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CTLA4Ig联合青藤碱对异种鼠肾移植排斥反应中Fas/FasL表达的影响

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CTLA4Ig联合青藤碱对异种鼠肾移植排斥反应中Fas/FasL表达的影响

作者：陈选才南华大学

学位级别：硕士

目的本实验主要利用PLNCX2-FLAG-CTLA4Ig基因包装成逆转录病毒局部转染豚鼠肾脏,通过其表达产生的CTLA4Ig阻断CD28-B7共同刺激通路,营造免疫抑制微环境,同时联合应用青藤碱抑制受鼠外周血CD4+T细胞增殖,通过研究两者的协同作用探究其对... 详细信息

目的本实验主要利用PLNCX2-FLAG-CTLA4Ig基因包装成逆转录病毒局部转染豚鼠肾脏,通过其表达产生的CTLA4Ig阻断CD28-B7共同刺激通路,营造免疫抑制微环境,同时联合应用青藤碱抑制受鼠外周血CD4+T细胞增殖,通过研究两者的协同作用探究其对异种鼠肾移植排斥反应中相关凋亡因子Fas/Fas L表达的影响,从而为临床治疗肾移植排斥反应及未来异种肾移植的临床应用提供新的方法和思路。方法选用雄性SD大鼠(12-14周龄)、雄性豚鼠(12-14周龄)各40只,完全随机分为4组(每组SD大鼠、豚鼠各10只)。实验分为4组,A组:空载体逆转录病毒基因转染+生理盐水空白对照;B组:空载体逆转录病毒基因转染+青藤碱;C组:CTLA4Ig逆转录病毒基因转染+生理盐水;D组:CTLA4Ig逆转录病毒基因转染+青藤碱。手术方式为先通过逆转录病毒载体将CTLA4Ig基因局部转染到豚鼠双肾,再将豚鼠双肾整体异位移植到SD大鼠颈部,其中左肾留作移植肾,切下右肾用于检测CTLA4Ig的表达。观察术后各组SD大鼠移植肾存活时间、受鼠存活时间;采用HE染色观察术后各组SD大鼠移植肾排斥反应病理分级;术后48小时受鼠尾静脉抽血查肌酐值,同时监测48小时尿量;采用Western blotting检测被切右肾CTLA4Ig的表达;Western blotting及免疫组化技术检测受鼠移植肾Fas/Fas L蛋白的表达。结果1.肌酐及尿量的监测术后48h尾静脉抽血查肌酐值:B、C组移植鼠肌酐值分别为(9.20±0.83)mg/L、(9.00±0.71)mg/L,明显低于A组(15.00±1.00)mg/L(P<0.05),而D组移植鼠肌酐值最低,为(4.20±0.84)mg/L,与其他3组相比差异有显著性(P<0.05)。术后48h尿量值:B、C组移植鼠尿量分别为(11.80±1.09)ml、(11.60±1.14)ml,明显高于A组(6.40±0.55)ml(P<0.05),而D组移植鼠尿量最多,为(19.20±0.81)ml,与其他3组相比差异有显著性(P<0.05)。2.移植肾及受鼠存活时间A组大鼠移植肾存活时间为(5.60±0.89)d,受鼠的存活时间为(6.50±0.87)d;B组、C组移植肾存活时间分别为(10.45±0.85)d、(10.85±0.80)d;受鼠存活时间为(12.40±0.86)d、(12.80±0.81)d,均长于A组(P<0.05),其中D组移植肾及受鼠存活时间最长,分别为(14.80±0.85)d及(17.75±0.87)d。D组与其他3组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。***染色各组移植肾病理切片HE染色检查结果示:术后A组移植肾组织HE染色可见大量淋巴细胞浸润,Banff09移植肾病理分级为IIB-III级,提示移植肾排斥反应强烈。B、C组移植肾也可见淋巴细胞浸润,但表达强度低于A组,Banff09移植肾病理分级为IIA-III级。而D组移植肾仅有少量淋巴细胞浸润,Banff09移植肾病理分级为IA-IIB级,明显低于其他三组。*** blotting供肾移植到受鼠颈部后,Western blotting检测到各实验组被切取右肾CTLA4Ig的不同表达,其中仅C、D组可检测到CTLA4Ig的表达,A、B组无CTLA4Ig的表达。术后各组移植肾发生排斥反应,Western blotting检测到各移植肾组织中均可见Fas/Fas L的表达。其中A组表达最强,B、C组与A组比较表达明显减弱,但两者表达差别不大,而D组表达最弱,与其他3组比较差异有显著性(P<0.05)。5.免疫组织化学检测免疫组织化学技术检测各组移植肾Fas/Fas L蛋白表达显示:A组移植肾组织Fas/Fas L表达呈棕色,为强阳性表达,强阳性率100%。B、C两组移植肾组织Fas表达强阳性率分别为60%和40%,Fas L表达强阳性率分别为40%和60%。D组移植肾Fas/Fas L均无强阳性表达,Fas表达中4例呈弱阳性,1例阳性;Fas L表达中3例呈弱阳性,1例阳性。D组明显低于对照组(P<0.05)。结论1、CTLA4Ig能够抑制异种鼠移植肾排斥反应,使Fas/Fas L表达降低,延长移植肾存活时间。2、青藤碱具有较强的免疫抑制作用,能抑制异种鼠肾移植排斥反应,使Fas/Fas L表达降低,延长移植肾存活时间。3、CTLA4Ig与青藤碱具有协同抗排斥作用,同时应用CTLA4Ig和青藤碱能显著减轻异种鼠肾移植排斥反应,降低Fas/Fas L表达,明显延长移植肾存活时间。

