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响应面法优化金钱白花蛇蛋白质的酸提工艺

粮食与油脂 2024年第3期37卷 68-71,81页

作者：母璇刘梦李靓颖张峻豪张林松闻崇炜江苏大学药学院江苏镇江212013 镇江市食品药品监督检验中心江苏镇江212050

以金钱白花蛇为原料,通过酸提法提取金钱白花蛇中的蛋白质,以蛋白质得率为指标,在单因素试验基础上通过响应面法优化提取工艺,并对提取物进行指纹图谱分析。结果表明:最佳酸提条件为醋酸钠浓度0.20mol/L、料液比1∶40(g/mL)、提取时间6 ... 详细信息

以金钱白花蛇为原料,通过酸提法提取金钱白花蛇中的蛋白质,以蛋白质得率为指标,在单因素试验基础上通过响应面法优化提取工艺,并对提取物进行指纹图谱分析。结果表明:最佳酸提条件为醋酸钠浓度0.20mol/L、料液比1∶40(g/mL)、提取时间6 h、提取温度45℃,在此条件下蛋白质得率为3.92%。指纹图谱分析表明,酸提法所得金钱白花蛇的蛋白质种类较丰富。

关键词：金钱白花蛇蛋白质酸提指纹

黄芩抗斑马鱼焦虑的作用及靶向GABA受体的分子对接研究

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中医药信息 2024年

作者：张文韬潘豪杰胡应宝闫攀徐秀泉仝旭汤建闻崇炜亳州学院江苏大学

目的：研究黄芩50%乙醇提取物对1-（3-氯苯基）哌嗪盐酸盐（mCPP）致焦虑的斑马鱼焦虑状态的治疗作用及可能的作用机制。方法：抗焦虑研究：选取受精后10、30 d的斑马鱼分为空白组、模型组（0.1 nmol/L mCPP）、给药组（不同浓度黄芩提... 详细信息

目的：研究黄芩50%乙醇提取物对1-（3-氯苯基）哌嗪盐酸盐（mCPP）致焦虑的斑马鱼焦虑状态的治疗作用及可能的作用机制。方法：抗焦虑研究：选取受精后10、30 d的斑马鱼分为空白组、模型组（0.1 nmol/L mCPP）、给药组（不同浓度黄芩提取物+0.1 nmol/L mCPP）,Zebralab软件分析斑马鱼的平均移动距离。采用分子对接软件Autodock Vina分析黄芩中的12种主要成分与γ-氨基丁酸A型受体（GABAAR）的结合能，初步确定潜在的活性组分。结果：黄芩50%乙醇提取物对mCPP诱导的受精后10、30 d斑马鱼焦虑均有抑制作用，其中受精后30 d斑马鱼空白组、模型组（0.1 nmol/L mCPP）和给药组（200μg/mL+0.1 nmol/L mCPP）的平均移动距离分别为3 633、4 280、3 894 mm，说明200μg/mL黄芩提取物可以减缓0.1 nmol/L mCPP对受精后30 d龄斑马鱼的焦虑行为。同时斑马鱼的焦虑行为符合趋触性。11种黄芩活性成分与GABAAR结合能强于原配体地西泮的结合能（-7.2 kcal/mol），白杨素的结合力最强（-8.8 kcal/mol），主要成分黄芩素、黄芩苷、汉黄芩素和汉黄芩苷的结合力也较强，分别为-8.3、-7.7、-8.3、-7.3 kcal/mol。预测黄芩苷等黄酮类成分是黄芩治疗焦虑主要物质基础。结论：黄芩具有抗斑马鱼焦虑的确切疗效，其活性机制可能与黄芩黄酮类成分激活GABAAR有关。

关键词：黄芩斑马鱼焦虑分子对接 γ-氨基丁酸A型受体

基于分子对接的玉屏风中端粒酶TERT激动剂的虚拟筛选

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中成药 2022年第6期44卷 2041-2044页

作者：汤建朱锐灵赵康琦夏海平闻崇炜亳州学院中药学院安徽亳州236800 江苏大学药学院江苏镇江212013 江苏大学附属四院神经内科江苏镇江212001

目的发现玉屏风中激活端粒酶逆转录酶(TERT)的小分子化合物,基于分子对接技术初步解释玉屏风抗衰老的作用机制。方法检索玉屏风中的化学成分,确定68个小分子化合物(配体);采用AutoDock Vina软件将这些化合物与TERT对接,根据打分值虚... 详细信息

