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作者：蔡晓雪大理学院

学位级别：硕士

社会实践作为我国高等教育的一个重要组成部分，在我国高等教育中有着不可替代的重要作用。同时社会实践作为大学生适应社会的一个重要过渡，对社会主义物质文明和精神文明建设也有积极作用。本文首先对大学生社会实践的内涵进行新的... 详细信息

社会实践作为我国高等教育的一个重要组成部分，在我国高等教育中有着不可替代的重要作用。同时社会实践作为大学生适应社会的一个重要过渡，对社会主义物质文明和精神文明建设也有积极作用。本文首先对大学生社会实践的内涵进行新的界定，在此基础上对大理学院大学生社会实践开展情况进行调查，通过查阅相关研究成果资料和大理学院大学生社会实践的材料，并在学生中开展抽样问卷调查和在师生中进行深度访谈调查，总结大理学院大学生社会实践的成绩经验，同时分析大理学院大学生社会实践存在的问题及其原因，最后提出具有针对性的对策措施，以期能够通过加强和改进大理学院大学生社会实践，为提高大理学院学生的综合素质和实践能力提出具有建设性的意见，同时也能够为其他高校进一步加强和改进大学生社会实践提供参考借鉴。本文的创新之处，首先是用一种新的视野去看待大学生社会实践，通过对大学生社会实践重新解释和定义，从而使大学生社会实践有了新的内涵和更为广阔的外延，在理论上具有创新性。其次，在新的解释和定义之下，拓宽了人们对大学生社会实践认识的视野，从而对高校组织开展大学生社会实践活动以及增强活动的目的性、实效性，都具有积极的指导作用。再次，对大理学院大学生社会实践的研究，从某种程度上来说也是对高校大学生社会实践的可持续发展的研究，从大理学院大学生社会实践成绩经验以及不足中探究如何进一步完善和创新社会实践，拓宽大学生社会实践的路径，为进一步加强和改进高校大学生社会实践都具有实际的意义。

关键词：大学生社会实践成绩经验问题原因对策

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植物异源合成大麻二酚基因元件的筛选研究

植物异源合成大麻二酚基因元件的筛选研究

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作者：蔡晓雪江西中医药大学

学位级别：硕士

目的大麻Cannabis sativa L.为大麻科Cannabaceae大麻属Cannabis L.,一年生草本植物,富含大麻素类化合物。其中,大麻二酚药理作用良好,应用前景广阔。但大麻种植受严格管控,且现有品种大麻二酚含量低,导致其来源受限。基于此,利用合成... 详细信息

