检索结果-南通市图书馆

作者：赵山美子广州医科大学

学位级别：硕士

研究背景天然免疫作为机体免疫系统抵御外来入侵的第一道屏障,通过模式识别受体(PRRs)识别感染和感知细胞稳态的变化,以启动清除病原体的免疫反应或者机体的组织损伤修复,在此过程中会活化多条下游信号通路,包括Ⅰ型干扰素通路和促炎因... 详细信息

研究背景天然免疫作为机体免疫系统抵御外来入侵的第一道屏障,通过模式识别受体(PRRs)识别感染和感知细胞稳态的变化,以启动清除病原体的免疫反应或者机体的组织损伤修复,在此过程中会活化多条下游信号通路,包括Ⅰ型干扰素通路和促炎因子的释放。黑色素瘤缺失基因2(AIM2)是胞质中的ds DNA识别受体,可以识别来自病原体和宿主的ds DNA。结合DNA后,AIM2激活下游的炎症小体信号通路,与含有CARD结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(caspase-1)分子组装形成炎症小体复合体,最终诱导炎性因子IL-1β和IL-18的成熟和释放。AIM2炎症小体的不当激活或者慢性激活会引起阿尔茨海默病、血管炎症、银屑病等多种疾病,所以炎症小体信号通路的调控研究至关重要。DDX家族成员参与RNA代谢的几乎所有过程,在翻译起始、核糖体形成、前m RNA拼接和m RNA降解过程中发挥作用。近年来,DDX家族成员参与调控天然免疫应答成为免疫领域中的一个研究热点。然而,目前关于DDX家族成员蛋白是否在AIM2炎症小体通路中发挥功能还缺乏相关报道。Ⅰ型干扰素是机体在抵御病毒感染的早期所产生的关键性细胞因子,介导天然和适应性免疫的后续反应,在维持免疫稳态的过程中发挥重要作用。Ⅰ型干扰素信号通路激活功能的不足,容易引起慢性炎症、抗病毒免疫功能缺陷,而过度激活则会导致自身免疫性疾病。因此,Ⅰ型干扰素通路需要受到紧密调控,研究其调控机制显得尤为重要。NOD样受体(NLRs)作为胞内识别受体的一大家族,其成员不仅拥有PRRs的识别配体形成炎症小体的功能,部分成员还直接参与了信号通路的转导和调控。其中,NLRP7的生物学基础研究主要集中在NLRP7识别病原体形成炎症小体这一方面,临床疾病研究主要是与NLRP7点突变相关生殖系统疾病疾病表型病例报道。然而,对于NLRP7在天然抗病毒免疫中的作用,尤其是对抗病毒通路中核心分子的具体调控机制还没有任何报道。研究目的1、筛选DEAD盒解旋酶(DDX)家族成员对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎症小体通路发挥调控作用的分子,并研究DDX10对AIM2炎症小体通路的调控机制。2、探索NLRP7是否可以在Ⅰ型干扰素通路中发挥调控功能并明确NLRP7调控Ⅰ型干扰素通路的具体机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2炎性体通路有调控作用的分子。在DDX10缺失的THP-1细胞系,利用佛波酯(PMA)诱导下分化为巨噬细胞,用脂多糖(LPS)预处理,再用poly(d A:d T)刺激巨噬细胞激活AIM2炎性体。采用ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)的释放,Western blot法检测胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白的切割和DDX10蛋白水平。采用免疫共沉淀法检测DDX10和AIM2的相互作用,利用免疫荧光细胞化学染色法结合共聚焦显微镜技术确定DDX10和AIM2在HEK293T细胞的共定位情况。通过构建多西环素诱导表达的Flag标签的NLRP7的293T细胞系和si RNA特异性敲低内源NLPR7的表达,分别在过表达和敲低系统中探索NLRP7的功能。用仙台病毒(Sedai Virus,Se V)、poly(I:C)刺激细胞激活RLRs介导的Ⅰ型干扰素通路。利用荧光实时定量PCR检测干扰素β(IFNB)和干扰素诱导诱导基因(ISGs)的m RNA水平的变化。采用ELISA检测IFN-β的释放,Western blot法检测IRF3的总蛋白水平和磷酸化水平。采用免疫共沉淀法检测NLRP7与MAVS的相互作用。借助免疫荧光细胞化学染色法结合共聚焦显微镜技术确定NLRP7、MAVS在He La细胞的定位情况。结果1、过表达DDX10显著促进AIM炎症小体通路的激活。2、敲除DDX10显著抑制AIM2炎症小体通路的激活。3、DDX10与AIM2的HIN-200结构域存在相互作用。4、DDX10增强AIM2的蛋白稳定性。5、过表达NLRP7促进RIG-I样受体介导的Ⅰ型干扰素通路的激活。6、敲低NLRP7能够抑制RIG-I样受体介导的Ⅰ型干扰素通路的激活。7、NLRP7通过靶向效应器蛋白MAVS促进Ⅰ型干扰素。8、NLRP7通过抑制MAVS的自噬降解来稳定MAVS蛋白水平。结论本研究首次对DDXs家族成员在AIM2炎症小体激活通路上进行了系统的功能筛选,发现DDX10能够与AIM2相互作用,通过增强AIM2的蛋白稳定性而促进其介导的炎症小体激活和IL-1β的释放。本研究首次提出了NLRP7作为调控分子参与到RLRs介导的Ⅰ型干扰素通路中,发现了人类NLRs家族

