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作者：陆春明第三军医大学

学位级别：硕士

研究背景: 随着研究的不断深入,使得借助自杀基因治疗恶性肿瘤成为可能。在癌症的自杀基因治疗中,实现目的基因在靶细胞的定位和可控性表达是自杀基因治疗的关键。目前,利用肝癌特异性转录调控元件(transcriptional regulatory elements... 详细信息

研究背景: 随着研究的不断深入,使得借助自杀基因治疗恶性肿瘤成为可能。在癌症的自杀基因治疗中,实现目的基因在靶细胞的定位和可控性表达是自杀基因治疗的关键。目前,利用肝癌特异性转录调控元件(transcriptional regulatory elements,TREs),如肝癌细胞特异性合成的甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)基因的增强子/启动子以调控自杀基因于肝癌细胞的特异性表达,从而实现对肝癌组织的靶向性研究取得了长足的进步。不容忽视的是,近30%的肝癌细胞并不表现为AFP阳性,凸现出上述靶向性治疗策略的局限性。作为一类新的肝素结合生长/分化因子,Midkine基因与肿瘤的发生存在某种联系,其在肝细胞癌中呈现高表达。此前,已有研究者将Midkine启动子运用于其他类型恶性肿瘤的自杀基因治疗。新近的文献证实,运用Midkine基因启动子(promoter)2335bp(-2285～+50)片段驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(Thymidine kinasegene of Herpes simplex virus,HSV-TK)作用于AFP阳性与AFP阴性肝细胞癌,其效果远优于Midkine基因609bp片段。更为重要的是,AFP阴性肝细胞癌在上述情况下同样显示对丙氧鸟苷(GCV)的易感性(susceptibility),从而提示在肝细胞癌自杀基因的靶向性治疗方面,以midkine驱动较AFP增强子驱动具有一定的优越性。以上述研究为基础,本研究拟采用PCR法获取人midkine基因启动子片段,将HSV-TK基因置于其调控之下,并构建重组腺病毒AdMKTK。观察AdMKTK/GCV对体外培养的AFP阳性和AFP阴性人肝癌细胞株的杀伤作用,以进一步明确将其运用于肝癌自杀基因治疗的可行性。第一部分人Midkine基因启动子片段的克隆目的:克隆人midkine启动子基因2335bp片段。方法:健康人血中提取人类基因组DNA,以此作为模板,聚合酶链式反应技术克隆人midkine启动子基因2335bp片段。琼脂糖凝胶电泳初步鉴定PCR产物,切取目的条带纯化并将其克隆入p GEM T载体中。选取阳性克隆进行DNA测序。结果:电泳结果显示,PCR产物包含有一大小约为2300bp条带和一大小约为1400bp的条带。较大片段的测序结果显示,其与Genbank中的人midkine启动子片段吻合。结论:成功克隆人midkine启动子基因2335bp片段。第二部分人MidkiBe启动子调控HSV-TK基因重组腺病毒的构建目的:构建含以人midkine(MK)启动子调控的TK基因的重组复制缺陷型腺病毒。方法:以Adeno-X表达试剂盒为基础,应用分子克隆技术,将穿梭质粒pShuttle的CMV启动子替换为MK启动子,并将由p HSV-106获取HSV-TK基因的编码序列亚克隆至其下游,酶切鉴定阳性重组穿梭质粒pShuttle-MK-TK。再通过I-CeuI和PI-SceI两个稀有酶切位点,将目的基因与腺病毒质粒DNA(p Adeno-X)进行体外连接,获得含目的基因的重组腺病毒质粒DNA,后者经限制性内切酶Pac I切割后,两端露出反向末端重复序列(ITR),利用脂质体转染293细胞,获得含有目的基因重组腺病毒上清,PCR检测。结果:酶切结果显示,MK启动子与TK基因均正向插入pShuttle中,TK位于MK启动子的下游。PCR检测显示重组腺病毒中含有MK启动子及TK基因片段。结论:利用体外连接法成功构建含以人MK启动子调控的TK基因的重组腺病毒。第三部分人Midkine启动子驱动HSV-TK自杀基因体外抗肝癌作用目的:观察以人midkine(MK)启动子调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统在体外对人肝癌细胞的杀伤效应。方法:以含有人midkine(MK)启动子调控的HSV-TK基因的重组腺病毒分别感染体外培养的甲胎蛋白阳性人肝癌细胞BEL-7402和甲胎蛋白阴性人肝癌细胞SMMC-7721,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HSV-TK基因在上述两种细胞中的转录表达,观察GCV对人肝癌细胞的杀伤作用。结果:GCV在体外对重组腺病毒感染的甲胎蛋白阳性人肝癌细胞BEL-7402及甲胎蛋白阴性人肝癌细胞SMMC-7721均有明显的杀伤作用,又以前者为著。相同的病毒滴度,其杀伤作用随着GCV浓度的增高而增强。均具有旁观者效应。结论:在体外,表现HSV-TK基因的甲胎蛋白阳性及阴性人肝癌细胞均可被人midkine启动子调控的自杀基因HSV-TK杀伤。重组腺病毒AdrMKTK有望用于肝癌的尤其是甲胎蛋白阴性肝癌的特异性基因治疗。

关键词： midkine 启动子单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统肝癌自杀基因基因治疗

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农村集体建设用地使用权流转的影响因素探讨 ——基于浙江省湖州市的调查研究

农村集体建设用地使用权流转的影响因素探讨 ——基于浙江省湖州...

