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贝伐珠单抗联合奥希替尼协同抑制非小细胞肺癌细胞增殖及机制

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河南医学研究 2024年第9期33卷 1561-1566页

作者：薛鸣李春青楚蕾蕾刘佟武莉萍新乡市中心医院、新乡医学院第四临床学院放疗科河南新乡453000 新乡市中心医院、新乡医学院第四临床学院肿瘤内科河南新乡453000

目的研究贝伐珠单抗(Bev)联合奥西替尼(Osi)对人非小细胞肺癌细胞株(A549)的增殖抑制作用、诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,并分成4组:空白对照组、Bev组、Osi组及联合处理组(Bev+Osi)。利用CCK-8实... 详细信息

目的研究贝伐珠单抗(Bev)联合奥西替尼(Osi)对人非小细胞肺癌细胞株(A549)的增殖抑制作用、诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,并分成4组:空白对照组、Bev组、Osi组及联合处理组(Bev+Osi)。利用CCK-8实验检测各组处理后的细胞增殖情况;细胞凋亡情况、活性氧水平变化通过流式细胞术实验检测;细胞凋亡相关蛋白和信号通路相关蛋白的表达通过蛋白免疫印迹法进行检测。结果CCK-8结果显示,联合处理组对A549细胞的增殖抑制作用最强,对人胚肺成纤维MRC-5细胞几乎无毒副作用,与单独用药处理组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示,联合处理组对A549细胞的诱导凋亡作用更强,较2个单药处理组分别高出45.7%和42.6%;联合处理组能够上调A549细胞中的活性氧水平,加入N-乙酰半胱氨酸后,诱导凋亡能力恢复到2个单药处理组相近的水平。蛋白免疫印迹法结果显示,联合处理组能够抑制ERK的磷酸化水平,上调p38的磷酸化水平。结论Bev与Osi联合使用能够上调细胞中ROS水平,调控p38/ERK信号通路,降低线粒体膜电位,引发A549细胞凋亡,联合使用具有明显的优势,有望成为肺癌治疗领域的重要策略。

关键词：非小细胞肺癌贝伐珠单抗奥西替尼联合用药活性氧

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番茄青枯病拮抗菌的筛选及防治效果

海南大学学报（自然科学版） 2024年第1期42卷 30-36页

作者：王位薛鸣雷婷越安馨媛范鹤龄张荣萍海南大学热带作物学院海南海口570228 海南大学植物保护学院海南海口570228

为了筛选出具有抑制青枯雷尔氏菌作用的拮抗菌,采用形态指标、生理生化特征以及16S rRNA序列分析等方法对菌株进行了研究,并且通过阴性对照(CK)、番茄青枯病菌阳性胁迫处理(RB)和拮抗菌K+番茄青枯病菌处理(KRB)3个盆栽番茄土壤样品进行... 详细信息

为了筛选出具有抑制青枯雷尔氏菌作用的拮抗菌,采用形态指标、生理生化特征以及16S rRNA序列分析等方法对菌株进行了研究,并且通过阴性对照(CK)、番茄青枯病菌阳性胁迫处理(RB)和拮抗菌K+番茄青枯病菌处理(KRB)3个盆栽番茄土壤样品进行了防卫反应基因的表达研究.结果表明,拮抗菌K5菌落呈乳白色且表面光滑,经革兰氏染色为阳性,初步确定为芽孢杆菌,通过分子鉴定后确定为贝莱斯芽孢杆菌;番茄青枯病的盆栽防治效果达到23.20%,K5菌株在接种48 h后能诱导番茄根部抗病基因表达,CTR、ETR基因的表达量提高,表明K5通过植物抗病相关基因的表达,能诱导植物产生抗病性,并能有效地抑制青枯病菌的繁殖,从而达到防治青枯病的作用.

关键词：番茄青枯病拮抗菌筛选鉴定

棘孢木霉DQ-1 Tri-milR535跨界靶向番茄Chit4逃避寄主免疫反应的调控机理研究

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棘孢木霉DQ-1 Tri-milR535跨界靶向番茄Chit4逃避寄主免疫反应的...

