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作者：郑彦懿广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过一般药效评价、对肠道菌群的影响等方面的研究,探讨大黄牡丹汤及其两种主要活性成分(大黄素、丹皮酚)对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用。方法:1.大黄牡丹汤及其主要活性成分药效学评价。BALB/c小鼠分为正常组、模型组、... 详细信息

目的:通过一般药效评价、对肠道菌群的影响等方面的研究,探讨大黄牡丹汤及其两种主要活性成分(大黄素、丹皮酚)对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用。方法:1.大黄牡丹汤及其主要活性成分药效学评价。BALB/c小鼠分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、大黄牡丹汤三个剂量组和大黄素三个剂量组。除正常组外,其余各组小鼠自由饮用3%DSS 6天建立UC模型,造模第1天开始分别灌胃给予大黄牡丹汤和大黄素10天。第11天取材,采用小鼠疾病活动指数(DAI)评价小鼠体重、粪便性状;结肠组织切片及HE染色观察小鼠结肠病变情况;2.大黄牡丹汤及其主要活性成分对免疫细胞的影响。流式细胞术检测UC小鼠肠系膜淋巴结中T、B淋巴细胞活化情况;MTT法检测脾淋巴细胞体外增殖的影响;3.大黄牡丹汤中有效单体抗消化液稳定性实验。紫外分光光度法测定大黄素和丹皮酚体外在人工唾液、模拟胃液中的稳定性;4.大黄牡丹汤及其主要活性成分对肠道菌群结构和多样性的影响。采用16SrDNA测序法测定肠道菌群的变化情况;5.大黄牡丹汤及其主要活性成分对与UC密切相关的三种肠道细菌的影响。平板计数法测定大黄牡丹汤、大黄素和丹皮酚体外对两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌和丁酸梭菌增殖的影响;荧光定量PCR法检测UC小鼠盲肠内容物中两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌和丁酸梭菌的含量;6.大黄牡丹汤及其主要活性成分对肠道菌群代谢产物的影响。气相色谱法检测整体肠道菌群、两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌和丁酸梭菌代谢产物——短链脂肪酸(SCFAs)分泌量的影响。结果:1.大黄牡丹汤及其主要活性成分对DSS所致UC小鼠的影响。BALB/c小鼠自由饮用3%DSS 6天可成功复制UC模型。除正常组外,其余各组小鼠体重、饮食量从造模第4天逐渐下降,大黄牡丹汤高剂量组小鼠体重在给药第8天后缓慢恢复;柳氮磺胺吡啶组、大黄牡丹汤各剂量组和大黄素各剂量组小鼠的饮水量、进食量于第8天后逐渐恢复。造模前5天,各组小鼠饮水情况相对稳定,饮水量从第6天开始下降,至第8天达到最低,而后逐渐上升。每天记录小鼠粪便性状和便血情况,并统计小鼠DAI,发现除正常组外,其余各组小鼠DAI自第4天明显升高,至第8天到达峰值,到第10天时,柳氮磺胺吡啶组、大黄牡丹汤中剂量组和大黄素各剂量组小鼠DAI均明显低于模型组。测量各组小鼠结直肠段长度发现,模型组小鼠结直肠水肿,明显变短,其余各给药组小鼠结直肠明显变长,且有一定的剂量依赖性。同时,取小鼠结肠进行HE染色,发现UC小鼠结肠粘膜层及粘膜下层病变严重,表现为杯状细胞大量坏死、脱落,隐窝消失,固有层肠腺明显缩小或消失,有大量炎症细胞浸润;粘膜下层间隙增大,血管扩张、充血,炎症细胞浸润;肌层明显增厚。给药后,柳氮磺胺吡啶、大黄牡丹汤和大黄素均能改善小鼠结肠炎症细胞浸润现象,肠壁变薄、粘膜层结构完整。2.大黄牡丹汤及其主要活性成分对免疫细胞的影响。观察小鼠肠系膜淋巴结中T、B淋巴细胞活化情况,发现UC小鼠T细胞活化增多,B细胞活化减少,但与正常组相比均无显著性差异。给药后,柳氮磺胺吡啶、大黄牡丹汤和大黄素均能降低肠系膜淋巴结中T、B细胞的活化程度,有一定的剂量依赖性(P<0.05或0.01)。MTT法测定大黄牡丹汤和大黄素对脾淋巴细胞体外增殖的影响,结果表明,大黄牡丹汤和大黄素能剂量依赖性抑制由ConA及LPS所致的脾淋巴细胞体外增殖,结果与LPS组、ConA组相比有显著性差异(P<0.05或0.001)。3.抗消化液稳定性实验结果表明,大黄素、丹皮酚在人工唾液、模拟胃液中可保持其吸光度的稳定。4.16SrDNA测序结果显示,体外分别给予大黄牡丹汤、大黄素和丹皮酚后,从门分类层面看,拟杆菌门细菌均减少,变形菌门细菌均增加,有剂量依赖性。而厚壁菌门细菌在大黄牡丹汤、大黄素体外作用下增加,而给予丹皮酚后减少;从属分类层面看,样品中含量较高的几种细菌在上述三种药物体外作用后,拟杆菌属细菌减少,乳酸杆菌属、乳球菌属增加。另外,埃希菌属、变形菌属在大黄牡丹汤、大黄素作用下有所增加,而给予丹皮酚后减少。但在对细菌种类的鉴定中,没有检测到两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌和丁酸梭菌,考虑是因为这三种细菌是严格厌氧菌,在体外提取、培养的过程中,因有氧气的存在,出现损失甚至死亡。5.平板计数法检测大黄牡丹汤、大黄素和丹皮酚体外分别对两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌和丁酸梭菌增殖的影响。结果显示:①大黄牡丹汤低浓度促进两歧双歧杆菌增殖,高浓度抑制;大黄素和丹皮酚均促进其增殖(P<0.05,0.01或0.001)。②大黄牡丹汤、大黄素和丹皮酚剂量依赖性地抑制脆弱拟杆菌增殖(P<0.01或0.001)。③大黄牡丹汤抑制丁酸梭菌增殖,而低浓度的大黄素和丹皮酚均促进其增殖,高浓度的大黄素和丹皮酚则抑制(P<0.05,0.01或0.001)。荧光定量PCR法

