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高表达透明颤菌血红蛋白的金色链霉菌工程菌的生长特性研究

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当代畜牧 2012年第1期41卷 44-46页

作者：谢昌贤刘运添王鹏飞金河生物科技股份有限公司呼和浩特010200

目的:研究四环素抗性基因启动子在金色链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因(vhb),并在180m3发酵罐实践应用,研究工程菌株的生长代谢特性。方法:在不同的溶解氧条件下,考察工程菌株与参比菌株的生长代谢特性。结果:在溶解氧充足的条件下,... 详细信息

目的:研究四环素抗性基因启动子在金色链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因(vhb),并在180m3发酵罐实践应用,研究工程菌株的生长代谢特性。方法:在不同的溶解氧条件下,考察工程菌株与参比菌株的生长代谢特性。结果:在溶解氧充足的条件下,透明颤菌血红蛋白表达,对金色链霉菌生长代谢未产生明显影响,工程菌株与参比菌株的生长代谢特性基本一致,工程菌株和参比菌株金霉素最终浓度分别平均为23980μg/mL、24030μg/mL。在低溶解氧条件下,透明颤菌血红蛋白的表达,可促进金色链霉菌菌体生长、菌丝活力保持和金霉素的合成,工程菌菌体浓度比参比菌株高18%,产物合成提高18.4%。结论:该工程菌的规模化推广全厂,可年产金霉素(15%)45000T,年节约压缩空气21600万m3,节约率15%,节电率25%,节约煤炭1.15万T,应用推广到全行业节能潜力巨大。

关键词： vhb 金色链霉菌金霉素工业节能

金霉素生物合成基因簇中调控基因ctcB的功能

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微生物学报 2016年第9期56卷 1486-1495页

作者：刘佳朱涛王鹏飞孔令新王松梅刘运添谢昌贤邓子新由德林上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240 金河生物科技股份有限公司内蒙古呼和浩特010200

【目的】研究金霉素产生菌中SARP家族转录调控基因ctc B的作用。【方法】利用大肠杆菌、链霉菌的属间接合转移和同源重组双交换的方法,构建ctc B基因缺失突变株。通过c DNA在相邻同转录方向的基因间隔进行PCR验证,确定金霉素生物合成基... 详细信息

【目的】研究金霉素产生菌中SARP家族转录调控基因ctc B的作用。【方法】利用大肠杆菌、链霉菌的属间接合转移和同源重组双交换的方法,构建ctc B基因缺失突变株。通过c DNA在相邻同转录方向的基因间隔进行PCR验证,确定金霉素生物合成基因簇中的转录单元。利用荧光定量RT-PCR方法进行突变株金霉素生物合成基因簇的转录水平检测。随后,生物信息学预测分析了金霉素生物合成基因簇内Ctc B与DNA的结合位点。【结果】获得了ctc B基因缺失的双交换突变株。发酵结果显示,该突变株失去产生金霉素与四环素的能力。金霉素生物合成基因簇内有6个共转录单元,其中4个共转录单元在ctc B基因缺失突变株中转录水平明显下降。软件分析预测到一致性较高的Ctc B结合重复序列。【结论】ctc B正调控金霉素生物合成结构基因ctc G-D、ctc H-K、ctc N-P、ctc W-T 4个转录单元和ctc Q,为进一步研究ctc B调控机制奠定了基础。

关键词：金霉素 SARP家族转录调控基因基因敲除生物合成

盐霉素原料药中新杂质的检测、分离、鉴定及抗肿瘤活性

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应用与环境生物学报 2020年第6期26卷 1526-1533页

作者：程瑶熊峰王涛谢昌贤云喜报张国林卢晓霞中国科学院成都生物研究所成都610041 金河生物科技股份有限公司呼和浩特010200 深圳劲宇生物科技有限公司深圳518118 中国科学院大学北京100049

盐霉素是第一个用于预防和治疗鸡球虫病的神经元钾通道开放剂.采用HPLC-UV、LC-MS等方法对盐霉素原料药中相关杂质进行检测.通过柱后衍生化高效液相色谱法检测到盐霉素原料药中共含有10个含量在0.18%-3.47%之间的杂质,其中3个杂质含量在... 详细信息

