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猪链球菌3种毒力因子多细胞表位靶向DC重组蛋白DC3pep-SDZ的构建及安全性检测

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中国预防兽医学报 2022年第4期44卷 416-422页

作者：于恩远潘晨浩姜轩李颖赵瑞利张欣曾君荣睿璠金天明于晓雪天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 天津市动物疫病预防控制中心天津300402

为了研制2、3、9型猪链球菌(SS)通用的重组亚单位疫苗,本研究通过生物信息学软件对SS分泌型核酸酶A(SsnA)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)、锌转运蛋白(ZnuA)3种毒力因子的蛋白质一级结构、B细胞及辅助T(Th)细胞抗原表位、亲疏水性及抗原性... 详细信息

为了研制2、3、9型猪链球菌(SS)通用的重组亚单位疫苗,本研究通过生物信息学软件对SS分泌型核酸酶A(SsnA)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)、锌转运蛋白(ZnuA)3种毒力因子的蛋白质一级结构、B细胞及辅助T(Th)细胞抗原表位、亲疏水性及抗原性、二级结构进行综合分析后,预测获得了SsnA、DLDH和ZnuA具有亲水性和较好抗原性的B/Th细胞表位,将它们与12聚体树突状细胞靶向肽(DC3pep)序列串联后获得了重组氨基酸序列DC3pep-SDZ。经蛋白质理化分析DC3pep-SDZ分子质量约为44 ku,理论等电点(pI)为4.65,平均亲水性为-0.462,为亲水性蛋白。由生物公司构建重组原核表达载体pET28a-DC3pepSDZ,转化感受态细胞后经IPTG诱导表达后经western blot鉴定重组蛋白以可溶形式表达。表达产物利用亲和层析镍柱纯化,SDS-PAGE结果显示得到44 ku的纯化目的蛋白,纯化浓缩后经BCA蛋白浓度测定试剂盒检测,浓度为5.60 mg/mL。利用不同浓度纯化重组蛋白对2%猪红细胞悬液进行体外溶血试验,并对PK15、IPEC-J2细胞进行毒性试验,检测重组蛋白的生物安全性。体外溶血试验结果显示在5μg/mL~500μg/mL浓度范围内,DC3pep-SDZ蛋白对2%猪红细胞悬液溶血率低于5%;细胞毒性试验结果显示经500μg/mL DC3pep-SDZ蛋白孵育后,PK15与IPEC-J2细胞的相对增殖率(RGR)分别为98.5%和99.6%,与对照组RGR相比均无显著差异。表明,重组蛋白无明显毒性作用。本实验首次构建并表达了重组蛋白DC3pep-SDZ,该蛋白生物安全性良好,为后续分析其免疫保护效果、研发2、3、9型SS重组亚单位疫苗奠定基础。

关键词：猪链球菌亚单位疫苗重组蛋白体外溶血试验细胞毒性

多元摩拉菌分离株生物被膜形成能力及其致病和耐药情况研究

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黑龙江畜牧兽医 2023年第11期 8-14,136页

作者：曾君赵瑞利孙英峰于恩远荣睿璠李颖李留安张东超王心如天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 天津市动物疫病预防控制中心天津300402

为了研究分离的猪多元摩拉菌生物被膜形成能力及相关特性,了解其致病性和耐药情况,试验采集天津市某猪场因患猪繁殖与呼吸道综合征并继发细菌感染而导致死亡的猪的心脏、肺脏进行细菌分离培养、生化试验、16S rDNA基因序列测定,并对分... 详细信息

