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作者：金巧艳第四军医大学

学位级别：硕士

【背景】肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)难治且预后差,可导致右心衰竭和死亡,是一种严重危害人类健康的疾病。低氧性肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)是PH常见的临床类型,常见于高原、低氧环境或肺部疾... 详细信息

【背景】肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)难治且预后差,可导致右心衰竭和死亡,是一种严重危害人类健康的疾病。低氧性肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)是PH常见的临床类型,常见于高原、低氧环境或肺部疾病的病理状态下,由于其病生理机制复杂,尚未彻底阐明,因此,目前治疗PH的方法有限,只能达到临床缓解,不能改变患者最终需要肺移植的结局。研究发现低氧刺激引起肺血管内皮损伤,可导致肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)表达分泌的多种血管活性因子、生长因子、细胞因子、炎症因子发生异常,且PMVECs活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)生成及凋亡增加。C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(C1q/TNF-related protein 9,CTRP9)是一种新发现的内源性脂肪细胞因子,在脂代谢、心血管功能等的调控中发挥重要的作用。CTRP9能够促进主动脉血管内皮产生NO,引起血管舒张,具有抗炎、抗动脉粥样硬化、抑制ADP诱导的血小板聚集、抑制内膜损伤后的血管重塑、抑制血管周围炎症和白细胞黏附等作用,对体循环动脉血管具有多重保护作用,然而,CTRP9对低氧引起的肺血管内皮功能失调有何影响,其分子机制为何,尚未见报道。因此,本研究旨在探讨CTRP9能否影响低氧引起的肺血管内皮损伤,并进一步研究其分子机制是否与影响血管活性因子及炎症因子等有关,期望为应用CTRP9缓解低氧性肺动脉高压提供实验证据,为防控低氧性肺动脉高压提供新策略和新靶点。【实验目的】(1)阐明CTRP9对低氧环境PMVECs功能的影响及其分子机制。(2)明确在整体水平肺组织过表达CTRP9能否改善肺血管内皮功能障碍,进而缓解HPH。【实验方法与结果】(1)分离培养健康雄性SD大鼠原代PMVECs,组织块贴壁72h后倒置显微镜下从形态学上鉴定PMVECs,可见组织块周围细胞融合生长成片状的细胞单层,多角形或类圆形细胞呈铺路石样分布、细胞透亮、轮廓清晰、连接紧密,证实PMVECs培养成功。(2)分离培养PMVECs,利用50ml/L O2、50ml/L CO2、900ml/L N2在细胞水平复制HPH模型。实验随机分为4组,分别为:常氧组(210ml/L O2、50ml/L CO2)、低氧组(50ml/L O2、50ml/L CO2、900ml/L N2)、低氧+CTRP9同时孵育组、低氧+CTRP9+Compound C孵育组(用Compound C在常氧预孵育30min后,给予CTRP9孵育的同时低氧处理),处理48h。收集细胞培养上清,分别用硝酸还原酶法、ELISA法测量NO和ET-1含量;收集细胞,抽提细胞总蛋白,用Western blot检测AMPK/p-AMPK、e NOS/p-e NOS、ERK1/2/p-ERK1/2变化。结果显示CTRP9抑制低氧时PMVECs中AMPK、e NOS磷酸化水平及NO生成的降低、ERK1/2磷酸化水平及ET-1生成的增加,该调节作用可被AMPK抑制剂Compound C抑制。(3)进一步研究CTRP9对PMVECs分泌的血管活性物质NO和ET-1的影响作用及机制,培养人肺动脉内皮细胞(human pulmonary artery endothelial cells,HPAECs),采用慢病毒载体在基因水平干扰AMPK(Lv-PRKAA1-RNAi)后,观察CTRP9的作用。结果显示,用Lv-PRKAA1-RNAi干扰后,CTRP9在低氧条件下促进p-AMPK、p-e NOS、NO产生、抑制p-ERK1/2、ET-1生成的作用降低。(4)原代培养的PMVECs分别在常氧(210ml/L O2、50ml/L CO2)、低氧(50ml/L O2、50ml/L CO2、900ml/L N2)、或者低氧+CTRP9(5μg/ml)环境中孵育48h。收集细胞培养上清,ELISA检测炎症因子IL-6、TNF-α,提取细胞总RNA,用RT-PCR检测IL-6、TNF-αm RNA变化。结果显示:与常氧组相比,低氧处理使两种炎症因子IL-6、TNF-α在PMVECs中m RNA水平及在细胞培养上清中的含量均增加;在低氧的同时给予CTRP9孵育时,与单纯低氧组相比,两种炎症因子在PMVECs中m RNA水平及在细胞培养上清中的含量均降低。(5)原代培养的PMVECs分别在常氧(210 ml/L O2、50 ml/L CO2)、低氧(50 ml/L O2、50 ml/L CO2、900 ml/L N2)、或者低氧+CTRP9(5μg/ml)环境中孵育48h。收集细

