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马齿苋总黄酮提高小鼠常压缺氧耐受能力研究

马齿苋总黄酮提高小鼠常压缺氧耐受能力研究

作者：董立巍第二军医大学

学位级别：硕士

目的筛选出马齿苋抗缺氧有效部位,并探讨其可能抗缺氧机制。方法动物灌胃给药后常压密闭缺氧暴露观察缺氧小鼠生存时间;低氧混合气体暴露制造缺氧模型,分析组织HIF-1α和EPO的mRNA表达及组织含量,测定血红蛋白含量等指标,测定组织乳... 详细信息

目的筛选出马齿苋抗缺氧有效部位,并探讨其可能抗缺氧机制。方法动物灌胃给药后常压密闭缺氧暴露观察缺氧小鼠生存时间;低氧混合气体暴露制造缺氧模型,分析组织HIF-1α和EPO的mRNA表达及组织含量,测定血红蛋白含量等指标,测定组织乳酸、乳酸脱氢酶及丙酮酸激酶和磷酸果糖激酶活性与ATP含量。结果马齿苋各个提取部位中总黄酮能够明显提高动物在缺氧环境中的生存时间;总黄酮组缺氧小鼠EPO mRNA表达增强,HIF-1α及EPO含量显著提高,血液学指标增高,所测各酶活性明显增强,ATP含量下降幅度明显降低。结论马齿苋总黄酮能够提高小鼠抗缺氧能力,机制可能通过提高组织HIF-1α含量,促进EPO表达,增加了血红蛋白的合成和红细胞的数量,增强机体携运氧能力,同时促进了无氧酵解进行,缓解了缺氧小鼠的能量代谢障碍。

关键词：马齿苋总黄酮缺氧缺氧诱导因子-1α 能量代谢促红细胞生成素

Musashi-1在肝细胞肝癌中的表达及其与临床预后的关系

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第二军医大学学报 2017年第10期38卷 1231-1237页

作者：刘琛董立巍潘宇飞谈冶雄第二军医大学东方肝胆外科医院生物信号转导研究室上海200438

目的研究Musashi-1在肝细胞肝癌患者癌组织及癌旁组织中的表达,探讨其与临床预后的关系及对肝癌细胞转移侵袭的影响。方法收集我院2000年6月至2010年6月间138例行根治性肝细胞肝癌切除术患者的术中肝癌以及癌旁样本,利用免疫组织化学方... 详细信息

目的研究Musashi-1在肝细胞肝癌患者癌组织及癌旁组织中的表达,探讨其与临床预后的关系及对肝癌细胞转移侵袭的影响。方法收集我院2000年6月至2010年6月间138例行根治性肝细胞肝癌切除术患者的术中肝癌以及癌旁样本,利用免疫组织化学方法检验癌组织与癌旁组织中Musashi-1的表达水平;通过Pearsonχ2检验和Fisher精确检验分析Musashi-1与患者临床特征以及预后之间的关系。利用qPCR检测癌组织和癌旁组织中CD133的表达并对癌组织中Musashi-1与CD133的表达水平进行相关性分析。构建稳定过表达Musashi-1的人肝癌细胞系SMMC-7721细胞,利用Sphere成球实验检测Musashi-1对肿瘤细胞成球能力的影响,利用肿瘤侵袭实验探究Musashi-1对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果 138例肝细胞肝癌患者中有105例(76.1%)癌组织中Musashi-1的表达高于癌旁组织(P<0.05)。Musashi-1的表达与甲胎蛋白(AFP)水平、腹水、远处转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、乙肝病史、肿瘤大小、子灶、门静脉癌栓、镜下癌栓等无关。Musashi-1的表达水平对患者总体生存率和无瘤生存率有显著影响(P<0.05)。肝癌组织中CD133mRNA的表达高于癌旁组织(P<0.05),且CD133的表达与Musashi-1的表达呈正相关(R2=0.78,P<0.001)。体外实验证实过表达Musashi-1的SMMC-7721细胞的成球能力和侵袭能力增强。结论 Musashi-1在肝细胞肝癌中表达增加,对肝细胞肝癌的进展可能具有促进作用,其表达水平可以为判断预后提供参考。

关键词：肝肿瘤肝细胞癌 Musashi-1 肿瘤干细胞预后肿瘤转移

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人参总皂苷对缺氧小鼠EPO表达影响

中国公共卫生 2006年第2期22卷 197-198页

作者：董立巍王万银李敏上海第二军医大学军队卫生学教研室上海200433

人参总皂苷是人参的主要生物活性成分[1].有报道,人参总皂苷有抗缺氧作用,可明显延长低压或常压缺氧条件下小白鼠的存活时间[2,3].缺氧状态下红细胞及血红蛋白含量的增加可提高机体缺氧耐受能力[4].促红细胞生成素(EPO)增多导致红细胞... 详细信息

人参总皂苷是人参的主要生物活性成分[1].有报道,人参总皂苷有抗缺氧作用,可明显延长低压或常压缺氧条件下小白鼠的存活时间[2,3].缺氧状态下红细胞及血红蛋白含量的增加可提高机体缺氧耐受能力[4].促红细胞生成素(EPO)增多导致红细胞增多和血红蛋白含量增高是缺氧引起的血液系统主要代偿性反应之一.本实验就人参总皂苷对缺氧小鼠血液中红细胞及血红蛋白含量的影响及其机制进行了探讨.

