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过表达Krüppel样因子7对小鼠视神经钳夹后视网膜神经节细胞保护作用及机制研究

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中华眼底病杂志 2024年第4期40卷 303-310页

作者：顾竞赛陈震徐奕爽郑红梅花蒂豪武汉大学人民医院眼科中心武汉430060

目的观察过表达Krüppel样因子7(KLF7)对视神经钳夹损伤(ONC)后小鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用和机制。方法10周龄C57BL/6J小鼠65只随机分为空白对照组(A组)、玻璃体腔注射(IVT)-KLF7组(B组)、IVT-磷酸盐缓冲液-ONC组(C组)、IVT-K... 详细信息

目的观察过表达Krüppel样因子7(KLF7)对视神经钳夹损伤(ONC)后小鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用和机制。方法10周龄C57BL/6J小鼠65只随机分为空白对照组(A组)、玻璃体腔注射(IVT)-KLF7组(B组)、IVT-磷酸盐缓冲液-ONC组(C组)、IVT-KLF7-ONC组(D组)、IVT-重组腺相关病毒2-重组绿色荧光蛋白-ONC组(E组),每组各13只小鼠。建立ONC模型后7 d,处死各组小鼠。全视网膜铺片免疫荧光染色计数RGC存活率;蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中KLF7、神经生长因子(NGF)、酪氨酸激酶A(TrkA)、磷酸化TrkA(pTrkA)、酪氨酸激酶B(TrkB)、磷酸化TrkB(pTrkB)、生长相关蛋白43(GAP43)、脑源性神经营养因子、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白相对表达水平。组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验。结果ONC后7 d,A组、B组、C组、D组、E组视网膜中RGC密度分别为(3707.4±12.8)、(3582.4±13.3)、(1396.3±16.1)、(1658.3±22.2)、(1323.6±16.9)个/mm^(2);与C组、E组比较,D组RGC密度显著升高,差异有统计学意义(P=0.028、0.007)。与A组、B组、C组、E组比较,D组小鼠视网膜中NGF、pTrkA、pTrkB、GAP43、Bcl-2蛋白相对表达量升高,BAX、Caspase-3蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论小鼠ONC模型中,过表达KLF7可相对提高RGC存活率,提高视网膜中NGF、pTrkA、pTrkB、GAP43、Bcl-2蛋白相对表达量,降低BAX、Caspase-3蛋白相对表达量。

关键词： Krüppel样因子7 视神经钳夹视网膜神经节细胞神经生长因子酪氨酸激酶 B淋巴细胞瘤-2 B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白

糖尿病视网膜病变患者的病变程度及糖化血红蛋白水平与视网膜血管血氧饱和度相关性研究

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中华眼底病杂志 2017年第1期33卷 36-39页

作者：花蒂豪徐奕爽邢怡桥武汉大学人民医院眼科中心 430060

目的观察糖尿病视网膜病变（DR）患者病变程度及糖化血红蛋白（HbA1c）水平与视网膜血管血氧饱和度的相关性。方法横断面研究。临床确诊为DR的102例患者102只眼及年龄与之匹配的正常健康者（正常对照组）20名20只眼纳入研究。将DR患... 详细信息

目的观察糖尿病视网膜病变（DR）患者病变程度及糖化血红蛋白（HbA1c）水平与视网膜血管血氧饱和度的相关性。方法横断面研究。临床确诊为DR的102例患者102只眼及年龄与之匹配的正常健康者（正常对照组）20名20只眼纳入研究。将DR患者分为轻中度非增生型DR（NPDR）组、重度NPDR组及增生型DR（PDR）组，分别为55、26、21例。根据DR患者HbA1c水平分为HbA1c＞9%、HbA1c 7%～9%、HbA1c＜7% 3组，分别为8、33、61例。采用无创视网膜血管血氧饱和度分析仪检测所有受检者视网膜血管血氧饱和度。暗室内采集眼底像，以视盘直径为半径，选取1.0～1.5倍半径的视盘同心圆之间直径＞60 μm的血管进行血氧饱和度分析。观察不同病变程度、不同HbA1c水平的DR患者以及正常对照组受检者视网膜动脉、静脉血氧饱和度及视网膜动静脉血氧饱和度差值。结果重度NPDR组患者视网膜动脉血氧饱和度较轻中度NPDR组、正常对照组明显升高，差异有统计学意义（F=13.670，P＜0.05）。PDR组视网膜静脉血氧饱和度较轻中度NPDR组、正常对照组明显升高，差异有统计学意义（F=6.379，P＜0.05）。重度NPDR组视网膜动静脉血氧饱和度差值较轻中度NPDR组、PDR组明显升高，差异有统计学意义（F=5.536，P＜0.05）。HbA1c＞9%组患者视网膜动脉（F=9.989）、静脉（F=10.208）血氧饱和度均较HbA1c 7%～9%组、HbA1c＜7%组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。HbA1c＞9%、HbA1c 7%～9%、HbA1c＜7%组患者之间视网膜动静脉血氧饱和度差值比较，差异无统计学意义（F=1.836，P＞0.05）。结论不同病变程度的DR患者视网膜血管血氧饱和度存在差异；其中，视网膜动脉血氧饱和度、视网膜动静脉血氧饱和度差值在重度NPDR患者中最高，而视网膜静脉血氧饱和度随病变进展呈上升趋势。随HbA1c水平升高，DR患者视网膜动脉、静脉血氧饱和度均相应增高。