关键词：大黄牡丹汤大黄素丹皮酚肠道菌群溃疡性结肠炎

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肠道菌群失调增加小鼠肠上皮内T淋巴细胞活化和促炎细胞因子分泌

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第8期32卷 1031-1035页

作者：罗霞罗爽郑彦懿温如燕邓向亮周联广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的探讨肠道菌群失调对小鼠小肠上皮间淋巴细胞(i IEL)功能的影响。方法口服给予广谱抗生素头孢曲松钠造成菌群失调小鼠模型,用乙二胺四乙酸(EDTA)和二硫苏糖醇(DTT)消化上皮细胞,流式细胞术鉴定i IEL表型和T细胞亚群的比例,ELISA检测... 详细信息

目的探讨肠道菌群失调对小鼠小肠上皮间淋巴细胞(i IEL)功能的影响。方法口服给予广谱抗生素头孢曲松钠造成菌群失调小鼠模型,用乙二胺四乙酸(EDTA)和二硫苏糖醇(DTT)消化上皮细胞,流式细胞术鉴定i IEL表型和T细胞亚群的比例,ELISA检测肠腔冲洗液中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)水平,采用选择性培养基以及PCR检测肠道细菌的类别。结果与正常组相比,给予头孢曲松钠后小鼠肠道内细菌明显减少,真菌和酵母菌增多;i IEL中T淋巴细胞亚群的比例发生变化,其中γδT细胞比例明显升高;CD3+T细胞、CD8+T细胞以及T细胞受体(TCR)γδ+T细胞活化增加,肠腔内IL-2、IL-6、IFN-γ水平显著升高。结论肠道菌群失调导致定植抗力下降,真菌增多,微生物屏障功能被破坏,引起i IEL中T细胞活化增加,促炎细胞因子分泌增加,可能是菌群紊乱引起炎症性肠病的原因之一。

关键词：上皮间淋巴细胞肠道菌群生物屏障

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大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用

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中药新药与临床药理 2016年第5期27卷 649-654页

作者：温如燕罗霞郑彦懿周联罗爽广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用。方法设正常组,溃疡性结肠炎模型组,美沙拉嗪组,大黄牡丹汤低、中、高剂量组,通过疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度、... 详细信息