关键词：天然免疫 NOD样受体 NLRP7 Ⅰ型干扰素 DDX10 AIM2 炎症小体

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DEAD盒解旋酶10(DDX10)通过增强黑素瘤缺失基因2(AIM2)蛋白稳定性促进AIM2炎性体激活

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第4期36卷 289-296页

作者：赵山美子林萌张玉霞广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心儿科研究所广东广州510623

目的研究DEAD盒解旋酶10(DDX10)对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎性体通路的调控机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2... 详细信息

目的研究DEAD盒解旋酶10(DDX10)对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎性体通路的调控机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2炎性体通路有调控作用的分子。在DDX10缺失的THP-1细胞系,利用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,用脂多糖(LPS)预处理,再用poly(dA:dT)刺激巨噬细胞激活AIM2炎性体。采用ELISA检测IL-1β的释放,Western blot法检测胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白的切割和DDX10蛋白水平。采用免疫共沉淀法检测DDX10和AIM2的相互作用,利用免疫荧光细胞化学染色法结合共聚焦显微镜技术确定DDX10和AIM2在HEK293T细胞的共定位情况。结果过表达DDX10显著促进AIM2炎性体通路的激活,缺失DDX10显著降低AIM2炎性体通路的激活,DDX10与AIM2的带有200个氨基酸重复序列的造血性干扰素诱导核蛋白(HIN-200)结构域存在相互作用,并增强AIM2的蛋白稳定性。结论DDX10通过提高AIM2的蛋白稳定性促进AIM2炎性体通路的激活。

关键词： DEAD盒解旋酶10(DDX10) 黑素瘤缺失基因2(AIM2) 炎性体

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溴己新治疗新型冠状病毒肺炎的潜在机制分析

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中国药学杂志 2020年第9期55卷 679-684页

作者：杨勇沈浩赵山美子王东王浩然四川省医学科学院四川省人民医院药学部个体化药物治疗四川省重点实验室成都610072 电子科技大学医学院成都611731 广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心儿科研究所广州510623 沈阳药科大学中药学院沈阳110016 纽兰生物科技有限公司山东威海264200

目的2019年12月新型冠状病毒肺炎(COVID-19)暴发,疫情在世界范围内迅速蔓延,寻找有效抗病毒药物成为治疗新型冠状病毒的迫切需求。方法笔者借助已有病毒学文献,对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染通路进行了系统的总结... 详细信息

目的2019年12月新型冠状病毒肺炎(COVID-19)暴发,疫情在世界范围内迅速蔓延,寻找有效抗病毒药物成为治疗新型冠状病毒的迫切需求。方法笔者借助已有病毒学文献,对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染通路进行了系统的总结,并且运用SWISSDOCK分子模拟方法对关键靶点和上市药物进行系统的虚拟药物筛选。结果研究发现,TMPRSS2/ACE2通路是SARS-CoV-2病毒进入肺部和其他组织细胞最高效和主要的途径。而呼吸科祛痰药物溴己新体外可强烈抑制TMPRSS2蛋白酶(EC50:0.75μmol·L^-1)。溴己新不良反应少且还具备促进肺部内源活性物质释放,维持肺泡功能,促进排痰等有益作用,适合联合用药。结论溴己新具有独特的潜在抗病毒机制,应当深入进行临床研究,发挥其对COVID-19预防,治疗和预后的作用。

