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优质早熟梨省力化高效栽培技术

农家致富 2022年第23期 26-27页

作者：蔺经江苏省农业科学院果树研究所 210014

优质早熟梨省力化高效栽培技术以种植“苏翠”系列早熟梨新品种和拱形棚架栽培技术、风送喷雾防治病虫害技术为核心内容,配套宽行种植、果园生草以及病虫害绿色综合防控等技术,达到梨果生产优质、省力、高效的目的。应用该技术可节省人... 详细信息

优质早熟梨省力化高效栽培技术以种植“苏翠”系列早熟梨新品种和拱形棚架栽培技术、风送喷雾防治病虫害技术为核心内容,配套宽行种植、果园生草以及病虫害绿色综合防控等技术,达到梨果生产优质、省力、高效的目的。应用该技术可节省人工成本25%左右,降低农药成本20%,优果率提高90%以上,亩均增效30%以上。

关键词：省力化农药成本防治病虫害果园生草早熟梨高效栽培技术风送喷雾梨果生产

早熟砂梨‘苏翠1号’与其亲本‘翠冠’‘华酥’成熟果实差异代谢产物及差异基因比较分析

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园艺学报 2022年第3期49卷 493-508页

作者：王宏杨王莉蔺经杨青松李晓刚盛宝龙常有宏江苏省农业科学院果树研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室南京210014 南京农业大学园艺学院南京210095

‘苏翠1号’梨因其极早熟、汁多味甜、肉质细脆而深受广大消费者喜欢。为了解‘苏翠1号’成熟果实主要代谢产物及代谢通路相关基因表达情况,探究其果实优异性状形成的物质和分子基础,对‘苏翠1号’及其亲本‘翠冠’和‘华酥’成熟果实... 详细信息

‘苏翠1号’梨因其极早熟、汁多味甜、肉质细脆而深受广大消费者喜欢。为了解‘苏翠1号’成熟果实主要代谢产物及代谢通路相关基因表达情况,探究其果实优异性状形成的物质和分子基础,对‘苏翠1号’及其亲本‘翠冠’和‘华酥’成熟果实样本进行代谢组和转录组测序分析。代谢组分析发现,3个品种间,前25个差异代谢产物主要包括有机酸、碳水化合物、氨基酸、甘油磷酸脂、脂肪酸和绿原酸。HPLC测定表明,蔗糖含量在‘苏翠1号’中最高,葡萄糖含量在‘翠冠’中最高,果糖含量在‘苏翠1号’和‘翠冠’中相似,略高于‘华酥’,山梨醇含量在‘苏翠1号’和‘华酥’中均显著低于‘翠冠’;苹果酸含量在‘苏翠1号’中最高,柠檬酸含量在‘华酥’中最高,‘苏翠1号’和‘华酥’总酸含量相近,均高于‘翠冠’。氨基酸含量分析表明,‘苏翠1号’的氨基酸总含量及天冬氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸含量显著高于‘翠冠’和‘华酥’。转录组GO和KEGG分析表明,相较于‘翠冠’和‘华酥’,‘苏翠1号’有机底物分解过程、脂质代谢、有机酸生物合成、羧酸生物合成、多糖代谢等生物学过程及代谢途径显著富集。进一步挖掘差异基因发现,糖代谢中的SPS、山梨醇代谢中的S6PDH、SDH,TCA循环中的FUM1、ICDH、PDH、OGDHL,氨基酸代谢途径中的GAT、GLSN、LASPO、SAMS,以及脂肪酸代谢中的DGK1、ACCA、KASC2、ADH、PLDA等基因在‘苏翠1号’中显著高表达。这些基因可能与‘苏翠1号’更活跃的蔗糖、山梨醇、氨基酸、甘油磷酯代谢及TCA循环有关。

关键词：砂梨果实品质差异代谢产物差异基因 qRT-PCR

早熟砂梨苏翠1号与其亲本成熟期果皮差异代谢产物鉴定及相关差异基因表达分析

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果树学报 2022年第11期39卷 1989-2006页

作者：杨王莉李晓刚杨青松蔺经盛宝龙常有宏王宏南京农业大学园艺学院南京210095 江苏省农业科学院果树研究所·江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室南京210095