目的研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用。方法设正常组,溃疡性结肠炎模型组,美沙拉嗪组,大黄牡丹汤低、中、高剂量组,通过疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度、脾脏指数、结肠组织HE染色、结肠病理损伤评分、结肠髓过氧化物酶(MPO)活性、血清及结肠IL-1β含量观察大黄牡丹汤对UC小鼠的治疗效果。结果与正常组比较,模型组小鼠DAI评分显著升高,结肠明显缩短,结肠显著增厚,炎症性细胞浸润明显,多灶溃疡,隐窝减少,肠腺减少,病理组织学评分显著升高,脾脏指数显著上升,结肠MPO活性、血清及结肠IL-1β含量显著高于正常组,差异均有统计学意义。与模型组比较,大黄牡丹汤低、中、高剂量组均能明显降低UC小鼠DAI评分,改善小鼠的疾病状态。大黄牡丹汤中、高剂量组能还能防止结肠组织增厚,维持其结构的完整,降低其病理组织评分,抑制脾脏指数升高,降低结肠MPO活性及血清、结肠IL-1β含量,差异均有统计学意义。结论大黄牡丹汤对溃疡性结肠炎小鼠具有治疗作用。

关键词：大黄牡丹汤溃疡性结肠炎葡聚糖硫酸钠治疗作用小鼠

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治疗牙周炎的乳杆菌筛选及口腔益生特性评价

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食品与发酵工业 2021年第15期47卷 70-76页

作者：徐晚晴张秋香郑彦懿赵建新马方励江南大学食品学院江苏无锡214122 无限极(中国)有限公司广东江门519000

利用牙周炎致病菌混合生物膜模型和牙周炎细胞模型筛选具有缓解牙周炎作用的乳杆菌。通过抑制生物膜形成量、降低炎性因子白细胞介素-1β、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α能力、调节紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin基因表达水平对乳杆... 详细信息

利用牙周炎致病菌混合生物膜模型和牙周炎细胞模型筛选具有缓解牙周炎作用的乳杆菌。通过抑制生物膜形成量、降低炎性因子白细胞介素-1β、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α能力、调节紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin基因表达水平对乳杆菌进行评估。筛选得到2株具有抑制混菌生物膜形成、缓解口腔炎症、调控紧密连接蛋白表达的植物乳杆菌CCFM1137和发酵乳杆菌CCFM1139。而后通过测定溶菌酶耐受能力、自成膜能力、自聚和共聚能力对2株乳杆菌进行口腔益生特性评价。结果表明,植物乳杆菌CCFM1137和发酵乳杆菌CCFM1139有作为治疗牙周炎的口腔益生菌的应用潜力。

关键词：牙周炎生物膜炎性因子紧密连接蛋白乳杆菌

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大黄牡丹汤及其主要活性成分对三种肠道细菌的影响

大黄牡丹汤及其主要活性成分对三种肠道细菌的影响

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第十届全国免疫学学术大会

作者：郑彦懿周联罗霞广州中医药大学

目的 :探讨大黄牡丹汤及其两种主要活性成分——大黄素、丹皮酚,对三种与溃疡性结肠炎密切相关的肠道细菌——双歧杆菌、脆弱拟杆菌、丁酸梭菌增殖及短链脂肪酸分泌的影响。方法:1、大黄素、丹皮酚体外抗消化实验。配置人工胃液、模拟... 详细信息

目的 :探讨大黄牡丹汤及其两种主要活性成分——大黄素、丹皮酚,对三种与溃疡性结肠炎密切相关的肠道细菌——双歧杆菌、脆弱拟杆菌、丁酸梭菌增殖及短链脂肪酸分泌的影响。方法:1、大黄素、丹皮酚体外抗消化实验。配置人工胃液、模拟唾液后,分别加入1%大黄素、丹皮酚后,37℃水浴,与0h、1h、2h、4h和6h时取样品溶液分别于527nm、274nm波长下测定大黄素、丹皮酚的含量。2、对三种肠道细菌体外增殖的影响。分别接种细菌至含药培养基中,给药终浓度(大黄牡丹汤:2、4、8mg/m L;丹皮酚:10、20、40μg/m L;大黄素:0.4、0.8、1.6μg/m L),厌氧培养48h,用平板计数法观察细菌体外增殖情况。3、对三种肠道细菌体外分泌短链脂肪酸的影响。定量接种菌液于含药脑心浸液肉汤中,给药终浓度同上,使菌液终浓度达到107个/毫升,厌氧培养48h后,用气相色谱法进行乙、丙、丁酸的含量检测。结果 :1、大黄素、丹皮酚在模拟唾液和人工胃液中均能保持稳定。2、大黄牡丹汤作用后,两歧双歧杆菌在2mg/m L增殖明显,而后逐渐被抑制;脆弱拟杆菌和丁酸梭菌明显减少。大黄素作用后,两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌逐渐增加,并在0.8μg/m L增殖最显著,而后逐渐减少;丁酸梭菌逐渐减少。丹皮酚作用后,两歧双歧杆菌、脆弱拟杆菌和丁酸梭菌均随给药浓度增加而减少。以上结果与对照组相比,结果均有差异。3、气相色谱法结果显示,体外给予大黄牡丹汤后,乙酸、丙酸、丁酸含量均下降。大黄素对乙酸、丁酸基本无影响;而丙酸的分泌明显被抑制,结果较对照组具有显著性差异。丹皮酚对乙酸的分泌有一定的抑制作用,但这种抑制随给药浓度增加而减弱;明显抑制丙酸分泌,而对丁酸基本无影响。结论 :大黄牡丹汤体外对三种与溃疡性结肠炎密切相关的细菌及其代谢产物均有一定的影响。