关键词：溴己新氯喹新型冠状病毒肺炎严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2 抗病毒机制

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短链脂肪酸对体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍的保护作用

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医学研究生学报 2022年第5期35卷 465-470页

作者：唐婷卡迪丽娅·居尔艾特提拜克赵山美子马汝钧陈莉姚兵南京医科大学金陵临床医学院(东部战区总医院)生殖医学科南京210002 南京师范大学生命科学学院南京210023

目的短链脂肪酸(SCFAs)对卵母细胞体外成熟的作用及其可能的机制尚不明确。文中探讨短链脂肪酸对小鼠卵母细胞体外诱导氧化应激后发育成熟的影响及其作用机制。方法收集6~8周龄ICR雌鼠生发泡(GV)期的卵母细胞,分为对照组(不干预)、H_(2)... 详细信息

目的短链脂肪酸(SCFAs)对卵母细胞体外成熟的作用及其可能的机制尚不明确。文中探讨短链脂肪酸对小鼠卵母细胞体外诱导氧化应激后发育成熟的影响及其作用机制。方法收集6~8周龄ICR雌鼠生发泡(GV)期的卵母细胞,分为对照组(不干预)、H_(2)O_(2)处理组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h)、H_(2)O_(2)+乙酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,1 mmol/L乙酸干预)、H_(2)O_(2)+丙酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,10μmol/L丙酸干预)和H_(2)O_(2)+丁酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,2μmol/L丁酸干预)。并于培养3 h后观察生发泡破裂(GVBD)率,于培养16 h后观察第一极体排出(PBE)率;免疫荧光化学染色法检测体外培养9 h进入第一次减数分裂中期(MI期)和16 h排出第一极体进入第二次减数分裂中期(MII期)的卵母细胞内染色体的排列和纺锤体的形态;Western blot检测不同处理组Pi3k/Akt通路相关蛋白表达量。结果成熟率结果显示,与对照组GVBD率[(86.87±1.76)%]和PBE率[(85.37±1.98)%]相比,H_(2)O_(2)处理组[(66.73±1.25)%、(50.57±4.22)%]明显下降(P<0.05),而与H_(2)O_(2)处理组相比,H_(2)O_(2)+乙酸组[(80.67±2.62)%、(78.07±1.78)%],H_(2)O_(2)+丙酸组[(74.50±2.91)%、68.03±1.84)%]和H_(2)O_(2)+丁酸组[(75.93±2.12)%、(66.40±3.46)%]卵母细胞的成熟率显著改善(P<0.01)。免疫荧光结果显示,在添加了SCFAs的M2培养液中成熟的卵母细胞减数分裂的超微结构较H_(2)O_(2)处理组明显改善,主要体现在染色体排列和纺锤体形态的改变。Western blot结果显示,H_(2)O_(2)处理组卵母细胞中的p-Akt和Akt蛋白表达量的比值较对照组明显增多(P<0.01),而H_(2)O_(2)+乙酸组和H_(2)O_(2)+丙酸组较H_(2)O_(2)处理组明显降低(P<0.01)。结论在体外培养液中添加短链脂肪酸可以改善氧化应激后小鼠卵母细胞的发育潜能,为改善体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍提供新思路。

关键词：短链脂肪酸卵母细胞发育体外成熟氧化应激

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绿色混杂纤维增强自密实混凝土力学性能多尺度分析

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建筑科学 2024年第7期40卷 130-139页

作者：李妍赵山木姚子奡李冬一吉林建筑大学土木工程学院吉林长春130118 吉林省寒地绿色智慧建筑技术工程研究中心吉林长春130118

为研究不同掺量与不同直径的绿色纤维对自密实混凝土(SCC)抗压性能及劈裂抗拉强度的影响,本文分别展开了1.5mm与0.22mm直径的绿色纤维,在不同掺量下对其在28d养护龄期下宏观力学性能的试验研究,同时从微观层次扫描电子显微镜(SEM)对其... 详细信息

