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基于TLR4信号通路研究小檗碱对血管紧张素Ⅱ诱导ANA-1细胞炎性应答的影响

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康复学报 2022年第2期32卷 140-148页

作者：高德兴贾沛芝彭军林炜福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的:研究小檗碱(BBR)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导ANA-1细胞炎性应答的影响及潜在的作用机制。方法:对数增长期的ANA-1细胞按照随机数字表法平均分为对照组、荧光抗体组、模型组、低剂量BBR组、中剂量BBR组、高剂量BBR组、抑制剂组。对... 详细信息

目的:研究小檗碱(BBR)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导ANA-1细胞炎性应答的影响及潜在的作用机制。方法:对数增长期的ANA-1细胞按照随机数字表法平均分为对照组、荧光抗体组、模型组、低剂量BBR组、中剂量BBR组、高剂量BBR组、抑制剂组。对照组、荧光抗体组均加入2.5μL二甲基亚砜(DMSO);模型组加入浓度为1μmol/L AngⅡ工作液;低、中、高剂量BBR组分别加入浓度为1、5、10μmol/L BBR工作液;抑制剂组加入浓度为10μmol/L TAK242工作液。采用细胞增殖与毒性检测实验(CCK-8)方法检测不同浓度的BBR对细胞活力的影响;采用流式细胞术检测细胞膜表面TLR4的平均荧光强度(MFI);采用ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用实时定量PCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平;采用Western blot检测p-ERK/ERK、p-p38/p38、pJNK/JNK、p-p65/p65、p-IRF3/IRF3的磷酸化及TLR4、MyD88、AP-1的表达情况;采用生化法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果:(1)CCK-8法检测结果:与对照组比较,低、中、高剂量BBR组细胞活性均无明显区别,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)流式细胞术检测结果:与荧光抗体组比,模型组MFI明显减弱;与模型组比较,模型+高剂量BBR组MFI明显增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)ELISA检测结果:与对照组比较,模型组IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显升高;与模型组比较,模型组+低、中、高剂量BBR组IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)实时定量PCR法检测结果:与对照组比较,模型组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平明显升高;与模型组比较,模型组+低、中、高剂量BBR组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)Western blot结果:与对照组比较,模型组处理45 min后p65、IRF-3蛋白的磷酸化表达明显升高,模型+低、中、高剂量BBR组p65、IRF-3蛋白的磷酸化表达明显下降。与对照组比较,模型组处理15 min后ERK、p38蛋白磷酸化表达明显升高,处理30 min后JNK蛋白的磷酸化表达明显升高,处理45 min后p65、IRF-3蛋白的磷酸化表达明显升高,而模型+高剂量BBR组与模型+抑制组p65、IRF-3、ERK、p38、JNK蛋白的磷酸化表达均明显下降。与对照组比较,模型组处理12 h后TLR4、MyD88、AP-1蛋白的表达以及p65、IκBα、JNK蛋白的磷酸化表达明显升高,模型+低、中、高剂量BBR组TLR4、MyD88、AP-1蛋白的表达以及p65、IκBα、JNK蛋白的磷酸化表达均明显下降。与对照组比较,模型组处理12 h后TLR4、p-p65的表达明显升高,而模型+高剂量BBR组、模型+抑制剂组、模型+抑制剂+高剂量BBR组的TLR4、p-p65蛋白的表达均明显下降。(6)生化检测结果:与对照组比较,模型组MDA含量明显升高,SOD活力明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),模型+低、中、高剂量BBR组MDA含量明显下降,SOD活力明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:BBR能够调控TLR4信号通路,抑制由AngⅡ诱导TLR4信号通路的异常激活和NF-κB、MAPK信号转导,降低促炎因子的水平,调控炎性应答;此外,BBR还能够改善AngⅡ诱导ANA-1细胞的脂质过氧化程度及抗氧化能力,降低AngⅡ造成的氧化应激损伤,保护ANA-1细胞。

关键词：小檗碱 TLR4信号通路血管紧张素Ⅱ 炎性应答

清达颗粒对AngⅡ诱导高血压小鼠肝脏炎症损伤的保护作用

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福建中医药 2022年第5期53卷 56-59页

作者：熊晓满张铃刘菲蔡巧燕贾沛芝陈达鑫林炜福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建中医药大学陈可冀学术思想传承工作室福建福州350122

目的探讨清达颗粒(QDG)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠血压及肝脏炎症的影响。方法将小鼠按1∶2随机分为对照组和造模组,造模组用皮下微量泵连续灌注AngⅡ构建高血压小鼠模型,持续灌注28 d,造模后再将造模成功的小鼠分为模型组... 详细信息

