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脂肪酸受体CD36通过影响有氧糖酵解促进肝细胞癌进展及相关机制

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脂肪酸受体CD36通过影响有氧糖酵解促进肝细胞癌进展及相关机制

作者：郑恩泽重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:肝癌,作为一种常见的恶性肿瘤,在我国恶性肿瘤发生率排名中占据前列,同时也是世界范围内因癌症导致死亡的第三大原因。代谢重编程是包括肝癌在内的肿瘤代谢的一个关键特征,它使得肿瘤细胞一方面获得必需的生物大分子用于细胞增殖,... 详细信息

目的:肝癌,作为一种常见的恶性肿瘤,在我国恶性肿瘤发生率排名中占据前列,同时也是世界范围内因癌症导致死亡的第三大原因。代谢重编程是包括肝癌在内的肿瘤代谢的一个关键特征,它使得肿瘤细胞一方面获得必需的生物大分子用于细胞增殖,一方面还能产生能量以供自身需求。脂肪酸受体CD36是一种整合的跨膜糖蛋白,在各种组织中表达,参与长链脂肪酸的高亲和性摄取。CD36在肝脏的糖代谢和脂肪酸代谢中的重要性已得到证实。然而,CD36在HCC进展过程中的代谢重编程中的作用仍有待进一步阐明。因此,本研究拟探索CD36在肝癌中的表达情况及CD36的表达增加促进肝癌进展的原因,并对其中的代谢调控机制进行了一定的阐释。方法:第一部分:分析TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中的373份HCC病例样本(包括50对正常肝组织)和GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中编号为GSE14520的225份HCC病例样本(包括220对正常肝组织)中CD36的表达情况;用实时荧光定量PCR(RT-PCR)对30例HCC患者癌与癌旁组织的CD36的mNA表达水平进行检测;使用RT-PCR和Western Blot对正常肝细胞L02细胞系和HCC细胞Huh7、SK-Hep-1、PLC/PRF/5、SMCC-7721以及Hep G2细胞系分别进行CD36的mNA表达水平和蛋白水平进行检测。第二部分:体外实验中,用含有CD36 cDNA的重组慢病毒构建CD36过表达(CD36 OE)的Huh7和SK-Hep-1细胞系,并用Western Blot检测两种细胞系CD36蛋白过表达水平;采用长期动态连续监测培养箱和EdU试验检测CD36 OE细胞或对照细胞的增殖情况;肿瘤细胞用流式细胞仪进行细胞周期检测;使用肿瘤细胞创面愈合实验和transwell实验对CD36过表达后肝癌细胞迁移和侵袭能力的改变进行评价。第三部分:用Seahorse Xfe-24分析仪测定Huh7和SK-Hep-1两种CD36过表达细胞系的能量代谢表型和比色法测定HCC细胞乳酸含量以测量两种肿瘤细胞糖酵解能力;Western Blot分析Huh7和SK-Hep-1两种CD36过表达细胞系哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin,m TOR)及其磷酸化p-m TOR的蛋白表达水平及下游靶点AKT、p-AKT(Ser43位点)蛋白水平;m TOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin,RA)处理HCC细胞后观察细胞增殖情况;用创面愈合和transwell实验评价RA处理后是否影响HCC细胞的迁移和侵袭能力;糖酵解应激试验测定RA对Huh7和SK-Hep-1细胞糖酵解能力的影响;AKT抑制剂MK-2206处理两种HCC肝癌细胞后,用创面愈合和Transwell实验验证AKT/m TOR信号通路对两种肝癌细胞的迁移和侵袭能力的改变。结果:第一部分:TCGA数据库中肝癌病人HCC组织CD36的mNA表达水平(N=373)显著高于与其配对的正常肝组织CD36的mNA水平(N=50)。同样,来自GEO数据库的病例资料显示CD36在HCC组织中增加。对30对重庆医科大学附属第二医院肝癌患者配对肝癌及癌旁组织CD36的mNA水平检测显示,与对应的非癌组织相比,HCC组织中CD36的mNA水平显著升高。以正常肝细胞L02为对照,检测发现SMCC-7721、Hep G2和PLC/PRF/5肝癌细胞在mNA和蛋白水平上均丰富表达CD36。SK-Hep-1和Huh7肝癌细胞的CD36表达虽然在mNA水平上有几倍的升高,但在蛋白水平上和对照细胞相比没有明显差异。第二部分:体外实验中,构建CD36过表达的Huh7和SK-Hep-1肝癌细胞系后,长时间动态连续监测法、EdU法和细胞周期法分析发现CD36过表达显著促进肿瘤细胞增殖。创面愈合实验和transwell实验表明CD36过表达可以增强肿瘤细胞迁移和侵袭的能力。第三部分:Seahorse XF分析仪检测两种过表达肝癌细胞系的代谢表型发现:CD36过表达时,HCC细胞倾向于糖酵解途径,且增加了乳酸的产生。糖酵解应激试验显示,CD36过表达可促进糖酵解和糖酵解能力。CD36过表达可诱导m TOR的磷酸化,抑制CD36可有效地抑制m TOR信号。RA预处理后可以抑制肝癌细胞的增殖作用,并消除CD36过表达对肝癌细胞糖酵解和糖酵解能力的影响。CD36过表达可激活AKT的磷酸化。而使用AKT的抑制剂后可阻断m TOR信号,同时抑制CD36过表达诱导的肿瘤细胞增殖和迁移。结论:CD36在HCC中呈高表达,在体内外CD36表达升高有助于肿瘤的生长和转移。代谢表型分析显示CD36过表达的HCC细胞具有更强的糖酵解潜能,而

