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Rad51在小鼠雄性生殖细胞发育过程中的作用及机制研究

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Rad51在小鼠雄性生殖细胞发育过程中的作用及机制研究

作者：秦君超山东大学

学位级别：硕士

[研究背景]近年来男性不育发生率快速增加,其中30%患者为病因不明的特发性不育(如非梗阻性无/寡精子症和严重少精子症),而且缺乏有效的治疗措施。因此,深入研究精子发生的分子机制对于阐明不育症的病因具有重要意义。精子发生过程包括... 详细信息

[研究背景]近年来男性不育发生率快速增加,其中30%患者为病因不明的特发性不育(如非梗阻性无/寡精子症和严重少精子症),而且缺乏有效的治疗措施。因此,深入研究精子发生的分子机制对于阐明不育症的病因具有重要意义。精子发生过程包括精原细胞有丝分裂、精母细胞减数分裂和精子的变态分化及成熟等阶段,其受多种激素和众多基因的共同调控。减数分裂(meiosis)是形成单倍体精子细胞的重要环节,而Rad51是参与减数分裂重组修复过程中的关键蛋白。由重组酶Rad51和Dmc1催化的单链入侵、同源配对及链交换是减数分裂重组中最核心的事件。Meiosis I前期,核酸内切酶SPO11催化产生大量的程序性DNA双链断裂(double-strandedDNAbreaks,DSBs),启动减数分裂重组。DSBs形成后形成3’端单链DNA(ssDNA)尾;Rad51和Dmcl结合到ssDNA上形成核蛋白纤维,并介导ssDNA侵入同源双链区域,形成D-loop中间体。在DSBs产生后,同源染色体开始配对、联会,形成联会复合体(synaptonemal complex,SC)。SC既能维持同源染色体的配对,也能作为支架(scaffold)与Rad51和Dmcl结合,促进重组复合物形成并参与减数分裂重组过程。由于全身性敲除Rad51基因的小鼠胚胎期致死,难以利用该动物模型研究Rad51基因在精子发生过程中的作用机制。条件性基因敲除小鼠模型可以避免全身性基因敲除小鼠可能出现的胚胎致死,但目前尚无Rad51的条件性基因敲除小鼠的报道。为了探究Rad51在雄性小鼠生殖发育过程中作用及机制探究,我们开展了以下研究工作:***51在小鼠睾丸中的表达Western blotting方法证明Rad51蛋白在不同日龄小鼠睾丸组织中均有表达,其表达水平从8日龄开始升高,在42日龄时表达水平明显增加,42日龄与96日龄Rad51蛋白的表达水平无明显差异。免疫组化和Real-time PCR方法证明Rad51在小鼠睾丸生殖细胞中高表达。***51条件性敲除小鼠不育我们构建了Rad51条件型敲除小鼠,并将其与DDX4-Cre转基因工具小鼠交配,进而得到从胚胎期15天生殖细胞缺失Rad51基因的雄性小鼠。通过Western blotting和免疫组化确定敲除效果,发现Rad51fl/-;DDX4-Cre雄性小鼠的睾丸体积较对照小鼠减少2/3并出现在小鼠个体发育早期。生育力实验表明其不育。***51条件性敲除小鼠中减数分裂和精原细胞增殖受阻通过染色体铺片和睾丸组织切片免疫荧光检测联会复合体蛋白(SCP-3)和DNA损伤相关蛋白(γ-H2AX),发现在Rad51fl/;DDX4-Cre小鼠中减数分裂过程受阻。采用免疫荧光和免疫组化对增殖相关蛋白Ki-67染色检测生殖细胞增殖,发现在Rad51f/-;DDX4-Cre小鼠中Ki-67表达受损。接下来我们探索精子发生早期精原细胞有丝分裂阶段PLZF表达情况的分析显示PLZF不表达,精原细胞有丝分裂过程受阻。4.检测Rad51条件性敲除小鼠曲细精管中支持细胞因为Rad51fl/;DDX4-Cre小鼠睾丸曲细精管中只含有一层细胞,且精原细胞有丝分裂过程受阻,通过对支持细胞标记物SOX9免疫荧光和免疫组化染色证明了Rad51fl-;DDX4-Cre小鼠睾丸曲细精管中只含有支持细胞,对支持细胞数目的统计学分析发现支持细胞数目明显增多;透射电镜观察法观察支持细胞形态异常,细胞延伸至曲细精管管腔中部,但内部的细胞器未发现异常。***51fl/;凰DX4-Cre小鼠生殖细胞有较高的DNA损伤并且对X射线敏感性增加Rad51fl/;DDX4-Cre小鼠和对照组小鼠照射4GyX射线并释放24小时,检测γ-H2AX结果表明与对照小鼠相比,Rad51fl/+;DDX4-Cre小鼠本底有较高的DNA损伤且睾丸组织对X射线更敏感。