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作者：陆春明浙江大学

学位级别：硕士

农村集体建设用地,是指乡(镇)村企业和乡(镇)村公共设施、公益事业建设用地,农村居民住宅建设用地,以及其他经依法批准用于非农建设的集体所有土地。当前,我国农村的集体建设用地闲置以及新增建设用地增加的情况并存,耕地保护形式十分... 详细信息

农村集体建设用地,是指乡(镇)村企业和乡(镇)村公共设施、公益事业建设用地,农村居民住宅建设用地,以及其他经依法批准用于非农建设的集体所有土地。当前,我国农村的集体建设用地闲置以及新增建设用地增加的情况并存,耕地保护形式十分严峻。而我国土地制度二元结构的国情导致了一方面是运行机制比较完善的国有土地市场,另一方面则是发展落后的农村集体土地市场,土地资源得不到充分有效的配置,存在着大量集体建设用地闲置的现象。随着经济不断发展,我国工业化、城镇化不断推进,城市基础设施建设、小城镇建设以及商业性企业尤其是乡镇企业的迅速发展,直接导致了对集体建设用地的需求激增,农村集体建设用地使用权流转现象频繁。学者对集体建设用地使用权流转的研究主要集中在理论层面和定性角度,鲜有人从定量角度出发去实证研究农村集体建设用地使用权流转的影响因素。浙江省湖州市乡镇企业发达,新农村建设推进迅速,集体建设用地使用权流转现象普遍,通过对其进行实地调研分析,试图从—个侧面去回答影响农村集体建设用地使用权流转的影响因素。本文主要以实证分析的方法,结合调研数据和Probit回归分析、灰色关联分析,从农户的“推力”角度和城市的“拉力”角度出发,综合分析农村集体建设用地使用权流转的影响因素,指出农村生活水平提升、城镇化率提高、非农就业途径以及乡镇企业发展、集体建设用地使用权流转的相关政策这四方面的因素影响着农村集体建设用地使用权的流转,并以此为基础探讨适用于社会主义新农村建设和促进城乡共同发展的可行的流转方式和相关机制。

关键词：集体建设用地使用权流转影响因素实证分析灰色关联分析

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InSb(111)表面硫处理的研究

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物理学报 1992年第6期41卷 1036-1043页

作者：董国胜陆春明李喆深王迅复旦大学应用表面物理国家重点实验室上海200433

本文用俄歇电子能谱、X射线光电子能谱和紫外光电子能谱对用硫化铵溶液处理的InSb表面进行研究。结果表明,硫处理以后在样品表面生成。一层厚度约8A的硫化物钝化层,它对防止表面的氧化和碳沾污有明显的钝化作用。钝化层中,破原子既与锑... 详细信息

本文用俄歇电子能谱、X射线光电子能谱和紫外光电子能谱对用硫化铵溶液处理的InSb表面进行研究。结果表明,硫处理以后在样品表面生成。一层厚度约8A的硫化物钝化层,它对防止表面的氧化和碳沾污有明显的钝化作用。钝化层中,破原子既与锑原子成键,引起Sb3d芯能级发生1.9eV的化学位移;又与铟原子成键,引起In4d芯能级发生0.6—0.7eV的化学位移。350℃的真空退火使锑的硫化物发生分解。500℃退火没能使铟的硫化物完全分解,仍有一部分硫原子以铟的硫化物形式留在样品表面。

关键词：表面硫处理钝化层锑化甸

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稀土促长珍珠的应用方法

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淡水渔业 1995年第6期25卷 39-40页

作者：张元培陆春明湖南省水产科学研究所武汉明珠生物技术公司

稀土促长珍珠的应用方法张元培，陆春明（湖南省水产科学研究所，４１３１００）（武汉明珠生物技术公司，４３００７３）珍珠贝类软体部含稀土元素０．９—２．０ＰＰｍ，贝壳和珍珠中稀土元素的含量更高。而水体中和土壤中稀土含量往... 详细信息

稀土促长珍珠的应用方法张元培，陆春明（湖南省水产科学研究所，４１３１００）（武汉明珠生物技术公司，４３００７３）珍珠贝类软体部含稀土元素０．９—２．０ＰＰｍ，贝壳和珍珠中稀土元素的含量更高。而水体中和土壤中稀土含量往往不足０．０１５ｐｐｍ，远远不能满...