关键词：糖尿病视网膜病变血氧测定法视网膜血管/病理生理学

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高度近视圆顶黄斑的形态学研究

武汉大学学报（医学版） 2018年第4期39卷 649-651页

作者：花蒂豪徐奕爽邢怡桥武汉大学人民医院眼科中心

目的：通过光相干断层扫描影像（OCT）研究高度近视圆顶黄斑的形态学特征。方法：横断面研究。47名诊断为高度近视的患者（高度近视圆顶黄斑组27只眼;高度近视未伴圆顶黄斑组45只眼）行OCT、最佳矫正视力、眼轴长度等检查,测量中央脉络... 详细信息

目的：通过光相干断层扫描影像（OCT）研究高度近视圆顶黄斑的形态学特征。方法：横断面研究。47名诊断为高度近视的患者（高度近视圆顶黄斑组27只眼;高度近视未伴圆顶黄斑组45只眼）行OCT、最佳矫正视力、眼轴长度等检查,测量中央脉络膜厚度、黄斑中心凹鼻、颞侧2mm处脉络膜厚度等数据,并对测量结果进行统计学分析。结果：高度近视圆顶黄斑组与高度近视未伴圆顶黄斑组比较,最佳矫正视力提高（P=0.022）;中央脉络膜厚度相对增加（P=0.041）;高度近视圆顶黄斑组中,中央脉络膜厚度与黄斑中心凹鼻、颞侧2mm处脉络膜厚度比较,厚度相对增加（P=0.001、0.001）。结论：高度近视圆顶黄斑患者比高度近视未伴圆顶黄斑患者的最佳矫正视力相对提高,中央脉络膜厚度相对增厚;高度近视圆顶黄斑患者中央脉络膜厚度高于黄斑周边区域的脉络膜厚度。

关键词：圆顶黄斑高度近视中央脉络膜厚度最佳矫正视力

下调热休克蛋白B8在视神经损伤中对小鼠视网膜神经节细胞的保护作用

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中华眼底病杂志 2021年第4期37卷 298-306页

作者：谢斐葭贺涛杨宁杨家翼花蒂豪罗晋媛李宗媛邢怡桥武汉大学人民医院眼科中心 430060

目的观察敲低热休克蛋白B8(HspB8)对鼠视神经钳夹(ONC)后视网膜神经节细胞(RGC)及视网膜功能的影响。方法构建敲低HspB8的重组腺相关病毒(AAV)2-小发夹HspB8(shHspB8)-绿色荧光蛋白(GFP)。雄性C57BL/6J小鼠66只随机分为正常对照组、ONC... 详细信息

目的观察敲低热休克蛋白B8(HspB8)对鼠视神经钳夹(ONC)后视网膜神经节细胞(RGC)及视网膜功能的影响。方法构建敲低HspB8的重组腺相关病毒(AAV)2-小发夹HspB8(shHspB8)-绿色荧光蛋白(GFP)。雄性C57BL/6J小鼠66只随机分为正常对照组、ONC组、AAV2-shHspB8组、ONC+AAV2-shHspB8组、ONC+AAV2组,分别为10、20、16、10、10只,双眼均作为实验眼。建模后3、7 d,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠视网膜HspB8蛋白相对表达变化;GFP免疫荧光染色确定AAV2-shHspB8-GFP转染情况。建模后5 d,视动反应(OMR)、暗适应全视野闪光视网膜电图(ff-ERG)检测各组小鼠视敏度、振荡电位(OPs)、明视负向反应(PhNR)振幅和潜伏期;视网膜铺片计数各组小鼠RGC。采用Mann-Whitney U检验、独立样本t检验、Welch法校正t检验、单因素方差分析、Bonferroni t检验对数据进行统计分析。结果与正常对照组比较,ONC3组小鼠视网膜中HspB8蛋白相对表达量明显增加,差异有统计学意义(F=43.63,P0.05);ONC5+AAV2-shHspB8组RGC计数较ONC5组明显升高,差异有统计学意义(F=10.62,P<0.01)。结论ONC诱导HspB8在视网膜中表达,导致RGC死亡并损害小鼠视功能;下调HspB8对ONC所致的RGC死亡具有保护作用。

关键词：热休克蛋白质类视神经损伤视网膜神经节细胞眼电描记术动物实验