

学位级别：硕士

在赏识教育和愉快教育逐渐占据主导地位的现实教育环境中,惩戒教育常常由于被直接等同于“体罚”和“变相体罚”而受到家长和社会各界人士的排斥。缺乏惩戒的教育导致很多中小学教师在面临学生违规违纪行为时,常常迫于多方面社会压力而... 详细信息

在赏识教育和愉快教育逐渐占据主导地位的现实教育环境中,惩戒教育常常由于被直接等同于“体罚”和“变相体罚”而受到家长和社会各界人士的排斥。缺乏惩戒的教育导致很多中小学教师在面临学生违规违纪行为时,常常迫于多方面社会压力而陷入“惩”与“不惩”的两难境地。特别是民族地区中小学由于其浓厚的民族文化特点和相对较低的办学效率,其教育质量的提升和效率的提高更需要社会各界对教师实施教育惩戒的支持和认可。为了解社会各界对民族地区中小学教师实施教育惩戒的支持情况,本研究以凉山彝族自治州为例,从中小学校学生、家长、教师、教育主管部门和媒体对教育惩戒的认识和支持情况入手,展开民族地区中小学教育惩戒的社会支持研究。本文对相关理论和国内外相关领域的研究进行整理和分析后,以“教育惩戒”和“社会支持”等概念为理论基础,从教育学、教育心理学以及社会管理学等角度探讨了教育惩戒对学校教育、学生成长和社会发展的必要性,并就教育惩戒给学生、家长、学校和社会带来的影响以及教育惩戒的法理性进行学理分析。在此理论基础上,本研究通过调查法了解凉山彝族自治州部分县中小学校学生、家长、教师、教育主管部门和媒体对不同教育惩戒的支持情况,对收集到的资料进行分析,发现民族地区中小学各社会主体对不同教育惩戒的总体支持度由高到低依次是:言语责备、没收物品、体罚、隔离措施、剥夺特权和留校;且不同性别、民族、地域、年龄、学历、任教学科和职称的教师对教育惩戒的支持程度存在差异;不同性别、地域、任职和学习成绩的学生对教育惩戒的支持程度存在差异;不同民族和地域的家长对教育惩戒的支持程度存在差异。本研究进一步探寻了民族地区中小学教育惩戒支持情况呈现如此差异的原因。研究发现民族地区中小学教育惩戒的社会支持度较低以及各主体对教育惩戒支持程度差异较大有十分复杂的原因,大致可归为我国法律法规中关于中小学教育惩戒相关规定的缺失、民族地区中小学教师教育惩戒素质存在的差异、民族地区中小学家长对教育惩戒认识的差异、舆论认识和报道的片面以及民族地区经济文化条件的独特等。对此,为提高民族地区中小学教育惩戒的社会支持度以及提高民族地区中小学办学质量和效率,本研究提出以下建议和对策:一是提高中小学教育惩戒法律法规健全度,从国家政策法律法规方面给予教师惩戒的合法性,完善教育惩戒规则中关于教育惩戒与体罚、变相体罚的概念界定,并制定详细的中小学教师惩戒实施细则;二是提升民族地区中小学教师综合素养,从提升民族地区中小学教师专业修养和教师使用教育惩戒的灵活度两个方面进行探讨;三是提升家长的惩戒意识和法律法规常识,从提升家长对于教育惩戒必要性的认识以及增强家校合作与联系等方面来探讨;四是建立正确的社会舆论引导机制,通过政府相关部门的引导和干预来增强媒体部门对教育惩戒的认识,促使媒体部门对教育惩戒相关新闻报道持公正客观的态度;五是发展民族地区文化和经济,通过将民族文化融入到教育惩戒规则中的方式来提升民族地区中小学教育惩戒的支持度,以及通过发展民族地区经济来提升民族地区中小学教育教学管理水平。

关键词：民族地区中小学教育惩戒社会支持

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盘基网柄菌发育期间gp150蛋白与蛋白激酶A相关性的研究

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中国细胞生物学学报 2012年第7期34卷 645-651页

作者：田莉陈颖盈梁静静侯连生华东师范大学生命科学学院上海200062

盘基网柄菌进入多细胞发育阶段后，野生型KAx-3细胞的盘基网柄菌蛋白激酶A（DdPKA）活性分别在12，16，20h时显著升高，这一变化趋势与细胞形态学上的分化有关；而突变型AK127细胞（gp150蛋白缺失）的DdPKA活性则一直保持在较高水平，直... 详细信息

