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汽油尾气对大鼠睾丸组织的氧化损伤和遗传毒性作用

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卫生研究 2008年第4期37卷 417-420页

作者：车望军吴媚张遵真张栗王玲四川大学华西公共卫生学院成都610041

目的探讨汽油尾气对大鼠睾丸的遗传毒性及氧化损伤作用。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次。末次染毒24h后处死动物,测定睾丸脏器... 详细信息

目的探讨汽油尾气对大鼠睾丸的遗传毒性及氧化损伤作用。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次。末次染毒24h后处死动物,测定睾丸脏器系数、睾丸组织内丙二醛(MDA)和羰基蛋白(CP)含量以及超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;并用彗星实验检测睾丸组织细胞中DNA的单链断裂水平。结果各剂量组体重增重和睾丸脏脏器系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05);中、高剂量染毒组睾丸组织中MDA和CP含量显著升高;各剂量组SOD酶活力明显降低(P<0.05),而GSH-Px活性的下降仅在高剂量组具有显著性。在16.7L/kg和50.0L/kg组,睾丸组织细胞的拖尾率较对照组明显增加(P<0.05),但尾长的增加仅在50.0L/kg组具有统计学意义。结论汽油尾气可诱导大鼠睾丸组织生物大分子的氧化损伤和DNA单链断裂。

关键词：汽油尾气氧化损伤遗传毒性睾丸大鼠空气污染物

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汽油尾气致氧化应激作用的实验研究

汽油尾气致氧化应激作用的实验研究

作者：车望军四川大学

学位级别：硕士

汽油尾气已成为许多城市室外空气污染的主要来源，且其成分中含有许多已确证或可疑的人类致癌物，因此，进一步明确汽油尾气暴露与人体健康的关系就变得十分重要。现的有研究资料显示，汽油尾气暴露与许多肺及肺外疾病的发生相关。虽然... 详细信息

汽油尾气已成为许多城市室外空气污染的主要来源，且其成分中含有许多已确证或可疑的人类致癌物，因此，进一步明确汽油尾气暴露与人体健康的关系就变得十分重要。现的有研究资料显示，汽油尾气暴露与许多肺及肺外疾病的发生相关。虽然，1989年国际癌症研究中心(IARC)将汽油尾气归为2B类人类致癌物，但迄今为止，对于人们最为关注的汽油尾气暴露与肺癌的发生的关系，不论流行病学、动物实验还是毒性机制研究方面的资料，都无法确认和达成共识。为了了解汽油尾气的毒作用机制及氧化损伤在其毒性机制中的作用，进一步揭示汽油尾气暴露与癌症发生之间的关系，从而为汽油尾气暴露与癌症发生之间的关系提供实验依据。本研究以汽油尾气的冷凝物、颗粒物和半挥发性有机物(Semivolatile organic compound，SVOC)三相成分的有机提取物为处理因素，探讨了汽油尾气对体外培养细胞和气管滴注染毒后的动物多器官组织细胞的氧化损伤作用。体外试验中以人肺腺癌上皮细胞株A549细胞为研究对象，通过MTT试验，2′，7′-二氯双氢荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)活性氧测定实验、抗氧化试验、微核试验以及彗星试验对汽油尾气影响细胞存活率、活性氧生成和脂类的氧化损伤、抗氧化酶活力以及造成细胞DNA的链断裂和染色体损伤的情况进行了观察。结果显示，汽油尾气能降低细胞存活率，诱导细胞内活性氧的生成和堆积，造成脂质的氧化损伤和抗氧化酶活力降低，并能导致DNA单链断裂的增加和染色体的损伤，表明汽油尾气具有明显的细胞毒性和遗传毒性，而氧化应激则可能是其毒作用机制之一。此外，通过还原性谷胱甘肽(Glutathion，GSH)对汽油尾气毒效应的干预实验表明GSH可以降低汽油尾气的毒性效应。表现为GSH预处理组的细胞存活率、活性氧含量和脂质过氧化程度、抗氧化酶活力的下降以及DNA单链的断裂情况明显低于未干预组。该结果从另一个侧面进一步提示氧化损伤在汽油尾气的毒效应过程中具有重要的作用。体内实验依据美国环保局(EPA)关于新燃料毒性评价的规定，将汽油尾气的三相有机提取物通过气管滴注对SD大鼠进行染毒，然后对肺脏、脑、肝脏和睾丸等器官进行多指标的实验观察。结果表明，汽油尾气可造成大鼠肺组织中脂类、蛋白质和核酸的氧化损伤以及抗氧化酶活力的下降，此外病理组织切片观察到肺组织的炎性损伤明显加重。通过免疫组化观察肺组织中DNA氧化损伤的关键性修复酶——8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1(OGG1)含量的变化，结果显示汽油尾气的暴露可导致肺组织8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1的含量明显增加：电镜观察肺组织细胞器细微结构的变化，发现肺组织各型细胞中的线粒体损伤明显，板层小体结构发生病理改变，并有部分细胞核固缩。同样，汽油尾气暴露导致脑、肝脏和睾丸等器官组织中的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和蛋白质氧化损伤产物羰基蛋白(CP)的含量增加、抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活力下降(脑组织除外)、组织细胞DNA的链断裂增加。动物实验的结果表明，汽油尾气经呼吸道暴露后，肺是其主要的靶器官，但脑、肝、睾丸等其他脏器也会被累及，表明汽油尾气暴露后的损伤是多器官的，而氧化应激可能是其重要的毒作用机制之一。体外体内实验的结果均表明，汽油尾气暴露后可导致多组织多器官的脂类、核酸和蛋白质等生物大分子的的氧化损伤，并能导致DNA损伤修复酶OGG1的量发生改变，这些损伤和变化也为癌症的发生创造了可能。