关键词：低氧性肺动脉高压肺血管内皮功能障碍血管活性物质 CTRP9

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浅谈水泥稳定粒料基层施工与试验检测

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企业技术开发（下半月） 2009年第10期28卷 131-132页

作者：张玲金巧艳湖北益通建设工程有限责任公司湖北宜昌443003

文章对水泥稳定粒料的配合比设计、施工流程和试验检测等方面进行阐述，并且探讨了混合料中水泥剂量与无侧限抗压强度之间的关系。

关键词：水泥稳定粒料无侧限饱水抗压强度压实度材料级配

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支气管哮喘儿童情绪问题现状及相关因素分析

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中国儿童保健杂志 2022年第12期30卷 1400-1403,1408页

作者：张洋王慧渊耿妍金巧艳郝娟娟侯伟西安交通大学第二附属医院儿童病院陕西西安710004

目的分析哮喘患儿存在的情绪问题及影响其发生的相关因素,为哮喘患儿的临床综合治疗和干预提供依据。方法选取2017年5—12月在西安交通大学第二附属医院儿童哮喘门诊就诊8~16岁哮喘儿童70例,采用一般情况调查表、哮喘控制问卷(ACQ)、儿... 详细信息

目的分析哮喘患儿存在的情绪问题及影响其发生的相关因素,为哮喘患儿的临床综合治疗和干预提供依据。方法选取2017年5—12月在西安交通大学第二附属医院儿童哮喘门诊就诊8~16岁哮喘儿童70例,采用一般情况调查表、哮喘控制问卷(ACQ)、儿童焦虑性情绪障碍筛查表(SCARED)、儿童抑郁障碍自评量表(DSRS)进行评估及分析。结果哮喘儿童焦虑、抑郁障碍筛查阳性者各24、26例,检出率分别为34.3%、37.1%。焦虑、抑郁障碍得分独生子女组高于非独生子女组(t=2.986、3.125)、家庭关系不和谐组高于家庭关系和谐组(t=3.636、5.309)、哮喘控制不佳组高于哮喘控制佳组(t=2.743、2.086);哮喘未规范管理组抑郁障碍得分高于哮喘规范管理组(t=2.336),差异均具有统计学意义(P<0.05)。多因素回归分析结果显示:独生子女及哮喘控制程度是哮喘患儿焦虑障碍评分的主要因素(β=0.289、-0.423,P<0.05);独生子女、家庭关系、哮喘控制程度是影响哮喘患儿抑郁障碍评分的主要因素(β=0.282、-0.283、-0.266,P<0.05)。结论哮喘儿童比同龄健康儿童更易出现焦虑、抑郁等负面情绪,家庭成员及医护人员需要重视儿童情绪问题,提高其生活质量。

关键词：支气管哮喘焦虑抑郁儿童

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珊瑚菌子实体多糖结构鉴定与抗氧化活性

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浙江工业大学学报 2020年第1期48卷 73-79页

作者：何荣军金巧艳刘高丹易千红孙培龙浙江工业大学海洋学院

从珊瑚菌子实体中分离纯化得到多糖组分RFPF2A,并研究其化学结构特征和抗氧化活性。采用DEAE sepharose fast flow离子柱、Sephacryl G-25和S-400 High-resolution凝胶柱层析进行分离纯化,经红外光谱、高效液相色谱、气相色谱-质谱联用... 详细信息