关键词：促红细胞生成素 EPO 人参总皂苷抗缺氧作用小鼠血红蛋白含量红细胞增多生物活性成分缺氧耐受能力血液系统

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马齿苋的抗低氧作用及其机制研究

中国公共卫生 2005年第12期21卷 1434-1436页

作者：岳义田董立巍李敏凌昌全中国人民解放军第二军医大学海医系军队卫生学教研室上海200433 上海长海医院

目的观察不同浓度马齿苋水提液对低氧小鼠的保护作用及其机制。方法以生理盐水和人参总皂苷为对照,观察不同浓度马齿苋水提液对密闭低氧条件下小鼠存活时间的影响,采用生物化学方法测定丙酮酸激酶(PK)和磷酸果糖激酶(PEK)活性,荧光素酶... 详细信息

目的观察不同浓度马齿苋水提液对低氧小鼠的保护作用及其机制。方法以生理盐水和人参总皂苷为对照,观察不同浓度马齿苋水提液对密闭低氧条件下小鼠存活时间的影响,采用生物化学方法测定丙酮酸激酶(PK)和磷酸果糖激酶(PEK)活性,荧光素酶法测定ATP含量,定磷法测定Na+,K+-ATP酶活性,分光光度法测定乳酸含量,2,4二硝基苯肼比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果(1)0.5,1.0,2.0 g/ml 3种浓度的马齿苋水提液分别延长密闭低氧小鼠的生存时间24%,36.5%和27.4%;(2)1 g/ml马齿苋水提液可明显增强低氧小鼠心、脑细胞PK、PEK活性,缓解细胞内ATP含量下降幅度,提高Na+,K+-ATP、Ca2+,Mg2+-ATP和LDH等酶的活性。结论马齿苋水提液可提高小鼠耐低氧能力,机制之一可能是其促进低氧小鼠无氧酵解关键酶的活性,进而缓解因低氧引起能量代谢障碍所致的细胞损伤。

关键词：马齿苋低氧能量代谢

嵌合抗原受体修饰T细胞在实体肿瘤治疗中的应用

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第二军医大学学报 2016年第4期37卷 482-487页

作者：马韵涵潘宇飞董立巍谈冶雄第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究中心上海200438

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别... 详细信息

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别能力,靶向发挥T细胞的效应功能。目前CAR-T细胞在临床治疗白血病、淋巴瘤、黑素瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的效果。但由于实体肿瘤的某些特点,CAR-T细胞在临床治疗实体肿瘤的实践中存在部分障碍。随着研究的深入,三代CAR-T细胞、双重特异性CAR-T细胞等的应用将为CAR-T细胞临床治疗实体肿瘤开拓道路。本文就近年来CAR-T细胞在实体肿瘤中的应用作一综述。

关键词：嵌合抗原受体 T淋巴细胞实体肿瘤免疫疗法

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5-羟色胺可促进肝细胞癌的发生与发展

肿瘤 2016年第5期36卷 521-529页

作者：马韵涵潘宇飞董立巍谈冶雄第二军医大学附属东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究中心上海200438

目的：研究5-羟色胺（即血清素）在肝细胞癌发生和发展过程中的作用。方法：采用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱导法建立SpragueDawley大鼠肝细胞癌模型,应用HE染色法确定模型建立过程中DEN诱发大鼠癌变的病程分期。收集... 详细信息

目的：研究5-羟色胺（即血清素）在肝细胞癌发生和发展过程中的作用。方法：采用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱导法建立SpragueDawley大鼠肝细胞癌模型,应用HE染色法确定模型建立过程中DEN诱发大鼠癌变的病程分期。收集大鼠肝细胞癌模型各阶段的血清和肝脏标本,以及临床上慢性肝炎、肝硬化和肝癌患者的血清标本,应用ELISA法检测这些血清标本中5-羟色胺的含量,并用实时荧光定量PCR法检测肝脏标本中5-羟色胺受体（5-hydroxytryptamine receptor,5-HTR）的m RNA表达水平。应用CCK-8法检测5-羟色胺对人肝癌Huh7细胞体外增殖能力的影响;建立Huh7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,然后腹腔注射5-羟色胺,观察移植瘤的体内生长情况以及荷瘤裸鼠的存活情况。结果：DEN诱导大鼠肝癌模型有3个病程：炎性反应期（第1-8周）、肝硬化期（第9-15周）及肝癌期（第16-20周）。大鼠DEN诱癌模型和临床患者血清中5-羟色胺的含量均随着肝炎-肝硬化-肝癌的进展不断升高（P值均〈0.001）,而且大鼠模型的肝脏组织中HTR2A和HTR1B的表达水平均随着病程进展不断升高（P值均〈0.001）。5-羟色胺可以逆转血清剥夺对人肝癌Huh7细胞体外增殖的抑制作用（P〈0.01）,并可促进Huh7细胞裸鼠移植瘤的体内生长（P〈0.001）,缩短荷瘤裸鼠的生存期（P=0.002）。结论：5-羟色胺可能通过与其受体相结合,对肝细胞癌的发生和发展起到促进作用。

关键词：癌,肝细胞血清素血清素,受体模型,动物