关键词： Rad51 生殖细胞减数分裂精子发生同源重组

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当代轻工新技术 1

中药王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞功能的影响

1987年

作者：赵秦生胡海南

本书分12章介绍了食品、服装、家具、家电、五金和工艺美术等行行业的新产品,新技术,新设备及其发展趋势。

ISBN: (纸本)7501900361

本书分12章介绍了食品、服装、家具、家电、五金和工艺美术等行行业的新产品,新技术,新设备及其发展趋势。

关键词：轻工业学科:技术

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中药王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞功能的影响

作者：秦君东北农业大学

学位级别：硕士

我国奶牛业普遍存在产乳量低、奶牛发病率高等问题。长期以来，人们主要用抗生素及一些化学合成物作为饲料添加剂来防治奶牛疾病，提高奶牛生产性能。但这些添加剂具有毒副作用大、残留高，易产生抗、耐药性和致畸、致癌、致突变等弊端... 详细信息

我国奶牛业普遍存在产乳量低、奶牛发病率高等问题。长期以来，人们主要用抗生素及一些化学合成物作为饲料添加剂来防治奶牛疾病，提高奶牛生产性能。但这些添加剂具有毒副作用大、残留高，易产生抗、耐药性和致畸、致癌、致突变等弊端，严重危害了人体健康。中药以其源自天然，具有毒副作用小、无残留、不易产生耐药性的优点，已广泛应用于我国奶牛业。许多具有补益气血、通经活络、调和脾胃的中草药及其复方制剂均具有显著的催乳作用。如党参、白术、黄芪、王不留行、当归、川芎、丝瓜络、路路通、甘草等中药含有多种营养物质和生物活性物质，能够补充机体营养，提高动物食欲，促进动物消化吸收，增强机体代谢，改善机体的造血机能和血液循环，以及杀灭微生物，增强机体免疫力，防治疾病发生，从而提高奶牛泌乳性能。传统中药王不留行广泛应用于我国奶牛饲料添加剂中，具有行血通经，催生下乳，消肿敛疮等功效。其主要成分为多种皂甙类、黄酮甙类、香豆素类、生物碱类等成分。本实验采用溶剂萃取法与酸碱法对王不留行三类主要成分(皂甙类、黄酮甙类及香豆素类)进行提取，并用化学方法及薄层层析方法予以鉴定。将三种成分分别以不同浓度添加入细胞培养液，一方面，采用MTT法检测这三类成分对体外培养的小白鼠乳腺上皮细胞增殖的作用，并运用激光共聚焦显微技术对乳腺上皮细胞中细胞周期蛋白cyclin D1的表达进行鉴定;另一方面，运用荧光定量RT-PCR方法对细胞中β-酪蛋白的表达进行检测，并用激光共聚焦显微技术对细胞信号通路中磷酸化stat5因子的表达进行鉴定，最后通过动物实验加以辅证。实验结果表明，王不留行中的黄酮甙类成分对小鼠乳腺上皮细胞的增殖有明显的促进作用(P＜0.05)，并随其浓度(100～200mg／L)的增加，其促进作用增强;皂甙类成分则对小鼠乳腺上皮细胞的增殖有明显的抑制作用，并随浓度(50～200mg／L)的增加而抑制作用增强;香豆素类成分(20～200mg／L)则对小鼠乳腺上皮细胞的增殖无明显作用(P＞0.05)。荧光定量RT-PCR结果表明，黄酮甙类成分可促进乳腺上皮细胞中β-酪蛋白基因的表达(P＜0.05)，皂甙类和香豆素类成分对β-酪蛋白基因的表达无明显作用(P＞0.05)。免疫荧光定量结果显示黄酮甙类成分可促进细胞周期蛋白cyclin D1的表达，表明黄酮甙类成分是通过激活cyclin D1的表达而促进乳腺上皮细胞增殖的。同时，黄酮甙类成分能够促进磷酸化的stat5因子的表达(P＜0.05)，表明黄酮甙类成分是通过激活Jak-stat5信号转导通路调控β-酪蛋白基因表达的。动物实验结果黄酮甙类成分能够提高小鼠泌乳量(P＜0.05)也证明了这一点。