目的探讨清达颗粒(QDG)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠血压及肝脏炎症的影响。方法将小鼠按1∶2随机分为对照组和造模组,造模组用皮下微量泵连续灌注AngⅡ构建高血压小鼠模型,持续灌注28 d,造模后再将造模成功的小鼠分为模型组和给药组。于造模后第2天开始给药,给药组予QDG灌胃,对照组和模型组予生理盐水灌胃,每日1次,连续灌胃4周。每周用无创血压测量系统测量各组血压。4周后,ELISA法检测3组血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;HE染色法观察3组肝脏组织病理形态学改变;免疫组化法检测3组肝脏组织中巨噬细胞表面标志物F4/80的表达。结果HE染色结果显示,与对照组比较,模型组肝组织炎症浸润明显,而给药组肝组织炎症浸润较模型组减少。与对照组比较,模型组第14、21、28天收缩压和舒张压明显升高(P<0.05),血清AST、IL-6、TNF-α含量及AST/ALT比值均明显升高(P<0.05),F4/80阳性率明显升高(P<0.05)。与模型组比较,给药组第14、21、28天收缩压、舒张压明显降低(P<0.05),血清AST、IL-6、TNF-α含量及AST/ALT比值均明显降低(P<0.05),F4/80阳性率明显降低(P<0.05)。结论QDG能显著降低AngⅡ诱导的高血压小鼠的血压及肝脏炎症反应。

关键词：高血压清达颗粒 AngⅡ 肝脏炎症

路基灾损变形对无砟轨道线路行车条件的影响及柔性运行策略研究

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路基灾损变形对无砟轨道线路行车条件的影响及柔性运行策略研究

作者：贾沛轩石家庄铁道大学

学位级别：硕士

莲心碱体外吸收对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞表型转化的影响

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福建中医药 2022年第5期53卷 20-23页

作者：贾沛芝林珊曾建伟熊晓满刘菲王美玲林炜陈达鑫福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

目的通过检测血管平滑肌A7R5细胞内莲心碱的含量,同时测定不同浓度莲心碱对A7R5细胞活力的影响及莲心碱的药效作用,探究莲心碱进入细胞作用的效率与对A7R5细胞表型转换的影响。方法体外培育大鼠血管平滑肌细胞A7R5细胞株,将其随机分为6... 详细信息

目的通过检测血管平滑肌A7R5细胞内莲心碱的含量,同时测定不同浓度莲心碱对A7R5细胞活力的影响及莲心碱的药效作用,探究莲心碱进入细胞作用的效率与对A7R5细胞表型转换的影响。方法体外培育大鼠血管平滑肌细胞A7R5细胞株,将其随机分为6组,分别用不同剂量莲心碱干预(0、5、25、50、100、200μg/mL),采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)检测不同浓度的莲心碱干预15 min时A7R5细胞质中莲心碱浓度;采用MTT法筛选莲心碱药物浓度后,选择对细胞无伤害的药物浓度,采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导建立A7R5细胞表型转换模型,将其分为空白对照组(完全培养基)、AngⅡ组(1×10^(-6) mol/L AngⅡ)、莲心碱组(1×10^(-6) mol/L AngⅡ+10μg/mL莲心碱),干预24 h后,双转盘活细胞共聚焦实时成像分析系统观察A7R5细胞中表型转换标志物α-SMA的蛋白表达情况。结果通过液质联用可检测到破碎细胞中莲心碱的含量,与干预浓度呈剂量依赖,空白对照和末次清洗细胞的PBS中未检测到莲心碱色谱峰,提示莲心碱可透过细胞膜进入细胞,且莲心碱进细胞效率为15.56%;AngⅡ诱导A7R5细胞由收缩型向合成型转换,其标志蛋白α-SMA表达减少,莲心碱干预后可抑制α-SMA表达量的降低。结论莲心碱可透过A7R5细胞膜进入细胞,且抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞表型转换,该结果可能是莲心碱抑制高血压血管重构的作用机制之一。

关键词：莲心碱血管平滑肌细胞超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱表型转化

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨葛根黄连黄芩汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制

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福建中医药 2023年第9期54卷 27-33页

作者：许瑶瑶蔡巧燕赵春雨贾沛芝王美玲林炜张铃福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨葛根黄连黄芩汤改善葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠炎症反应的作用机制。方法20只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白组、中药组、模型组、模型+中药组。模型组和模型+中药组采用2.5%DSS... 详细信息