为了研究分离的猪多元摩拉菌生物被膜形成能力及相关特性,了解其致病性和耐药情况,试验采集天津市某猪场因患猪繁殖与呼吸道综合征并继发细菌感染而导致死亡的猪的心脏、肺脏进行细菌分离培养、生化试验、16S rDNA基因序列测定,并对分离菌进行药敏试验、生物被膜及相关基因检测、PK-15细胞黏附试验、致病力研究及毒力基因检测。结果表明:分离菌为革兰氏阴性球菌且多成对排列;氧化酶试验呈阳性,不分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖、木糖,PCR产物大小为868 bp,结合16S rDNA测序结果经BLAST比对鉴定为摩拉菌属成员,与多元摩拉菌(M.pluranimalium)序列的同源性达99.71%,将分离菌命名为M.pluranimalium 1120;M.pluranimalium 1120对氟苯尼考、林可霉素、阿莫西林、恩诺沙星、左氧氟沙星耐药,对头孢噻肟中度敏感,对头孢曲松敏感;在培养至第60小时时生物被膜形成量达到峰值,并检测到生物被膜基因LuxS、LpxM、CRP、nanH、SiaB;对PK-15细胞的平均黏附率为13.3%,黏附能力较弱;对小鼠致病性弱,腹腔注射1×10^(11)cfu/mL菌液0.1 mL的小鼠仅表现饮食欲减退且感染2 d后情况好转,剖检可见肺脏水肿、充血,肝脏、脾脏、肾脏、胃、十二指肠和肠黏膜不同程度淤血、水肿;未检测到毒力基因UspAI。说明M.pluranimalium 1120对多种常见抗生素耐药,生物被膜形成能力强,对PK-15细胞的黏附能力弱,对小鼠致病性低。

关键词：猪多元摩拉菌分离鉴定耐药性生物被膜细胞黏附致病性

不同毒力副猪嗜血杆菌生物被膜形成能力及特性

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中国兽医杂志 2022年第7期58卷 1-8,13页

作者：赵瑞利曾君于恩远荣睿璠王心如李颖张东超武玮卓张清孙英峰天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津西青300392 天津市动物疫病预防控制中心天津北辰300402

为探索不同毒力(血清型)副猪嗜血杆菌(HPS)生物被膜形成能力与胞外多糖含量、细胞黏附性和耐药情况的相关性,本试验经细菌分离鉴定后,通过PCR鉴定HPS血清型和被膜基因数量,K-B纸片扩散法检测耐药性,结晶紫半定量法检测生物被膜形成能力... 详细信息

为探索不同毒力(血清型)副猪嗜血杆菌(HPS)生物被膜形成能力与胞外多糖含量、细胞黏附性和耐药情况的相关性,本试验经细菌分离鉴定后,通过PCR鉴定HPS血清型和被膜基因数量,K-B纸片扩散法检测耐药性,结晶紫半定量法检测生物被膜形成能力及动态形成过程,苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量,宿主细胞黏附试验判定侵袭力。结果显示:中等毒力菌株(HPS-4)主要对四环素类、β-内酰胺类、林可胺类耐药;无毒型菌株(HPS-7)和未分型菌株(HPS-NT)仅分别对林可胺类、四环素类耐药;强毒株(HPS-5)对常见抗菌药均敏感。在生物被膜形成过程中,强毒株(HPS-5)生物被膜形成能力最强,未分型菌株(HPS-NT)最弱;各血清型HPS在培养36 h后生物被膜含量开始明显增多,第60小时和第72小时相比,被膜增加量形成差异极显著(P0.05)。被膜基因检测结果显示,中等毒力菌株(HPS-4)被膜基因CRP、LpxM呈阳性;强毒株(HPS-5)被膜基因LpxM、LuxS、qseC呈阳性;无毒型菌株(HPS-7)被膜基因LpxM呈阳性;未分型菌株(HPS-NT)被膜基因LpxM、CRP呈阳性。中等毒力菌株(HPS-4)对PK-15的黏附率为26.3%;强毒株(HPS-5)为30.0%;无毒型菌株(HPS-7)为23.6%;未分型菌株(HPS-NT)为22.0%,四者差异不显著(P>0.05)。结果表明,强毒株(HPS-5)生物被膜形成能力和对宿主细胞黏附性更强,各血清型HPS在培养72 h时生物被膜形成量最大,达到成熟阶段,各血清型HPS耐药情况不一,可能与地区和猪场用药情况不同相关。

关键词：副猪嗜血杆菌毒力耐药性生物被膜胞外多糖细胞黏附

裂解性噬菌体内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展

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畜牧兽医杂志 2023年第4期42卷 37-40,43页