关键词：汽油尾气羰基蛋白活性氧族脂质过氧化 DNA氧化损伤 8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1 A549细胞 SD大鼠

人8羟-基鸟嘌呤DNA糖苷酶1基因低表达增加肺腺癌细胞对博来霉素的敏感性

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中国药理学与毒理学杂志 2006年第4期20卷 312-317页

作者：吴媚张遵真车望军李娜四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室四川成都610041

目的研究DNA碱基切除修复基因人8羟-基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(hOGG1)低表达增加肺腺癌细胞对博来霉素(BLM)的敏感性的作用,为化疗增敏提供更多的实验依据。方法以肺腺癌A549细胞和通过稳定转染hOGG1核酶而获得的hOGG1低表达的A549-R细胞为研... 详细信息

目的研究DNA碱基切除修复基因人8羟-基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(hOGG1)低表达增加肺腺癌细胞对博来霉素(BLM)的敏感性的作用,为化疗增敏提供更多的实验依据。方法以肺腺癌A549细胞和通过稳定转染hOGG1核酶而获得的hOGG1低表达的A549-R细胞为研究对象,用MTT试验和集落形成抑制试验测定不同浓度BLM处理后两种细胞的存活率和形成集落的能力;体外微核试验及单细胞凝胶电泳检测两种细胞微核率及DNA损伤与修复的差异。结果BLM作用下A549-R细胞的IC50及集落形成率显著低于A549细胞;BLM可诱导两种细胞的微核率增高,而在相同浓度下A549-R细胞微核率较A549细胞更高;单细胞凝胶电泳结果显示,BLM作用下两种细胞均有不同程度DNA损伤,A549-R细胞的拖尾率和DNA迁移长度显著大于A549细胞;损伤后A549细胞修复发生较A549-R早,与A549细胞相比A549-R细胞更不易修复。结论hOGG1低表达使肺腺癌细胞DNA修复能力降低,从而使其对BLM的敏感性增强。

关键词：基因表达人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶博来霉素腺癌肺 DNA损伤

汽油尾气对小鼠肺脏的氧化应激和遗传毒性作用

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现代预防医学 2007年第7期34卷 1213-1215页

作者：张栗张遵真车望军王玲四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041

[目的]探讨汽油尾气对小鼠肺的氧化应激作用和对脏器系数以及组织细胞DNA的影响。[方法]将汽油尾气有机提取物以0、8.5、17.0、34.0 L/kg的剂量经气管滴注染毒昆明种小鼠,每5 d染毒1次,共3次,末次染毒24 h后处死小鼠,称量体重和肺脏重量... 详细信息

