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关节镜下应用Rigidfix、Endobutton及Intrafix重建膝关节前交叉韧带术后功能恢复效果观察

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郑州大学学报（医学版） 2012年第6期47卷 877-879页

作者：谷晨熙许建中田科乔源鑫李光曦郑州大学第一附属医院骨科6病区关节外科郑州450052

超声心动图对部分型心内膜垫缺损（partial en-docardial cushion defect,PECD）有很好的诊断价值,但对部分合并畸形者容易漏诊。该研究通过与手术病理结果对照,探讨PECD患者合并畸形的种类及其超声心动图特征,并对漏诊、误诊病例进行... 详细信息

超声心动图对部分型心内膜垫缺损（partial en-docardial cushion defect,PECD）有很好的诊断价值,但对部分合并畸形者容易漏诊。该研究通过与手术病理结果对照,探讨PECD患者合并畸形的种类及其超声心动图特征,并对漏诊、误诊病例进行总结和分析,以期引起超声诊断工作者的重视,提高术前超声诊断PECD合并畸形的准确率。

关键词：前交叉韧带 Rigidfix Endobutton Intrafix 重建功能恢复

微小RNA-27a靶向调控过氧化物酶体增殖子活化受体-γ和骨形态发生蛋白-2对激素诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响

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中华实验外科杂志 2015年第12期32卷 3110-3112页

作者：王光辉李月白李明谷晨熙宋石单杰赵国强王义生郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系郑州大学基础医学院微生物免疫系

目的检测微小RNA（miRNA，miR）-27a调控过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-γ）和骨形态发生蛋白-2（BMP-2）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化的影响。方法将培养的40只大鼠BMSCs，随机分4组，正常对照组：细胞不作特殊处理；模型... 详细信息

目的检测微小RNA（miRNA，miR）-27a调控过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-γ）和骨形态发生蛋白-2（BMP-2）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化的影响。方法将培养的40只大鼠BMSCs，随机分4组，正常对照组：细胞不作特殊处理；模型组：细胞给予1×10-7mol／L地塞米松；无关序列组：将无关序列基因电转入细胞，给予1×10 -7mol／L地塞米松；实验组：将具有双向靶向作用的miR-27a电转入细胞，给予1×10-7mol／L地塞米松。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT—qPCR）技术测定PPAR-γ和BMP-2mRNA的相对表达量。结果处理细胞7d时，实验组细胞中PPAR-γmRNA的相对表达量（1．203±0．111）较模型组（1．877±0．225）、无关序列组（1．913±0．195）明显降低（P〈0．05），近似于正常组（1．000）且与其差异无统计学意义（P〉0．05）。实验组细胞中BMP-2mRNA的相对表达量（0．832±0．105）较模型组（0．455±0．051）、无关序列组（0．422±0．038）明显升高（P〈0．05），近似于正常组（1．000）且与其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论miR-27a能够有效抑制PPAR-γ表达，维持BMP-2表达。

关键词：股骨头坏死过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 骨形态发生蛋白一2

关节局部镇痛在全膝关节置换多模式镇痛中的疗效分析

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中国实用医刊 2016年第7期43卷 46-47页

作者：王维康谷晨熙王义生郑州大学第一附属医院骨科 450052

目的：探讨关节局部镇痛在全膝关节置换（TKA）多模式镇痛中的作用以及对膝关节功能恢复的影响。方法将65例 TKA 患者随机分为实验组 A（34例）和对照组 B（31例）。A 组术中使用局部镇痛，B 组未使用，其余术前、术后口服及静脉镇痛的... 详细信息

