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鸭源致病性大肠杆菌耐药性研究

鸭源致病性大肠杆菌耐药性研究

作者：苟清碧西南大学

学位级别：硕士

禽大肠杆菌病是家禽最常见的细菌病之一,给养禽业造成了严重的经济损失。禽大肠杆菌病（Avian Colibacillosis）是指部分或全部由禽病原性大肠杆菌（Avian PathogenicEscheichia coli,APEC）所引起的局部或全身性感染的疾病,包括大肠杆... 详细信息

禽大肠杆菌病是家禽最常见的细菌病之一,给养禽业造成了严重的经济损失。禽大肠杆菌病（Avian Colibacillosis）是指部分或全部由禽病原性大肠杆菌（Avian PathogenicEscheichia coli,APEC）所引起的局部或全身性感染的疾病,包括大肠杆菌性败血症、大肠杆菌肉芽肿（Hjarre氏病）、气囊病（慢性呼吸道病,CRD）,禽蜂窝织炎、肿头综合症、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、全眼球炎及脐炎/卵黄囊感染。抗菌药在控制大肠杆菌感染方面发挥了重要作用,但随着抗菌药物的广泛应用,导致大肠杆菌耐药株尤其是多重耐药菌株不断出现,大肠杆菌的耐药问题已成为影响人类健康和养殉业发展的重要因素。因此,对人肠杆菌耐药性进行调查研究,从基因水平上探讨耐药性产生的分子机制以及指导临床用药都具有重要的意义。 1.鸭源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析 2007年2～12月间,从四川、重庆部分地区养鸭场采集发生大肠杆菌病的病死鸭的内脏,无菌处理病料表面,采用常规三区划线分离细菌。通过镜检、生化试验,共得到65株鸭致病性大肠杆菌。用大肠杆菌0血清型多因子血清及单因子血清,采用玻板和试管凝集试验,对所分离得到的菌株进行0血清型鉴定。分离的65株致病性大肠杆菌（*** i）中鉴定出49株的血清型,占分离菌株的75.4%,另外15株未能定型,3株自凝。这些定型菌株覆盖了15个血清型,但以078,021,01,093等4个血清型检出率最高,共鉴定出26株,占定型菌株的53%。检测结果表明:078,021,01,093等血清型为四川、重庆鸭源性大肠杆菌的优势血清型。另外血清型鉴定检出率较低的还有11个分离株,占定型菌株的47%。从不同地区分离得到的菌株的血清型种类和主要血清型有所不同,078血清型在大部分地区的分离菌株中都是主要血清型。采用世界卫生组织（WHO）推荐的K-B纸片扩散法,按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS的判定标准,以ATCC25922标准质控菌做对照,选用21种常用抗生素对分离得到的65株鸭大肠杆菌进行药敏实验,结果显示,鸭源大肠杆菌分离株耐药现象已经很严重,细菌的多重耐药十分普遍,最多耐药20种,耐10种药物以上的有53株（占81.5%）。在21种抗菌素中,对林可霉素和红霉素的耐药率最高,达96.5%,对利福平、磺胺异噁唑、氨苄青霉素、磺胺甲基异噁唑、阿莫西林、四环素、链霉素等药物的也表现出很高的耐药性,耐药率均超过了70%。妥布霉素抑菌作用最强,敏感株占73.8%。对不同地区的耐荮隋况进行比较,结果发现,分离自不同地区的受试菌株对药物的耐受情况不同。 2.鸭源致病性大肠杆菌耐药基因及Ⅰ型整合子酶的PCR检测抗菌药物是临床治疗大肠杆菌病的重要手段,长期应用与不合理使用使得药物效果不尽理想。本研究参照GenBank中耐药基因相关序列,设计引物,对耐氨基糖苷类药物相关基因aphA、rpsL、rrsA,耐β-内酰胺类药物相关基因bla-TEM、SHV,耐磺胺类药物相关基因Dhps,耐喹诺酮类药物相关基因gyrA、parC,Ⅰ型整合酶intⅠ等进行了PCR扩增。对本次分离的65株鸭致病性大肠杆菌进行药物抗性基因的分子流行病学检测,结果表明:gyrA、parC阳性率最高,达到100%;aphA、Dhps,rpsL的阳性率超过80%,分别为95.4%,90.8%和80%;rrsA bla-TEM和SHV的阳性率较低,分别为13.8%,46.2%和27.7%。多数菌株携带有多种耐药基因,一个菌株同时携带3种以上耐药基因的有64株,占到了全部测试菌株的98.5%,最多的携带了8种被检测的耐药基因,大多数携带了3至5种耐药基因。对分离菌株的intⅠ的检测表明,intⅠ阳性检测率达78.5%。本试验结果显示,在四川、重庆部分地区养鸭场,感染鸭的大肠杆菌的耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关,说明兽医临床上的日益严重的耐药现象与耐药基因的普遍存在有着很大的关系,并提示控制禽源耐药细菌对食品安全及人类健康有重要意义。 3.鸭源致病性大肠杆菌热休克蛋白70mRNA的研究采用热休克诱导法分别给予质控菌株ATCC25922、耐药菌株非致死性的高温（42℃）恒温振荡培养,先在37℃,180rpm恒温振荡培养2h,再在42℃培养3h,收集菌体。通过RT-PCR检测鸭大肠杆菌HSP70mRNA的表达情况。（1）质控菌株ATCC25922在37℃下培养,经RT-PCR检测,没有发现hsp70mRNA的表达,而温度提高到42℃后,hsp70mRNA有较高表达;受试菌YY1在37、42℃培养,hsp70mRNA均有较高表达。（2）采用Bio-rad Quantity One软件分析,经热处理的菌株