目的大麻Cannabis sativa L.为大麻科Cannabaceae大麻属Cannabis L.,一年生草本植物,富含大麻素类化合物。其中,大麻二酚药理作用良好,应用前景广阔。但大麻种植受严格管控,且现有品种大麻二酚含量低,导致其来源受限。基于此,利用合成生物学方法,植物异源合成大麻二酚为重要发展方向之一。本研究目的为:(1)筛选组织特异性表达基因的启动子及大麻二酚合成途径基因的启动子,验证其表达模式,为后续植物异源合成大麻二酚提供基因元件。(2)通过烟草瞬时表达系统,使大麻二酚合成途径基因异源表达,验证基因功能,初探植物异源合成大麻二酚的可能性。方法(1)验证大麻启动子表达模式,筛选异源表达启动子。利用大麻基因组数据和转录组数据筛选组织特异性表达基因,通过文献整理确定大麻二酚合成途径基因(候选基因)。使用TBtools软件对候选基因的表达强度可视化。同时,截取候选基因的启动子区域,利用Plant Care在线网站分析顺式作用元件,预测影响启动子调控的因素。通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)从大麻基因组DNA中克隆组织特异性表达基因的启动子和大麻二酚合成途径基因的启动子。利用无缝连接技术,将克隆的启动子连接至p CAMBIA1305.1的β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase,GUS)上游,并将重组载体导入农杆菌EHA105中。随后,借助花浸法转化拟南芥,利用潮霉素抗性筛选及PCR检测获取转基因拟南芥。最后,对转基因拟南芥的不同组织进行GUS染色,验证启动子的表达模式。(2)烟草瞬时表达验证大麻二酚合成途径基因功能。首先,提取大麻基因组RNA,反转录获取c DNA。PCR克隆获取大麻二酚合成途径基因,酰基激活酶1(acyl-activating enzyme1,AAE1)、橄榄醇合成酶(olivetol synthase,OLS)、橄榄酸环化酶(olivetolic acid cyclase,OAC)、芳香族戊烯基转移酶(prenyltransferase 4,PT4)及大麻二酚酸合成酶(cannabidiolic acid synthase,CBDAS)。利用无缝克隆技术及体外多基因叠加技术构建表达载体,并导入农杆菌EHA105中。通过烟草叶片瞬时表达,将大麻二酚合成途径基因以不同组合进行异源表达。最后,利用对照品及超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF-MS)方法,检测烟叶中异源合成的化合物,验证基因异源表达的功能。结果(1)大麻启动子表达模式验证。通过转录组分析及文献整理,共获取21个候选启动子。其中,种子特异性表达6个(Seed,S1-S6)、腺毛特异性表达5个(Glandular hair,G1-G5)、根特异性表达5个(Root,R1-R5)、大麻二酚合成途径基因启动子5个(p AAE1、p OLS、p OAC、p PT4、p CBDAS)。PCR克隆获取14个启动子(p AAE1、p OLS、p OAC、p PT4、p CBDAS、S1、S2、S3、S4、S6、G2、G5、R2、R4),均构建载体并转化拟南芥。其中,9个启动子(p AAE1、p OLS、p OAC、p PT4、p CBDAS、S2、S4、G2、R4)获得转基因拟南芥。转基因拟南芥的不同组织进行GUS染色的结果表明,p AAE1、p OLS和p OAC在表皮毛、花序和根中表达,在茎和种子中不表达。p PT4呈现强组成型表达模式。p CBDAS在表皮毛、花柱头、种子和根中表达,茎和叶中无表达。S2在初生花序及幼苗中表达。S4在初生花序和表皮毛中弱表达。G2仅在初生花序弱表达。R4除不在种子中表达,在其他组织中均强表达。(2)大麻二酚合成途径基因功能验证。从大麻基因组c DNA中成功克隆5个大麻二酚合成途径基因(AAE1、OLS、OAC、PT4和CBDAS),并构建以p EAQHT为骨架的单基因载体。同时,构建p AAE1-OLS-OAC-HT和p AAE1-OLS-OACPT4-HT多基因载体。农杆菌介导烟草叶片瞬时表达结果显示,A组:共注射底物己酸和p EAQ-AAE1-HT、p EAQ-OLS-HT、p EAQ-OAC-HT载体,检测到橄榄酸和橄榄酸糖基化物。B组:共注射橄榄酸和p EAQ-PT4-HT载体,未检测到大麻萜酚酸。C组:共注射大麻萜酚酸和p EAQ-CBDAS-HT载体,可产生大麻二酚酸,但未检测到大麻二酚。结论(1)大麻启动子表达模式验证。克隆的大麻启动子可在异源植物底盘中表达。p PT4呈现组成型表达,其余启动子在花、表皮毛、根、种子中呈现特异性表达。虽然表达结果与大麻转录组数据存在差异,但均可作为基因元件用于后续植物异源合成大麻二酚。(2)

关键词：大麻二酚异源合成烟草瞬时表达启动子花浸法 GUS染色

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慢性病管理模式联合协同家属护理管理在类风湿关节炎患者中的应用效果

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中国社区医师 2023年第19期39卷 102-104页

作者：蔡晓雪绵阳市中心医院四川绵阳621000

目的:探讨慢性病管理模式联合协同家属护理管理对类风湿关节炎患者自我效能、生命质量及就医行为的影响。方法:选取2020年11月—2021年10月绵阳市中心医院收治的风湿关节炎患者40例为观察对象,根据随机数字表法分为试验组与参照组,各20... 详细信息