盐霉素是第一个用于预防和治疗鸡球虫病的神经元钾通道开放剂.采用HPLC-UV、LC-MS等方法对盐霉素原料药中相关杂质进行检测.通过柱后衍生化高效液相色谱法检测到盐霉素原料药中共含有10个含量在0.18%-3.47%之间的杂质,其中3个杂质含量在2.0%以上.含量为2.04%的杂质为已知的20-氧代-盐霉素,其由盐霉素C-20位的仲羟基氧化为羰基而形成,但其他2个杂质(SAL-A含量为3.47%,SAL-B含量为2.30%)未见文献报道.通过制备液相色谱(Prep LC)从盐霉素原料药中分离得到该新杂质,并利用红外吸收光谱(IR)、一维及二维核磁(NMR)、高分辨质谱(HR-ESI-MS)和圆二色谱(CD)等测试分析方法对其化学结构进行表征,对这些表征数据进行综合解析,确证了2个盐霉素杂质(SAL-A和SAL-B)的化学结构:SAL-A为盐霉素C-6位的甲基变换为了乙基,SAL-B为盐霉素C-14位的甲基变换为了乙基.SAL-A和SAL-B的CD光谱数据也同盐霉素相似,说明它们具有相同的相对构型.此外,生物活性研究表明SAL-A和SAL-B对人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2和乳腺癌细胞SK-BR3具有一定的抑制活性.上述结果表明两个可作为潜在抗肿瘤药物的盐霉素新杂质得到发现和确证.

关键词：盐霉素杂质分离结构确证抗肿瘤活性

初中化学“金属性质复习”项目式教学——探秘神奇的自热饭盒

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中学化学 2023年第6期 8-10页

作者：江昌标谢利珍张贤金福建省建瓯市第四中学 353100 福建省建瓯市第一中学 353100 福建教育学院化学教育研究所 350025

一、项目主题分析自制自热饭盒,并以自热饭盒中的主要物质镁、铁等金属性质与用途的复习,激发学生主动探究,促进学生知识深度理解、迁移应用,形成知识结构化,发展学生学科能力和素养。同时,通过自制自热饭盒,认识放热原理与应用,学会反... 详细信息

一、项目主题分析自制自热饭盒,并以自热饭盒中的主要物质镁、铁等金属性质与用途的复习,激发学生主动探究,促进学生知识深度理解、迁移应用,形成知识结构化,发展学生学科能力和素养。同时,通过自制自热饭盒,认识放热原理与应用,学会反应工艺设计与制取操作,开展跨学科学习,综合运用知识解决真实情境中的问题,完成教学目标。项目规划拆解为3个学习主题和5个学习问题,见表1。

关键词：初中化学学习主题主动探究真实情境主题分析迁移应用知识结构化项目式教学

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筛选适应大生产菌种的思路与措施

内蒙古科技与经济 2014年第18期 101-103页

作者：马晓玲谢昌贤刘运添郝兴乐侯国峰内蒙古金河生物科技股份有限公司内蒙古托克托010200

为了将研发优势成果在大生产中保持,找到研发与大生产的衔接的最大化,最终找到最适合培养条件下的最优良菌种。以金霉素的产生菌金色链丝菌为研究对象,采用摇瓶培养与发酵罐培养两种发酵条件,从影响产生菌的各个因素出发,探讨多年来一... 详细信息

为了将研发优势成果在大生产中保持,找到研发与大生产的衔接的最大化,最终找到最适合培养条件下的最优良菌种。以金霉素的产生菌金色链丝菌为研究对象,采用摇瓶培养与发酵罐培养两种发酵条件,从影响产生菌的各个因素出发,探讨多年来一直困扰生产的一个问题,即:研发出来的菌种摇瓶发酵水平很高,但进入大生产推广阶段后,发酵水平却不突出、不稳定,甚至逐渐滑坡。以期提高发酵水平,达到产能最大化。

关键词：金霉素选种多因素生产摇瓶培养发酵罐培养措施

用紫外线及2-脱氧-D-葡萄糖改良产土霉素菌

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中国抗生素杂志 2014年第7期39卷 499-502页

作者：李兰枝谢昌贤刘运添王鹏飞郝新乐陈有君金河生物科技股份有限公司研发部呼和浩特010200 内蒙古农业大学呼和浩特010018

目的改善产土霉素菌的生产特性。方法紫外线诱变、在含有2-脱氧-D-葡萄糖的培养基中选育。结果紫外线照射30s的剂量下致死率适合做育种。在此基础上,诱变后选育出了一株高产菌株,编号9-15#,其摇瓶效价比原菌株提高了13.0%,上罐试生产提... 详细信息