关键词：鸭大肠杆菌耐药基因 intⅠ HSP70

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硫酸多糖抗病毒活性构效关系

动物医学进展 2012年第12期33卷 187-190页

作者：苟清碧西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621010

近年来随着糖生物学的发展,硫酸多糖独特的抗病毒活性越来越被人们所关注。多糖的功能与结构密切相关,多糖构效关系的研究已经成为人们关注的一个热点。论文对已研究发现的硫酸多糖,从结构出发就构效关系如硫酸基取代度、硫酸基取代位... 详细信息

近年来随着糖生物学的发展,硫酸多糖独特的抗病毒活性越来越被人们所关注。多糖的功能与结构密切相关,多糖构效关系的研究已经成为人们关注的一个热点。论文对已研究发现的硫酸多糖,从结构出发就构效关系如硫酸基取代度、硫酸基取代位置、分子质量等对抗病毒活性的影响进行详细阐述,以期对新型硫酸多糖的研究与开发提供一定的参考。

关键词：硫酸多糖抗病毒结构构效关系

重庆部分鸭场致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

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黑龙江畜牧兽医 2009年第4期 88-89页

作者：张奎苟清碧陈先丽周莉聂奎西南大学动物科技学院

鸭大肠杆菌病是由某些血清型大肠杆菌引起的鸭的局部或全身性感染的一类疾病。试验对重庆地区部分规模化鸭场进行大肠杆菌的耐药性调查，以了解这一地区鸭源致病性大肠杆菌耐药性的情况，为兽医临床用药和有效防治该病提供科学依据。

关键词：致病性大肠杆菌耐药性分析重庆地区分离鉴定鸭场鸭大肠杆菌病兽医临床用药科学依据

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鸡慢性呼吸道疾病的研究进展

畜禽业 2006年第7期17卷 13-16页

作者：苟清碧西南大学动物科学院重庆400716

鸡的慢性呼吸道疾病(chronic respiratory disease,CRD)是由鸡毒支原体(mycoplasma gallisepticum,MG)引起的一种接触性传染性呼吸道病。本文从该病的病原、流行病学、临床症状和病理变化、实验室诊断技术、预防和治疗几个方面就该病的... 详细信息

鸡的慢性呼吸道疾病(chronic respiratory disease,CRD)是由鸡毒支原体(mycoplasma gallisepticum,MG)引起的一种接触性传染性呼吸道病。本文从该病的病原、流行病学、临床症状和病理变化、实验室诊断技术、预防和治疗几个方面就该病的研究进展作一综述。

关键词：鸡慢性呼吸道疾病(CRD) 诊断检测方法

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猪尼帕病毒研究进展

猪业科学 2006年第9期23卷 12-14页

作者：苟清碧西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621000

猪尼帕病毒是一个有囊膜的连续单股RNA病毒,属于副粘病毒科。它是一种极度危险的病毒,在生物安全等级上属于最危险的第四级病毒,可以感染人、猪、狗、猫和马等多种动物,具有感染宿主范围广、感染人类能引起高死亡率等生物学特征,已引起... 详细信息