目的:探讨慢性病管理模式联合协同家属护理管理对类风湿关节炎患者自我效能、生命质量及就医行为的影响。方法:选取2020年11月—2021年10月绵阳市中心医院收治的风湿关节炎患者40例为观察对象,根据随机数字表法分为试验组与参照组,各20例。参照组给予常规护理,试验组给予慢性病管理模式联合协同家属护理管理。比较两组患者生命质量、自我效能、就医行为。结果:护理后,试验组活动能力、日常生活、家庭支持评分均高于参照组,差异有统计学意义(P<0.001)。护理后,试验组自我效能评分高于参照组,差异有统计学意义(P=0.026)。护理后,试验组自主用药、积极复诊情况评分高于参照组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:慢性病管理模式联合协同家属护理管理可提高类风湿关节炎患者自我效能及就医行为,改善患者生命质量。

关键词：慢性病管理模式协同家属护理类风湿关节炎自我效能生命质量

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基于猪圆环病毒2型复制子的复制型表达载体的构建

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生物工程学报 2023年第7期39卷 2634-2643页

作者：蔡晓雪李俊李章勋杜红旭曹立亭马跃西南大学动物医学院重庆402460

DNA疫苗在动物体内表达抗原基因的水平是决定DNA疫苗免疫效果的关键,而提高DNA疫苗抗原基因表达水平的途径之一是利用可在动物细胞内复制的质粒作为载体。本研究利用pcDNA3.1构建了1个基于猪圆环病毒2(porcine circovirus 2,PCV2)复制... 详细信息

DNA疫苗在动物体内表达抗原基因的水平是决定DNA疫苗免疫效果的关键,而提高DNA疫苗抗原基因表达水平的途径之一是利用可在动物细胞内复制的质粒作为载体。本研究利用pcDNA3.1构建了1个基于猪圆环病毒2(porcine circovirus 2,PCV2)复制子的复制型DNA疫苗载体pCMVori,再将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因分别克隆入pCMVori和对照质粒pcDNA3.1中,然后分别转染PK-15细胞,48 h后观察两组转染细胞EGFP表达情况后分别提取细胞质粒和RNA。利用Bcl I酶切前、后的质粒为模板通过定量PCR检测质粒的复制效率,并通过反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测PCV2复制子的Rep基因转录产物。通过Image J软件分析两组转染细胞的平均荧光强度,并通过定量RT-PCR定量检测两组转染细胞的EGFP基因转录水平。结果显示,pCMVori在细胞内48 h的复制效率达到136%,RT-PCR结果证实Rep和Rep’均有转录。pCMVori-EGFP转染细胞的平均荧光强度比pcDNA3.1-EGFP的高39.14%,定量RT-PCR检测结果显示,前者的EGFP转录水平也比后者高40%。本研究结果表明,所构建的复制型DNA疫苗载体pCMVori可在真核细胞中独立复制,克隆的目的基因的表达水平也因此获得提升,为构建复制型DNA疫苗奠定了基础。

关键词： DNA复制子表达载体猪圆环病毒2型 DNA疫苗

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行政法学知织讲座第三讲我国行政法的基本原则

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法律适用 1988年第8期 23-25页

作者：梁书文蔡晓雪

我国行政法的基本原则,是指贯穿在一切行政法律法规电,始终起指导作用的基本准则。它是我国行政法阶级本质的表现,也是我国行政执法、行政司法以及解释、研究我国行政法的指导思想。因此,了解和明确这些基本原则,对理解我国有关行政法... 详细信息

我国行政法的基本原则,是指贯穿在一切行政法律法规电,始终起指导作用的基本准则。它是我国行政法阶级本质的表现,也是我国行政执法、行政司法以及解释、研究我国行政法的指导思想。因此,了解和明确这些基本原则,对理解我国有关行政法的基本精神,在行政管理和行政审判实践中正确适用法律,提高行政管理和行政审判的水平都有着极为重要的意义。

关键词：行政违法规章事务监督国家行政机关行政机关管理

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