关键词：王不留行皂甙黄酮甙香豆素乳腺上皮细胞增殖 β-酪蛋白

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Ag/石墨烯基底的表面增强拉曼散射的研究

Ag/石墨烯基底的表面增强拉曼散射的研究

作者：秦君大连理工大学

学位级别：硕士

表面增强拉曼散射光谱(SERS)作为一种新型的检测手段,广泛地应用于材料、化学、生物检测等领域。目前石墨烯复合金属材料应用于增强拉曼光谱一直是SERS基底研究的热点。大多数的相关研究的关注点在于如何提高复合基底的测试灵敏度,延长... 详细信息

表面增强拉曼散射光谱(SERS)作为一种新型的检测手段,广泛地应用于材料、化学、生物检测等领域。目前石墨烯复合金属材料应用于增强拉曼光谱一直是SERS基底研究的热点。大多数的相关研究的关注点在于如何提高复合基底的测试灵敏度,延长基底的使用寿命等。现有的石墨烯制备方法,主要有物理或化学方式剥落生长,SiC上外延生长及化学气相沉积成长(CVD)等,会使得制备的石墨烯上不可避免的产生缺陷。其中官能团呈现的负电性特性会影响到金属粒子的形貌及分布,最终会影响复合基底的SERS结果。而关于石墨烯的缺陷如何影响基底的测试效率的研究很少。本实验将通过控制生长条件得到不同缺陷的石墨烯并详细讨论石墨烯的缺陷如何影响金属材料的形貌,从而影响复合材料的SERS测试结果。实验的具体方法如下:(1)通过CVD的方法成长石墨烯。在成长过程中控制氢气的流量来调控石墨烯的层数和缺陷数量。通过拉曼光谱分析石墨的层数和缺陷数量,并利用XPS分析石墨烯中官能团的种类及所占比例。测试结果表明,在氢气流量从10 sccm增强加到100sccm石墨烯中的缺陷数量不断增多,随着氢气的流量继续增加石墨烯的缺陷数量则会减少,这一过程中石墨烯的层数随着氢气流量的增加一直增加。同时随着氢气流量由10 sccm增加大100 sccm的过程中石墨烯中的C-O键含量急剧增多,随后又随着氢气流量增加而减少。(2)利用磁控溅射的方法在具有不同缺陷的石墨烯上溅射上Ag。通过SEM观察分析在具有不同缺陷的石墨烯上Ag粒子的尺寸大小及形貌。通过观察分析发现,随着氢气流量从10 sccm增加到100 sccm,Ag粒子的尺寸逐渐增大,间距逐渐减小。随着氢气流量超过100 sccm Ag粒子的尺寸急剧变小,间距变大,之后随着氢气流量继续增加Ag粒子逐渐聚集长成更大的粒子。(3)对比具有不同缺陷的石墨烯/Ag复合基板的R6G增强拉曼光谱。实验结果表明在氢气流量为100 sccm的条件下制得的石墨烯上溅射Ag之后的拉曼增强效果最好。通过以上实验发现在氢气流量为100 sccm条件下生长石墨烯的层数较少缺陷数量最多,且含有的C-O键含量最高。C-O键较多时,石墨烯上Ag粒子间距小于10 nm所占比例也越高,也更容易形成“热点”。C-O键与复合基底的SERS增强因子随氢气流量变化趋势相同。从实验结果中可得到结论:石墨烯中的C-O键通过影响Ag粒子的形貌及分布,最终影响复合材料的SERS结果。

关键词：表面拉曼增强散射石墨烯形貌增强因子化学气相沉积

纳米TiO2改性液体硅橡胶的介电特性和空间电荷特性研究

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纳米TiO2改性液体硅橡胶的介电特性和空间电荷特性研究

作者：秦君哈尔滨理工大学

学位级别：硕士

高压直流电缆附件是高压直流输电中必不可少的一部分,由于直流电缆附件结构复杂、尺寸紧凑极易导致其电场分布发生畸变,引起绝缘异常击穿并造成供电事故。为解决直流电缆附件因空间电荷积聚及材料电导率不同而造成的电场分布不均问题,... 详细信息