关键词： CTLA4Ig 逆转录病毒青藤碱异种鼠肾移植排斥反应

miR-130b-5p靶向E26转录因子1对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制

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中国生物制品学杂志 2023年第12期36卷 1442-1449页

作者：陈选才符浩唐亚纯唐昕祝乐喜李雪峰朱子贵南华大学衡阳医学院附属南华医院泌尿外科湖南衡阳421002 南华大学附属第一医院肿瘤科湖南衡阳421001

目的探讨miR-130b-5p靶向E26转录因子1(E26 transformation specific-1,ETS1)对前列腺癌(prostatic cancer,PCa)细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法qRT-PCR法测定PCa组织及其癌旁组织、PCa细胞(LNCap、PC-3、DU-145)及正常前列腺细胞(RPWE-1)中miR-130b-5p基因mRNA的转录水平,Western blot法检测PCa细胞中ETS1蛋白的表达水平。生物信息学、双荧光素酶活性测定法、qRT-PCR法及Western blot法预测和验证miR-130b-5p与ETS1的靶向关系。将PC-3细胞分为对照(不作任何处理)、mimic(转染miR-130b-5p模拟物)、mimic+ETS1组(转染miR-130b-5p模拟物+pcDNA-ETS1),采用克隆形成试验和CCK-8法分别检测细胞增殖情况及活力,划痕试验和Transwell小室试验分别检测细胞迁移及侵袭情况,Western blot法检测侵袭相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果与癌旁组织比较,PCa组织中miR-130b-5p基因mRNA的转录水平明显下降(t=12.450,P<0.001);与RPWE-1细胞比较,LNCap、PC-3和DU-145细胞中miR-130b-5p基因mRNA的转录水平均明显下降(t分别为4.463、7.103和5.741,P分别为0.0012、<0.001和<0.001),ETS1蛋白表达水平显著升高(t分别为4.850、9.325和7.723,P分别为0.008、<0.001和0.002)。miR-130-5p可以靶向负调控ETS1的表达。与对照组比较,mimic组细胞克隆率、细胞活力、细胞划痕愈合率均明显降低(t分别为11.370、10.640、15.660,P均<0.001),侵袭细胞数明显减少(t=10.160,P<0.001),基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9和波形蛋白(vimentin)表达水平显著下调(t分别为15.120、9.992和12.600,P分别为<0.001、<0.001和0.002),钙黏蛋白(E-cadherin)表达显著升高(t=6.928,P<0.001),磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)磷酸化水平均显著降低(t分别为7.746、8.041和11.510,P分别为0.002、0.002、<0.001);与mimic组比较,mimic+ETS1组细胞克隆率、细胞活力、细胞划痕愈合率均明显升高(t分别为6.988、6.642、6.660,P均<0.001),侵袭细胞数明显增多(t=4.082,P=0.002),MMP-2、MMP-9和vimentin蛋白表达水平显著上调(t分别为10.410、6.754和8.521,P分别为0.002、0.003、0.002),E-cadherin表达水平显著下调(t=4.648,P<0.01),PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平均显著升高(t分别为4.850、4.323和10.840,P分别为0.008、0.008和<0.001)。结论miR-130b-5p可靶向ETS1抑制PC-3细胞的增殖、迁移及侵袭,可能是通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路实现的。

关键词：前列腺癌 E26转录因子1 miR-130b-5p 细胞增殖细胞迁移细胞侵袭

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碳风险定价：来自中国城投债市场的证据

当代财经 2024年

作者：陈选娟杨刚王楠上海财经大学滴水湖高级金融学院中国民生银行金融市场研究中心香港浸会大学工商管理学院

“双碳”目标提出以来，研究者格外关注二氧化碳排放所引发的气候风险以及金融资产价格风险。城市作为推动低碳经济转型的重要空间和行动单元，其城投债市场为研究碳风险定价提供了一个理想的实验平台。研究发现，在控制一系列其他因素... 详细信息