关键词：大黄牡丹汤大黄素丹皮酚肠道菌群短链脂肪酸

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大黄牡丹汤改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠炎症状态及其贫血症

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中华中医药学刊 2016年第12期34卷 2998-3001,I0040页

作者：温如燕罗霞郑彦懿周联廖海锋刘琦广州中医药大学中药学院广东广州510006 广西中医药大学广西南宁530200

目的:研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用及其相关的贫血症的改善作用。方法:设正常组、模型组、美沙拉嗪组、大黄牡丹汤低剂量组、大黄牡丹汤中剂量组和大黄牡丹汤高剂量组,通过疾... 详细信息

目的:研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用及其相关的贫血症的改善作用。方法:设正常组、模型组、美沙拉嗪组、大黄牡丹汤低剂量组、大黄牡丹汤中剂量组和大黄牡丹汤高剂量组,通过疾病活动指数(DAI)、结肠病理损伤评分、结肠髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、外周血中性粒细胞数量、红细胞总数及血红蛋白含量观察大黄牡丹汤对UC小鼠的治疗效果及对炎症性肠病相关的贫血症的影响。结果:模型组小鼠DAI评分显著升高,结肠横切面显著增厚,大量炎症性细胞浸润,溃疡部位明显,隐窝和肠腺减少,病理组织学评分显著升高,外周血中性粒细胞显著增多,红细胞数减少,血红蛋白含量显著减少。美沙拉秦可降低UC小鼠DAI评分、组织病理学评分,但对UC小鼠结肠增厚、中性粒细胞增多及红细胞及血红蛋白减少作用不明显。大黄牡丹汤个剂量组均能降低DAI评分、组织病理学评分、结肠MPO活性。大黄牡丹汤中剂量组和高剂量组还可显著防止结肠组织增厚,维持其结构的完整,显著抑制外周血中性粒细胞的增多和提高红细胞数及血红蛋白含量。结论:大黄牡丹汤可以改善葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠炎症状态及其贫血症。

关键词：大黄牡丹汤溃疡性结肠炎葡聚糖硫酸钠贫血症治疗作用小鼠

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体外降糖降脂益生菌筛选及复配益生菌活性探究

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食品与发酵工业 2023年

作者：闫梦晴郑彦懿张璐柳嘉蓝彩娟周晓莉曾雪莹张思璐刘国玉中国食品发酵工业研究院有限公司功能主食创制与慢病营养干预北京市重点实验室深圳保时健生物工程有限公司

为获得到降糖降脂综合能力较佳的复配益生菌，该研究以8种常用益生菌为研究对象，测定其体外降糖能力、胆固醇清除率、胃肠道耐受性及其他性能。以所测指标为因子，通过主成分分析方法筛选出综合能力较优的菌株，并进行菌株间拮抗分析... 详细信息

为获得到降糖降脂综合能力较佳的复配益生菌，该研究以8种常用益生菌为研究对象，测定其体外降糖能力、胆固醇清除率、胃肠道耐受性及其他性能。以所测指标为因子，通过主成分分析方法筛选出综合能力较优的菌株，并进行菌株间拮抗分析及复配益生菌较佳比例的探究。此外，对较佳比例的复配益生菌进行益生元嗜好性分析。结果表明，植物乳杆菌CFFM1031和乳双歧杆菌CFFM2012降糖降脂综合能力较优，2种菌株之间无拮抗作用，与单一菌株或其他比例复配菌株相比，1:1比例复配的菌株具有显著的胆固醇清除能力（43.56%），且复配益生菌在低聚半乳糖或水苏糖为碳源时增殖能力较强，表现出嗜好性。该研究可为益生菌协同增效研究及功能食品配方的开发提供参考。

关键词：益生菌降糖降脂能力拮抗分析复配益生菌促增殖

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大黄牡丹汤对肠道菌群的体外作用

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广州中医药大学学报 2016年第3期33卷 357-361页

