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大溪水库流域典型抗生素的污染特征及风险评价

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大溪水库流域典型抗生素的污染特征及风险评价

作者：江桥江南大学

学位级别：硕士

大溪水库流域是由河流和水库两种不同特征的水体构成的“河流-水库”复合型系统,流域内水体质量对人类健康有重要意义。本研究以大溪水库流域作为研究对象,分析流域内水环境因子和抗生素的时空分布特征,探究水环境因子对抗生素环境行为... 详细信息

大溪水库流域是由河流和水库两种不同特征的水体构成的“河流-水库”复合型系统,流域内水体质量对人类健康有重要意义。本研究以大溪水库流域作为研究对象,分析流域内水环境因子和抗生素的时空分布特征,探究水环境因子对抗生素环境行为的影响,确定抗生素的来源,并评估抗生素对生态和人体健康的潜在风险,以期为维持大溪水库流域生态健康安全提供有力的技术支撑。得出以下结论:(1)在四个季节中,水温范围为4.6～36.3C;DO浓度范围为1.2～12.22 mg/L,四个季节平均浓度均是Ⅰ～Ⅱ类水;p H值范围为6.05～8.95,符合地表水环境质量标准;TN在水库系统以Ⅲ类水为主,在河流系统以Ⅳ类水为主;NH-N在水库和河流系统均以Ⅱ类水为主;TP在水库和河流系统均以Ⅳ类水为主;COD在水库系统为Ⅲ～Ⅳ类水,在河流系统以Ⅳ类水为主。在时间上,TN、NH-N、NO-N、TP、Chla和COD均有显著季节性差异,且均呈秋季>夏季>春季>冬季的趋势;NO-N和DOC也存在显著季节性差异,但季节的变化趋势不同,NO-N呈春季>冬季>秋季>夏季的趋势,DOC呈夏季>秋季>春季>冬季的趋势。在空间上,NH-N、TP、Chla和DOC在“河流-水库”系统中无显著性差异;但TN、NO-N、NO-N和COD有显著的空间差异性,从河流系统到水库系统存在一定的空间梯度变化。根据综合营养状态指数法(TSI)评价水体富营养化情况,大溪水库流域处于中营养-轻度富营养状态。(2)在大溪水库流域共检出目标抗生素19种。不同类别抗生素的污染贡献率依次为TCs>FQs>SAs>MLs>CPAs>β-Ls,SAs、FQs和TCs是该流域水体中的主要抗生素污染类型。在时间上,冬季抗生素浓度最高,为40.37 ng/L,夏季浓度最低,为12.6 ng/L。不同类别的抗生素在不同季节的赋存特征是不同的,SAs在夏季浓度最高,在冬季浓度最低,而FQs、TCs、RTM和TAP均在冬季浓度最高,在夏季浓度最低,与SAs呈相反的季节变化趋势。在四个季节中,SMX、SMM和TMP是磺胺类抗生素的主要污染构成;NFX、EFC、OFX和DIF是喹诺酮类抗生素的主要污染构成;TC和DXC是四环素类抗生素的主要污染构成。RTM在四个季节中均有较高的检出率,相对较低的检出浓度。LEX仅在春季检出,检出率为8.7%,检出浓度为ND～5.0 ng/L。TAP在四个季节的检出率为8.7%～52.17%,检出浓度呈冬季>秋季≈春季>夏季的季节变化趋势。在空间上,SAs无明显的变化规律,RTM是洙漕河的浓度大于库岸带,而FQs、TCs和TAP则是库岸带的浓度大于洙漕河。不同种类的抗生素通过各种途径流入河流后进入水库,使抗生素总浓度呈现库岸带>洙漕河>入库支流河口的分布规律。(3)通过斯皮尔曼(Spearman)相关性分析发现温度、DO、p H、DOC、COD、Chla、TP、TN和NH-N与抗生素之间具有相关性,且DO的影响最大。同时通过线性拟合发现,浮游生物的Shannon-Wiener多样性指数、Margalef丰富度指数、生物量和总丰度与部分抗生素之间也存在相关性。(4)PCA-MLR分析结果表明:生活污水和医药污水、禽畜养殖废水、农田废水和水产养殖废水是大溪水库流域内抗生素的主要来源,它们的污染贡献率分别为36.75%、24.32%、27.32%和11.61%。(5)多数抗生素对三种水生生物无生态风险,只有少数抗生素在某些点位对藻存在中低生态风险,对无脊椎动物和鱼存在低生态风险。抗生素的累积生态风险主要来自于SAs和FQs,且河流系统的平均累积生态风险低于水库系统的平均累积生态风险。大溪水库流域内的抗生素对人体无潜在健康风险。