关键词：脂肪酸葡萄糖代谢重塑 mTOR AKT

基于事件相关电位绝对时间标记法的汽车造型语义评价方法

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同济大学学报（自然科学版） 2022年第8期50卷 1207-1214页

作者：邵景峰杨志刚杨再峰郑恩泽同济大学汽车学院上海201804 上海汽车集团股份有限公司技术中心设计中心上海201804

借助Muse脑电设备,采用绝对时间标记法,探索事件相关电位(ERP)实验的造型评价方法,从而缩短造型设计评估周期,提高企业内部造型设计决策效率。首先通过句尾歧义经典实验范式,验证Muse脑电设备可用于ERP的N400经典实验范式研究,其次进行... 详细信息

借助Muse脑电设备,采用绝对时间标记法,探索事件相关电位(ERP)实验的造型评价方法,从而缩短造型设计评估周期,提高企业内部造型设计决策效率。首先通过句尾歧义经典实验范式,验证Muse脑电设备可用于ERP的N400经典实验范式研究,其次进行多模态语义加工研究的复合刺激范式实验,验证Muse脑电设备测试结果。结果表明,Muse脑电设备在对汽车造型语义与文字语义进行测量时,能够准确采集N400成分并进行比较。N400成分可以在特定刺激下反映用户的真实想法,提高汽车造型决策效率,降低造型设计成本。

关键词：汽车造型绝对时间标记法事件相关电位

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基于NeRF的超分辨率图像重建算法研究

基于NeRF的超分辨率图像重建算法研究

作者：郑恩泽北京邮电大学

学位级别：硕士

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微能源网的优化配置及运行研究

微能源网的优化配置及运行研究

作者：郑恩泽上海交通大学

学位级别：硕士

随着传统一次能源快速消耗,国家对新能源发展大力扶持。火力发电规模迅速扩大,但仍然难以满足持续高速发展的用电需求。同时用户的负荷需求并不仅仅局限在电能,热能、冷能等其他类型的低品位负荷的需求也大幅增加,分布式供能正在逐渐成... 详细信息

随着传统一次能源快速消耗,国家对新能源发展大力扶持。火力发电规模迅速扩大,但仍然难以满足持续高速发展的用电需求。同时用户的负荷需求并不仅仅局限在电能,热能、冷能等其他类型的低品位负荷的需求也大幅增加,分布式供能正在逐渐成为为用户供能的重要手段。作为新兴的能源互联网的重要存在形式,微能源网的发展成为了政府政策支持和技术发展的重要方向。基于上述背景,本文重点研究了微能源网的优化配置与运行,主要完成了以下工作:(1)首先总结了常见微能源网的系统构成,对其主要设备的出力特性和运行模型进行梳理。(2)建立了以系统总成本和环保性综合最优为优化目标的微能源网多目标优化配置模型,对经典粒子群算法进行改进,得到了优化配置模型的考虑极值变异的混合型粒子群求解算法。(3)研究微能源网不同运行模式特征,建立了不同模式下同时考虑运行经济性和环保性的微能源网多目标优化运行模型,并利用考虑极值变异的混合型粒子群算法对模型进行求解。(4)建立了同时考虑离网与并网运行方式需求的微能源网储能优化配置模型。针对微能源网的储能优化配置,通过同时考虑离网运行状态下的储能配置需求和并网运行状态下的微能源网运行策略,运用双层优化理论,对储能优化配置建立双层优化模型,并利用考虑极值变异的混合型粒子群算法对模型进行求解。本文对微能源网的优化配置、优化运行及考虑不同运行状态需求的储能优化配置进行研究,并采用算例对模型及算法的有效性进行了测试,计算结果验证了模型及算法的有效性。