从珊瑚菌子实体中分离纯化得到多糖组分RFPF2A,并研究其化学结构特征和抗氧化活性。采用DEAE sepharose fast flow离子柱、Sephacryl G-25和S-400 High-resolution凝胶柱层析进行分离纯化,经红外光谱、高效液相色谱、气相色谱-质谱联用和核磁共振等谱图分析确定多糖的结构组成,并测定RFPF2A的羟基自由基清除能力、超氧阴离子清除能力、亚铁离子金属螯合能力和总还原力。结果表明:RFPF2A分子质量为9.87×10^2kDa,由β-(1,6)-D-吡喃葡萄糖、α-(1,2,6)-D-吡喃半乳糖和β-(1,4)-D-吡喃甘露糖组合而成,摩尔比为n(葡萄糖)∶n(半乳糖)∶n(甘露糖)=1∶0.15∶0.26。当多糖质量浓度为5 mg/mL时,羟基自由基的清除能力达60%,超氧阴离子清除能力达74.47%,亚铁离子金属螯合能力达61.82%,还原力吸光值达1.506。因此,RFPF2A多糖具有显著的抗氧化活性,并表现出一定的质量浓度依赖性。

关键词：珊瑚菌多糖结构分析核磁共振抗氧化活性

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大鼠Pdcd4基因真核载体的构建与表达

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医学研究杂志 2019年第10期48卷 58-62页

作者：钟波李静吕社民侯伟刘海燕金巧艳魏伟西安交通大学医学部第二附属医院小儿内科 710004 西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系 7100061 西安交通大学医学部第二附属医院检验科 710004

目的构建大鼠程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,Pdcd4)基因真核表达载体,为进一步研究该基因的功能提供条件。方法提取E3大鼠肺组织总RNA,RT-PCR扩增大鼠Pdcd4基因全长cDNA;经过双酶切、连接等反应,构建pEGFP-C1-Pdcd4重组... 详细信息

目的构建大鼠程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,Pdcd4)基因真核表达载体,为进一步研究该基因的功能提供条件。方法提取E3大鼠肺组织总RNA,RT-PCR扩增大鼠Pdcd4基因全长cDNA;经过双酶切、连接等反应,构建pEGFP-C1-Pdcd4重组表达载体。将该载体转染大鼠巨噬细胞系NR8383细胞,通过RT-qPCR与Western blot法检测NR8383细胞Pdcd4基因的表达。结果RT-PCR扩增的大鼠Pdcd4全长cDNA为1410bp;pEGFP-C1-Pdcd4重组真核表达载体中插入片段与NCBI GenBank文库中大鼠Pdcd4 cDNA的序列完全一致;倒置荧光显微镜下观察转染后NR8383细胞中绿色荧光蛋白的表达确定转染成功;RT-qPCR与Western blot法检测NR8383细胞中Pdcd4基因的表达水平明显上调。结论成功构建pEGFP-C1-Pdcd4重组真核表达载体,为进一步研究Pdcd4基因的作用机制奠定基础。

关键词：程序性细胞死亡因子4 基因重组 pEGFP-C1载体支气管哮喘

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CTRP9抑制低氧环境下肺微血管内皮细胞IL-6和TNF-α表达的研究

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心脏杂志 2017年第4期29卷 399-404页

作者：金巧艳曾明华谭延振苏慧易蔚张海锋孙新第四军医大学西京医院儿科陕西西安710032 第四军医大学西京医院心血管外科陕西西安710032 第四军医大学西京医院老年病科陕西西安710032 第四军医大学教学实验中心陕西西安710032

目的研究低氧环境下C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(C1q/TNF-related protein 9,CTRP9)对肺微血管内皮细胞(Pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC)中白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为常氧组、低氧组,采用低压低氧法建立大鼠低氧性肺动脉高压(Hypoxic pulmonary hypertension,HPH)模型,28 d后检测各组大鼠血流动力学、右心室肥厚指标和组织病理学改变;用RT-PCR检测HPH大鼠肺组织中IL-6、TNF-αmRNA表达水平;用ELISA法检测二者在血清中的变化。分离培养健康雄性SD大鼠的PMVEC,分别在常氧(210 ml/L O_2、50 ml/L CO_2)、低氧(50 ml/L O_2、50 ml/L CO_2)、或者低氧+CTRP9(5μg/ml)环境中孵育48 h。结果与常氧组相比,低氧组大鼠右心室收缩压和右心室肥厚指标增加(P<0.05),肺小动脉管壁增厚,显示造模成功;肺组织中IL-6、TNF-αmRNA水平上调(P<0.05),两种炎症因子在血清中的含量增加(P<0.05)。与常氧组相比,低氧处理使两种炎症因子IL-6、TNF-α在PMVEC中mRNA水平及在细胞培养上清中的含量均增加(P<0.05);在低氧的同时给予CTRP9孵育时,与单纯低氧组相比,两种炎症因子在PMVEC中mRNA水平及在细胞培养上清中的含量均降低(P<0.05)。结论大鼠发生HPH时,炎症因子IL-6、TNF-α表达升高。而CTRP9对低氧条件下PMVEC表达和分泌IL-6及TNF-α具有抑制作用,进而有望预防或延缓HPH的发生发展。