关键词：大溪水库流域综合营养状态指数法抗生素风险评价

市级反电信网络诈骗中心运行优化研究——以W市为例

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市级反电信网络诈骗中心运行优化研究——以W市为例

作者：万桥中国人民公安大学

学位级别：硕士

电信网络诈骗是利用电信网络技术手段或软件产品,通过远程、非接触等方式与受害人取得联系,采取虚构事实,让被害人产生焦虑、恐惧等心理,进而骗取公私财物的行为。由于电信网络诈骗犯罪在手法样式、技术原理、波及范围等方面不断演化升... 详细信息

电信网络诈骗是利用电信网络技术手段或软件产品,通过远程、非接触等方式与受害人取得联系,采取虚构事实,让被害人产生焦虑、恐惧等心理,进而骗取公私财物的行为。由于电信网络诈骗犯罪在手法样式、技术原理、波及范围等方面不断演化升级,公安机关积极采取宣传防范、侦查打击、联防联控等多种手段进行治理,并与金融、通讯等部门加强联系与合作,逐步构建起电信网络诈骗协同治理模式。伴随着各地治理电信网络诈骗实战经验的不断积累,在网络信息技术的推动下,反电信网络诈骗中心应运而生,形成了以公安机关为主导,金融、通讯、科技公司、社会企业组织等外部合作力量为辅助的协同治理格局。在国务院打击治理电信网络新型违法犯罪工作部际联席会议的大力支持下,全国各级公安机关持续推进反电信网络诈骗中心的建设,共同构建各级反电信网络诈骗中心协同运行治理体系。目前已形成国家级-省级-市级-县级四级架构,整体呈现为“1+32+316+2935”结构,即1个国家反电信网络诈骗中心,32个省级反电信网络诈骗中心和316个市级反电信网络诈骗中心,2935个县级反电信网络诈骗中心。其中,市级反电信网络诈骗中心处于中间层级,承接上级反电信网络诈骗中心的政策指令与工作任务,统筹与指导下级反电信网络诈骗中心的打击防范、治理工作,在推进与完善全国各级反电信网络诈骗中心协同运行治理体系的建设中具有重要作用。近年来,通过强化思想理念、加强专业知识培训、完善资源配置、丰富技术应用等手段,W市反电信网络诈骗中心持续推进建设与发展。文章以W市的个案来深入观察和剖析市级反电信网络诈骗中心运行的细节,发现W市反电信网络诈骗中心主要包含接警与申诉、查询、止付与冻结、预警、拦截与反制、研判与打击、宣防与管控、多方协调与行业治理等工作流程和运行环节,并形成了“打防管控宣”五位一体运行机制和跨部门协同治理机制等运行成效,实现了电信网络诈骗“两升两降”的治理目标。研究发现,市级反电信网络诈骗中心在运行中还存在政策—机制落实不到位、专业队伍力量薄弱、一体化流程衔接不畅、信息化管理平台功能不完善、监督缺乏全局性、激励机制流于形式等问题。研究建议从技术、制度、技术与制度互构等三个方面优化市级反电信网络诈骗中心的运行路径:在技术方面,从信息化技术、专业知识与经验、非正式规则与资源等三个层面不断优化;在制度方面,完善市级反电信网络诈骗中心运行的制度性建设,促进市级反电信网络诈骗中心分工制度规范化,实现市级反电信网络诈骗中心运行制度持续性优化;在技术与制度互构方面,构建优化原则、联动机制、场域行动等三个层面的优化格局,提升市级反电信网络诈骗中心的战斗力,从而进一步完善全国各级反电信网络诈骗中心协同运行治理体系的建设。

关键词：反电信网络诈骗中心电信网络诈骗新型犯罪犯罪治理

乳酸在脓毒症炎性骨髓中性粒细胞趋化作用的研究

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乳酸在脓毒症炎性骨髓中性粒细胞趋化作用的研究

作者：玉桥内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨脓毒症(Sepsis)时乳酸对免疫炎症及骨髓内皮细胞通透性的影响,明确其对促中性粒细胞(PMN)趋化作用的机制,为脓毒症发病研究提供实验数据。方法:1、临床研究:分为Spesis组和健康对照组(各10例),收集住院d1外周血,检测血常规中... 详细信息