目的：探讨关节局部镇痛在全膝关节置换（TKA）多模式镇痛中的作用以及对膝关节功能恢复的影响。方法将65例 TKA 患者随机分为实验组 A（34例）和对照组 B（31例）。A 组术中使用局部镇痛，B 组未使用，其余术前、术后口服及静脉镇痛的方法、药物使用剂量及用药时限均相同。评价两组患者术前及术后12 h、24 h、3 d、5 d 的 VAS 评分，评价术前与术后5 d 的膝关节 HSS 评分。结果 A 组在术后12 h、24 h、3 d、5 d 的 VAS评分为（5.294±0.799）、（4.265±0.828）、（3.559±0.824）、（1.882±1.094）分，B 组为（6.807±0.910）、（5.452±0.888）、（4.000±0.775）、（2.226±0.884）分，A 组低于 B 组，其中12 h、24 h、3 d 比较差异有统计学意义（P〈0.05）；A 组术后 HSS 评分为（73.382±3.445）分，高于 B 组的（68.516±3.075）分，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论多模式镇痛中应用关节局部镇痛的临床疗效满意，利于膝关节的功能恢复。

关键词：关节局部镇痛多模式镇痛全膝关节置换功能恢复

微小RNA-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-20S细胞增殖及分化的影响

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中华实验外科杂志 2017年第2期34卷 271-273页

作者：李成梅英武吴留源关红亚谷晨熙李月白王义生郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组（Blank）：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组... 详细信息

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组（Blank）：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组（NC）：细胞转染无关序列；miR-329组：细胞转染miR-329。实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测人骨肉瘤U-2OS细胞和人成骨细胞hFOB1.19中miR-329和E2F1 mRNA表达。细胞计数试剂盒（CCK-8）检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞在48、72、96 h的增殖水平。转染48 h后收集细胞，采用Western blot法检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞中E2F1和核心结合蛋白因子2（Runχ2）、骨桥蛋白（OPN）、维甲酸α受体（RARα）蛋白的表达。结果miR-329和E2F1 mRNA在人骨肉瘤U-2OS细胞、人成骨细胞中的表达水平分别为0.736±0.013、1.215±0.026和1.329±0.015、0.894±0.017，人骨肉瘤细胞中miR-329 mRNA表达水平明显低于人成骨细胞（P＝0.008），E2F1 mRNA表达水平明显高于人成骨细胞（P＝0.003）。细胞转染后，Blank组、NC组和miR-329组在48、72、96 h细胞增殖水平分别为2.635±0.214、2.584±0.107和1.319±0.135，2.912±0.152、2.826±0.165和1.136±0.214，3.109±0.143、3.095±0.129和1.153±0.172，miR-329组人骨肉瘤细胞的增殖水平明显低于空白组和阴性对照组，且随时间延长其抑制人骨肉瘤细胞增殖的作用逐渐增强，差异均有统计学意义（F组间＝4.351，P＝0.036；F时间＝2.366，P＝0.043）。miR-329组E2F1的蛋白表达量明显低于空白组和阴性对照组，Runχ2、OPN、RARα蛋白表达量明显高于空白组和阴性对照组，差异有统计学意义（F组间＝9.037，P＝0.025；F组内＝7.779，P＝0.028）。结论miR-329能够通过下调E2F1表达抑制人骨肉瘤U-2OS细胞的增殖，并促进其成骨分化。

关键词：微小RNA-329 E2F1 骨肉瘤增殖分化

人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞的共培养

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第10期14卷 1721-1728页

作者：田毅关方霞胡祥杨波杜英周长辉巴云涛谷晨熙雷宁静王晓薇郑州大学第一附属医院神经外科河南省郑州市450052 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南省郑州市450052 郑州大学生物工程系河南省郑州市450001 江苏省干细胞与生物治疗公共技术服务平台江苏省泰州市225300 深圳市北科细胞工程研究所广东省深圳市518000 郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室河南省郑州市450052 郑州大学临床医学系河南省郑州市450001 湖南师范大学生命科学学院湖南省长沙市410081

背景:人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性。目的:观察人脐带沃顿胶间充质... 详细信息