关键词： C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9 低氧性肺动脉高压肺微血管内皮细胞白介素-6 肿瘤坏死因子-α

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小鼠胰岛素抵抗哮喘模型的建立与评估

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现代生物医学进展 2018年第7期18卷 1259-1263,1301页

作者：周宁娟徐海军金巧艳张娟李秋红吴海霞苏慧孙新第四军医大学西京医院儿科陕西西安710032 西京医院老年病科陕西西安710032

目的:探讨小鼠胰岛素抵抗哮喘模型的建立方法,并进行评估。方法:C57BL/6J小鼠随机分为4组:正常对照组(HC)、哮喘组(NIRA)均给予普通饲料喂养;胰岛素抵抗组IRNA)、胰岛素抵抗+哮喘组(IRA)均给予高脂饲料(D12492)喂养。每周称重,第6-14周... 详细信息

目的:探讨小鼠胰岛素抵抗哮喘模型的建立方法,并进行评估。方法:C57BL/6J小鼠随机分为4组:正常对照组(HC)、哮喘组(NIRA)均给予普通饲料喂养;胰岛素抵抗组IRNA)、胰岛素抵抗+哮喘组(IRA)均给予高脂饲料(D12492)喂养。每周称重,第6-14周,每周检测各组小鼠空腹血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(FINS)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗评价指数(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗程度;小鼠胰岛素抵抗模型建立成功后在其基础上诱导哮喘模型,NIRA组和IRA组小鼠给予卵清蛋白(OVA)致敏、激发;HC组和IRNA组小鼠给予生理盐水作为对照,末次激发24后,制作肺病理切片,计数肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及分类,检测血清和BALF中相关炎性因子的水平,比较各组小鼠胰岛素抵抗指数与哮喘评价指标,评估模型。结果:(1)第9周末,IRNA组、IRA组小鼠的HOMA-IR值均>2.5,表明胰岛素抵抗小鼠模型建立成功;(2)肺组织病理切片中,HC组、IRNA组小鼠肺组织无炎症改变,NIRA组、IRA组炎细胞浸润明显,尤以IRA组更甚。(3)与HC组比较,NIRA组(P<0.01)、IRA组(P<0.01)BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞比例明显增高;(4)血清中抗OVA特异性Ig E(P<0.01)和Ig G1(P<0.05)水平显著升高;(5)血清和BALF中IL-4(P<0.01)、IL-17(P<0.05)的水平明显升高,且IRA组(P<0.05)明显高于NIRA组;IFN-γ(P<0.05)的水平明显降低,且IRA组(P<0.05)明显低于NIRA组。结论:用高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠9周,可建立稳定的胰岛素抵抗模型,从第10周开始用OVA致敏、激发诱发哮喘,可成功建立稳定的胰岛素抵抗哮喘小鼠模型,为进一步研究胰岛素抵抗与哮喘相关机制奠定基础。

关键词：胰岛素抵抗哮喘动物模型

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儿科医护人员新型冠状病毒肺炎防控知信行调查及影响因素分析

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中国妇幼健康研究 2020年第2期31卷 161-165页

作者：侯伟王慧渊耿妍郝娟娟金巧艳张洋东利娟高丹钟波刘海燕李静西安交通大学第二附属医院儿科陕西西安710004

目的了解儿科医护人员对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)防控知识、态度和行为现状及分析其影响因素,为采取针对性的措施提供依据。方法在疫情上升阶段,于2020年2月13日采用问卷星的调查方式,对我省儿科医护人员COVID-19防控知识、态度和行... 详细信息