目的:探讨脓毒症(Sepsis)时乳酸对免疫炎症及骨髓内皮细胞通透性的影响,明确其对促中性粒细胞(PMN)趋化作用的机制,为脓毒症发病研究提供实验数据。方法:1、临床研究:分为Spesis组和健康对照组(各10例),收集住院d1外周血,检测血常规中性粒细胞绝对值及乳酸含量,荧光定量RT-PCR法检测MCT4、GPR81mRNA表达量。2、动物研究:分为四组:(1)正常对照组(NC组):腹腔注射与脂多糖(LPS)等量的生理盐水;(2)LPS脓毒症大鼠模型组(LPS组):腹腔注射LPS 5mg/kg;(3)LPS脓毒症加乳酸干预模型组(LPS+Lac组):LPS腹腔注射造模1h后进行腹腔注射乳酸(10mg/kg)。(4)LPS脓毒症大鼠加乳酸及GPR81受体抑制剂干预组(LPS+Lac+GPR81￣组):腹腔注射GPR81受体抑制剂(20mg/kg)1h后LPS腹腔注射造模,1h后进行腹腔注射乳酸(10mg/kg);每组各8只大鼠。肺HE染色观察病理变化;ELISA法检测外周血IL-6、IL-12、IL-18及乳酸含量;q PCR检测肺组织中性粒细胞CD16、Ly6G mRNA及MCT4、GPR81、c AMP、Epac-1、VE-cadherin mRNA表达。结果:临床研究:Sepsis组外周血PMN及乳酸的含量均较NC组显著升高(t=4.446、4.167,均P<0.001),Sepsis组外周血MCT4、GPR81 mRNA表达均较NC组显著升高(t=5.519、10.00,P<0.0001)。动物研究:1、HE染色显示NC组肺泡结构完整,肺泡腔、间质无炎症细胞及液体渗出。LPS组肺组织充血水肿,肺泡间隔增厚,大量炎性细胞浸润;LPS+Lac组肺组织充血水肿,肺泡间隔增厚,炎性细胞浸润较LPS组明显加重;LPS+Lac+GPR81￣组肺组织充血水肿,肺泡间隔增厚,炎性细胞浸润较LPS组病变减轻。2、LPS组血粒细胞绝对数及乳酸含量较NC组含量显著升高(t=9.267、t=4.823,P<0.05、P<0.0001),LPS+Lac组粒细胞绝对值及乳酸含量较LPS组显著升高(t=4.421、t=9.170,P<0.0001、P<0.05),LPS+Lac+GPR81￣组较LPS组及LPS+Lac组显著降低(t=4.720、9.141;t=6.346、10.69,P<0.05)。LPS组IL-6、IL-12及IL-18含量较NC组显著升高(t=7.59、6.751和5.195,P<0.05),IL-6、IL-18含量LPS+Lac组较LPS组显著升高(5.463、6.543,P<0.05),LPS+Lac+GPR81￣组IL-6、IL-12及IL-18含量较LPS组显著降低(t=4.663、5.482和4.050,P<0.05);LPS组CD16及Ly6G及GPR81、MCT4 mRNA表达较NC组量显著升高(t=6.341、6.271,P<0.001;t=4.170、t=4.927,P<0.05),LPS+Lac组较LPS组显著升高(t=15.77、16.15,P<0.0001;t=6.148、6.902,P<0.05),LPS+Lac+GPR81￣组较LPS组及LPS+Lac组显著降低(t=4.021、4.373、4.401、11.30,P<0.05;t=13.52、14.18,4.036、10.18,P<0.05)。LPS组c AMP、Epac-1、VE-cadherin mRNA较NC组显著下降(t=4.882、6.687,6.279,P<0.05),LPA+Lac组LPS组显著下降(t=4.882、6.687、6.297,P<0.05)及(t=4.316、4.124、6.470,P<0.05),LPS+Lac+GPR81￣组VE-cadherin mRNA较LPS组显著升高(t=6.078,P<0.05),c AMP、Epac-1、VE-cadherin mRNA较LPS+Lac组显著增高(t=6.204、7.869、12.55,P<0.05)。结论:1、临床研究:Sepsis患者外周血PMN、血乳酸明显增高,同时MCT4/GPR81表达量明显增加。2、动物研究:(1)乳酸增加LPS脓毒症模型大鼠炎症因子及PMN表达。(2)乳酸增加LPS脓毒症模型大鼠乳酸转运体系MCT4/Lac/GPR81 mRNA的表达,减少与血管通透性相关的c AMP/Epac-1/VE-cadherin mRNA的表达量。说明乳酸通过上调GPR81 mRNA,增加血管内皮通透性,实现中性粒细胞趋化增强。