作者：薛鸣海南大学

学位级别：硕士

木霉(Trichoderma spp.)是一种重要的生防真菌,在自然界中分布广泛。木霉菌可在植物根际土壤中存活,也可以定殖于植物根系表面和质外体,通过释放生物活性分子与与植物建立一个互作共生关系,促进植物根系对营养物质的吸收,诱导植物产生... 详细信息

木霉(Trichoderma spp.)是一种重要的生防真菌,在自然界中分布广泛。木霉菌可在植物根际土壤中存活,也可以定殖于植物根系表面和质外体,通过释放生物活性分子与与植物建立一个互作共生关系,促进植物根系对营养物质的吸收,诱导植物产生抗病性。本实验室前期通过高通量测序技术,筛选出一些在木霉-番茄互作过程中高丰度表达的mi RNA-like-RNA(milRNA),并从中获得一个可能跨界靶向番茄几丁质酶基因的特异表达的Tri-milR535。本文采用基因功能研究技术和显微观察等技术研究Tri-milR535靶向番茄几丁质酶基因逃避宿主免疫反应的分子机制,其具体结果如下:1.为了研究Tri-milR535表达和靶基因,通过实时荧光定量技术,选取11种不同的植物和微生物种类,明确了Tri-milR535只在棘孢木霉DQ-1特异表达,在其它物种不存在该小RNA表达,并且在木霉-番茄互作的早期阶段开始上调表达,在互作24小时表达量最高,然后开始下调表达;进一步通过生物信息学预测该小RNA靶向番茄的几丁质酶基因Chit4,采用q RT-PCR技术证实Chit4与Tri-milR535在木霉-番茄互作过程中的表达呈现负相关;进一步通过烟草共表达技术表明Tri-milR535可以抑制Chit4基因表达;利用5’-RLM RACE技术明确了Tri-milR535可以与Chit4结合位点的第6/7位碱基进行剪切,这些结果表明Tri-milR535可以靶向Chit4抑制该基因的表达,并且受时间精细调控。2.为了研究Tri-milR535生物学功能,通过同源重组、过表达以及短串联靶标技术(STTM)获得棘孢木霉DQ-1 Tri-milR535敲除、过表达和沉默突变体;采用荧光显微观察和木霉生物量的检测发现,与野生型相比,敲除突变体和沉默突变株在番茄根部的定殖能力明显减弱,而过表达突变体在番茄根部的定殖能力则明显增强,这可能与Tri-milR535的过表达抑制了番茄Chit4的表达,有利于木霉菌的定殖。以上结果表明Tri-milR535通过靶向抑制Chit4的表达,提高了棘孢木霉DQ-1在番茄根部的定殖。3.通过生物信息学分析了Chit4与内几丁质酶家族间的遗传进化关系,发现Chit4分别与番茄CHI3、CHI9和拟南芥的At＿CHI52、At＿CHI61基因存在高度的相似性,推测该基因可能与At＿CHI52、At＿CHI61有相似的功能,属于抗病相关蛋白(PR)。进一步通过Chit4原核表达,发现该蛋白在15μM、10μM、5μM、1μM的浓度下均可抑制棘孢木霉DQ-1的孢子萌发,并且抑制效果随着蛋白质浓度的升高而变强,表明Chit4具有抑菌作用。4.为了进一步研究Chit4基因功能,利用Crispr-Cas9基因编辑技术获得Chit4敲除株系,与野生型相比,发现敲除突变体的抗病性减弱,并且有利于棘孢木霉DQ-1在番茄根部定殖。然而,Chit4过表达突变株与野生型相比,其番茄根部胼胝质积累增多,抗病性增强,并发现棘孢木霉DQ-1在过表达株系定殖速度下降且定殖量显著减少。以上结果表明Chit4属于抗病相关蛋白,可以抑制棘孢木霉DQ-1的菌丝生长和在番茄根部定殖。综合以上结果,表明木霉产生特异性的Tri-milR535,可以跨界靶向番茄几丁质酶基因Chit4逃避宿主免疫反应。

关键词： milRNA 互作几丁质酶逃避寄主免疫跨界靶向

突发公共事件中应急征用的法律问题研究——以三个应急征用事件为例

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突发公共事件中应急征用的法律问题研究——以三个应急征用事件为...

作者：薛鸣贵州财经大学

学位级别：硕士

2019年底,湖北武汉出现多例新冠肺炎疫情(以下简称新冠疫情)感染病例,此次新冠疫情爆发突然并迅速蔓延至全国,肆虐的新冠疫情给国家、社会、人民造成严重损害。据此,中央和地方迅速做出决定并采取各种有效应急征用措施进行应对,其对人... 详细信息