为研究不同掺量与不同直径的绿色纤维对自密实混凝土(SCC)抗压性能及劈裂抗拉强度的影响,本文分别展开了1.5mm与0.22mm直径的绿色纤维,在不同掺量下对其在28d养护龄期下宏观力学性能的试验研究,同时从微观层次扫描电子显微镜(SEM)对其微观结构进行研究与分析。研究结果表明,绿色纤维能够较好的与自密实混凝土相结合,发挥出良好的力学性能。随着绿色纤维掺量的增大,绿色纤维自密实混凝土的轴心抗压强度与劈裂抗拉强度呈上升趋势,当绿色纤维的体积分数达到1.5%时绿色纤维自密实混凝土能发挥出最好的抗压性能,大于1.5%时有所回落。此外,相比于1.5mm的绿色纤维,0.22mm绿色纤维能够更好地与自密实混凝土相结合,发挥出更好的力学性能。

关键词：绿色纤维自密实混凝土力学性能微观结构固废利用

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促性腺激素释放激素激动剂长、短方案在体外受精-胚胎移植中的比较性研究

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中国现代药物应用 2016年第20期10卷 7-9页

作者：宋英伟徐艳霞李学荣周颖荧徐友花何韶坚赵山美子罗嘉东莞康华医院 523000 不详

目的为提高临床胚胎移植妊娠率,临床对长、短方案使用促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)在体外受精-胚胎移植中应用可行性进行研究。方法 70例不孕症患者入院行体外受精-胚胎移植治疗,按双盲法随机分为观察1组与观察2组,每组35例。观察... 详细信息

目的为提高临床胚胎移植妊娠率,临床对长、短方案使用促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)在体外受精-胚胎移植中应用可行性进行研究。方法 70例不孕症患者入院行体外受精-胚胎移植治疗,按双盲法随机分为观察1组与观察2组,每组35例。观察1组使用长方案,观察2组使用短方案,所有胚胎均经玻璃化。观察两组患者临床妊娠情况,同时记录入院时、注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)前患者血清性激素水平。结果入院时观察1组卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)检测水平低于观察2组(P<0.05);注射HCG前观察1组LH、E2水平低于观察2组(P<0.05)。观察1组临床妊娠率42.9%高于观察2组17.1%(P<0.05)。结论长方案使用Gn RH-a用于体外受精-胚胎移植,患者临床妊娠率高于短方案。

关键词：促性腺激素释放激素激动剂长方案短方案体外受精-胚胎移植

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卡夫卡《论寓言》及其先驱

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学习与探索 2024年第1期 144-150,176页

作者：赵山奎浙江工商大学人文与传播学院浙江工商大学西方文学与文化研究院

卡夫卡短篇名作《论寓言》既是其文本“寓言性”的展示,也是其写作过程的“寓言性展示”,以及内在于文学世界的“文学—现实”之不确定二元关系这一“寓言式结构”的说明,可视作“元寓言”“最后的寓言”或“关于寓言的寓言”。在这一... 详细信息

卡夫卡短篇名作《论寓言》既是其文本“寓言性”的展示,也是其写作过程的“寓言性展示”,以及内在于文学世界的“文学—现实”之不确定二元关系这一“寓言式结构”的说明,可视作“元寓言”“最后的寓言”或“关于寓言的寓言”。在这一寓言提供的视野中,寓言世界与现实世界相互转化、彼此依存;文学对现实进行解释与转化以及文学批评对文学文本进行解释与转化之生生不息驱动力,皆来自于这一寓言结构。从比较文学渊源学及语文学角度来看,卡夫卡这一作品及其所包含洞见的“先驱”,可被追溯至古代中国的庄子与古代希腊的欧里庇得斯,由此,内在于古今文学关系之“古—今结构”的寓言性可得到阐明。

关键词：卡夫卡《论寓言》庄子欧里庇得斯

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Sysmex XE-2100血细胞分析仪自建检测系统的建立及应用研究

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现代检验医学杂志 2013年第6期28卷 87-89,92页

作者：王伟鑫林佩娜李忠信赵山美子梁宝环东莞康华医院检验科广东东莞523080 广东医学院医学检验学院2008级本科生广东东莞523808

目的建立SysmexXE-2100血细胞分析仪自建检测系统，并探讨其结果的可比性。方法以国产试剂为基础建立SysmexXE-2100血细胞分析仪自建检测系统。参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP9-A2文件将其与配套检测系统进行比对分析，建立线... 详细信息