【目的】明确早熟砂梨苏翠1号与其母本华酥和父本翠冠成熟期果实的果皮差异代谢产物和差异基因,解析苏翠1号果皮优良性状形成的物质和分子基础。【方法】以苏翠1号(无或极少锈)和其父本翠冠(有锈)、母本华酥(无锈)为试材,利用广靶代谢... 详细信息

【目的】明确早熟砂梨苏翠1号与其母本华酥和父本翠冠成熟期果实的果皮差异代谢产物和差异基因,解析苏翠1号果皮优良性状形成的物质和分子基础。【方法】以苏翠1号(无或极少锈)和其父本翠冠(有锈)、母本华酥(无锈)为试材,利用广靶代谢组学及高通量测序技术对3个品种成熟期果实的果皮进行代谢产物测定及转录组测序分析。通过qRT-PCR方法对差异基因进行表达水平验证。【结果】代谢组结果显示差异代谢物主要是酚酸类、脂质类和黄酮类。转录组结果显示在苯丙素合成途径,角质、栓质和蜡质生物合成途径及黄酮类生物合成途径显著富集。与翠冠比较,苏翠1号果皮中苯丙素合成途径关键酶的相关基因POD、4CL以及角质、栓质和蜡质合成途径上的HHT1、CYP86A1基因被抑制表达,CYP86B1、CER1和CAD基因显著上调,类黄酮合成途径CHS、DFR、CYP75B1、F3H和ANS基因在苏翠1号中均下调。qRT-PCR结果与测序结果相符。【结论】苯丙素合成途径以及角质、栓质和蜡质合成途径在梨果锈产生中起到了重要作用;而高黄酮醇可能使苏翠1号具有良好的耐贮性。

关键词：砂梨苏翠1号果皮转录组-代谢组联合分析 qRT-PCR

全基因组DNA甲基化和转录组联合分析鉴定杜梨耐盐相关转录因子

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中国农业科学 2023年第7期56卷 1377-1390页

作者：李慧张雨峰李晓刚王中华蔺经常有宏江苏省农业科学院果树研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室南京林业大学生物与环境学院

【目的】鉴定不同杜梨株系根中响应盐胁迫信号的相关转录因子，分析盐胁迫下基因序列DNA甲基化变化与基因表达改变之间的关系，探讨参与调控不同杜梨株系耐盐能力的转录因子成员。【方法】以杜梨耐盐株系和普通株系为试材，在苗期使用20... 详细信息

【目的】鉴定不同杜梨株系根中响应盐胁迫信号的相关转录因子，分析盐胁迫下基因序列DNA甲基化变化与基因表达改变之间的关系，探讨参与调控不同杜梨株系耐盐能力的转录因子成员。【方法】以杜梨耐盐株系和普通株系为试材，在苗期使用200 mmol·L-1NaCl对90日龄组培生根苗进行水培处理，以Hoagland营养液为对照。利用火焰石墨炉原子吸收光谱仪测定钠离子含量；利用全基因组DNA甲基化和转录组测序技术从表观遗传修饰和转录调控水平对盐胁迫下转录因子进行生物信息学分析；最后用McrBC-PCR和qPCR对差异转录因子进行验证。【结果】外源NaCl处理24 h后，杜梨植株中钠离子含量显著增加，其中耐盐株系的增加幅度比普通株系小，为普通株系钠含量的73.1%，但根中积累的钠是普通株系含量的1.1倍；杜梨根中检测到69类共2 682个转录因子的表达，盐胁迫后243个转录因子在两个株系中都发生了差异表达，包括AP2/ERF(37个)、bHLH(19个)、bZIP(7个)、HD-Zip(10个)、MYB(30个)、NAC(18个)、WRKY(8个)和ZFP(23个)等家族成员；盐胁迫后，耐盐株系基因组中转录因子甲基化水平下降，而普通株系转录因子甲基化水平上升，其发生DNA差异甲基化区域主要在基因启动子位置，差异甲基化类型主要为mCHH，占mCG、mCHG、mCHH三种类型总和的93%以上。AP2/ERF、bHLH、DREB、GRAS、GT因子、HB Zip、MYB、NAC、Trihelix和Zinc finger ZFP家族的23个转录因子响应盐胁迫表达量上调而甲基化水平降低，可能参与调节钠在根中的吸收和积累。对部分候选基因的表达模式和启动子区域分别进行实时荧光定量(qPCR)和甲基化依赖型限制性内切酶PCR(McrBC-PCR)，验证了生物信息学分析结果。【结论】盐胁迫后在两个杜梨株系根中均差异表达的转录因子数目为243个，其中8个转录因子(PbERF2、PbGT3、PbZAT10.1、PbSCL33、PbDREB1、PbZAT10.2、PbERF53、PbNAC72)DNA序列的甲基化改变与基因转录水平变化呈负相关，研究结果为揭示转录因子参与不同杜梨株系耐盐能力调控的分子机制提供了依据。

