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作者：郝丛丛河北农业大学

学位级别：硕士

由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是一种世界性的重要病害,常给农业生产造成重大的经济损失。分离植物抗灰霉病相关基因,研究其抗病分子机制,进而培育抗病新品种是防治灰霉病的有效途径。本实验室前期通过筛选拟南芥的T-DNA插... 详细信息

由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是一种世界性的重要病害,常给农业生产造成重大的经济损失。分离植物抗灰霉病相关基因,研究其抗病分子机制,进而培育抗病新品种是防治灰霉病的有效途径。本实验室前期通过筛选拟南芥的T-DNA插入突变体库获得了一株对灰葡萄孢敏感的突变体,利用TAIL-PCR技术和生物信息学方法确定了突变体的突变基因为T1N62,推测T1N62基因为拟南芥的抗灰霉病相关基因。为进一步确定该基因的功能及其在抗病过程中的具体作用,本研究对t1n62突变体进行分子鉴定和抗病性测定,明确了t1n62突变体对灰葡萄孢的敏感性和对丁香假单胞杆菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000,Pst DC3000)的抗病性。通过互补回复试验,验证了T1N62基因为拟南芥抗灰葡萄孢相关基因。利用RT-PCR和Real-Time PCR技术,确定了T1N62基因是通过水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)信号途径影响拟南芥对灰葡萄孢的抗性。利用黄色荧光蛋白YFP融合蛋白技术,确定了T1N62蛋白定位于叶绿体。利用酵母双杂交技术筛选拟南芥cDNA文库,获得T1N62的互作蛋白。为进一步阐明T1N62基因抗灰霉病的分子机制及植物抗病育种奠定了良好基础。 1.对t1n62突变体进行分子鉴定,确定了其纯合突变体为T1N62基因的功能缺失突变体。检测t1n62突变体对灰葡萄孢的抗病性,发现t1n62突变体表现为明显的感病症状(野生型为抗病症状);t1n62突变体中灰葡萄孢ACTIN基因的表达水平明显高于野生型;台盼蓝染色和DAB染色法确定t1n62突变体叶片中死亡细胞数量和H2O2的积累量均明显高于野生型,进一步确定了t1n62突变体对灰葡萄孢的敏感性。检测t1n62突变体对Pst DC3000的抗病性,发现t1n62突变体表现明显的抗性(野生型感病),采用间苯胺蓝染色法检测到t1n62突变体中胼胝质大量积累,进一步验证了t1n62突变体对Pst DC3000的抗病性。 2.通过农杆菌介导法将构建好的T1N62基因回复表达载体pCAMBIA1300-Pro35S∷T1N62(CDS)-NOS转化至t1n62突变体中,抗生素筛选获得了T1N62基因的转基因回复株系;利用PCR和Southern blotting鉴定,确定了T1N62基因以多拷贝形式成功整合到t1n62突变体基因组中;利用RT-PCR技术分析,确定了转基因株系中T1N62基因及抗病防御相关基因的表达恢复到了野生型水平;抗病性测定发现,回复转基因株系恢复了对灰葡萄孢的抗病性和对Pst DC3000的感病性,进一步确定了T1N62基因为拟南芥抗灰霉病相关基因。 3.利用RT-PCR技术,对拟南芥野生型Col-0经SA类似物BTH、乙烯合成前体ACC、SA及JA处理后T1N62基因的表达情况进行分析,发现SA及其类似物BTH处理后该基因的表达明显增强,JA处理该基因的表达明显减弱,ACC处理该基因的表达没有明显变化,表明T1N62基因的表达受SA的诱导和JA的抑制。将JA合成缺失突变体jar1用JA处理,检测T1N62基因的表达情况,发现Col-0中T1N62在JA处理后下调表达,而jar1突变体中T1N62的表达没有明显变化,说明T1N62的表达受JA信号途径的调控。将SA信号途径相关突变体NahG、eds5、sid2和npr1用SA处理,检测T1N62的表达情况,发现各突变体中T1N62基因的表达明显减弱,说明T1N62的表达受SA信号途径的调控。 4.利用RT-PCR和Real-Time PCR技术,检测野生型Col-0、t1n62突变体及回复株系接种灰葡萄孢后抗病相关基因的表达情况,发现t1n62突变体中PR1、PR3、PR5及PDF1.2基因的表达变化趋势与野生型明显不同。对野生型Col-0、t1n62突变体及回复株系接种Pst DC3000后,检测T1N62及抗病相关基因的表达情况,发现t1n62突变体中PR1、PR3、PR5及NPR1基因的表达趋势与野生型明显不同,说明T1N62基因的功能缺失破坏了SA和JA/ET的抗病信号途径。 5.试验构建了T1N62基因与YFP融合的植物表达载体,采用原生质体转化的方法,将此载体导入拟南芥原生质体中进行瞬时表达,用荧光显微镜观察其在原生质体中的分布情况,初步确定了T1N62蛋白定位于叶绿体。 6.试验构建了T1N62基因的酵母诱饵表达载体,转录激活活性分析确定T1N62具有较强的转录激活活性。以T1N62为诱饵,利用酵母双杂交体系筛选拟南芥cDNA文库,并利用PCR技术初步验证,共获得了4个可能与T1N62互作的蛋白,对其进行生物信息学分析,发现4个T1N62互作蛋白均为核小体组