目的建立SysmexXE-2100血细胞分析仪自建检测系统，并探讨其结果的可比性。方法以国产试剂为基础建立SysmexXE-2100血细胞分析仪自建检测系统。参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP9-A2文件将其与配套检测系统进行比对分析，建立线性回归方程和计算相对系数（r），并计算各项目医学决定水平处的相对偏倚％（SE％），以1／2CLIA’88为实验室允许总误差（TEa）的临床可接受范围判断自建检测系统与配套检测系统结果的可比性。同时将仪器白细胞分类（DC）结果与人工镜检结果进行比较。结果两套检测系统测定结果（CBC）间相关性良好（r=0．9967～0．9998，t配对=--0．1052～O．2524，P值均〉O．05）。自建检测系统在医学决定水平处相对偏倚在允许范围之内。白细胞分类计数仪器法与人工镜检方法比较，嗜中性粒细胞、淋巴细胞结果的相关性较好（r均〉0．97）。而在测定单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞时相关性稍差（r=0．7997～O．9138）。结论自建检测系统测定结果与配套检测系统结果具有良好的可比性，可应用于临床，显著降低成本。

关键词：血细胞分析仪自建检测系统比对分析

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职业院校学生数字智能测评框架构建与应用研究

职业院校学生数字智能测评框架构建与应用研究

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作者：赵山水南昌大学

学位级别：硕士

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二十二碳六烯酸(DHA)通过PPARγ/Nrf2通路保护氧化应激对精母细胞线粒体功能及DNA损伤的作用机制

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中国男科学杂志 2023年第4期37卷 3-10页

作者：靖俊孙珊珊邹志川赵山美子冯雨明梁宽欧阳磊姚兵中国人民解放军东部战区总医院生殖医学科江苏南京210002

目的探讨二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)对精母细胞的线粒体功能及DNA损伤的影响及作用机制。方法培养GC2精母细胞,用不同浓度(0、50、100、200、400μmol/L)的过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))处理2 h,通过检测线粒... 详细信息

目的探讨二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)对精母细胞的线粒体功能及DNA损伤的影响及作用机制。方法培养GC2精母细胞,用不同浓度(0、50、100、200、400μmol/L)的过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))处理2 h,通过检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)确定构建氧化应激模型的最佳H_(2)O_(2)浓度。培养GC2精母细胞,添加不同浓度(25、50μmol/L)的DHA孵育24 h后,再给予H_(2)O_(2)(200μmol/L)处理2 h,分为Control组、H_(2)O_(2)组、DHA低浓度组(25μmol/L)和DHA高浓度组(50μmol/L)。GW9662(10μmol/L)是过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的不可逆抑制剂,与DHA同时处理细胞。流式细胞术检测MMP,荧光酶标法检测胞内ATP含量,免疫荧光检测胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)和γ-H2AX荧光强度。逆转录-荧光定量PCR(RT-qPCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC1α)、肉毒碱棕榈酸转移酶1α(CPT1α)、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、超氧化物歧化酶2(SOD2)的mRNA水平,蛋白质免疫印迹检测PGC1α、CPT1α、磷酸化DNA复制检查点激酶1(p-CHK1)、p-p53、PPARγ及核因子NF-E2相关因子(Nrf2)蛋白的表达变化。结果与Control组相比,200和400μM浓度的H_(2)O_(2)处理后,GC2细胞的MMP显著下降(P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,DHA低浓度组、DHA高浓度组的MMP和胞内ATP含量上升(P<0.05)、胞内ROS浓度和DNA损伤降低,PGC1α、CPT1α、GPX4、SOD2的mRNA水平均显著上升(P<0.05),p-CHK1、p-p53蛋白表达量显著下降,PPARγ及Nrf2蛋白表达量显著上升(P<0.05);与DHA高浓度组相比,GW9662组MMP、胞内ATP含量、Nrf2、PGC1α、CPT1α蛋白表达量显著降低(P<0.05),胞内ROS浓度、DNA损伤、p-CHK1、p-p53蛋白表达量显著上升。结论DHA可能通过上调PPARγ/Nrf2通路来增强精母细胞的能量代谢和抗氧化作用。本研究为临床上通过多不饱和脂肪酸治疗由氧化应激导致的男性不育提供了理论依据和潜在靶点。

关键词：二十二碳六烯酸精母细胞线粒体氧化应激 DNA损伤

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