[目的]探讨汽油尾气对小鼠肺的氧化应激作用和对脏器系数以及组织细胞DNA的影响。[方法]将汽油尾气有机提取物以0、8.5、17.0、34.0 L/kg的剂量经气管滴注染毒昆明种小鼠,每5 d染毒1次,共3次,末次染毒24 h后处死小鼠,称量体重和肺脏重量,测定肺组织内超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;并用彗星实验检测肺组织细胞中DNA的损伤程度。[结果]各剂量组小鼠肺脏脏器系数的增加与对照组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);各剂量组SOD和GSH-Px酶活力明显降低,MDA含量则显著升高(P﹤0.05),且染毒剂量与酶活力、MDA含量均呈剂量-反应关系(r值分别为-0.98、-0.959和0.97,P均小于0.05)。在17.0、34.0 L/kg组,肺组织细胞的拖尾率和尾长较对照组明显增加(P﹤0.05)。[结论]汽油尾气可促进小鼠肺组织的氧化应激和诱导肺细胞DNA的损伤。

关键词：汽油尾气氧化应激彗星实验遗传毒性

60Coγ射线对小鼠组织细胞氧化损伤的研究

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现代预防医学 2005年第10期32卷 1267-1269页

作者：吴媚张遵真叶丛茂车望军成都市第七人民医院四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041

目的:研究60Coγ射线对小鼠组织细胞DNA的氧化损伤及其对组织抗氧化系统的影响。方法:小鼠接受60Coγ射线全身一次性照射(吸收剂量分别为7Gy、10Gy、15Gy)后,用彗星试验对其肝、脾、肾及血液组织细胞DNA的完整性进行检测,并用比色法对... 详细信息

目的:研究60Coγ射线对小鼠组织细胞DNA的氧化损伤及其对组织抗氧化系统的影响。方法:小鼠接受60Coγ射线全身一次性照射(吸收剂量分别为7Gy、10Gy、15Gy)后,用彗星试验对其肝、脾、肾及血液组织细胞DNA的完整性进行检测,并用比色法对红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及肝匀浆丙二醛(MDA)含量进行测定。结果:各照射剂量组小鼠组织细胞拖尾率和拖尾细胞尾长比对照组显著增加(P<0.05),并呈现良好的剂量反应关系。7Gy剂量组小鼠红细胞SOD活性及全血GSH-Px活性明显低于对照组(P<0.05),而肝匀浆MDA含量则明显高于对照组(P<0.05)。结论:60Coγ射线照射可造成小鼠多组织细胞DNA完整性的损伤,破坏组织抗氧化系统并引起脂质过氧化水平增高。

关键词： 60Coγ射线 DNA氧化损伤彗星试验脂质过氧化

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汽油车尾气的致突变性和致癌性研究进展

环境与健康杂志 2008年第4期25卷 357-361页

作者：车望军张遵真昆明市疾病预防控制中心云南昆明650228 四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室四川成都610041

该文主要对以汽油为燃料的汽车发动机尾气(简称汽油车尾气)的致突变性和致癌效应的实验研究和流行病学调查进展进行综述。研究表明汽油车尾气对细菌、动物和人均具有明显的遗传毒性和致突变性,但在致癌性方面,动物吸入致癌实验未见新的... 详细信息

该文主要对以汽油为燃料的汽车发动机尾气(简称汽油车尾气)的致突变性和致癌效应的实验研究和流行病学调查进展进行综述。研究表明汽油车尾气对细菌、动物和人均具有明显的遗传毒性和致突变性,但在致癌性方面,动物吸入致癌实验未见新的报道,而流行病学研究的结果仍缺乏一致性。

关键词：车辆排放物突变致癌作用

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汽油尾气致大鼠肺组织氧化损伤机制的研究

四川大学学报（医学版） 2009年第1期40卷 11-14,47页

作者：车望军王玲罗擎英吴媚张遵真四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041 昆明市疾病预防控制中心