猪尼帕病毒是一个有囊膜的连续单股RNA病毒,属于副粘病毒科。它是一种极度危险的病毒,在生物安全等级上属于最危险的第四级病毒,可以感染人、猪、狗、猫和马等多种动物,具有感染宿主范围广、感染人类能引起高死亡率等生物学特征,已引起了公众对尼帕病毒的重视及其对公民健康影响的关注,是我国重点防范的一种人畜共患疫病。

关键词：猪尼帕病毒副粘病毒高死亡率

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中药添加剂对产蛋鸡生产性能的影响

畜禽业 2009年第10期20卷 6-7页

作者：苟清碧张奎西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621010 西南大学动物科技学院

选用陈皮、党参、黄芪、当归、淫羊藿、补骨脂、益母草、山楂、麦芽等十五味中药组成添加剂饲喂罗曼蛋鸡,与不添加药物组作对比试验,观察对其生产性能的影响,观察统计产蛋率、蛋均重、料蛋比等指标,结果发现实验组产蛋率显著高于对照组... 详细信息

选用陈皮、党参、黄芪、当归、淫羊藿、补骨脂、益母草、山楂、麦芽等十五味中药组成添加剂饲喂罗曼蛋鸡,与不添加药物组作对比试验,观察对其生产性能的影响,观察统计产蛋率、蛋均重、料蛋比等指标,结果发现实验组产蛋率显著高于对照组,料蛋比显著低于对照组。

关键词：中药添加剂产蛋率料蛋比

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鸭源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

黑龙江畜牧兽医 2010年第20期 92-93页

作者：苟清碧聂奎西南科技大学生命科学与工程学院西南大学动物科技学院

试验通过对四川、重庆部分地区规模化鸭场的大肠杆菌的耐药性进行调查分析,为临床合理选择用药、有效防治鸭大肠杆菌病提供科学依据。1材料与方法1.1材料(1)病料来源。2007年11月份—2008年6月份在四川、重庆部分地区以无菌采集疑似大... 详细信息

试验通过对四川、重庆部分地区规模化鸭场的大肠杆菌的耐药性进行调查分析,为临床合理选择用药、有效防治鸭大肠杆菌病提供科学依据。1材料与方法1.1材料(1)病料来源。2007年11月份—2008年6月份在四川、重庆部分地区以无菌采集疑似大肠杆菌病的病、死鸭的心脏、肝脏、脑样品,死亡时间不超过12h。

关键词：大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属先锋霉素Ⅳ 头孢力新头孢霉素致病性耐药率

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鸭源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

黑龙江畜牧兽医（下半月） 2010年第10期 92-93页

作者：苟清碧聂奎西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621010 西南大学动物科技学院重庆400716

关键词：致病性大肠杆菌大肠杆菌病死亡时间生化鉴定先锋霉素三糖铁琼脂纤维素性渗出膜生化试验养禽生产麦康凯平板

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薄荷浸提液的抑菌效果及猪肉保鲜研究

食品科技 2009年第6期34卷 108-112页

作者：刘明学申秀娟李琼芳苟清碧西南科技大学生命科学与工程学院绵阳621000

薄荷目前较多应用是利用它的薄荷醇等芳香物质作为香料及药物制剂等。国内外研究较多的是薄荷精油提取、成分及应用,国内外尚未见到薄荷浸提物抑菌性的研究。通过3种不同方法提取薄荷浸提物,用于7种常见食品微生物细菌、酵母菌、霉菌的... 详细信息

薄荷目前较多应用是利用它的薄荷醇等芳香物质作为香料及药物制剂等。国内外研究较多的是薄荷精油提取、成分及应用,国内外尚未见到薄荷浸提物抑菌性的研究。通过3种不同方法提取薄荷浸提物,用于7种常见食品微生物细菌、酵母菌、霉菌的抑菌活性研究。通过琼脂扩散纸片实验,结果表明:不同浓度的3种薄荷浸提物,对7种微生物都有一定的抑制作用。总的来看3种浸提液对霉菌的抑制效果比细菌的要好,浸提液作用强度顺序为A>C>B。通过薄荷浸提液浸泡猪肉实验,结果表明薄荷浸提液可明显延长猪肉的保鲜期。结论认为薄荷浸提液可以作为潜在的食品天然生物防腐剂进行开发。

关键词：薄荷浸提液抑菌活性生物防腐剂