目的了解儿科医护人员对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)防控知识、态度和行为现状及分析其影响因素,为采取针对性的措施提供依据。方法在疫情上升阶段,于2020年2月13日采用问卷星的调查方式,对我省儿科医护人员COVID-19防控知识、态度和行为进行在线问卷调查,采用多因素Logistic回归分析其可能的影响因素。结果共收回有效问卷1876份。儿科医护人员COVID-19防控知识平均得分为(23.77±3.06)分,态度平均得分为(6.15±1.30)分,行为平均得分为(9.82±1.06)分。知识、态度和行为得分较高(≥P80)例数分别为610(32.5%)、811(43.2%)和555(29.6%)。多因素Logistic分析结果显示护理人员的知识、行为得分均较医师低,其OR值及95%CI分别为0.626(0.505~0.775)、0.586(0.469~0.733)。参加工作20年以上的人员知识、态度及行为得分均较高,其OR值及95%CI分别为1.402(1.033~1.903)、1.520(1.150~2.009)、1.582(1.156~2.164)。结论儿科医护人员COVID-19的知信行总体情况良好,但主动学习仍不足,应加强对各级别医护人员培训。

关键词：新型冠状病毒肺炎儿科医护人员知信行调查问卷

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合作的收益与风险:发明人外部合作网络对核心技术和颠覆性技术形成的不同影响

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管理工程学报 2025年第1期 155-169页

作者：胡谍佘茂艳杨雪魏丽灿福州大学经济与管理学院成都理工大学管理科学学院四川大学商学院

本研究基于合作的收益和风险,利用1980年—2017年的美国医药发明专利数据进行实证分析,探索发明人外部合作网络对核心技术和颠覆性技术形成的不同影响。研究表明,发明人外部直接合作对核心技术和颠覆性技术的形成均存在“倒U型”作用,... 详细信息

本研究基于合作的收益和风险,利用1980年—2017年的美国医药发明专利数据进行实证分析,探索发明人外部合作网络对核心技术和颠覆性技术形成的不同影响。研究表明,发明人外部直接合作对核心技术和颠覆性技术的形成均存在“倒U型”作用,但效果有所差异:在达到最优外部直接合作数量(“倒U型”拐点)之前,外部直接合作对核心技术的正向作用强于对颠覆性技术的正向作用,达到最优合作数量(“倒U型”拐点)之后,外部直接合作对核心技术的负向作用强于对颠覆性技术的负向作用;发明人外部间接合作对核心技术的形成存在负向作用,对颠覆性技术的形成存在正向作用;外部间接合作会减弱外部直接合作与核心技术的“倒U型”曲线关系,增强外部直接合作与颠覆性技术的“倒U型”曲线关系。研究结论从合作的收益与风险视角为管理者有效利用发明人外部合作网络来促成不同类型技术创新的产生提供决策参考。

关键词：发明人外部合作网络核心技术颠覆性技术收益与风险

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健行云端：高中生社交媒体使用状况及对策——基于15126份中美日韩高中生问卷调查结果的比较分析

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中小学管理 2025年第1期 39-43页

作者：孙宏艳中国青少年研究中心

青少年是社交媒体的活跃用户。通过对比分析中美日韩高中生使用社交媒体的问卷调查结果发现，我国高中生对社交媒体有较高认可度，承认其对自身人际关系改善、兴趣技能发展等方面的积极影响，但部分高中生使用社交媒体后也出现社交焦虑... 详细信息

青少年是社交媒体的活跃用户。通过对比分析中美日韩高中生使用社交媒体的问卷调查结果发现，我国高中生对社交媒体有较高认可度，承认其对自身人际关系改善、兴趣技能发展等方面的积极影响，但部分高中生使用社交媒体后也出现社交焦虑、社交沉迷等问题，或遭遇过网络安全风险。建议学校和家庭接纳未成年人亲近社交媒体的事实，关注其相关心理与情绪，并通过营造健康和谐的成长环境、创新网络素养教育方式，为未成年人提供强有力的社会支持，保障其健康使用社交媒体。

关键词：社交媒体使用社交沉迷社交焦虑网络素养生成式AI 国际比较

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