关键词：拟南芥灰葡萄孢互补回复亚细胞定位酵母双杂交

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大众传媒中的日源“新借用语”转汉语词汇浅论

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吕梁学院学报 2023年第6期13卷 19-24页

作者：郝丛丛东京外国语大学综合国际学研究科日本东京183-8534

在日本的明治维新过程中,率先将当时西方先进的科学、社会、政治相关的名词翻译成“和制汉语”。19世纪末20世纪初,新文化运动将已经被翻译成“和制汉语”的汉字词汇借用到汉语中,这便是近代中日语言文化交流的起点,其中大多数词语也被... 详细信息

在日本的明治维新过程中,率先将当时西方先进的科学、社会、政治相关的名词翻译成“和制汉语”。19世纪末20世纪初,新文化运动将已经被翻译成“和制汉语”的汉字词汇借用到汉语中,这便是近代中日语言文化交流的起点,其中大多数词语也被沿用至今。20世纪后期,中日之间的文化交流越发频繁,这期间也陆续有日语词汇被借用或音译为中文。而在进入21世纪的今天,随着新媒体发展,日本流行文化大规模进入中国,由于日语中部分词汇比当代汉语中的词汇更加简洁、准确的表达,这些词汇也就被年轻人以各种各样的形式流用至汉语中,其中包括直接原样借用日本汉字词并保留其词义的“借形词”;通过音译形式转换为汉语但保留原本词义的“借音词”;亦有通过借音或借形等形式融入至汉语,也有词义与日语原词有些许出入的“变义词”,以及参考日语原词使用的汉字或假名,对其加以改变而来的“变形词”等。当代年轻人在网络平台上使用这些日语词汇的现象颇为常见,这些新词对汉语可能造成的正面及负面影响也日益凸显。我们在积极引进丰富汉语词汇的同时,对于这些新词汇的使用也需要适当管制,确保规范使用,以减少对未成年人可能造成的不良影响。

关键词：流行词外来词借用语中日文化交流和制汉语

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抽血记

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作文世界（小学版） 2008年第2期 10-11页

作者：郝丛丛上海市闸北区第二中心小学二年级

　　今天是星期二,我们全家一起去儿童医学中心给我化验血铅和血锌.到了医院,等了好长时间才开始发号,我领到的号码是106号.……

关键词：心理描写医学中心

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公关礼仪课程状况及教学改革方案

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就业与保障 2021年第6期 156-157页

作者：郝丛丛陈果贵州师范学院

公关礼仪是公共关系学的专业核心课程,与旅游类专业的公关礼仪不同,公共关系学专业的礼仪课程不仅培养学生塑造个人与社会组织良好形象的能力,更注重培养学生建立社群间沟通与信任的能力。但是现有的传统理论性教学模式无法满足该专业... 详细信息