作者：郑彦懿温如燕罗霞周联广州中医药大学中药学院广东广州510006

【目的】观察大黄牡丹汤对肠道菌群结构及功能的影响。【方法】分别采用16S r DNA测序法、平板计数法和气相色谱法考察大黄牡丹汤对肠道菌群及其分泌短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)功能的影响。【结果】16S r DNA测序结果... 详细信息

【目的】观察大黄牡丹汤对肠道菌群结构及功能的影响。【方法】分别采用16S r DNA测序法、平板计数法和气相色谱法考察大黄牡丹汤对肠道菌群及其分泌短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)功能的影响。【结果】16S r DNA测序结果表明拟杆菌属、埃希菌属细菌明显减少,乳杆菌属、乳球菌属、变形菌属细菌增多。平板计数结果表明大黄牡丹汤能显著抑制脆弱拟杆菌体外增殖(P<0.001)。气相色谱法检测结果表明大黄牡丹汤可显著抑制SCFAs的分泌(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】肠道菌群及其代谢产物可能是大黄牡丹汤发挥药效的靶点。

关键词：大黄牡丹汤/药理学拟杆菌属脆弱拟杆菌短链脂肪酸 16S r DNA测序色谱法,气相

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中药多糖对免疫抑制小鼠T细胞亚群影响的差异研究

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实用医药杂志 2016年第7期33卷 621-624页

作者：罗霞胡明华马方励温如燕郑彦懿周联广州中医药大学中药学院广东广州510006 无限极(中国)有限公司广东广州510623

目的比较巴戟天多糖(BJT)、酒黄精多糖(JHJ)、淫羊藿多糖(YYH)、人参多糖(RS)、黄芪多糖(HQ)、何首乌多糖(HSW)、生地多糖(SD)、枸杞多糖(GQ)对免疫抑制小鼠T细胞亚型影响的差异。方法采用环磷酰胺腹腔注射制成免疫抑制小鼠模型,通过流... 详细信息

目的比较巴戟天多糖(BJT)、酒黄精多糖(JHJ)、淫羊藿多糖(YYH)、人参多糖(RS)、黄芪多糖(HQ)、何首乌多糖(HSW)、生地多糖(SD)、枸杞多糖(GQ)对免疫抑制小鼠T细胞亚型影响的差异。方法采用环磷酰胺腹腔注射制成免疫抑制小鼠模型,通过流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测T细胞比例及分型。结果给予环磷酰胺后,与正常组比小鼠外周血中CD3+T细胞比值明显升高(P<0.01),YYH,高剂量HQ,低、高剂量RS、HSW、SD、GQ多糖对CD3+T细胞比值具有恢复作用(P<0.05);多糖对环磷酰胺所致Th1/Th2平衡失调具有恢复作用,其中YYH低剂量组,RS、HQ、JHJ、GQ低、高剂量组,HSW、SD高剂量组与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);而JHJ、GQ低、高剂量,HSW、SD高剂量多糖对Th2的影响较明显;此外,低、高剂量BJT、YYH、RS、GQ多糖对环磷酰胺所致Treg比例减少有恢复作用,与模型相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论补益类中草药多糖具有调节免疫系统平衡的作用,在这一过程中,性味不同中药来源的多糖可能通过作用于不同的免疫细胞起作用,滋补阴血中药的多糖免疫调节活性主要偏向于Th2细胞,温补阳气中药的多糖对Treg细胞作用较明显。

关键词：中药多糖免疫抑制 T细胞亚群

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中国式现代化进程中高校教师队伍思想建设探讨

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江苏高教 2024年第8期 78-81页

作者：郑彦之苏州大学沙钢钢铁学院江苏苏州215008

建设教育强国是中国式现代化的基础工程。强教必先强师,加强教师队伍思想建设有其理论和实践相统一的内在逻辑,针对高校教师队伍思想建设面临的主要问题,探索高校教师队伍思想建设的实践路径:坚持党管人才,以习近平新时代中国特色社会... 详细信息

建设教育强国是中国式现代化的基础工程。强教必先强师,加强教师队伍思想建设有其理论和实践相统一的内在逻辑,针对高校教师队伍思想建设面临的主要问题,探索高校教师队伍思想建设的实践路径:坚持党管人才,以习近平新时代中国特色社会主义思想为指引;优化思想建设机制,把顶层设计与制度执行统一起来;坚持以人为本,了解和把握教师的发展需求;提高思想建设能力,创新工作方式方法。

关键词：中国式现代化高校教师队伍思想建设

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