关键词：脓毒症乳酸中性粒细胞乳酸受体GPR81 血管内皮细胞

基于公平性与可持续视角下的养老保险基金中央调剂制度研究

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云南财经大学学报 2022年第1期38卷 1-11页

作者：李明桥西南石油大学马克思主义学院成都610500

基于人口跨省流动和省级统筹视角,分析了企业职工基本养老保险基金中央调剂制度的最优上解比例。研究发现:首先,中央调剂制度最优上解比例可分解为两部分,一部分上解比例体现了养老保险基金跨省调剂公平性,另一部分上解比例则提高了养... 详细信息

基于人口跨省流动和省级统筹视角,分析了企业职工基本养老保险基金中央调剂制度的最优上解比例。研究发现:首先,中央调剂制度最优上解比例可分解为两部分,一部分上解比例体现了养老保险基金跨省调剂公平性,另一部分上解比例则提高了养老保险基金整体可持续性;其次,按最优上解比例进行省际再分配养老保险基金既能保证调剂公平性又能提高养老保险基金整体可持续性;再次,养老保险参保赡养率因人口老龄化而持续上升背景下,即使借助最优上解比例跨省调剂基金,2050年也仍会出现养老保险基金收支庞大缺口;最后,如果实施推迟法定退休年龄制度并且按最优上解比例调剂基金,那么能有效缓解未来养老保险基金支出负担,因此现阶段迫切需要实施最优上解比例和推迟法定退休年龄相结合的制度改革。

关键词：养老保险基金最优上解比例公平性可持续性

基于混沌系统和DNA编码的图像加密算法研究

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基于混沌系统和DNA编码的图像加密算法研究

作者：赵桥中北大学

学位级别：硕士

随着互联网、5G技术、云仓储等高新技术的发展,数字化图像已经成为各行各业不可或缺的一部分,为了确保图像信息的安全传输,对图像加密技术的研究成为了信息安全领域的一项重要任务。数字图像具有像素间关联性强、冗余程度高等特点,传统... 详细信息

随着互联网、5G技术、云仓储等高新技术的发展,数字化图像已经成为各行各业不可或缺的一部分,为了确保图像信息的安全传输,对图像加密技术的研究成为了信息安全领域的一项重要任务。数字图像具有像素间关联性强、冗余程度高等特点,传统的图像加密技术已经满足不了数字图像的加密需求。混沌系统和DNA编码则因为其优良的特性,刚好能应用于图像加密领域,可以很好地解决数字图像的加密问题。基于此,针对现阶段图像加密的发展现状和不同用户的加密需求,分别提出了以下三种基于不同混沌系统和DNA编码的加密算法,保证了图像加密过程中的安全性,主要内容如下:(1)在一维Logistic混沌映射的基础上进行改进,得到一种基于一维分段Logistic混沌映射和DNA编码的图像加密算法。该算法在一维Logistic混沌映射的基础上进行改进,将Logistic混沌映射进行分段,使系统可以更快进入混沌状态,提升了加密速度。通过仿真实验证明,这种算法的密钥空间较大,加密速度快,算法复杂度低,可以满足用户的基本安全需求,比如人们的日常交流。(2)提出一种基于三维Lorenz混沌映射和动态DNA编码的图像加密算法。该算法在算法1的基础上进行了两点改进,将一维Logistic混沌系统升级为三维Lorenz混沌系统,提高了系统的稳定性和安全性;动态DNA编码则进一步增加了编码运算的多样性,让加密过程更安全。通过仿真实验证明,该算法密钥空间大,加密速度较快,相关性系数较小,有良好的抗噪声特性,能满足用户的较高安全需求,比如一些公司和企业。(3)提出基于Chen超混沌系统和动态DNA编码的彩色图像加密算法。该算法在算法2的基础上有两点升级和改进,将多维Lorenz混沌系统升级为Chen超混沌系统,系统更加稳定,加密效果更好;将传统灰度数字图像的加密算法扩展至彩色数字图像,应用范围也更广泛。通过仿真实验结果以及和其他算法的比较分析,该算法和其他的算法相比,密钥空间更大,相关性系数极小,有良好的抗噪声和抗剪切性能,能满足用户很高的安全需求,比如一些特殊单位。