高压直流电缆附件是高压直流输电中必不可少的一部分,由于直流电缆附件结构复杂、尺寸紧凑极易导致其电场分布发生畸变,引起绝缘异常击穿并造成供电事故。为解决直流电缆附件因空间电荷积聚及材料电导率不同而造成的电场分布不均问题,本文通过研究新型纳米复合硅橡胶材料,使其电导率在不同温度及场强下能与XLPE的电导率相匹配,并降低空间电荷的积聚,以实现电缆附件内部电场分布的均化。本文采用双组份加成型液体硅橡胶（Liquid Silicone Rubber,LSR）作为基体,以纳米二氧化钛（TiO2）作为改性填料,制备了不同纳米TiO2含量的TiO2/LSR复合材料,并利用扫描电镜观察其微观形貌,研究复合硅橡胶材料中纳米粒子的分布状态和分散程度。在实验室中对TiO2/LSR复合材料的介电特性和击穿特性进行了测试,并研究温度及电场强度对其介电特性的影响规律。试验研究结果表明:纳米TiO2的掺杂可以提高硅橡胶基复合材料的电导率,且随着温度和场强的增加其电导率呈上升趋势,当纳米TiO2含量为4%和6%时,TiO2/LSR复合材料电导率在不同温度及场强下能与交联聚乙烯基本匹配;随着TiO2掺杂浓度的增加TiO2/LSR复合材料的介电常数和介质损耗因数呈上升趋势;随着纳米TiO2掺杂浓度以及温度的升高,TiO2/LSR复合材料的直流击穿场强有所下降。为研究纳米掺杂对改性硅橡胶空间电荷积聚特性的影响规律,本文利用电声脉冲法对TiO2/LSR复合材料中空间电荷的分布进行测试,试验研究结果表明:直流电场下纯硅橡胶在电极附近积累了大量同极性电荷,当硅橡胶中引入纳米TiO2后对同极性电荷积聚起到了抑制作用,当纳米TiO2含量为4%%时TiO2/LSR复合材料中空间电荷积聚量最小。

关键词：高压直流电缆附件纳米改性硅橡胶介电特性空间电荷积聚

儿童文学翻译中译者与读者间的伙伴关系及翻译策略的选择 ——《哈利·波特》汉译本个案研究

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儿童文学翻译中译者与读者间的伙伴关系及翻译策略的选择 ——《...

作者：秦君贵州大学

学位级别：硕士

本文旨在讨论儿章文学的英汉翻译，并以《哈利·波特与魔法石》和《哈利·波特与凤凰社》的原著和汉译本为案例。儿童文学的读者是儿童，这个读者群体决定了儿童文学翻译的特殊性。基于皮亚杰的儿童认知发展阶段理论，文章认为儿童文... 详细信息

本文旨在讨论儿章文学的英汉翻译，并以《哈利·波特与魔法石》和《哈利·波特与凤凰社》的原著和汉译本为案例。儿童文学的读者是儿童，这个读者群体决定了儿童文学翻译的特殊性。基于皮亚杰的儿童认知发展阶段理论，文章认为儿童文学的翻译应以对儿童、儿童文学和儿童语言的理解为基础。儿童文学的翻译应考虑到儿童的兴趣、理解能力和语言习惯，应提供给儿童阅读的乐趣，而不仅仅是知识和道德的教化功能。儿童文学的定义尚无定论，依据中外学者的观点，作者认为儿童文学可视为儿童文本，即成人为儿童所出版的读物，包括本土儿童文学与翻译儿童文学。针对儿童在翻译过程中缺席的现状，作者提出，在翻译儿童文学的过程中，译者应该与儿章读者建立一种伙伴关系，应该摆脱高高在上的成人权威，给与儿章读者充分的尊重。也就是说，译者应该帮助儿童摆脱缺席的地位，让其现身讲话，同时，译文不应在“为了孩子好”的借口下，对原文内容进行任意的增、删，译者呈现给儿童读者的应该是一个内容完整的译本。首先，译者应当选择恰当的翻译策略，力争用儿童的眼睛去观察、用儿童的心灵去体会，让儿童讲自己的语言。其次，译者还可以向儿童读者寻求帮助。译者和译本可以进入学校，到孩子们中去，让他们来检验译文的可接受性。我们知道，不同的翻译目的、文本类型、作者意图及读者对象都会决定翻译策略的选择。因为儿童文学的消费者是儿童，其身心、认知发展的特点决定了翻译策略的选择。作为翻译的两种策略，归化与异化一直是译界关注的话题，当前，归化与异化之争，由单纯的语言层面上升到文化、政治层面。依据韦努蒂和一些中国学者对归化与异化的看法，通过个案研究，本文从文化因素和语言风格方面讨论了儿童文学的翻译，并且提出，在处理文化因素时，翻译策略应以异化为主，归化为辅，而在语言上则应纳入规范化的汉语，