2019年底,湖北武汉出现多例新冠肺炎疫情(以下简称新冠疫情)感染病例,此次新冠疫情爆发突然并迅速蔓延至全国,肆虐的新冠疫情给国家、社会、人民造成严重损害。据此,中央和地方迅速做出决定并采取各种有效应急征用措施进行应对,其对人员、学校、应急物资等进行适当限制,为新冠疫情防控和阻击提供了强有力的保障。应急征用作为抗击新冠疫情事件中的紧急行政措施,是国家行使紧急权的有利证明。应急征用措施作为抑制突发公共事件无序扩散的前置手段,在新冠疫情处置与防控过程中扮演着重要角色,但当前突发公共事件背景下应急征用措施的开展在规范与具体实践中存在较多疏漏。反思此次新冠疫情期间实施的应急征用措施,在肯定其采取多种应急征用措施进行有效防控的同时,也要看到此次新冠疫情期间应急征用事件中呈现出相关征用主体混乱、征用对象不明确、征用程序不严格、征用监督不到位等亟待解决的法律问题,这与现代法治社会倡导依法防控的法治要求尚存有一定差距。因此,有必要在疫情防控与应急管理法治建设主题下进行反思和检视,对此次新冠疫情期间暴露的征用行为乱象涉及的法律问题进行深入研究分析。本文尝试从新冠疫情期间报道的突发公共事件中应急征用事件入手,梳理典型事件反映出的法律问题并提出厘清应急征用主体及权限、明确应急征用对象、完善应急征用程序、加强应急征用监督、规范征用行为四个层面对策建议来重构相关应急机制,目的在于为有效保护公民权利以及逐步实现突发公共事件中新冠疫情防控工作能在法制轨道上有序开展提供参考。

关键词：突发公共事件应急征用主体应急征用对象应急征用程序应急征用监督

传统文化元素在书籍装帧设计中的应用策略研究

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鞋类工艺与设计 2024年第10期4卷 64-66页

作者：薛鸣一常州刘国钧高等职业技术学校江苏常州213025

随着社会的发展和文化的多元化,传统文化元素在书籍装帧设计中应用广泛,不仅能够增添书籍的文化底蕴,还能提升读者的阅读体验。本文在明确传统文化元素与书籍装帧设计内涵的基础上,分析传统文化元素在书籍装帧设计中的应用价值,并围绕... 详细信息

随着社会的发展和文化的多元化,传统文化元素在书籍装帧设计中应用广泛,不仅能够增添书籍的文化底蕴,还能提升读者的阅读体验。本文在明确传统文化元素与书籍装帧设计内涵的基础上,分析传统文化元素在书籍装帧设计中的应用价值,并围绕传统文化元素在书籍装帧设计中的应用策略展开研究,旨在探索如何将传统文化元素与现代设计理念相结合,为书籍装帧设计带来新的创意与灵感。

关键词：传统文化元素书籍装帧设计应用策略

江苏地域特色工艺美术在书籍整体设计中的应用与研究

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鞋类工艺与设计 2024年第11期4卷 69-71页

作者：薛鸣一常州刘国钧高等职业技术学校江苏常州213025

工艺美术作为一种实用性与审美性相结合的艺术形式,以其独特的魅力与深厚的文化底蕴,不仅为书籍设计提供了丰富的灵感和素材,而且也为书籍整体设计注入了浓郁的地域特色、增添艺术魅力、增强文化内涵。基于此,本文在分析江苏地域特色与... 详细信息

工艺美术作为一种实用性与审美性相结合的艺术形式,以其独特的魅力与深厚的文化底蕴,不仅为书籍设计提供了丰富的灵感和素材,而且也为书籍整体设计注入了浓郁的地域特色、增添艺术魅力、增强文化内涵。基于此,本文在分析江苏地域特色与工艺美术内涵的基础上,针对江苏地域特色工艺美术在书籍整体设计中的应用情况,分析了其在书籍整体设计中的应用价值,并以此为基础探索江苏地域特色工艺美术在书籍装帧设计中的应用策略,旨在为书籍设计行业提供更多元化、更具地域特色的设计思路。

关键词：江苏地域特色工艺美术书籍设计

肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染病原菌及PCT和IL-16与TGF-β水平

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中华医院感染学杂志 2023年 332-336页

作者：薛鸣帖永新张如楠陈利军武莉萍新乡市中心医院(新乡医学院第四临床学院)呼吸科新乡市中心医院(新乡医学院第四临床学院)放疗科

目的分析肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染患者病原菌及降钙素原(PCT)、白细胞介素-16(IL-16)、转化生长因子-β(TGF-β)水平。方法选择2020年3月-2022年12月新乡市中心医院收治的接受放疗的肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染患者10... 详细信息