目的改善产土霉素菌的生产特性。方法紫外线诱变、在含有2-脱氧-D-葡萄糖的培养基中选育。结果紫外线照射30s的剂量下致死率适合做育种。在此基础上,诱变后选育出了一株高产菌株,编号9-15#,其摇瓶效价比原菌株提高了13.0%,上罐试生产提高6.1%。结论紫外线照射结合2-脱氧-D-葡萄糖的培养基中筛选可以获得高产土霉素的龟裂链霉菌菌种。

关键词：土霉素紫外线 2-脱氧-D-葡萄糖龟裂链霉菌诱变育种

实施生态绿化,促进重庆外环高速公路的路域生态建设

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城市发展研究 2009年第1期16卷 80-84页

作者：谢怀建王昌贤重庆交通大学

通过对几种绿化的深入分析,提出了生态绿化包括了近自然绿化、去人工化植被恢复和抗污染的生态绿化等三种类型。以外环高速路域生态环境为据,论述重庆外环高速公路路域生态建设需要以推行降低污染的生态绿化为主进行绿化。

关键词：绿化生态绿化重庆外环高速路降低污染的绿化路域生态建设

寒区隧道不同排水形式下保温层作用效果及适用性研究

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现代隧道技术 2023年

作者：王志杰谢盛昊周飞聪王磊马志富杨昌贤林铭范文昊西南交通大学土木工程学院西南交通大学交通隧道工程教育部重点实验室中国铁路设计集团有限公司黑龙江铁路发展集团有限公司

本文以哈杜高速铁路鲜丰隧道为例，探究施作保温措施后洞内环境温度以及隧道围岩温度等变量综合影响下的隧道温度场，并结合围岩初始温度以及洞内温度提出寒区隧道排水系统结构形式影响分区，并可通过分区选定寒区隧道排水形式，保障寒... 详细信息

本文以哈杜高速铁路鲜丰隧道为例，探究施作保温措施后洞内环境温度以及隧道围岩温度等变量综合影响下的隧道温度场，并结合围岩初始温度以及洞内温度提出寒区隧道排水系统结构形式影响分区，并可通过分区选定寒区隧道排水形式，保障寒区隧道排水系统的安全与稳定。主要结论如下：1）同一条件下，设置保温层后排水系统各测点的温度值均有所不同程度的提高。2）设置保温层后，衬砌背后水管保温效果较好，而对侧边水沟及纵向水管保温作用效果有限。3）各排水形式的主要区别体现在中心（深埋）水沟内的温度。4）根据洞内环境温度以及隧道围岩温度可将寒区隧道排水形式分为3区，分别为A区（无保温）、B区（中心水沟-保温）以及C区（中心深埋水沟-保温）。

关键词：寒区隧道工程保温层排水结构影响分区

用密度泛函方法研究N-甲基吡咯烷酮与二硫化碳的反应

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化工学报 2004年第4期55卷 569-574页

作者：王宝俊魏贤勇谢克昌太原理工大学煤科学与技术教育部和山西省重点实验室山西太原030024 中国矿业大学化学工程学院江苏徐州221008

N 甲基吡咯烷酮 (NMP)和二硫化碳 (CS2 )在加压下发生热反应生成N 甲基吡咯烷 2 硫酮 .用密度泛函方法确定了该反应有两条平行的路径 ,获得了相关的 4个过渡态和 2个中间体的构型 ;在拟定了两步反应机理的基础上 ,确认了第一步反应为... 详细信息

N 甲基吡咯烷酮 (NMP)和二硫化碳 (CS2 )在加压下发生热反应生成N 甲基吡咯烷 2 硫酮 .用密度泛函方法确定了该反应有两条平行的路径 ,获得了相关的 4个过渡态和 2个中间体的构型 ;在拟定了两步反应机理的基础上 ,确认了第一步反应为速度控制步骤 ,计算了在 2 98K和 5 0 0K下两种反应路径的活化能和速率常数 .根据计算结果判断NMP羰基的α氢原子通过与羰基氧的分子内相互作用在反应中起重要作用 ,同时确认了反应区域为NMP的羰基碳和氧、α位上的碳和氢 ,以及CS2 中的碳原子和其中的一个硫原子所构成的两个并联的四元环 .

关键词：密度泛函 N-甲基吡咯烷酮二硫化碳机理活化能速率常数过渡态