目的发现玉屏风中激活端粒酶逆转录酶(TERT)的小分子化合物,基于分子对接技术初步解释玉屏风抗衰老的作用机制。方法检索玉屏风中的化学成分,确定68个小分子化合物(配体);采用AutoDock Vina软件将这些化合物与TERT对接,根据打分值虚拟筛选玉屏风中潜在的激活端粒酶TERT的化学成分。结果 68个化合物的对接分值与结构有明显的相关性,异黄酮类及异黄烷醇类化合物具有最强的结合力,其中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷与TERT对接打分值均为-10.2 kcal/mol;色原酮类化合物也具有较强的结合力;大部分白术内酯类和香豆素类具有中等强度的结合力;黄芪皂苷类化合物结合力普遍偏弱,在-7.0~-7.4 kcal/mol。结论玉屏风的异黄酮类和色原酮类物质对激活端粒酶可能起关键作用。

关键词：玉屏风分子对接抗衰老端粒酶 TERT

金钱白花蛇碱溶性蛋白质的提取工艺优化及其表征

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中药材 2023年第8期46卷 2007-2011页

作者：谢超刘梦宋美营尚如霞裴丹张林松闻崇炜镇江市食品药品监督检验中心江苏镇江212050 江苏大学药学院江苏镇江212013

目的:优化金钱白花蛇碱溶性蛋白质(bmASP)的提取工艺,并对其进行SDS-PAGE、HPLC、FTIR表征。方法:在单因素试验基础上,以提取pH值、料液比、提取时间和提取温度为自变量,bmASP提取率为因变量,基于Box-Behnken组合设计对提取工艺进行响... 详细信息

目的:优化金钱白花蛇碱溶性蛋白质(bmASP)的提取工艺,并对其进行SDS-PAGE、HPLC、FTIR表征。方法:在单因素试验基础上,以提取pH值、料液比、提取时间和提取温度为自变量,bmASP提取率为因变量,基于Box-Behnken组合设计对提取工艺进行响应面优化,对提取产物进行HPLC、FTIR、SDS-PAGE分析。结果:最佳提取工艺条件为:提取pH值为8.0,料液比为1∶40(g/mL),提取时间为5.0 h,提取温度为45℃,bmASP提取率为5.96%。HPLC结果表明bmASP的保留时间为2.998、4.745、4.977、5.672 min;FTIR结果表明bmASP在3 551.45、3 575.95、3 413.06 cm^(-1)等处有特征吸收峰;SDS-PAGE指纹图谱结果表明bmASP分子量介于18.4~116 kDa,其中18.4~19.5 kDa、23.38~25.11 kDa、32.53~38.64 kDa、58.62~65.96 kDa的蛋白质含量丰富。结论:bmASP提取工艺的响应面模型可靠有效,结果稳定,可为金钱白花蛇药效物质基础的研究、资源开发利用及真伪鉴定提供实验依据。

关键词：金钱白花蛇碱溶性蛋白质提取工艺响应面优化表征

肿瘤饥饿疗法的新靶标——内分泌腺衍生血管内皮生长因子

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生物化学与生物物理进展 2012年第7期39卷 622-630页

作者：闻崇炜宁德刚刘瑞江张业旺江苏大学药学院镇江212013 江苏大学环境学院镇江212013

"肿瘤饥饿疗法"是通过抑制促肿瘤血管新生细胞因子的作用,阻断肿瘤血管形成,最终实现"饿死"肿瘤细胞的一种治疗方法.内分泌腺衍生血管内皮生长因子(EG-VEGF)是在2001年被发现的一个组织选择性促血管新生因子.近年来的研究表明,EG-VEGF... 详细信息

"肿瘤饥饿疗法"是通过抑制促肿瘤血管新生细胞因子的作用,阻断肿瘤血管形成,最终实现"饿死"肿瘤细胞的一种治疗方法.内分泌腺衍生血管内皮生长因子(EG-VEGF)是在2001年被发现的一个组织选择性促血管新生因子.近年来的研究表明,EG-VEGF还兼有促进造血干细胞分化、刺激胃肠道收缩及影响肠神经系统发育等多种生理功能.EG-VEGF的异常表达与多种肿瘤及血管新生依赖性疾病的发生发展密切相关,有望作为相应的治疗靶点开发诊断及治疗试剂.本文对有关研究进展及应用前景作一简要综述.

关键词：肿瘤饥饿疗法内分泌腺衍生血管内皮生长因子(EG-VEGF) 组织选择性血管新生肿瘤

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丙缬异苏(AVIT)蛋白质家族

生命的化学 2009年第6期29卷 844-847页

作者：闻崇炜宁德刚江苏大学药学院镇江212013 江苏大学环境学院镇江212013

丙缬异苏(AVIT)蛋白质家族是近年发现的一个新的蛋白质家族。该家族成员广泛存在于多种生物的不同组织中,具有促进血管新生、调控生物节律、影响新生神经元迁移等重要生物学功能。AVIT蛋白质的基因的突变或异常表达与多种肿瘤、Kallman... 详细信息

丙缬异苏(AVIT)蛋白质家族是近年发现的一个新的蛋白质家族。该家族成员广泛存在于多种生物的不同组织中,具有促进血管新生、调控生物节律、影响新生神经元迁移等重要生物学功能。AVIT蛋白质的基因的突变或异常表达与多种肿瘤、Kallmann综合征等疾病的发生发展相关。因此,以AVIT蛋白质为靶点,开发相关疾病的早期诊断试剂和治疗药物,将是下一个研究焦点。