作者：荣睿璠曾君郭志良左君豪赵瑞利郭海悦孙旭阳天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392

随着细菌耐药情况的日益严重,人们开始寻找抗生素的代替物,噬菌体内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)受到了关注。其中内溶酶展现了良好的抑菌潜力,与抗生素和噬菌体制剂相比有着一定的优点。而内溶酶的作用特点决定了其在抑制革兰阴性... 详细信息

随着细菌耐药情况的日益严重,人们开始寻找抗生素的代替物,噬菌体内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)受到了关注。其中内溶酶展现了良好的抑菌潜力,与抗生素和噬菌体制剂相比有着一定的优点。而内溶酶的作用特点决定了其在抑制革兰阴性菌时需要穿孔素的协同,因此有研究利用基因工程把内溶酶和穿孔素进行重组来解决这一问题。此外,在噬菌体-细菌相互作用的研究中,已有研究表明噬菌体基因参与调控细菌间的通讯系统,内溶酶和穿孔素正是其中重要的调控因素。本文通过对噬菌体与噬菌体制剂的研究进展、内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展及其应用进行了综述,以期为未来有关噬菌体裂解酶的研究提供思路。

关键词：裂解性噬菌体革兰阴性菌内溶酶穿孔素

精准帮扶政策对县域经济增长助推效应及其收敛性实证研究

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经济地理 2024年第4期44卷 1-11页

作者：周力邹璠沈坤荣同济大学经济与管理学院上海200092 南京农业大学经济管理学院江苏南京210095 南京大学商学院江苏南京210093

保障欠发达县域共享发展成果、实现经济协调发展,是我国精准帮扶政策的应有之义。文章基于2006—2019年中国县域数据,采用经济增长收敛方程展开实证分析。研究发现:(1)我国县域经济存在收敛性,精准帮扶政策可以提升欠发达县域的经济增... 详细信息

保障欠发达县域共享发展成果、实现经济协调发展,是我国精准帮扶政策的应有之义。文章基于2006—2019年中国县域数据,采用经济增长收敛方程展开实证分析。研究发现:(1)我国县域经济存在收敛性,精准帮扶政策可以提升欠发达县域的经济增长速度(β收敛)。从作用机制看,产业结构升级与财政效率提升是精准帮扶助推经济收敛的关键,这与新古典增长理论、新经济地理学或内生增长理论的假说机理都不相符。(2)精准帮扶期间中国县域经济收敛源于贫困县、非贫困县内部的差距缩小(俱乐部组内收敛),而以东西部协作为代表的结对精准帮扶不能显著缩小贫困县与非贫困县之间的差距(俱乐部组间收敛)。据此,提出我国应该依据欠发达县域的比较优势顺势而为,兼顾效率与公平,调整优化结对关系和帮扶方式,加强政府综合治理能力,借助产业政策、财税政策等振兴欠发达县域,实现共同富裕目标。

关键词：县域经济精准帮扶结对帮扶关系地区经济差异贫困县产业政策助推效应

电-氢混合储能型多微电网系统有功功率均衡控制方法

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西南交通大学学报 2024年第3期59卷 485-492,518页

作者：李奇李蕊睿李朔蒲雨辰孙彩陈维荣西南交通大学电气工程学院四川成都610031

在多电-氢微电网并联运行的交流系统中,采用传统控制方法的逆变器会受到输出线路阻抗差异所产生的影响产生较大环流,甚至无法实现有功功率的合理分配,考虑到系统中电压偏差与有功功率间的关系,对多微电网的有功功率分配问题进行分析研究... 详细信息

在多电-氢微电网并联运行的交流系统中,采用传统控制方法的逆变器会受到输出线路阻抗差异所产生的影响产生较大环流,甚至无法实现有功功率的合理分配,考虑到系统中电压偏差与有功功率间的关系,对多微电网的有功功率分配问题进行分析研究.首先,构建含光伏、燃料电池、电解槽、蓄电池的电-氢混合储能微电网交流系统模型;其次,根据反下垂控制中有功功率与电压间的关系,构造考虑电压偏差的反下垂控制,并为使额定有功功率自适应调节,提出基于功率跟随控制的反下垂控制方法;最后,在多电-氢微电网并联运行的系统中,对本文所提方法进行RT-LAB半实物实验验证及与其他方法的对比验证.实验结果显示:基于本文所提控制方法的系统稳定后功率分配的准确度达97.50%,母线电压的精准度达99.86%,环流大小的范围约为[−3.0,3.0]A,均优于其余方法.