关键词：微能源网优化配置优化运行储能优化配置双层优化模型粒子群算法

降解多菌灵木霉菌株的分离及其生防与降解特性

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湖北农业科学 2012年第7期51卷 1348-1351页

作者：郑恩泽山东省实验中学济南250001

从长期施用多菌灵的葡萄园土壤中分离纯化得到一株能够降解多菌灵的木霉(Trichoderma sp.)菌株Tr1。在以多菌灵为惟一碳源的无机盐培养基中培养14 d后,该菌株对多菌灵的降解率为45.74%。在无机盐培养基中添加少量氮源,可以提高木霉Tr1... 详细信息

从长期施用多菌灵的葡萄园土壤中分离纯化得到一株能够降解多菌灵的木霉(Trichoderma sp.)菌株Tr1。在以多菌灵为惟一碳源的无机盐培养基中培养14 d后,该菌株对多菌灵的降解率为45.74%。在无机盐培养基中添加少量氮源,可以提高木霉Tr1对多菌灵的降解率,尤其是添加0.1%酵母粉,降解率达到了66.57%。木霉Tr1在含氮的无机盐培养基上的最适生长温度为28℃,最适初始pH为6.5。木霉Tr1还对所测定的6种植物病原真菌(Rhizoctonia solani,Phytophthora capsici,Verticillium dahliae Kleb,Phoma uvicola Berk,Bipolaris sorokiniana(Sacc.)hoemaker,Fusarium moniliforme Sheld)都具有抑菌活性。该项研究为木霉在植物病害生物防治及多菌灵污染土壤修复方面的应用提供了基础。

关键词：多菌灵生物降解木霉(Trichoderma sp.) 降解特性生物防治

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乙级技术士考试与教学适用工业配线学

乙级技术士考试与教学适用工业配线学

1979年

作者：郑恩泽陈逸宏合

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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略谈祖国医学中的“终始”与“数”

天津中医学院学报 1983年第1期 8-10页

作者：郑恩泽河北省航运局

祖国医学之说理、取法都“本于阴阳”,并进一步以五行相生、相克推演阴阳终始之妙用。五指数,行指气,水、火、木、金,土指象,相生相克指理。因此学习、研究、运用祖国医学理论时,都会涉及到理、气、象、数的问题。“终始”与“数”在内... 详细信息

祖国医学之说理、取法都“本于阴阳”,并进一步以五行相生、相克推演阴阳终始之妙用。五指数,行指气,水、火、木、金,土指象,相生相克指理。因此学习、研究、运用祖国医学理论时,都会涉及到理、气、象、数的问题。“终始”与“数”在内、难经中屡见不鲜,并占有重要位置。如《素问·四气

关键词：祖国医学大论四气调神干解杂篇素问阴阳终始

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《伤寒论》六经与《易经》八卦

天津中医药大学学报 1989年第2期23卷 1-,12页

作者：郑恩泽

张仲景在《伤寒论》中划分六经,其本于《黄帝内经·素问》热论篇,然溯源于《易》旨。即如《易经》八卦次序中,首冠乾(三)坤(三)指明天地之阴阳,变化之父母。次序震(三得乾初爻)、坎(三得乾中爻、艮三得乾上爻)、巽(三得坤初爻)、离(三... 详细信息

张仲景在《伤寒论》中划分六经,其本于《黄帝内经·素问》热论篇,然溯源于《易》旨。即如《易经》八卦次序中,首冠乾(三)坤(三)指明天地之阴阳,变化之父母。次序震(三得乾初爻)、坎(三得乾中爻、艮三得乾上爻)、巽(三得坤初爻)、离(三得坤中爻)、兑(三得坤上爻)之六子,统一阴阳动变而六位成章。其卦象及卦气,俱与《伤寒论》六经契合,需进一步认识与探讨。故参考《易经通注》及《伤寒论翼》,以八卦证六经,从六经明卦气,制表阐明如下:

关键词：上爻卦气伤寒论中爻卦象一阴热论篇黄帝内经·素问里证外越

类风湿关节炎铁死亡特征基因CeRNA网络构建及免疫表现

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2561-2567页

作者：夏天李炳霖肖发源郑恩泽陈跃平广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530000 广西中医药大学附属瑞康医院创伤骨科与手外科广西壮族自治区南宁市530000

背景:研究发现铁死亡相关基因在类风湿关节炎的发病机制中占据重要地位,但目前尚缺乏关于类风湿关节炎铁死亡特征基因的免疫表现及CeRNA互作网络的构建,而机器学习作为生物信息学中强大的特征基因选择算法能更精确地筛选出在类风湿关节... 详细信息

背景:研究发现铁死亡相关基因在类风湿关节炎的发病机制中占据重要地位,但目前尚缺乏关于类风湿关节炎铁死亡特征基因的免疫表现及CeRNA互作网络的构建,而机器学习作为生物信息学中强大的特征基因选择算法能更精确地筛选出在类风湿关节炎发病机制中占主导地位的铁死亡特征基因。目的:利用生物信息学与机器学习方法筛选类风湿关节炎铁死亡特征基因,并分析铁死亡特征基因与免疫浸润的相关性及铁死亡特征基因CeRNA的网络构建。方法:从GEO数据库获取与类风湿关节炎相关的芯片,利用R语言提取铁死亡相关基因及其差异基因表达;使用机器学习方法对差异基因进行筛选,即运用LASSO回归与SVM-RFE方法进行特征基因筛选,对两者过滤后的基因进行再次交集,最终得到类风湿关节炎的特征基因,运用ROC曲线评估筛选后的疾病特征基因诊断疾病的准确性;利用CIBERSORT算法分析类风湿关节炎与正常滑膜组织的免疫浸润情况,并分析铁死亡特征基因与免疫细胞的相关性,最后构建类风湿关节炎铁死亡疾病特征基因的CeRNA网络并对疾病特征基因进行验证。结果与结论:①得到与类风湿关节炎相关铁死亡基因150个,其中55个上调基因,95个下调基因;②GO与KEGG富集分析分别得到18个GO显著相关条目与30个KEGG条目,主要涉及金属离子稳态、有铁离子稳态与氧化应激反应等;③机器学习分析最终获得疾病特征基因GABARAPL1、SAT1;④GSEA分析发现脂肪细胞因子信号通路、药物代谢细胞色素P450、脂肪酸代谢、PPAR信号通路、酪氨酸代谢主要集中在GABARAPL1高表达时,趋化因子信号通路、肠道免疫网络对IGA产生的影响主要集中在SAT1高表达时;⑤免疫浸润分析发现类风湿关节炎与9种免疫细胞与正常组织存在明显差异,其中浆细胞、T细胞CD8、T细胞滤泡辅助器在疾病组中为高表达状态,其余为低表达。单基因与免疫细胞相关性分析发现GABARAPL1在树突状静息细胞、激活的NK细胞、巨噬细胞M1等为正相关,其中与树突状静息细胞的相关性最为显著,SAT1与T细胞CD4与γδT细胞为正相关,与NK静息细胞为负相关;⑥GSVA分析发现抗坏血酸和醛酸代谢在SAT1表现为上调的基因高表达水平时候为上调,而B细胞受体信号通路、TOLL样受体信号通路、T细胞受体信号通路、自然杀伤细胞介导的细胞毒性等表现为下调,PPAR信号通路、烟酸盐和烟酰胺的代谢、色氨酸代谢、脂肪酸代谢、类固醇生物合成等在GABARAPL1表现为下调趋势;⑦60种长链非编码RNA可能在导致类风湿关节炎发展过程中发挥关键作用。提示:类风湿关节炎的发生与类风湿关节炎铁死亡疾病特征基因的异常表达显著相关,特征基因通过影响相关信号通路诱导疾病的发生发展,并通过对类风湿关节炎相关长链非编码RNA介导的ceRNA网络进行分析,识别出潜在的治疗靶点及信号通路,为进一步阐明其发病机制,并为后续的实验研究提供参考依据。

关键词：类风湿关节炎生物信息学机器学习铁死亡 CeRNA网络构建