关键词：稀土珍珠贝珍珠质量

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化学腐蚀和硫处理对InSb(111)表面的影响

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物理学报 1992年第4期41卷 675-682页

作者：陆春明李喆深董国胜任静龚雅谦复旦大学应用表面物理国家重点实验室上海200433 中国科学院上海技术物理研究所上海200083

本文应用俄歇电子能谱和X射线光电子能谱对化学腐蚀和硫处理的InSb表面进行了研究。实验中发现经过CP-4腐蚀以后在样品的表面生成了InSb的氧化层,氧化层中的组分是锑的氧化物明显多于铟的氧化物。样品经过硫处理以后能够除去InSb表面的... 详细信息

本文应用俄歇电子能谱和X射线光电子能谱对化学腐蚀和硫处理的InSb表面进行了研究。实验中发现经过CP-4腐蚀以后在样品的表面生成了InSb的氧化层,氧化层中的组分是锑的氧化物明显多于铟的氧化物。样品经过硫处理以后能够除去InSb表面的氧化层并且形成硫化物钝化层。

关键词：锑化铟半导体化学腐蚀硫处理

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小麦新品种徐麦856高产稳产栽培技术

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中国种业 2008年第4期 49-50页

作者：刘志勇王军宁陆春明江苏省宿迁中江种业有限公司 223800

徐麦856由江苏徐淮地区徐州农科所1998年育成．2004年通过江苏省农作物品种审定委员会审定（苏审麦200401），2006年通过国家农作物品种审定委员会审定（国审麦2006012）。该品种由江苏中江种业股份有限公司独占许可生产经营。2004—200... 详细信息

徐麦856由江苏徐淮地区徐州农科所1998年育成．2004年通过江苏省农作物品种审定委员会审定（苏审麦200401），2006年通过国家农作物品种审定委员会审定（国审麦2006012）。该品种由江苏中江种业股份有限公司独占许可生产经营。2004—2007年在宿迁及苏北地区推广迅速．示范推广面积累计达15万hm2左右．表现出穗大、粒大、适应性强的特点，在小麦生产上具有明显的高产稳产优势。

关键词：高产稳产栽培技术小麦新品种农作物品种审定委员会江苏省徐淮地区生产经营苏北地区小麦生产

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从锦纶6生产废水中回收己内酰胺技术的改进

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化工环保 1999年第1期19卷 37-40页

作者：王国华陆春明潘晓军高鹏扬州有机化工厂

采用三效蒸发－间歇蒸馏技术，从锦纶６生产装置的萃取废水中回收己内酰胺。通过对三效蒸发工艺流程的改进，降低了蒸发冷凝水中己内酰胺单体含量，使蒸发冷凝水全部回用于萃取系统，萃取废水中己内酰胺单体的回收率达到９９％。

关键词：锦纶6 己内酰胺三效蒸发废水处理回收

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郑规一六八

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北京文学（精彩阅读） 2024年第8期 152-160页

作者：陆春祥不详

1.远山如黛,晨光初露,啼叫了半个时辰的鸡鸣声,渐渐稀了下来。咚!咚!咚!清亮而沉着的鼓声破空而来,这鼓声,对浦江郑氏家族而言,就是起床号,即便依然沉睡着的孩子,也会立即被父母们唤醒。咚,咚,咚,鼓声有节奏地响着,一直响过二十四声才... 详细信息

1.远山如黛,晨光初露,啼叫了半个时辰的鸡鸣声,渐渐稀了下来。咚!咚!咚!清亮而沉着的鼓声破空而来,这鼓声,对浦江郑氏家族而言,就是起床号,即便依然沉睡着的孩子,也会立即被父母们唤醒。咚,咚,咚,鼓声有节奏地响着,一直响过二十四声才停止。晨起的人们,如行军作战,叠被理床,洗漱整衣,来往穿梭,然后匆匆赶往有序堂。

关键词：鼓声时辰鸡鸣

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颞下颌关节紊乱综合征52例临床分析

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桂林医学杂志 1997年第2期13卷 92-93页

作者：陆春明广西灌阳县文市中心卫生院

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创设教学情境培养思维能力

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中学教学参考 2013年第29期 15-16页

作者：陆春明广西平果县民族中学

随着教学改革的不断深入,全国各地的中考命题形式及内容开始出现了变化,应用题、情景题、说理题、探索题、开放题等越来越频繁地出现在中考中,这些试题考查了学生发现问题、解决问题的能力,激活了学生的创新意识,展示了学生的创新精神... 详细信息

随着教学改革的不断深入,全国各地的中考命题形式及内容开始出现了变化,应用题、情景题、说理题、探索题、开放题等越来越频繁地出现在中考中,这些试题考查了学生发现问题、解决问题的能力,激活了学生的创新意识,展示了学生的创新精神和数学思维能力.所以,在初中数学教学过程中,教师精心创设教学情境,是课堂教学有效性能否实现的关键.笔者认为,

关键词：创设教学情境数学思维能力解决问题的能力培养数学教学过程教学改革命题形式创新意识

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