“双碳”目标提出以来，研究者格外关注二氧化碳排放所引发的气候风险以及金融资产价格风险。城市作为推动低碳经济转型的重要空间和行动单元，其城投债市场为研究碳风险定价提供了一个理想的实验平台。研究发现，在控制一系列其他因素以及城市和时间固定效应后，城市的碳排放强度与城投债二级市场的信用利差呈现正相关，并且这种影响在不同类别的行业中均非常显著。将低碳试点城市的政策作为碳排放的外生事件冲击，采用工具变量法来缓解潜在的内生性问题，结果依然稳健。机制检验发现，城市碳排放通过惩罚性信贷机制和资产搁浅机制对城投债信用利差产生影响，揭示了碳风险传导途径的特殊性。进一步研究表明，城市在高耗能产业上的技术创新、政府在遏制温室气体排放与环境治理上的努力，能够降低碳风险对城投债信用利差的边际影响程度。因此，政府部门需加快建设绿色基础设施建设，资本市场应积极探索城投绿色融资工具，政策上需要激励城市领导人采取措施以缓解气候变化。

关键词：碳排放碳风险城投债信用利差双碳目标

智能技术教育应用伦理审视与纾解:基于戈夫曼“拟剧论”的视角

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电化教育研究 2024年第1期45卷 36-42,51页

作者：杨文正陈选超云南师范大学信息学院云南昆明650500

智能技术在赋能教育系统转型升级的同时,也引发诸多伦理问题。基于戈夫曼“拟剧论”分析框架,从区域行为、理想化自我、神秘化、缺席对待、再合作行为等视角切入剖析智能技术教育应用引发的五个典型伦理问题,即人格异化、数据偏见、算... 详细信息

智能技术在赋能教育系统转型升级的同时,也引发诸多伦理问题。基于戈夫曼“拟剧论”分析框架,从区域行为、理想化自我、神秘化、缺席对待、再合作行为等视角切入剖析智能技术教育应用引发的五个典型伦理问题,即人格异化、数据偏见、算法黑箱、人工情感泛滥和角色入侵。依此提出“印象管理:实现人格的自我协同;消除偏见:培育主体的数据素养;去神秘化:提高算法应用透明度;忠诚对待:走向‘人—机’情感融合;明晰边界:促进人与技术的角色认同”的消解进路,纾解智能技术教育应用导致的伦理冲突。微观社会学给人们思考智能技术教育应用伦理问题提供新的视角,所提出的伦理消解策略能为智能技术与教育系统的良性融合、生态发展提供借鉴。

关键词：智能技术教育应用伦理欧文·戈夫曼拟剧论印象管理人工情感

侧卧位经皮肾镜取石术与开放手术应用于肾结石治疗的疗效分析

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健康之路 2018年第11期 46-47页

作者：陈选才符浩南华大学附属南华医院

目的:分析经皮肾镜取石术与开放手术在肾结石中的临床疗效。方法:选取2015年6月-2018年8月60例南华医院收治的肾结石患者,根据手术方案的不同分为观察组与对照组,其中观察组32例,对照组28例。观察组采取经皮肾镜取石术,对照组则采取传... 详细信息

目的:分析经皮肾镜取石术与开放手术在肾结石中的临床疗效。方法:选取2015年6月-2018年8月60例南华医院收治的肾结石患者,根据手术方案的不同分为观察组与对照组,其中观察组32例,对照组28例。观察组采取经皮肾镜取石术,对照组则采取传统开放手术。观察两组患者手术相关指标及预后指标的比较差异。结果:观察组术中出血量、手术时间、住院时间以及术后并发症发生率均明显低于对照组(P<0.05)。结论:经皮肾镜取石术在肾结石中的应用效果要优于开放手术,能够缩短手术时间,降低术中出血量,从而改善患者的预后情况,值得在基层医院中推广应用。

关键词：经皮肾镜取石术开放手术肾结石

新型冠状病毒肺炎救治定点医院院前急救医护人员的防护策略

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中国中西医结合急救杂志 2020年第2期27卷 239-240页

作者：唐昕陈选才郭涛魏红江符浩南华大学附属南华医院湖南衡阳421002

2019年12月,发生于湖北武汉的不明原因肺炎被证实为是由一种新型冠状病毒引起,世界卫生组织将其命名为"2019-nCoV".由2019-nCoV感染引起的新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)具有人传人的特点.新冠肺炎定点救治医院的院前急救医护人员暴露... 详细信息

2019年12月,发生于湖北武汉的不明原因肺炎被证实为是由一种新型冠状病毒引起,世界卫生组织将其命名为"2019-nCoV".由2019-nCoV感染引起的新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)具有人传人的特点.新冠肺炎定点救治医院的院前急救医护人员暴露性高,感染风险大.本文从了解新型冠状病毒及熟悉诊治指南,患者就诊时医务人员的高度识别,重视个人岗前、岗中、岗后的防护3个方面进行归纳总结,提示在疫情严峻的形势下一线院前急救医护人员需增强防护意识,做好自我防护,避免交叉感染,为打赢这场疫情防控阻击战贡献力量.