背景:人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性。目的:观察人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后,脑肿瘤干细胞的生物学变化。方法:以原位法培养人脐带沃顿胶间充质干细胞,以酶消化法培养人脑肿瘤组织脑肿瘤干细胞,以细胞传代法获取第3代细胞。应用不添加任何生长因子的无血清培养基将两种细胞在24孔板中进行直接共培养。第3,7天应用流式细胞术检测细胞CD133表达;应用免疫荧光法检测贴壁细胞巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白表达;将第3天离心所得的共培养上清液重悬第3代脑肿瘤干细胞并与正常培养悬浮的第3代脑肿瘤干细胞置入96孔板中,应用酶标仪检测两组细胞生长曲线的差异。结果与结论:两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见脑肿瘤干细胞球随着培养时间的增加出现分解、贴壁、分化现象;贴壁的脑肿瘤干细胞免疫荧光染色胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白均阳性。恶性程度高的脑肿瘤组织培养的脑肿瘤干细胞表达CD133量越高,而与沃顿胶间充质干细胞共培养后随着时间的变化均出现CD133表达量降低。共培养3d的上清液培养的脑肿瘤干细胞与正常培养基培养的脑肿瘤干细胞相比,增殖明显受到抑制。结果显示沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后可限制脑肿瘤干细胞表面标记物CD133的阳性率以及细胞增殖能力并促使其分化。

关键词：共培养脑肿瘤干细胞 CD133 沃顿胶间充质干细胞人脐带

人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗转基因APP^+小鼠的机制

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第19期14卷 3471-3476页

作者：王成春杨波关方霞李国栋周长辉周云帆胡祥谷晨熙雷宁静郑州大学生物工程系河南省郑州市450001 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南省郑州市450052 郑州大学第一附属医院神经外科河南省郑州市450052 郑州大学药物实验中心河南省郑州市450052 江苏省干细胞与生物治疗公共技术服务平台江苏省泰州市225300 深圳市北科细胞工程研究所广东省深圳市518000 郑州大学临床医学系河南省郑州市450001

背景:研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可以促进阿尔茨海默病APP+转基因小鼠的学习,记忆能力改善。目的:探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植后,能否归巢到小鼠脑组织中,并分化... 详细信息

背景:研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可以促进阿尔茨海默病APP+转基因小鼠的学习,记忆能力改善。目的:探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植后,能否归巢到小鼠脑组织中,并分化为相关的中枢神经细胞,治疗阿尔茨海默病。方法:无菌条件下体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代将细胞浓度调整为1×109L-1,经尾静脉注入0.5mL至细胞移植组转APP+基因小鼠体内;对照组经尾静脉注入同体积的生理盐水;正常组转APP-基因小鼠不给予任何干预措施。采用免疫组化方法检测、测定Brdu标记的人第3代羊膜间充质干细胞在小鼠脑组织中的表达,各组小鼠脑组织中GFAP、Nestin和NSE的表达。结果与结论:光镜下观察可见,移植组小鼠脑组织中大部分细胞核被染成蓝色,但有一些细胞核被染成棕色或褐色,Brdu呈阳性。与对照组相比,移植组小鼠脑组织中的GFAP增加了近4倍,表达显著增加,甚至超过正常组的表达(P<0.05);Nestin的表达则显著升高,增加了近10%,但是还比正常组低了近20%(P<0.05)。NSE的表达降低了近1/3,但仍高于正常组(P<0.05)。表明人羊膜间充质干细胞尾静脉移植治疗阿尔茨海默病可能是通过羊膜间充质干细胞归巢到转基因APP+小鼠脑组织中,并分化成中枢神经细胞的途径实现的。