目的探讨汽油尾气对大鼠肺DNA损伤、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1(OGG1)表达和细胞超微结构的影响。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次,... 详细信息

目的探讨汽油尾气对大鼠肺DNA损伤、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1(OGG1)表达和细胞超微结构的影响。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次,末次染毒24h后处死动物,用彗星实验检测肺组织细胞中DNA单链断裂水平,免疫组化检测肺组织中OGG1的含量,并在电镜下观察各型肺细胞超微结构的变化。结果在汽油尾气16.7和50.0L/kg组,肺组织细胞的拖尾率明显高于溶剂对照组(P<0.05),并有随剂量增加而增加的趋势,但各剂量组尾长的增加均无统计学意义;而汽油尾气中、高剂量组OGG1蛋白水平明显增加(P<0.05);在汽油尾气50.0L/kg组,肺组织各型细胞中的线粒体发生肿胀和空泡化,且线粒体数量明显减少。结论汽油尾气可诱导大鼠肺组织DNA单链断裂、OGG1蛋白含量增加和线粒体的损伤。

关键词：汽油尾气 DNA损伤线粒体 8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1 肺

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名优白酒对小鼠健康效应的影响

现代预防医学 2007年第15期34卷 2801-2803+2806页

作者：王玲张遵真张栗车望军吴媚舒亚刘芳四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041

[目的]探讨名优白酒对小鼠健康效应的影响。[方法]按极大似然法(Bliss)分别计算名优白酒与酒精的LD50。根据急性毒性实验结果对小鼠进行名优白酒灌胃处理(剂量分别为0.5,1.5,3.0,6.0 ml/kg),并设定酒精对照组、空白对照组与模型组,1个... 详细信息

[目的]探讨名优白酒对小鼠健康效应的影响。[方法]按极大似然法(Bliss)分别计算名优白酒与酒精的LD50。根据急性毒性实验结果对小鼠进行名优白酒灌胃处理(剂量分别为0.5,1.5,3.0,6.0 ml/kg),并设定酒精对照组、空白对照组与模型组,1个月后除空白对照外,各组均给予60Coγ射线全身一次性照射,照射后D4处死动物,测定肝组织中SOD、GSH-Px活性和MDA、MT含量,并于实验开始及结束时测定小鼠体重。[结果]名优白酒LD50显著高于酒精对照(P﹤0.05);名优白酒低剂量组小鼠肝组织中SOD与GSH-Px酶活力均显著高于模型组(P﹤0.05),高剂量组SOD与GSH-Px酶活力与模型组的差异无统计学意义;名优白酒各剂量组小鼠肝组织中,MT含量均显著高于模型组(P﹤0.05),MDA含量与模型组的差异无统计学意义;名优白酒组与酒精对照组小鼠体重增加量均显著低于空白对照组(P﹤0.05)。[结论]名优白酒的毒性低于食用酒精;一定剂量范围内的名优白酒可增强小鼠的抗氧化能力。

关键词：白酒氧化应激金属硫蛋白小鼠

重组酵母测评系统对环境样品雌激素活性的检测

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环境科学学报 2005年第12期25卷 1698-1701页

作者：王娟张遵真张浩李娜车望军四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041

采用重组酵母测评系统对香烟烟雾溶液和汽车尾气提取物分别进行雌激素活性的测定.结果显示在受试浓度下,PBS烟雾溶液和DMSO烟雾溶液的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比均无显著性差异(P>0·05).汽油燃料车尾气在600mL·mL-1时,其酵母菌... 详细信息

采用重组酵母测评系统对香烟烟雾溶液和汽车尾气提取物分别进行雌激素活性的测定.结果显示在受试浓度下,PBS烟雾溶液和DMSO烟雾溶液的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比均无显著性差异(P>0·05).汽油燃料车尾气在600mL·mL-1时,其酵母菌液OD600明显低于DMSO对照组(P0·05);甲醇燃料车尾气的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比无显著性差异(P>0·05).提示汽油燃料车尾气具有弱雌激素活性,甲醇燃料车尾气和香烟烟雾溶液未检出雌激素活性.

关键词：重组酵母测评系统香烟烟雾汽车尾气雌激素活性