关键词：电-氢微电网混合储能功率控制

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浅析浮世绘艺术中的“平面性”与“空间性”

时尚设计与工程 2024年第2期 39-40,43页

作者：陈星睿李凡璠浙江理工大学

浮世绘的诞生、发展和繁荣几乎代表着17~19世纪的日本艺术史。现如今浮世绘也对当代日本艺术和平面设计有着持续性的影响力。在历史上,浮世绘对欧洲近现代绘画由写实性走向平面化起到了重要的启示作用。同时浮世绘的意境美感与空间布局... 详细信息

浮世绘的诞生、发展和繁荣几乎代表着17~19世纪的日本艺术史。现如今浮世绘也对当代日本艺术和平面设计有着持续性的影响力。在历史上,浮世绘对欧洲近现代绘画由写实性走向平面化起到了重要的启示作用。同时浮世绘的意境美感与空间布局也深受中国山水画形式的影响。通过举例浮世绘的代表性作品来分析浮世绘艺术中包含的平面性美感形式与空间性美感形式。

关键词：浮世绘平面性空间布局

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西方制裁背景下俄罗斯高等教育发展新趋势

比较教育研究 2024年第3期46卷 74-84页

作者：元璠璠王建华郑州大学教育学院河南郑州450001 南京师范大学教育科学学院江苏南京210097

俄乌冲突爆发后,俄罗斯高等教育因西方国家的隐性制裁而面临发展危机。欧洲组织终止俄罗斯在博洛尼亚进程中的代表权,停止与俄罗斯高校的合作,禁止向俄罗斯高校提供财政支持;欧美世界大学排名机构停止对俄罗斯高校的宣传,欧美主导的数... 详细信息

俄乌冲突爆发后,俄罗斯高等教育因西方国家的隐性制裁而面临发展危机。欧洲组织终止俄罗斯在博洛尼亚进程中的代表权,停止与俄罗斯高校的合作,禁止向俄罗斯高校提供财政支持;欧美世界大学排名机构停止对俄罗斯高校的宣传,欧美主导的数据库关闭俄罗斯高校访问通道,欧美企业停止向俄罗斯科教机构供应高精设备。俄罗斯高等教育面临退出博洛尼亚进程、学生国际流动受限、高校国际宣传减弱和科研发展受阻等考验。作为应对,俄罗斯高等教育形成了学制上的本土化、国际交流上的向非西方国家转移、学术科研上的自主化等趋势。虽然这些趋势可以暂时缓和俄罗斯高等教育发展危机,但是同西方教育与科学世界的长期脱钩,势必会影响该国高等教育的发展进程。

关键词：俄乌冲突俄罗斯高等教育博洛尼亚进程高等教育国际化

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道光朝海运图版本源流考

文献 2024年第2期 136-155页

作者：何国璠复旦大学历史地理研究中心

道光六年(1826),清代漕粮首次实施海运,前后过程中产生一批海运图。其中南京图书馆藏《海运全图》更接近时任江苏巡抚陶澍呈送道光帝的海运图原本,并且也更接近胡振馨摹绘的《道光六年海运全图》;美国国会图书馆藏《江海全图》与英国海... 详细信息

道光六年(1826),清代漕粮首次实施海运,前后过程中产生一批海运图。其中南京图书馆藏《海运全图》更接近时任江苏巡抚陶澍呈送道光帝的海运图原本,并且也更接近胡振馨摹绘的《道光六年海运全图》;美国国会图书馆藏《江海全图》与英国海道测量局档案馆藏“海运图”则与道光五年陶澍倡导的海、河并运有关,是次年陶澍绘制海图的图源。陶澍海运图基于多个版本的海图绘制而成,是当时北洋海域舆地知识的最新呈现。道光朝海运图的成图背景,客观上是因为康熙二十三年(1684)开海禁之后,北洋海域形成了繁荣的沙船航运业;主观上则是陶澍等人倡导经世致用,在考证古籍的同时,更注重从“实践”中访求海疆舆地知识。

关键词：道光朝漕粮海运陶澍海运图海疆舆地知识