关键词：杜梨盐胁迫转录因子 DNA甲基化转录组

杜梨PbPEAMT的克隆、序列分析及表达特征

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植物生理学报 2012年第5期48卷 449-455页

作者：李慧丛郁常有宏蔺经盛宝龙江苏省农业科学院园艺研究所南京210014 国家农业科技华东(江苏)创新中心--高效园艺作物遗传改良实验室南京210014 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008

采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增法和长片段PCR技术,从杜梨幼苗中获得1个磷酸乙醇胺N-甲基转移酶基因(Pb-PEAMT),运用生物信息学方法分析它的序列特点,并通过跨内含子引物进行半定量RT-PCR研究其在非生物胁迫下的表达情况。结果表明:PbPE... 详细信息

采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增法和长片段PCR技术,从杜梨幼苗中获得1个磷酸乙醇胺N-甲基转移酶基因(Pb-PEAMT),运用生物信息学方法分析它的序列特点,并通过跨内含子引物进行半定量RT-PCR研究其在非生物胁迫下的表达情况。结果表明:PbPEAMT基因编码区DNA序列长为3320bp,由11个外显子和10个内含子组成,cDNA序列长1479bp,推导的多肽包括2个II型甲基转移酶保守结构域,与蓖麻PEAMT蛋白相似性最高(86%),亲缘关系最近。PbPEAMT基因在杜梨幼苗根和叶中均为诱导型表达,100mmol.L-1氯化钠、10%(W/V)聚乙二醇、180mmol.L-1甘露醇或20μmol.L-1脱落酸处理后PbPEAMT表达水平上升,表明PbPEAMT对盐碱、干旱和渗透胁迫存在表达响应,可能参与ABA介导的逆境信号转导途径。

关键词：杜梨磷酸乙醇胺N-甲基转移酶基因克隆表达特征

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日本新育梨树优良品种介绍

江苏农业科学 2003年第6期31卷 73-74页

作者：蔺经盛宝龙常有宏江苏省农业科学院园艺研究所江苏南京210014

日本梨树新品种选育工作进展快,近年来各级育种单位相继选育出了许多新的优良品种,尤其是梨自交亲和品种的选育已取得了很大进展.我国近几年掀起了引种日本梨的热潮,笔者曾于2002年6～12月对日本果树进行了为期半年的交流考察,本文将了... 详细信息

日本梨树新品种选育工作进展快,近年来各级育种单位相继选育出了许多新的优良品种,尤其是梨自交亲和品种的选育已取得了很大进展.我国近几年掀起了引种日本梨的热潮,笔者曾于2002年6～12月对日本果树进行了为期半年的交流考察,本文将了解到的16个日本新育梨树优良品种作简要介绍,仅供引种时参考.

关键词：日本梨树新品种特性

杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白PbCBL10基因的克隆和表达特性研究

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果树学报 2012年第4期29卷 550-556页

【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白（CalcineurinB—likeprotein，CBL）基因的序列特征和表达特点，【方法】以杜梨幼苗为试材，运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明．PbCBLIO基因... 详细信息

【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白（CalcineurinB—likeprotein，CBL）基因的序列特征和表达特点，【方法】以杜梨幼苗为试材，运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明．PbCBLIO基因编码区cDNA长度为801bp，编码的多肽由266个氨基酸组成。该多肽预测的等电点为4．56，估计的相对分子质量为30．45ku。其对应基因组DNA序列长1983bp，包括9个外显子和8个内含子。通过PSORT进行亚细胞定位分析发现PbCBLl0蛋白位于质膜上的几率最大。PbCBLIO基因编码的多肽具有4个钙离子结合域EF手形结构和1个钙调磷酸酶A亚基结合位点。PbCBLl0与番茄S1CBLIO（NP_001239045）和拟南芥AtCBLl0（NP_195026）蛋白间的同源性较高，分别为82％和77％，并与AtCBL10亲缘关系最近。PbCBL10基因在杜梨幼苗根、茎和叶片中均为诱导型表达，50～200mmol·L^（-1）CaCl2、20μmol·L^（-1）ABA、100mmol·L^（-1）NaCl、10％（w／v）PEG6000或180mmol·L^（-1）甘露醇处理后其表达量明显上调。【结论】PbCBLIO基因具备植物CBL基因家族的固有特征，能够响应胞内钙浓度变化，对ABA、盐碱、干旱和渗透胁迫均存在转录响应。