目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨葛根黄连黄芩汤改善葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠炎症反应的作用机制。方法20只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白组、中药组、模型组、模型+中药组。模型组和模型+中药组采用2.5%DSS溶液连续饮用7 d,再换纯水饮用4 d构建急性溃疡性结肠炎小鼠模型。中药组及模型+中药组小鼠按体质量2 g/(kg·d)给予葛根黄连黄芩汤连续灌胃11 d,空白组及模型组小鼠给予等体积的生理盐水灌胃。每天记录小鼠体质量变化,同时采用疾病活动指数(DAI)评分法观察4组小鼠体质量、粪便黏稠度、粪便潜血的变化;观察4组小鼠结肠组织整体性状,测量结肠长度;HE染色法观察4组小鼠结肠组织病理变化;Western blot检测4组小鼠结肠组织中TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量;免疫组化(IHC)法检测4组小鼠结肠组织中p-P65蛋白定位及阳性表达;qPCR法检测4组小鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平;采用眼球取血法将血液离心收集血清,酶联免疫(ELISA)法检测4组小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量下降,DAI评分显著升高(P<0.05);结肠长度缩短(P<0.05);结肠黏膜糜烂充血严重,炎症细胞浸润明显,TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量显著升高(P<0.05);结肠中p-P65的阳性表达率显著增加,且入核数量增加(P<0.05);结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平显著升高(P<0.05);血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,模型+中药组小鼠体质量下降幅度有所缓解,DAI评分低于模型组(P<0.05),结肠长度延长(P<0.05);结肠黏膜轻度糜烂,炎症细胞浸润减少;TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量显著降低(P<0.05);结肠中p-P65的阳性表达率显著降低(P<0.05),且入核数量减少;IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平显著降低(P<0.05);血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05)。结论葛根黄连黄芩汤可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活,减轻炎症反应,从而起到治疗溃疡性结肠炎的作用。

关键词：溃疡性结肠炎葛根黄连黄芩汤 TLR4/NF-κB信号通路

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清达颗粒对血管紧张素Ⅱ诱导的高血压小鼠心脏损伤的保护作用

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福建中医药 2023年第11期54卷 25-29页

作者：赵春雨张铃贾沛芝王美玲许瑶瑶林浩伟蔡巧燕福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建中医药大学陈可冀学术思想传承工作室福建福州350122

目的探讨清达颗粒(QDG)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠心脏损伤的保护作用。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组、高剂量组和阳性组,模型组、低剂量组、高剂量组和阳性组采用皮下微量泵持续灌注AngⅡ溶液2... 详细信息

目的探讨清达颗粒(QDG)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠心脏损伤的保护作用。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组、高剂量组和阳性组,模型组、低剂量组、高剂量组和阳性组采用皮下微量泵持续灌注AngⅡ溶液28 d构建高血压小鼠模型,对照组给予皮下微量泵持续灌注生理盐水。于造模第2天开始灌胃给药,低、高剂量组分别按1.3、2.6 mg/(kg·d)给予QDG药液灌胃;阳性组按10.4 mg/(kg·d)给予缬沙坦药液灌胃,对照组和模型组按12 mL/(kg·d)给予生理盐水灌胃,每日1次,连续灌胃28 d。应用鼠尾无创血压仪检测每周小鼠尾动脉收缩压(SBP)和舒张压(DBP)。灌胃28 d后取材,观察小鼠心脏形态,称量小鼠体质量和心脏质量,测量胫骨长度,计算小鼠心重指数及心胫比;qPCR检测心脏组织心钠肽(ANP)和脑钠肽(BNP)mRNA相对表达水平;ELISA检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和BNP的含量;天狼星红法检测心脏组织胶原纤维的表达情况。结果与对照组比较,模型组造模第7、14、21、28天SBP和DBP均明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组造模后第14、21、28天SBP和DBP均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组心脏组织明显肥大,心重指数和心胫比均明显增加(P<0.05),心脏组织ANP、BNP mRNA相对表达水平均明显升高(P<0.05),血清CK-MB、BNP含量均明显升高(P<0.05),天狼星红染色显示心脏组织的红色或黄色Ⅰ型胶原纤维以及绿色Ⅲ型胶原纤维明显增多(P<0.05)。与模型组比较,各给药组心脏组织肥大情况明显减轻,心重指数与心胫比均明显降低(P<0.05),心脏组织ANP、BNP mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),血清CK-MB、BNP含量均明显降低(P<0.05),心脏组织胶原纤维表达量明显降低(P<0.05)。结论QDG能明显改善AngⅡ诱导的高血压小鼠心肌肥大和纤维化,减轻心脏损伤。