关键词：新型冠状病毒肺炎定点医院院前急救医护人员防护策略

血清IL-6联合降钙素原及C-反应蛋白在经皮肾镜碎石术后尿源性脓毒血症诊断中的意义

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实用医学杂志 2018年第13期34卷 2198-2203页

作者：唐亚纯符浩郭涛段斌王昕禧陈选才南华大学附属南华医院泌尿外科湖南衡阳421002

目的探讨血清白细胞介素-6(IL-6)联合降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)在经皮肾镜碎石术后尿源性脓毒血症诊断中的意义。方法回顾性选取2015年5月至2018年2月行经皮肾镜碎石术的128例患者为研究对象,其中发生尿源性脓毒血症患者(观察组)6... 详细信息

目的探讨血清白细胞介素-6(IL-6)联合降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)在经皮肾镜碎石术后尿源性脓毒血症诊断中的意义。方法回顾性选取2015年5月至2018年2月行经皮肾镜碎石术的128例患者为研究对象,其中发生尿源性脓毒血症患者(观察组)64例,未发生尿源性脓毒血症患者(对照组)64例,分别比较两组患者术前术后血清IL-6、PCT及CRP水平;绘制单指标及三指标联合检测的受试者工作特征(ROC)曲线并评价其对尿源性脓毒血症的诊断效能。结果术前两组患者三指标均无显著差异;与术前比较,术后两组患者三指标均有不同程度上升(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,术后观察组患者三指标均显著升高(P<0.01);血清IL-6诊断PCNL后尿源性脓毒血症的ROC曲线下面积(AUC)为0.856(95%CI:0.799~0.913),灵敏度为73.44%,特异度为78.13%,均高于PCT水平(AUC:0.819;95%CI:0.726~0.911;灵敏度:64.06%;特异度:69.53%)及CRP水平(AUC:0.738;95%CI:0.634~0.841;灵敏度:60.94%;特异度:62.50%);但略低于三指标联合检测水平(AUC:0.865;95%CI:0.788~0.942;灵敏度:81.22%;特异度:84.94%)。结论血清IL-6水平可作为早期诊断皮肾镜碎石术后尿源性脓毒血症的可靠指标,且其诊断效能高于传统的PCT及CRP水平,但低于三指标联合检测的效能。

关键词：经皮肾镜碎石术尿源性脓毒血症白细胞介素-6 降钙素原 C-反应蛋白

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指对数跨阶同构思想,不等式恒成立定参数

中学生数理化（高二数学、高考数学） 2024年第11期 6-8,M0002页

作者：陈选明江西师范大学附属中学

在某些方程、不等式(特别是指对混合)的复杂问题中,可以通过等价变形(特别是指对转换),将关系式(方程或不等式)变成左右两端同构(结构一致)的情形,进而构造函数,运用函数的单调性来解决问题,这种解决问题的方法叫作同构。

关键词：构造函数不等式恒成立等价变形同构思想解决问题的方法函数的单调性

探寻几何代数齐上阵,拓宽数量积最值求解——一道2023年强基计划校考试题的探究与拓展

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高中数理化 2024年第9期 130-132页

作者：陈选明江西师范大学附属中学

强基计划数学试题普遍具有很好的区分度,突出了数学基础学科的引领作用,着力考查学生的综合素养和创新意识,体现了为高校选拔优秀人才的目标.平面向量在高中数学学习中属于工具性的专题,有关平面向量数量积的最值问题是近几年各校强基... 详细信息

强基计划数学试题普遍具有很好的区分度,突出了数学基础学科的引领作用,着力考查学生的综合素养和创新意识,体现了为高校选拔优秀人才的目标.平面向量在高中数学学习中属于工具性的专题,有关平面向量数量积的最值问题是近几年各校强基计划校考中的热点问题.这类平面向量题目立足于向量的基本知识点,同时综合了数学中的其他知识点(如三角函数等),对于数学综合能力的考查比较到位,属于难题,向量数量积最值问题的求解有以下三个方向.

关键词：基本知识点最值问题平面向量几何代数数量积三角函数综合素养强基