盘基网柄菌进入多细胞发育阶段后，野生型KAx-3细胞的盘基网柄菌蛋白激酶A（DdPKA）活性分别在12，16，20h时显著升高，这一变化趋势与细胞形态学上的分化有关；而突变型AK127细胞（gp150蛋白缺失）的DdPKA活性则一直保持在较高水平，直至22h才缓慢下降。两种细胞类型中24h的DdPKA活性都再一次升高。总体而言，AK127细胞的DdPKA活性要比KAx-3细胞高。这表明AK127细胞可能因缺失了gp150蛋白而导致DdPKA活性调控失去控制。在KAx-3细胞的分化过程中，前柄细胞（prestalk cells，pst）DdPKA的活性在16～18h缓慢上升，但在20h时显著下降；前孢子细胞（prespore cells，psp）中DdPKA的活性在18h时显著下降，但在20h时又迅速恢复，并达到前柄细胞中DdPKA活性的两倍。激光共聚焦结果显示，在KAx-3发育的关键阶段，DdPKA两种亚基的胞内定位并不一致，DdPKA-R亚基在空间位置上更为靠近gp150蛋白，甚至互相重叠。以上结果表明，gp150蛋白可能通过影响DdPKA-R的活性来调控前柄细胞的凋亡和前孢子细胞的分化。

关键词：盘基网柄菌蛋白激酶A 黏附分子gp150 蛋白间相互作用

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gp150蛋白对盘基网柄菌发育阶段膜蛋白的影响

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华东师范大学学报（自然科学版） 2007年第4期 101-106页

作者：韩轶陈颖盈侯连生华东师范大学生命科学学院上海200062

用生化抽提细胞质膜蛋白和SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较gp150突变AK127细胞和野生型KAx-3细胞质膜蛋白的结果显示,各发育时期的AK127细胞和KAx-3细胞在含量方面比较恒定的质膜蛋白组分是68kD,60kD,54kD,50kD,37kD,34kD和31kD条... 详细信息

用生化抽提细胞质膜蛋白和SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较gp150突变AK127细胞和野生型KAx-3细胞质膜蛋白的结果显示,各发育时期的AK127细胞和KAx-3细胞在含量方面比较恒定的质膜蛋白组分是68kD,60kD,54kD,50kD,37kD,34kD和31kD条带,它们并不因为AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.发育12h后,蛋白含量变化最为明显的是45kD,25kD,20kD和17kD蛋白,由于同时期突变细胞的这些蛋白条带含量没什么变化,推测这些条带的变化与gp150分子有密切关系;同时野生型细胞还增加了两条10～12kD蛋白条带,这些蛋白可能与gp150分子一样在发育中有表达的时间性和空间性,且与细胞信号传递有密切关系.

关键词：盘基网柄菌膜蛋白发育

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基于甲型流感病毒H1N1亚型血凝素的mRNA疫苗制备和加强免疫策略研究

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上海交通大学学报（医学版） 2023年第11期43卷 1374-1383页

作者：沈海浅俞康莹陈颖盈季萍王颖上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025 上海市病毒研究院上海200025

目的制备甲型流感病毒H1N1亚型血凝素(hemagglutinin,HA)mRNA疫苗,并探讨不同加强免疫策略的免疫保护作用。方法以荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)为报告基因,构建Fluc mRNA-脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP)疫苗,通过小鼠活体... 详细信息

目的制备甲型流感病毒H1N1亚型血凝素(hemagglutinin,HA)mRNA疫苗,并探讨不同加强免疫策略的免疫保护作用。方法以荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)为报告基因,构建Fluc mRNA-脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP)疫苗,通过小鼠活体成像实验鉴定Fluc mRNA-LNP疫苗肌内注射后在体内的表达情况。进一步构建H1N1亚型(A/Michigan/45/2015)HA(M15-HA)的mRNA-LNP疫苗,将20、10、5和1μg M15-HA mRNA-LNP疫苗通过肌内注射分别免疫不同剂量组小鼠2次(间隔3周),酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定小鼠第2次免疫2周和4周后血清抗体滴度,血凝抑制试验检测功能性抗体水平。第2次免疫后40 d,采用1μg mRNA疫苗或10μg HA蛋白亚单位疫苗对1μg剂量免疫组小鼠进行加强免疫,接种2周和4周后用ELISA和血凝抑制试验分别检测特异性抗体及功能性抗体水平。结果活体成像实验结果显示,小鼠接种Fluc mRNA-LNP疫苗1 d后即能在小鼠体内检测到荧光素酶活性。制备获得的M15-HA mRNA-LNP疫苗2次免疫小鼠2周和4周后,所有剂量组小鼠的特异性抗体水平均较免疫前显著上升(均P=0.000);血凝抑制试验结果显示,20μg和10μg剂量组的功能性抗体水平均较PBS对照组显著升高(均P<0.05)。对1μg低剂量组小鼠进行HA蛋白或M15-HA mRNA-LNP的加强免疫后,均诱导产生了更高水平的特异性抗体和功能性抗体,并能维持较长时间;2种不同加强免疫策略之间差异无统计学意义。结论成功制备M15-HA mRNA-LNP疫苗,显示出良好的免疫原性和抗体中和活性;低剂量mRNA疫苗免疫2次后,同源mRNA疫苗和异源蛋白疫苗加强免疫均可以诱导更强的免疫反应。

