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乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征

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第二军医大学学报 2002年第11期23卷 1179-1183页

作者：訾晓渊姚玉成熊俊金艳花叶煦亭李建秀刘红朱海英王新民倪文君胡以平余宏宇丛文铭第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 长征医院病理科东方肝胆外科医院病理科

目的:评价乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU生物学特征的稳定性。方法:以F5代乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、血清ELISA检测、Western印迹分析、免疫组织化学、血清DNA PCR、透射电镜和... 详细信息

目的:评价乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU生物学特征的稳定性。方法:以F5代乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、血清ELISA检测、Western印迹分析、免疫组织化学、血清DNA PCR、透射电镜和H-E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合、表达、复制和组织学变化。结果:F1代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因,肝组织中可检测到HBsAg、HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白,血清中HB-sAg和HBeAg的表达率分别为19.54％和3.39％,且在血清和肝组织中存在病毒DNA和病毒样颗粒;长期的病毒DNA整合、表达和复制可以引起转基因小鼠肝、肺等组织的病理性损伤。结论:乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O:)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA、血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征,并具有一定的组织学变化,作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠免疫组织化学病理学

联合外周血循环肿瘤细胞评估索拉非尼治疗肝细胞癌疗效？

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临床肿瘤学杂志 2016年第3期21卷 275-277页

作者：龙建云訾晓渊李静黄亮曹杰严以群第二军医大学附属东方肝胆外科医院肝外一科上海200438 第二军医大学干细胞与医学研究中心 200438

目的通过联合外周血循环肿瘤细胞(CTC)评估索拉非尼治疗肝细胞癌的疗效,提高对肝癌CTC临床应用的认识。方法本科室基于BIOMARKERBOX平台,利用独特差减富集技术—肿瘤标示物免疫荧光染色—肿瘤细胞染色体荧光原位杂交整合技术平台(SET-i ... 详细信息

目的通过联合外周血循环肿瘤细胞(CTC)评估索拉非尼治疗肝细胞癌的疗效,提高对肝癌CTC临床应用的认识。方法本科室基于BIOMARKERBOX平台,利用独特差减富集技术—肿瘤标示物免疫荧光染色—肿瘤细胞染色体荧光原位杂交整合技术平台(SET-i FISH)分离2例肝癌患者外周血,后将肿瘤标示物免疫荧光染色与染色体荧光原位杂交整合为同步进行的检测技术鉴别出CTC,并结合2例患者的临床表现及生存情况进行分析。结果肝癌CTC经SET-i FISH标记为CK-/DAPI+/FISH(CEP8单体)+/CD45-。本科室采用连续3天分离患者外周血(7.5 ml),病例1外周血中检测到CTC 2个,病例2外周血中未见CTC,病例2目前已无瘤生存13个月。结论联合外周血CTC评估索拉非尼治疗肝细胞癌的疗效可能成为一种有效、无创的液体评估手段,为肝癌临床诊治提供新的思路。

关键词：肝细胞癌循环肿瘤细胞索拉非尼

HBV preS2-S DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 286-289页

作者：巴月訾晓渊张南熊俊张树忠李文林李建秀吴逸明胡以平郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450052 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进... 详细信息

目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进行稳定表达;以此重组质粒免疫小鼠,ELISA方法检测免疫小鼠抗HBs抗体浓度。结果:构建了HBV preS2 S 基因的表达质粒pcDNAS2 S,该表达质粒可在7721 细胞中稳定高效表达;免疫接种小鼠2 周后抗HBs抗体浓度明显升高,接种后第4周布比卡因处理组小鼠抗HBs抗体的浓度达到峰值161.4 mIU/ml,布比卡因非处理组第5周抗HBs抗体的浓度可达133.7 mIU/ml。结论:所构建的pcDNAS2 S表达质粒能有效表达并诱导小鼠体液免疫应答。

关键词：肝炎病毒乙型抗原,表面免疫抗体生成

HBV转基因在C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU3小鼠基因组中的整合分析

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 271-274页

作者：訾晓渊张南巴月张树忠姚玉成熊俊李建秀王新民胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室

目的:分析HBV转基因在乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系基因组中的整合特征.方法:以F6～F17代乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、Southern印迹和DNA测序的方法,分析HBV转基因在该品系... 详细信息

目的:分析HBV转基因在乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系基因组中的整合特征.方法:以F6～F17代乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、Southern印迹和DNA测序的方法,分析HBV转基因在该品系转基因小鼠基因组中的整合特征.结果:PCR分析显示,F6～F17代乙肝转基因小鼠基因组中均已稳定整合了相同拷贝数的HBV转基因,整合的HBV DNA可通过生殖系在世代间稳定遗传.整合在转基因小鼠基因组中的HBV DNA含有HBVpres、s、c、x基因,Southern印迹证实HBV转基因含有全长HBV基因组DNA,DNA测序结果表明,该品系转基因小鼠所整合的转基因为adr亚型的HBV DNA.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠基因组中均整合有adr亚型的全长HBV基因组DNA,从DNA水平证实该转基因小鼠品系已具备了乙肝实验动物模型的基本条件.