关键词：信息安全图像加密混沌系统 DNA编码

多菌灵单克隆抗体的制备及其免疫层析试纸条产品的开发

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多菌灵单克隆抗体的制备及其免疫层析试纸条产品的开发

作者：郭桥南昌大学

学位级别：硕士

多菌灵(Carbendazim,CBZ)是目前农业生产过程中高频使用的一种苯并咪唑类广谱杀菌剂,对农作物的各种真菌疾病有着明显的防治作用,能有效提高作物的产量与质量。然而CBZ结构稳定,不容易分解而在环境和农产品中持续残留,给食品安全和人类... 详细信息

多菌灵(Carbendazim,CBZ)是目前农业生产过程中高频使用的一种苯并咪唑类广谱杀菌剂,对农作物的各种真菌疾病有着明显的防治作用,能有效提高作物的产量与质量。然而CBZ结构稳定,不容易分解而在环境和农产品中持续残留,给食品安全和人类健康带来严重威胁。当下针对食品中CBZ的检测主要依靠仪器分析方法,以上方法需要依赖昂贵设备和专业的技术人员、且操作过程复杂耗时、成本高昂,限制了其在大规模农残筛查监测和现场实时检测中的应用。相比之下,基于抗原抗体特异性识别的免疫分析方法是农药残留快检和现场实时检测的常用方案。其中,免疫层析技术(Immunochromatographic assay,ICA)因简单快速、成本低廉、结果可裸眼判读等优势成为现场筛查检测的首选手段。因此,制备高性能抗CBZ单克隆抗体,并基于此构建高灵敏ICA方法对加强CBZ残留监测具有重要现实意义。传统胶体金ICA方法因探针信号强度不够,导致在方法学上灵敏度受限,针对痕量污染物难以满足其检测需求。荧光纳米粒子如荧光微球、量子点微球等作为新型探针被证明能有效提高免疫层析方法的检测灵敏度。然而,上述微球的发光强度受限于聚集导致的猝灭(Aggregation-caused quenching,ACQ)效应。聚集诱导发光(Aggregation-induced emission,AIE)染料在聚集状态下因分子内运动受限而强烈发光,以此材料制备的荧光纳米微球具有更高的发光强度,从而可提高免疫层析方法的灵敏度。此外,聚集诱导发光荧光微球(AIEFMs)还具有更大的stokes位移、更好的稳定性以及耐光漂白等优点,因而广泛引起了研究人员的兴趣。本研究通过化学方法合成了CBZ人工抗原,免疫小鼠后获得了抗CBZ单克隆抗体,将抗体标记在AIEFMs上构建了高性能荧光探针,并基于此建立了荧光ICA方法,实现莴苣样本中的CBZ的高灵敏检测。首先以二氨基苯并咪唑、对硝基酚碳酸脂和氨基丁酸为原料合成了CBZ抗原衍生物,并通过碳二亚胺法将其偶联在蛋白质分子(包括钥孔血蓝蛋白KLH、牛血清白蛋白BSA、鸡卵清蛋白OVA)上制备全抗原CBZ-KLH、CBZ-BSA和CBZ-OVA。然后,以CBZ-KLH作为免疫原与佐剂混合乳化后免疫Balb/c小鼠,同时以CBZ-BSA用作为包被抗原,定期对每只小鼠血清内抗体的性能进行评价。根据小鼠血清评价结果挑取免疫效果最佳的小鼠取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,经过亚克隆、细胞株筛选等过程后,成功获得了一株抗CBZ单克隆抗体,将其命名为6C5单克隆抗体。通过亚型鉴定确定该抗体为Ig G亚型,通过酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对所获抗体进行评价,结果表明抗体效价高达1:243000,抗体亲和力达1.03×10 L mol。以该抗体构建ELISA方法,当CBZ浓度在3.13-50 ng m L之间时,定量检测有较好的线性关系,半抑制浓度(IC)为13.56 ng m L,最低检测灵敏度为1.92 ng m L。特异性评估结果表明该抗体与苯菌灵交叉反应为5.4%,而与其他几种常见苯并咪唑类农药无交叉反应,证明该抗体特异性良好。将该单克隆抗体修饰在高发光AIEFMs上制备AIE荧光纳米探针,并以此构建荧光ICA方法(AIEFMs-ICA),同时与胶体金(Gold nanoparticles,Au NPs)免疫层析方法(Au NPs-ICA)进行性能对比。通过对条件的优化,AIEFMs-ICA检测CBZ的灵敏度为0.75 ng m L,其线性范围在1.56-25 ng m L之间;Au NPs-ICA检测CBZ的灵敏度为4.78 ng m L,其线性范围为6.25-50 ng m L。AIEFMs-ICA检测CBZ的灵敏度相比于Au NPs-ICA提升了6.3倍。实际样本加标回收实验结果显示,AIEFMs-ICA的批内、批间回收率在91%-112.3%范围之内,变异系数在2.5%-13.2%范围内,表明AIEFMs-ICA检测CBZ具有良好的准确度和精密度。此外,AIEFMs-ICA检测CBZ亦有较好的特异性。最后,通过选取21份经LC-MS/MS检测为阴性的实际样本,对其进行随机加标,进一步将AIEFMs-ICA所得数据与ELISA试剂盒所得数据进行比较,结果证实本研究构建的AIEFMs-ICA可用于实际蔬菜样本中CBZ的快速、灵敏检测。