关键词：儿童儿童文学儿童文学的翻译《哈利·波特》

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水声传感器网络路由机制研究

水声传感器网络路由机制研究

作者：赵秦一天津大学

学位级别：硕士

水声传感器网络作为探索和开发海洋的关键技术,在资源勘探、灾难预警和军事防御等多个领域有着广泛的应用前景。然而水声传感器网络具有传播时延长和节点能耗高等特点,严重地限制了数据传输的有效性和可靠性。路由机制是提高数据传输性... 详细信息

水声传感器网络作为探索和开发海洋的关键技术,在资源勘探、灾难预警和军事防御等多个领域有着广泛的应用前景。然而水声传感器网络具有传播时延长和节点能耗高等特点,严重地限制了数据传输的有效性和可靠性。路由机制是提高数据传输性能的关键技术,因此本文针对水声传感器网络中路由协议和路由空洞修复技术进行研究。为减少拥塞对端到端传输的不利影响,本文提出了基于强化学习的拥塞避免路由协议——RCAR。在RCAR中,设计了考虑节点拥塞状态和剩余能量的回报函数,基于强化学习算法进行路由决策,使得路由能够绕过拥塞区域并且均衡节点能耗。仿真结果表明,RCAR能够有效避免拥塞,极大地降低了数据包传输的端到端时延。为解决路由空洞问题,本文提出了自主水下航行器(Autonomous Underwater Vehicle,AUV)辅助的路由空洞预测修复协议——RVPR。在RVPR中,设计了基于马尔可夫链的路由空洞预测模型,并通过粒子群优化算法计算能够最大化链路连通性和最小化AUV行驶距离的空洞修复位置。当节点预测到路由空洞形成时,请求AUV前往指定位置部署节点,实现路由空洞的修复。仿真结果表明,RVPR能够及时修复路由空洞,显著地提高了包投递率。最后,本文基于所提出的拥塞避免路由协议和路由空洞预测修复协议设计了完善的RCAR-RVPR路由机制,并与其他典型水下路由机制(HHVBF、QELAR、GEDAR、EAVARP)进行对比。仿真结果表明:RCAR-RVPR路由机制综合了上述两项工作的优势,在平均端到端时延、包投递率和能效等方面表现优异,因此路由机制具有卓越的有效性和可靠性。

关键词：水声传感器网络路由机制拥塞避免空洞修复

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含硒、碲和贵金属复杂物料的处理方法

稀有金属与硬质合金 2012年第6期40卷 15-18页

作者：赵秦生中南大学冶金科学与工程学院湖南长沙410083 永兴县鑫泰银业有限公司湖南郴州423300

概述了含硒、碲和贵金属复杂物料常规处理方法的优缺点。重点介绍了俄罗斯某贵金属精炼厂的改进工艺及效果:用氢氧化钠溶液对物料进行浸出,使贵金属富集于碱浸残渣中;分步调节碱浸液的pH值,使硒、碲等金属沉淀分离,母液送脱贵金属置换处... 详细信息

概述了含硒、碲和贵金属复杂物料常规处理方法的优缺点。重点介绍了俄罗斯某贵金属精炼厂的改进工艺及效果:用氢氧化钠溶液对物料进行浸出,使贵金属富集于碱浸残渣中;分步调节碱浸液的pH值,使硒、碲等金属沉淀分离,母液送脱贵金属置换处理;将碱浸残渣与置换产物混合熔炼。经此改进工艺处理,物料中的贵、贱金属均得到有效回收,并减少了后续母液置换过程的置换剂消耗。

关键词：贵金属铂族金属硒碲挥发烟尘中和沉淀精炼

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红色影视,成长的力量

思想政治课教学 2023年第3期3卷 90-92页

作者：秦君临山东省昌乐及第中学

习近平总书记指出,要抓好青少年学习教育,让红色基因、革命薪火代代传承。“好客山东”革命英雄辈出,一些红色题材被搬上荧幕荧屏,如《铁道游击队》《红日》《沂蒙红嫂俺的娘》《黄河口儿女》等,引导人们缅怀红色岁月,传承红色文化,弘... 详细信息

习近平总书记指出,要抓好青少年学习教育,让红色基因、革命薪火代代传承。“好客山东”革命英雄辈出,一些红色题材被搬上荧幕荧屏,如《铁道游击队》《红日》《沂蒙红嫂俺的娘》《黄河口儿女》等,引导人们缅怀红色岁月,传承红色文化,弘扬红色精神,根植红色基因。我们要用好中国影视里的“红色芳华”,讲好红色故事,以熠熠生辉的英雄人物、事件给学生施加积极影响,在光影世界里炫舞青春活力,从革命文化中吸取成长力量。

关键词：红色影视《铁道游击队》青春活力《红日》红色精神中国影视英雄人物红色基因