公关礼仪是公共关系学的专业核心课程,与旅游类专业的公关礼仪不同,公共关系学专业的礼仪课程不仅培养学生塑造个人与社会组织良好形象的能力,更注重培养学生建立社群间沟通与信任的能力。但是现有的传统理论性教学模式无法满足该专业的人才培养需求,因此要以培养良好形象为内涵、培养社交与沟通能力为导向,对公关礼仪课程教学模式进行改革,以期培养出符合社会需求的专业人才。

关键词：公共关系学公关礼仪教学改革

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拟南芥T1N622在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析

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中国农业科学 2013年第4期46卷 678-685页

作者：郝丛丛郑会欣贾娇司贺龙陈展赵斌张靖邢继红董金皋河北农业大学生命科学学院真菌毒素与植物分子病理学实验室吉林省农林科学院植物保护研究所河北省农林科学院果树研究所

【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N622在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N622影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n622突变体和转基因回复突变体(t1n622/T1N622)接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测接种突... 详细信息

【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N622在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N622影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n622突变体和转基因回复突变体(t1n622/T1N622)接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测接种突变体中胼胝质的积累情况;测定接种叶片中Pst DC3000的生长量,明确T1N622在拟南芥抗Pst DC3000过程中的功能。利用RT-PCR技术,检测SA、JA和ET对T1N622表达的影响及T1N622对抗病防御相关基因表达的影响;利用quantitative real-time PCR技术,检测Pst DC3000对T1N622及抗病相关基因表达的影响,分析T1N622影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【结果】t1n622突变体接种Pst DC3000后表现明显的抗病症状,而回复突变体t1n622/T1N622和拟南芥野生型表现明显的感病症状。SA处理拟南芥野生型,T1N622的表达量明显增强,经JA和ACC处理,该基因的表达量无显著变化。t1n622突变体中,PAL、PR4、PPO、SOD和CAT的表达水平均明显高于野生型Col-0和转基因回复植株。接种Pst DC3000后,拟南芥野生型中T1N622及抗病相关基因PR1、PR3、PR5和PDF1.2的表达量明显增强。【结论】T1N622在拟南芥抗Pst DC3000过程中起负调控作用,T1N622的表达受SA诱导,可能主要通过调节植物的次生代谢产物的分泌影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。

关键词： T1N622 拟南芥 Pst DC3000 抗病信号途径

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拟南芥AtBT4对灰葡萄孢的抗性机制分析

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中国农业科学 2013年第9期46卷 1756-1761页

作者：郝丛丛杨萍陈展贾娇赵斌司贺龙韩建民邢继红董金皋河北农业大学生命科学学院/真菌毒素与植物分子病理学实验室河北省农林科学院果树研究所吉林省农林科学院植物保护研究所

【目的】揭示AtBT4在拟南芥抗灰葡萄孢中与SA、JA信号途经的相互关系。【方法】利用RT-PCR技术,检测用SA、SA类似物BTH、JA、ACC及灰葡萄孢处理拟南芥野生型Col-0后其AtBT4的表达情况;检测经SA和JA处理后拟南芥SA、JA途径相关突变体AtBT... 详细信息