目的分析肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染患者病原菌及降钙素原(PCT)、白细胞介素-16(IL-16)、转化生长因子-β(TGF-β)水平。方法选择2020年3月-2022年12月新乡市中心医院收治的接受放疗的肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染患者108例为研究组,并根据肺炎程度将研究组分为1级组(n=17)、2级组(n=56)和3～4级组(n=35),选取同期治疗的148例肺癌患者为对照组,分析研究组患者病原菌情况,比较各组血清PCT、IL-16、TGF-β水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清PCT、IL-16、TGF-β对肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染的预测价值。结果 108例肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染患者中,共检出病原菌129株,其中革兰阴性菌72株占55.81%,革兰阳性菌50株占38.76%,真菌7株占5.43%,以肺炎克雷伯菌,金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌为主;研究组PCT、IL-16、TGF-β水平高于对照组(P<0.05);3～4级组血清PCT、IL-16、TGF-β高于1级组和2级组(P<0.05),2级组高于1级组(P<0.05);PCT、IL-16、TGF-β及三者联合预测肺癌放疗后放射性肺炎并肺部感染的曲线下面积分别为0.928、0.888、0.886和0.965。结论肺癌放疗后放射性肺炎合并肺部感染患者病原菌以革兰阴性菌为主,且患者PCT、IL-16、TGF-β水平显著上升,三者联合检测有利于提高肺癌放疗后放射性肺炎并肺部感染的预测价值。

关键词：肺癌放射性肺炎肺部感染病原菌降钙素原转化生长因子-β

基于QuEChERS的超高效液相色谱-串联质谱法快速测定果蔬中双酚类物质

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分析化学 2022年第5期50卷 810-821页

作者：赵斌谭学蓉付瑜薛鸣许东海梁秀川张丽广元市疾病预防控制中心杭州市疾病预防控制中心

建立了超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定水果(橙子、梨、猕猴桃、葡萄)和蔬菜(豇豆、韭菜、土豆、西蓝花)中8种双酚类物质(BPs)的分析方法。以QuEChERS处理技术为基础，选用乙腈为提取剂，NaAC为萃取盐，考察... 详细信息

建立了超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定水果(橙子、梨、猕猴桃、葡萄)和蔬菜(豇豆、韭菜、土豆、西蓝花)中8种双酚类物质(BPs)的分析方法。以QuEChERS处理技术为基础，选用乙腈为提取剂，NaAC为萃取盐，考察了基质效应(ME)和萃取回收率(RE)对过程效率(PE)的影响，选择33 mg N-丙基乙二胺(PSA)、 33 mg石墨化碳黑(GCB)和10 mg C混合吸附剂为净化剂。以甲醇和0.1 mmol/L NHHCO溶液为流动相，采用Waters BEH C(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱分离；采用电喷雾离子源，在负离子、多反应监测模式下，使用同位素内标法进行定量检测分析。结果表明，在8 min内，可完成8种BPs的色谱分离，在线性范围内线性关系良好，相关系数(R~2)均大于0.9990,检出限(LOD)为0.01～0.10μg/kg,定量限(LOQ)为0.03～0.35μg/kg;在不同果蔬基质样品中，8种BPs的平均加标回收率为67.2%～117.8%,相对标准偏差(RSD)为0.1%～8.3%。采用本方法检测广元市售果蔬中BPs的污染状况，发现污染物主要为双酚A和双酚S,检出率分别为80.0%和47.5%,浓度分别在未检出～31.84μg/kg和未检出～15.75μg/kg之间。本方法可用于果蔬中8种BPs的快速提取、净化、定性与定量检测，具有操作简单、灵敏度高、成本低和绿色环保等优势，适合于大批量果蔬中8种双酚类化合物的日常筛查与确证。

关键词： QuEChERS 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱双酚类物质果蔬

橡胶树两种叶部病害拮抗木霉T008的筛选、鉴定及室内防效评价

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中国生物防治学报 2022年第1期38卷 125-132页

作者：薛鸣战鑫王睿邢梦玉刘铜侯巨梅海南大学热带农林生物灾害教育部重点实验室海口570228 海南省农用生物制剂创制工程研究中心海口570228

采用平板稀释法从海南橡胶园16份根际土壤中分离获得6株拮抗木霉,通过对峙培养、非挥发性和挥发性物质及几丁质酶活测定,从中筛选出一株对橡胶树胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和多主棒孢菌Corynespora cassiicola均有较好... 详细信息

采用平板稀释法从海南橡胶园16份根际土壤中分离获得6株拮抗木霉,通过对峙培养、非挥发性和挥发性物质及几丁质酶活测定,从中筛选出一株对橡胶树胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和多主棒孢菌Corynespora cassiicola均有较好抑制作用的菌株T008;采用分子生物学鉴定方法,结合形态学特征,明确了拮抗菌T008为棘孢木霉Trichoderma asperellum。通过室内防效测定,棘孢木霉T008预防处理对胶孢炭疽菌和多主棒孢菌的抑制率分别达61.02%和58.60%。该研究结果可作为防治橡胶树炭疽病和棒孢霉落叶病的潜力生防菌株。

关键词：木霉菌橡胶病害几丁质酶形态学鉴定分子鉴定