关键词：人羊膜间充质干细胞转基因APP+小鼠尾静脉移植胶质纤维蛋白巢蛋白神经元特异性烯醇化酶

改良法培养人牙髓间充质干细胞及其向神经样细胞的分化

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第49期14卷 9239-9243页

作者：李远关方霞李季杨波胡祥杜英谷晨熙雷宁静王晓薇郑州大学第一附属医院神经外科河南省郑州市450052 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南省郑州市450052 郑州大学生物工程系河南省郑州市450001 郑州大学第一附属医院口腔科河南省郑州市450052 江苏省干细胞与生物治疗公共技术服务平台江苏省泰州市225300 深圳市北科细胞工程研究所广东省深圳市518000 郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室河南省郑州市450052 郑州大学临床医学系河南省郑州市450001 湖南师范大学生命科学学院湖南省长沙市410081

背景:应用改良组织原位培养法后,牙髓间充质干细胞的提取成功率显著提高,但鲜有文献报道其与酶消化法提取干细胞生物学特性的异同。目的:观察改良组织原位培养法与传统酶消化法所获得的牙髓间充质干细胞向神经样细胞分化上的差异。方法... 详细信息

背景:应用改良组织原位培养法后,牙髓间充质干细胞的提取成功率显著提高,但鲜有文献报道其与酶消化法提取干细胞生物学特性的异同。目的:观察改良组织原位培养法与传统酶消化法所获得的牙髓间充质干细胞向神经样细胞分化上的差异。方法:将同一组织来源的标本随机分成两组,分别用改良的组织原位培养法及常规的酶消化法提取人牙髓间充质干细胞,通过免疫组化、流式细胞检测及RT-PCR等比较观察其生长情况、抗原表达及向神经样细胞分化能力。结果与结论:改良法原位培养组分离牙髓间充质干细胞与常规分离培养组分离的干细胞在形态学表现,抗原表达及神经向分化能力上无明显区别,但简化了操作流程,且所得细胞数量大。

关键词：改良法原位培养干细胞牙髓神经分化

人脐带沃顿胶间充质干细胞对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第14期14卷 2485-2491页

作者：周长辉田毅杨波胡祥焦红亮周云帆王成春谷晨熙雷宁静关方霞郑州大学生物工程系河南省郑州市450001 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南省郑州市450052 郑州大学第一附属医院神经外科河南省郑州市450052 江苏省干细胞与生物治疗公共技术服务平台江苏省泰州市225300 深圳市北科细胞工程研究所广东省深圳市518000 郑州大学临床医学系河南省郑州市450001

背景:骨髓源性间充质干细胞具有低免疫原性和免疫调节作用,但有关人脐带沃顿胶间充质干细胞的免疫调节作用及其机制研究较少。目的:观察脐带沃顿胶间充质干细胞对异体外周血T淋巴细胞的免疫调节作用及机制。方法:从人脐带沃顿胶组织块... 详细信息

背景:骨髓源性间充质干细胞具有低免疫原性和免疫调节作用,但有关人脐带沃顿胶间充质干细胞的免疫调节作用及其机制研究较少。目的:观察脐带沃顿胶间充质干细胞对异体外周血T淋巴细胞的免疫调节作用及机制。方法:从人脐带沃顿胶组织块培养中分离出间充质干细胞。将脐带沃顿胶间充质干细胞及脐带沃顿胶间充质干细胞培养上清分别与植物凝集素刺激下的人外周血T淋巴细胞共培养,多功能酶标仪测量脐带沃顿胶间充质干细胞及脐带沃顿胶间充质干细胞培养上清与植物凝集素刺激下的人外周血T淋巴细胞共培养72h后A值;ELISA试剂盒检测培养上清中转化生长因子β1、γ-干扰素的表达。结果与结论:沃顿胶间充质干细胞对植物凝集素刺激下的T淋巴细胞增殖有抑制作用,增殖抑制率为56%(P<0.01),沃顿胶间充质干细胞培养上清对植物凝集素刺激下的T淋巴细胞增殖也具有抑制作用,且这种抑制呈剂量依赖性。含50%沃顿胶间充质干细胞培养上清组和100%培养上清组的增殖抑制率分别为8.3%、27%(P<0.05);沃顿胶间充质干细胞能显著降低T淋巴细胞分泌的γ-干扰素(P<0.05);可分泌转化生长因子β1,沃顿胶间充质干细胞与T淋巴细胞共培养组的转化生长因子β1分泌量低于沃顿胶间充质干细胞单独培养组(P<0.05)。提示沃顿胶间充质干细胞及沃顿胶间充质干细胞培养上清对植物凝集素刺激下的T淋巴细胞增殖均有抑制作用,其作用机制可能与细胞间的接触及抑制T淋巴细胞分泌的γ-干扰素有关。