关键词：多菌灵单克隆抗体酶联免疫聚集诱导发光免疫层析

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一流教育学科的本土化建设

教育研究 2023年第10期44卷 4-14页

作者：阎凤桥北京大学教育学院北京100871

教育学科的本质是基于对教育实践的理性认识,并反过来指导教育实践活动。在现代学科分类体系中,教育学科具有明显的人文学科和社会科学特征。在现代化进程中,产生了“殊相”与“共相”之间二元对立统一的关系,以往存在着把源于西方知识... 详细信息

教育学科的本质是基于对教育实践的理性认识,并反过来指导教育实践活动。在现代学科分类体系中,教育学科具有明显的人文学科和社会科学特征。在现代化进程中,产生了“殊相”与“共相”之间二元对立统一的关系,以往存在着把源于西方知识误视为共相、忽视本土知识的偏差。教育学科本土化的必要性表现在中西社会差异之静态、西方现代化局限之动态和中西文明互鉴三重意义上。中国的天人合一、伦理至上、通学、知行合一等思想,对西方知识体系是一种有益的补充。一流教育学科本土化建设的根本是学术创新和服务实践,要根植于中国社会和历史背景,利用非线性认识观和以问题为导向的学科综合发展态势,建立有效和有用的知识体系,进而对人类知识发展做出贡献。

关键词：教育学科本土化现代化学术互鉴

首译“利未亚”:利玛窦汉文著述中的非洲知识详考

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浙江学刊 2023年第6期 229-236页

作者：闫波桥北京大学历史学系北京100871

利玛窦率先将非洲译为“利未亚”,并在汉文著述中译介了数量可观的非洲知识,开辟了晚明国人认识非洲的新途径。利氏融合各类欧洲文献涉非记载、耶稣会内部非洲信息、东渡时在非亲身经历等,打下扎实的非洲知识基础。他绘制世界地图直观... 详细信息

利玛窦率先将非洲译为“利未亚”,并在汉文著述中译介了数量可观的非洲知识,开辟了晚明国人认识非洲的新途径。利氏融合各类欧洲文献涉非记载、耶稣会内部非洲信息、东渡时在非亲身经历等,打下扎实的非洲知识基础。他绘制世界地图直观呈现非洲样貌,创制“利未亚”等非洲地名译名,以释文介绍非洲多地风土人情,还在宗教和世俗著作中引用涉非古典人文知识。作为古代中非关系史的重要环节、早期西学东渐的稀见篇章,利玛窦首译的“利未亚”知识反映出欧洲文化输出与殖民活动特征,预示着欧洲崛起后中非相似的历史遭遇。

关键词： “利未亚” 西学东渐中非关系史利玛窦全球史观

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沙门氏菌噬菌体的微囊化及其抑菌效果研究

沙门氏菌噬菌体的微囊化及其抑菌效果研究

作者：周瑜桥浙江工商大学

学位级别：硕士

如今耐药形势愈发严峻,沙门氏菌作为常见的食源性病原菌,对人类的健康造成了极大的威胁,急需寻找一种新型的治疗方法来代替传统的抗生素治疗。噬菌体疗法具有特异性强、自我增殖、安全、来源广泛等优点,是一种十分具有前景的生物防治技... 详细信息