关键词： AVIT蛋白质家族 AVIT蛋白质结构功能

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超活性胰高血糖素的分泌表达

生物化学与生物物理学报 2003年第2期35卷 167-171页

作者：闻崇炜甘人宝朱尚权中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

通过多肽化学合成方法 ,人们对胰高血糖素的结构与功能关系有了比较深刻的了解 ,其中最引人注目的成就之一是发现 [Lys17,18,Glu2 1] 胰高血糖素具有比天然胰高血糖素更高的生物活性 ,称之为超活性胰高血糖素(superactiveglucagon ,下称... 详细信息

通过多肽化学合成方法 ,人们对胰高血糖素的结构与功能关系有了比较深刻的了解 ,其中最引人注目的成就之一是发现 [Lys17,18,Glu2 1] 胰高血糖素具有比天然胰高血糖素更高的生物活性 ,称之为超活性胰高血糖素(superactiveglucagon ,下称SA glucagon)。为了通过基因工程途径获得SA glucagon ,用PCR方法从以前构建的胰高血糖素表达载体pAGluT得到SA glucagon的基因 (SAG) ,构建了含PL 启动子 ,phoA信号肽和SAG的分泌表达载体pBLSG7。pBLSG7转化到大肠杆菌BL2 1中 ,进行SAG的分泌表达 ,在摇瓶条件下 ,该菌种能分泌表达SA glucagon达 3.6 5mg/L(A60 0 =1) ,占上清液中蛋白质的 19.5 % ,并进一步研究了诱导温度和菌株对表达的影响。

关键词：基因重组胰高血糖素超活性胰高血糖素 PL启动子分泌表达

聚乙二醇沉淀蛋清蛋白质的规律及在卵白蛋白分离中的应用

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食品科学 2018年第1期39卷 29-35页

作者：闻崇炜赵烨清石莉欧阳臻江苏大学药学院江苏镇江212013

研究3种pH值条件下4种聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对卵白蛋白(ovalbumin,OVA)、卵转铁蛋白(ovotransferrin,OVT)与溶菌酶(lysozyme,LYZ)的沉淀效率,根据变化规律建立无需后续脱盐的OVA分离新工艺。结果表明:PEG 4000、6000、8000及10000均可有效沉淀OVA、OVT及LYZ,沉淀率受PEG质量分数及pH值影响。其中pH 7.5、PEG 4000质量分数12%时,OVA、OVT及LYZ的沉淀率相差最大,当pH值从7.5调至5.5时,3种蛋白质沉淀率的变化幅度相差也最大。由此建立如下分离工艺:首先向pH 7.5的蛋清液中加PEG 4000至质量分数为12%,离心收集上清液,即得纯度88.1%的OVA,提取率为95.1%;再将所得上清液pH值调至5.5,离心收集上清液,所得OVA纯度提高至99.7%,提取率为87.3%。该工艺简便易行,有利于OVA的大规模制备及在食品及医药领域的应用。

关键词：聚乙二醇沉淀相对分子质量卵白蛋白卵转铁蛋白溶菌酶

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响应面法优化金钱白花蛇醇溶蛋白提取工艺

粮食与油脂 2023年第2期36卷 73-77页

作者：刘梦谢超张林松宋美营母璇闻崇炜江苏大学药学院江苏镇江212013 镇江市食品药品监督检验中心江苏镇江212013

以金钱白花蛇为原料,在单因素试验基础上采用响应面法优化其醇溶蛋白提取工艺,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)指纹图谱分析。结果表明:最佳提取工艺条件为乙醇体积... 详细信息

以金钱白花蛇为原料,在单因素试验基础上采用响应面法优化其醇溶蛋白提取工艺,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)指纹图谱分析。结果表明:最佳提取工艺条件为乙醇体积分数40%、料液比1∶17(g/mL)、提取时间4 h、提取温度40℃,此时醇溶蛋白得率为0.51%。SDS-PAGE指纹图谱分析表明金钱白花蛇醇溶蛋白分子质量主要介于26.69~88.02 kDa,26.69~28.34 kDa和70.84~88.02 kDa处的蛋白质丰度较高,分别占蛋白质总量的55.2%和31.8%;HPLC结果表明,主要金钱白花蛇醇溶蛋白的保留时间为2.928和3.452 min;FTIR结果表明,金钱白花蛇醇溶蛋白在3526.67、2918.31、2357.83、1940.24、1354.05、841.90、546.07和444.52 cm^(-1)处有特征吸收峰。试验结果可为金钱白花蛇醇溶蛋白资源的开发利用及药理活性研究提供依据。

关键词：金钱白花蛇醇溶蛋白提取工艺响应面优化