关键词：沃顿胶间充质干细胞 T淋巴细胞免疫调节 γ-干扰素转化生长因子β1

双基因重组载体预防兔乙醇性股骨头坏死的组织病理学观察

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中华实验外科杂志 2020年第6期37卷 1017-1021页

作者：李劲峰马源刘柯希谷晨熙王丹孙肖雅赵雪枫贾祯李月白王义生郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001

目的观察双基因重组载体预防兔乙醇性股骨头坏死(ONFH)的组织病理学变化。方法自2018年1月至2019年6月将购自河南省实验动物中心的80只兔采用完全随机化原则分为5组:正常组(N,正常动物,空白对照)、致敏组(H,仅马血清致敏,不给予白酒)、... 详细信息

目的观察双基因重组载体预防兔乙醇性股骨头坏死(ONFH)的组织病理学变化。方法自2018年1月至2019年6月将购自河南省实验动物中心的80只兔采用完全随机化原则分为5组:正常组(N,正常动物,空白对照)、致敏组(H,仅马血清致敏,不给予白酒)、模型组[M,马血清致敏,烈性白酒10 ml/(kg·d)灌胃]、无关序列组[Con,马血清致敏,白酒灌胃,一侧股骨头注入无关序列pGFP-V-RS转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)]、双基因组(S,马血清致敏,白酒灌胃,一侧股骨头内注入双基因重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP转染的BMSCs)。实验第4、8周末分批处死动物,观察兔股骨头病理学改变。两样本两组间比较采用t检验;分类变量数据资料分析采用χ2检验;数值变量资料统计采用方差分析、组间比较采用最小显著性差异法(LSD)。结果实验第8周,S、H组中骨小梁面积分数分别为(40.80±3.16)、(41.20±3.65)%,与正常组[(41.80±3.63)%]比较差异无统计学意义(t=0.588、0.661,P>0.05),明显高于M组[(28.10±2.55)%]、Con组[(28.30±2.65)%],差异均有统计学意义(t=8.846、8.496、8.322、8.089,P0.05),明显低于M组[(39.30±3.86)%]、Con组[(39.10±3.65)%],差异均有统计学意义(t=17.502、18.397、17.686、18.397、18.505、19.282,P0.05),明显低于M组[(52.31±5.26)μm]、Con组[(52.19±5.13)μm],差异均有统计学意义(t=4.116、4.128、4.129、4.141,P<0.01)。M、Con组中出现明显的早期ONFH病理学变化,股骨头软骨下骨区的造血组织显著减少,骨小梁变细稀疏、中断、结构紊乱,骨髓坏死,骨小梁面积分数降低、空骨陷窝显著增多,脂肪细胞增殖肥大,脂肪组织堆积。N组中无这些ONFH病理学改变。S、H组中病理学改变很少,骨组织结构接近于N组。8周时,M、Con组中病理学变化比4周时加重,ONFH发生率为87.5%、87.5%,而S、H、N组中为12.5%、12.5%、0%(χ2=9.833、9.833、12.444、9.833、9.833、12.444,P<0.01),差异有统计学意义。结论双基因重组载体能够高效阻止乙醇导致兔ONFH的组织病理学改变,预防乙醇性ONFH的发生,显著优于单一基因的作用。

关键词：双基因重组载体预防乙醇股骨头坏死病理学