如今耐药形势愈发严峻,沙门氏菌作为常见的食源性病原菌,对人类的健康造成了极大的威胁,急需寻找一种新型的治疗方法来代替传统的抗生素治疗。噬菌体疗法具有特异性强、自我增殖、安全、来源广泛等优点,是一种十分具有前景的生物防治技术。但通过口服噬菌体治疗肠道致病菌时,噬菌体易遭到胃酸破坏而失活。因此需要利用微囊化技术保护噬菌体,同时控制噬菌体在合适的部位释放。目前,对治疗肠道致病菌的噬菌体微胶囊的研究相对简单,并且鲜有利用细胞模型来探究噬菌体的抑菌效果。由于沙门氏菌不仅会黏附于肠壁,还会通过内吞作用进入细胞,本文制备了载噬菌体脂质体,以期借助脂质体与细胞的融合、内吞作用,将噬菌体运送进细胞内部以裂解胞内感染菌。为增加到达肠道的噬菌体滴度,并控制其释放,对噬菌体脂质体进行二次包埋。主要研究内容及结果如下:(1)以鼠伤寒沙门氏菌LT为宿主菌从养殖场的环境污水中分离噬菌体,并对分离得到的3株噬菌体进行生物学性状研究。利用透射电镜观察噬菌体的形态,采用双层琼脂平板法测定噬菌体的效价以及最佳感染复数、一步生长曲线、温度、pH值、氯仿和胆盐敏感性等生物学特性。结果显示,三株噬菌体均属于尾病毒目,在氯仿和胆盐较为稳定,对高温敏感,在pH≤3和pH≥13的环境中极易失活。最后筛选出一株潜伏期短、爆发量高的烈性噬菌体p SLT23作为后续包封和抑菌实验的研究对象。(2)为保证噬菌体的滴度与活性,提高其抑菌效果,使用微囊化技术包封噬菌体。首先利用Box-Behnken响应面法优化制备了噬菌体负载脂质体的混合液,条件为:卵磷脂与胆固醇质量比为5.99:1,噬菌体投入量为117.47μL,超声时间为14 min,包封率为50.2%。再利用海藻酸钠(ALG)和κ-卡拉胶(CG)将噬菌体进行二次包封,制备了pH响应型ACLP微胶囊,包封率为97.4%。并考察其在体外模拟消化的稳定性与释放特性。结果表明2.0%ALG,0.3%CG的比例制得的ACLP微胶囊具有良好的保护性和控释效果。在SGF中(pH 1.5)噬菌体损失滴度仅为0.12 Log PFU/m L,并且在进入SIF(pH 7.0)后30 min内能迅速释放出大量的噬菌体,并且随着时间的进行能够持续释放出几乎所有的噬菌体。这为噬菌体微囊化技术的开发提供了新的应用参考。(3)建立鼠伤寒沙门氏菌感染Caco-2细胞模型,从细胞存活率、沙门氏菌消除效果和炎症相关基因的表达情况,综合考察了微囊化噬菌体的抑菌效果。结果表明噬菌体及其微囊化制剂都可以显著降低感染细胞的沙门氏菌的数量,提高细胞的存活率(P<0.05)。并且,经脂质体和ALG、CG包埋的微囊化噬菌体可以借助脂质体的作用进入细胞以消除胞内感染的沙门氏菌。通过对炎症相关基因的检测,发现噬菌体的加入可以显著抑制沙门氏菌引起的细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的上调(P<0.05),促进抑制炎症因子IL-10的上调(P<0.05)。综上所述,分离得到的沙门氏菌噬菌体对沙门氏菌具有良好的抑菌效果,用脂质体、海藻酸钠和卡拉胶对噬菌体进行微囊化,可以提高噬菌体的活性并控制其在肠道的缓释。包封在脂质体中的噬菌体可借助脂质体能与细胞融合的特性,被运送进细胞内部,以消除胞内感染的沙门氏菌,提高了噬菌体的抑菌效果。本研究为噬菌体微囊化提供了一种新的有效模型,对其释放规律及抗菌效果的探究为噬菌体在动物细菌性疾病防治中的应用奠定了基础,对动物性食品的质量与安全具有重要意义。

关键词：沙门氏菌噬菌体微囊化体外消化 Caco-2模型