关键词：杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因克隆表达特性

翠冠梨PG基因家族两成员的克隆及其表达与货架期果实软化的关系

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果树学报 2012年第1期29卷 17-23页

作者：李慧丛郁常有宏蔺经盛宝龙江苏省农业科学院园艺研究所南京210014 国家农业科技华东(江苏)创新中心.高效园艺作物遗传改良实验室南京210014 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008

以早熟砂梨翠冠果实为材料,克隆了多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因家族中的两成员PpPG1和PpPG2。PpPG1cDNA序列全长1 793 bp,开放阅读框为287～1 666 bp,DNA序列长2 757 bp,包括8个外显子和7个内含子,编码一个含有459个氨基酸残基的蛋白,预测... 详细信息

以早熟砂梨翠冠果实为材料,克隆了多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因家族中的两成员PpPG1和PpPG2。PpPG1cDNA序列全长1 793 bp,开放阅读框为287～1 666 bp,DNA序列长2 757 bp,包括8个外显子和7个内含子,编码一个含有459个氨基酸残基的蛋白,预测的等电点(pI)为8.47,估计的相对分子质量为49.45 ku。而PpPG2 cDNA序列全长1 671 bp,开放阅读框为120～1 316 bp,DNA序列长2 566 bp,包括3个外显子和2个内含子,编码一个含有398个氨基酸残基的蛋白,预测的等电点(pI)为7.34,估计的相对分子质量为41.14 ku。PpPG1和PpPG2都含有糖苷水解酶Glyco_hydro_28亚家族和多聚半乳糖醛酸酶保守域,它们分别位于系统进化树的两个不同发育分枝上。在夏季货架期,PpPG1和PpPG2基因的表达丰度先上升,PpPG1在采后16 d表达量达到峰值,PpPG2在采后8 d达到峰值,然后均下降;施加1-MCP处理后,PpPG1的表达不受影响,采后8 d的表达丰度下降,PpPG2的表达峰值延后,到采后16 d才达到表达高峰。与此同时,果实PG活性上升速度减缓,乙烯释放速率下降,硬度下降速度减缓。上述结果表明,PpPG1与PpPG2为多聚半乳糖醛酸酶基因家族的不同成员,它们的表达均受乙烯调控,并且PpPG1和PpPG2都与翠冠梨在货架期的果实软化相关。

关键词：砂梨多聚半乳糖醛酸酶基因克隆序列分析表达特点

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田间条件下苹果品种叶片蒸腾作用的研究

干旱地区农业研究 1993年第S2期11卷 78-81页

作者：王永熙张军科蔺经吴其伟西北农业大学园艺系陕西杨陵712100

以陕西省乾县枣子沟旱坡地果园的新红星、长富2号、乔纳金苹果品种为材料,砧木为新疆野苹果,在田间条件下,应用“三次称重法”研究了不同苹果品种在生长季及id中蒸腾强度变化规律。结果表明,3个品种均在8月份出现叶片蒸腾强度的峰值,生... 详细信息

以陕西省乾县枣子沟旱坡地果园的新红星、长富2号、乔纳金苹果品种为材料,砧木为新疆野苹果,在田间条件下,应用“三次称重法”研究了不同苹果品种在生长季及id中蒸腾强度变化规律。结果表明,3个品种均在8月份出现叶片蒸腾强度的峰值,生长季节长富2号与乔纳金比较接近,而新红星显著高于前两个品种。蒸腾强度日变化中,日出前后6～8时增长速率最快。在环境条件良好时,10～14时达到最高水平,以后随气温下降逐渐减弱,日落后达到较低水平。土壤水分亏缺时,叶片蒸腾强度出现双峰现象,12～14时出现低谷,新红星尤明显。

关键词：苹果品种叶片蒸腾强度田间条件三次称重法