【目的】揭示AtBT4在拟南芥抗灰葡萄孢中与SA、JA信号途经的相互关系。【方法】利用RT-PCR技术,检测用SA、SA类似物BTH、JA、ACC及灰葡萄孢处理拟南芥野生型Col-0后其AtBT4的表达情况;检测经SA和JA处理后拟南芥SA、JA途径相关突变体AtBT4的表达情况;并检测接种灰葡萄孢后拟南芥野生型Col-0、bt4突变体和回复突变体抗病相关基因的表达情况。【结果】JA处理和接种灰葡萄孢后,拟南芥野生型Col-0中AtBT4的表达明显增强。但经JA处理后,JA不敏感突变体jar1的AtBT4表达变化趋势与野生型明显不同,AtBT4的表达水平不受JA诱导。SA信号途径相关突变体eds5、sid2和npr1中AtBT4的表达明显低于野生型,但变化趋势与野生型基本一致。bt4突变体中抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达明显低于野生型和回复突变体。【结论】AtBT4的表达受JA和灰葡萄孢的诱导,AtBT4突变影响抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达,AtBT4可能通过SA、JA信号途径影响拟南芥对灰葡萄孢的抗性。

关键词： AtBT4 拟南芥灰葡萄孢抗病信号途径

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鲁迅“国民性”批判的日本影响及其文化超越

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日本问题研究 2023年第5期37卷 54-63页

作者：郝雨郝丛丛上海大学新闻传播学院上海200444 东京外国语大学综合国际学研究科东京183-8534

基于多年来关于鲁迅研究的文献资料,考察梳理了鲁迅从赴日求学,弃医从文,到“国民性”思想的产生,这一期间内所受到的种种影响,分析鲁迅提出的“国民性”与日本“国民性”的差别。根据史料可以得知鲁迅深深受到当时在日本国内的关于“... 详细信息

基于多年来关于鲁迅研究的文献资料,考察梳理了鲁迅从赴日求学,弃医从文,到“国民性”思想的产生,这一期间内所受到的种种影响,分析鲁迅提出的“国民性”与日本“国民性”的差别。根据史料可以得知鲁迅深深受到当时在日本国内的关于“国民性”研究的影响。而且,鲁迅对于“国民性”问题的关注,从源头上看,受日本文化的影响很大,尤其是在留日期间的日本文化氛围的浸染。至于芳贺矢一的《国民性十论》,更是启发了鲁迅的“国民性”概念的确立。鲁迅通过自己的消化改造,将包括国民性在内的新概念、新思想注入自己的作品,其国民性概念实际上是对芳贺矢一“国民性”的反用,也因此达到了对于日本“国民性”研究的超越。也就是说鲁迅对于“国民性”概念的使用,完全不是在芳贺矢一的原意上照搬,却恰恰是反其意而用之。由芳贺矢一的对其日本国民性的赞美,而根据当时中国实际的国民精神状况,对于我们民族的国民性进行了深刻的批判。今天,重新审视鲁迅当年所极力批判的“国民性”的来龙去脉,并以此作为今后进一步研究的起点,进行更加深入的学术发掘和探讨。

关键词：鲁迅日本文化国民性溯源

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拟南芥抗灰霉病相关基因BRG2的RNAi载体构建及转基因植株的筛选

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河北农业大学学报 2010年第6期33卷 21-25页

作者：郝丛丛陈展邢继红董金皋河北农业大学植物分子病理学实验室河北保定071001

为研究BRG2基因在拟南芥抗灰霉病过程中的作用及其调控机理,试验构建了含拟南芥抗灰霉病相关基因BRG2特异片段反向重复结构的RNA干扰(RNAi)载体,通过根癌农杆菌介导转化拟南芥及潮霉素筛选和PCR检测,获得了3株阳性转基因植株;半定量RT-... 详细信息

为研究BRG2基因在拟南芥抗灰霉病过程中的作用及其调控机理,试验构建了含拟南芥抗灰霉病相关基因BRG2特异片段反向重复结构的RNA干扰(RNAi)载体,通过根癌农杆菌介导转化拟南芥及潮霉素筛选和PCR检测,获得了3株阳性转基因植株;半定量RT-PCR检测转基因株系中BRG2的表达情况,结果发现,转基因株系中BRG2的表达产物比野生型(WT)明显降低,且转基因株系之间差异明显,表明该干扰载体转入拟南芥能特异引起植株中BRG2基因表达量下降。

关键词：拟南芥灰霉病 BRG2 RNAi

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