关键词：高血压清达颗粒血管紧张素Ⅱ 心肌肥大心肌纤维化心脏损伤小鼠

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基于TGF-β1/Smad2/3信号通路研究莲心碱对高血压小鼠肾间质纤维化的保护作用

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福建中医药 2023年第8期54卷 50-53页

作者：王美玲陈达鑫贾沛芝赵春雨许瑶瑶姚琳林珊福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 福建省中西医结合防治重大心血管慢病协同创新中心福建福州350122

目的探究莲心碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠肾间质纤维化的影响和作用机制。方法将18只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和莲心碱组各6只。模型组和莲心碱组使用AngⅡ微量缓释泵持续28 d构建高血压小鼠模型,出现收缩压(S... 详细信息

目的探究莲心碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠肾间质纤维化的影响和作用机制。方法将18只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和莲心碱组各6只。模型组和莲心碱组使用AngⅡ微量缓释泵持续28 d构建高血压小鼠模型,出现收缩压(SBP)>120 mm Hg提示建模成功;对照组使用等体积PBS灌注微量缓释泵。造模后第2天开始干预,莲心碱组按5 mg/(kg·d)腹腔注射150μL莲心碱溶液,对照组、模型组腹腔注射同等体积生理盐水,均连续干预4周。每周应用无创鼠尾血压仪对小鼠进行血压测量。观察3组小鼠肾脏大小;天狼星红染色观察肾组织胶原纤维分布;Western blot检测肾组织中TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组造模第7、14、21、28天SBP、DBP及MAP均明显提高(P<0.05);与模型组比较,莲心碱组造模第14、21、28天SBP、DBP及MAP均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组肾脏重量明显提高(P<0.05);天狼星红染色示肾间质可见大面积呈红色或黄色的Ⅰ型胶原纤维,并伴有部分绿色Ⅲ型胶原纤维;肾脏组织CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1蛋白表达量和p-Smad2/3/Smad2/3比值均明显提高(P均<0.05);与模型组比较,莲心碱组肾脏重量明显降低(P<0.05);天狼星红染色示肾间质纤维化程度较模型组明显下降;肾脏组织CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1蛋白表达量和p-Smad2/3/Smad2/3比值均明显降低(P均<0.05)。结论莲心碱能抑制高血压所致的肾脏组织纤维化,减轻肾脏胶原沉积,其可能通过TGF-β1/Smad2/3信号通路发挥作用。

关键词：高血压莲心碱莲子心肾损害纤维化 TGF-β1/Smad2/3

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国企党建与思政宣传的有效结合策略分析

现代企业文化 2024年第19期 83-85页

作者：贾沛毅国家能源集团神东煤炭分公司

长期以来，党建工作一直被视为国有企业发展的根本保障，而思想政治工作是国有企业健康发展的重要基础，将党建与思政宣传工作进行有机结合，不仅可以增强企业的凝聚力和战斗力，还可以提升广大职工的思想境界和道德品质，从根本上促进... 详细信息

长期以来，党建工作一直被视为国有企业发展的根本保障，而思想政治工作是国有企业健康发展的重要基础，将党建与思政宣传工作进行有机结合，不仅可以增强企业的凝聚力和战斗力，还可以提升广大职工的思想境界和道德品质，从根本上促进国有企业的高质量、可持续发展。然而，在具体实践中，一些国有企业党建与思政宣传之间存在一定的脱节现象，为了提升企业的整体素质和竞争力，必须不断创新和探索更加有效的结合对策，才能进一步实现国企的持续稳定发展。本文就国企党建与思政宣传的有效结合策略展开研究和讨论，以期为国有企业的改革发展提供参考。

关键词：国企党建思政宣传有效结合策略分析

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《说文浅说》初探

今古文创 2024年第25期 86-89页

作者：贾沛玉郑州大学文学院河南郑州450001

《说文浅说》是晚清学者郑知同探讨“六书”的专书,蕴含了郑氏丰富的“六书”思想,反映了其研究方法和治学理念,是最能反映郑氏“六书”理论的著作。该书是研究清代“六书”学体系和郑知同学术成就的重要材料,具有重要的学术价值和学术... 详细信息

《说文浅说》是晚清学者郑知同探讨“六书”的专书,蕴含了郑氏丰富的“六书”思想,反映了其研究方法和治学理念,是最能反映郑氏“六书”理论的著作。该书是研究清代“六书”学体系和郑知同学术成就的重要材料,具有重要的学术价值和学术史价值。

关键词：清代六书《说文浅说》郑知同