关键词：病毒乙型肝炎小鼠转基因整合

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细胞工程翻转课堂的设计与实施

基础医学教育 2018年第12期20卷 1062-1064页

作者：张红霞职晓松李建秀陈费朱海英胡以平訾晓渊海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室上海200433

翻转课堂教学模式近些年来在高校中逐渐推广开来,其核心是以学生为中心,目标是培养学生的自主学习能力和创新能力。细胞工程是生物技术本科专业开设的理论性和实践性高度结合的课程,其目的是让学生具备初步的实验技术水平和科研思维能... 详细信息

翻转课堂教学模式近些年来在高校中逐渐推广开来,其核心是以学生为中心,目标是培养学生的自主学习能力和创新能力。细胞工程是生物技术本科专业开设的理论性和实践性高度结合的课程,其目的是让学生具备初步的实验技术水平和科研思维能力。根据学校促进教育改革的需要,并从学生对自主学习的实际需求出发,设计并实施了细胞工程翻转课堂,取得了良好的教学效果,为今后的教学实践提供了良好的借鉴。

关键词：细胞工程翻转课堂课程设计教学改革

C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU转基因小鼠肝脏的组织病理学观察

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第二军医大学学报 2005年第3期26卷 283-285页

作者：徐军訾晓渊余宏宇何金刘惠敏姚玉成李建秀张南巴月胡以平第二军医大学长征医院病理科上海200003 第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433

目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征。方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H E染色,并选取20 例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标... 详细信息

目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征。方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H E染色,并选取20 例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标本,免疫组化原位鉴定白细胞分化抗原的肝内分布。结果:37.5%的转基因小鼠肝脏出现人慢性轻度乙型肝炎样的病理改变,病变率随月龄增大显著增高;32.7%有更轻微的非特异性炎症反应;肝内浸润的单个核细胞多数为CD3+、CD4+细胞,未发现CD57+、CD8+细胞浸润。结论:乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏可出现不同程度的病理改变,与人慢性轻度乙肝组织学相类似。

关键词：肝炎病毒乙型小鼠转基因病理学肝

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医学细胞生物学课程体系改革探讨

山西医科大学学报（基础医学教育版） 2011年第6期13卷 505-508页

作者：苏娟李建秀张红霞朱海英张树忠訾晓渊胡以平第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

细胞生物学的理论知识已经渗透到医学科学的各个领域,是医学科学的基本组成部分,也是医学科学高水平发展的重要基础。随着医学科学和细胞生物学本身的快速发展,医学教育对于细胞生物学的需求日益增加,为了使医学细胞生物学教学体系适应... 详细信息

细胞生物学的理论知识已经渗透到医学科学的各个领域,是医学科学的基本组成部分,也是医学科学高水平发展的重要基础。随着医学科学和细胞生物学本身的快速发展,医学教育对于细胞生物学的需求日益增加,为了使医学细胞生物学教学体系适应我国医学教育的发展,第二军医大学细胞生物学教研室本着培养创新型人才、提高教育质量的思想,建立了一种新的医学细胞生物学课程体系。该教学体系的核心内容是将细胞生物学从内涵上融入医学科学教育,既有利于学生的学,又有利于教师的教,保证了"教"与"学"的有效性。

关键词：医学细胞生物学教学改革课程体系教学理念

环状RNA-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及其机制

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山东医药 2019年第35期59卷 1-5页

作者：时浩清訾晓渊张春雷杨琦孙颖浩海军军医大学附属长海医院

目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形... 详细信息

目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形成、凋亡、侵袭及迁移能力。免疫共沉淀实验筛选与circRNA-1565结合的miRNA分别为miR-21和miR-153,采用双荧光素酶报告基因实验观察circRNA-1565对miR-21和miR-153的调控作用。将PC-3细胞分为si445组、si445+miR-21 inhibitor组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组,分别转染si445、si445+miR-21 inhibitor、si445+miR-153 inhibitor及阴性对照siRNA,并检测细胞侵袭、迁移能力。采用Western blotting法检测si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、蜗牛家族转录抑制子1(SNAIL1)蛋白表达。结果观察组与对照组不同时间点细胞增殖OD值、克隆形成个数、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均>0.05),观察组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均低于对照组(P均0.05。si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞PI3K蛋白相对表达量依次升高(P均0.05。结论circRNA-1565可促进前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移,其机制可能与竞争性结合miR-153并沉默其下游靶蛋白PI3K表达有关。

关键词：前列腺癌 PC-3细胞环状RNA-1565 微小RNA-153 磷脂酰肌醇3-激酶

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医学细胞生物学实验教学改革的探索与实践

山西医科大学学报（基础医学教育版） 2010年第1期12卷 49-52页

作者：何志颖朱海英陈元晓訾晓渊谢东甫胡以平第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室上海200433 昆明医学院细胞生物学及遗传学教研室

突出细胞生物学实验课教学的主体地位,实验课课程设置以验证性实验、综合性实验及创新性实验相结合,激发学生的积极性和主观能动性,培养学生的创新思维和分析问题解决问题的综合实践能力,取得了良好的教学效果。

关键词：细胞生物学实验课教学改革