关键词：流感疫苗甲型流感病毒血凝素 mRNA疫苗加强免疫

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盘基网柄菌——研究致病机制的宿主模型

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细胞生物学杂志 2007年第1期29卷 67-70页

作者：陈颖盈侯连生华东师范大学生命科学学院上海200062

盘基网柄菌作为致病菌宿主模型的研究主要有:筛选致病菌株及相应突变菌株毒性;鉴别对致病菌易感性和抗性的突变细胞宿主;宿主细胞的有效标记、已完成的基因组计划以及宿主细胞与致病菌间信号转导通路的相互作用;这些都表明盘基网柄菌是... 详细信息

盘基网柄菌作为致病菌宿主模型的研究主要有:筛选致病菌株及相应突变菌株毒性;鉴别对致病菌易感性和抗性的突变细胞宿主;宿主细胞的有效标记、已完成的基因组计划以及宿主细胞与致病菌间信号转导通路的相互作用;这些都表明盘基网柄菌是致病机制研究的理想宿主模型。

关键词：宿主模型致病机制盘基网柄菌

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分枝杆菌Lsr2蛋白的结构、功能及其与结核病防控

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生命科学 2017年第5期29卷 415-420页

作者：肖佳妮陈颖盈王颖上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025

结核病是由结核分枝杆菌(***,***)感染引起的传染病,目前对于结核潜伏感染状态的维持和防止再激活成为结核病防控的关注热点和研究方向。Lsr2属于***中的拟核结合蛋白,具有H-NS样结构域,在***对氧浓度变化的适应中具有重要作用。作为一... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌(***,***)感染引起的传染病,目前对于结核潜伏感染状态的维持和防止再激活成为结核病防控的关注热点和研究方向。Lsr2属于***中的拟核结合蛋白,具有H-NS样结构域,在***对氧浓度变化的适应中具有重要作用。作为一个全局性的转录调控因子,Lsr2调控结核分枝杆菌的蛋白表达,参与潜伏感染状态的维持,并可能成为针对活动性结核病和结核潜伏感染的候选靶抗原。现围绕Lsr2的生物学特性和在结核病防控中的意义进行论述。

关键词： Lsr2 结核分枝杆菌结核潜伏感染转录因子疫苗研发

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小学音乐生本化课堂的构建策略

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音乐天地 2019年第8期 27-29页

作者：陈颖盈浙江省慈溪市

教育的本质在于激励和唤醒,师生之间应该互相启迪、激励和感染。《音乐新课程标准》指出:'音乐以审美为核心。教学手段和教学方法的运用一定要具有音乐审美的特点,符合学生的年龄、心理和生理特点。'一堂成功的音乐课,对学生是一次美的... 详细信息

教育的本质在于激励和唤醒,师生之间应该互相启迪、激励和感染。《音乐新课程标准》指出:'音乐以审美为核心。教学手段和教学方法的运用一定要具有音乐审美的特点,符合学生的年龄、心理和生理特点。'一堂成功的音乐课,对学生是一次美的熏陶。在教学中以生为本,积极构建情智课堂,以灵活、有趣的教学手段吸引学生,最大限度地激发其学习音乐的兴趣和热情,发挥他们的主体作用,带领学生愉悦地去感受美、理解美和享受美,培养高尚的审美情操、审美意识和创新能力,使他们成为学习音乐、享受音乐的主人。

关键词：情智课堂小学音乐音乐教师生本化构建策略

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基于核心素养下的音乐有效课堂教学实践

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音乐天地 2019年第5期 12-14页

作者：陈颖盈浙江省慈溪市

21世纪,随着科技的不断进步和发展,我国的教育改革已经跨入了强化核心素养的时代。对于音乐学科来说,核心素养包括音乐自主需要、音乐实践能力、音乐情感体验和音乐文化理解这四个层面。因此,教师在音乐课堂教学中应从学生的兴趣入手,... 详细信息

21世纪,随着科技的不断进步和发展,我国的教育改革已经跨入了强化核心素养的时代。对于音乐学科来说,核心素养包括音乐自主需要、音乐实践能力、音乐情感体验和音乐文化理解这四个层面。因此,教师在音乐课堂教学中应从学生的兴趣入手,努力激发学生对音乐的自主学习的需要,通过聆听、演唱、律动、演奏等音乐实践活动,丰富学生的音乐情感体验,切实提高学生对音乐的理解与感悟,使学生的各项素养得到提升。小学生的音乐素养应该包括对音乐有一定的兴趣和爱好;有欣赏音乐、表现音乐和创作音乐的能力。

关键词：核心素养音乐情感体验有效课堂教学

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跨界进化论

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新发现 2014年第9期 54-61页

作者： RomanIkonicoff 陈颖盈

达尔文掀起的那场思想革命，如今已经蔓延至物理学、人类学、信息科学等领域。他不会想到．他的后继者正试图用进化论来解码整个世界。

关键词：进化论思想革命信息科学达尔文物理学人类学

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