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基于转录组学分析左归丸治疗环磷酰胺诱导卵巢早衰大鼠的分子机制

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中药新药与临床药理 2023年第3期34卷 328-334页

作者：焦存芦现杰张梅红谷万里聊城市人民医院山东聊城252000 山东大学附属聊城人民医院山东聊城252000

目的探讨左归丸对环磷酰胺诱导的卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠的治疗作用,通过转录组测序(RNA-seq)技术分析其分子机制。方法腹腔注射环磷酰胺复制卵巢早衰大鼠模型。15只大鼠随机分为对照组、模型组和左归丸组。对... 详细信息

目的探讨左归丸对环磷酰胺诱导的卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠的治疗作用,通过转录组测序(RNA-seq)技术分析其分子机制。方法腹腔注射环磷酰胺复制卵巢早衰大鼠模型。15只大鼠随机分为对照组、模型组和左归丸组。对照组及模型组给予生理盐水灌胃,左归丸组给予2 g·kg^(-1)·d^(-1)左归丸灌胃,连续灌胃4周。ELISA检测各组血清促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_(2))和抗缪勒管激素(AMH)水平,比较各组卵巢湿质量。利用RNA-seq技术检测各组卵巢组织中基因表达谱,筛选目标差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),对DEGs进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)分析。结果与对照组比较,模型组FSH水平升高(P0.05)。RNA-seq结果显示,模型组与对照组DEGs 562个,左归丸组与模型组DEGs 393个,左归丸组逆转模型组DEGs 64个。GO富集分析到370个条目,其中生物过程284条,细胞组分40条,分子功能46条。KEGG富集分析主要在卵巢类固醇合成、催乳素信号通路和PPAR信号通路。PPI分析显示,核心基因为EphA5、Acta1、Ros1、Aldh1a1、Cdh1和Cyp19a1。结论左归丸能够有效改善环磷酰胺诱导卵巢早衰大鼠的血清性激素水平,其分子机制可能与调控类固醇激素合成相关通路及基因有关。

关键词：左归丸卵巢早衰转录组测序环磷酰胺分子机制差异表达基因大鼠

补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗肾阳虚血瘀型卵巢早衰的临床研究

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中国医师杂志 2019年第2期21卷 255-257页

作者：焦存芦现杰山东省聊城市人民医院中医科 252000 山东省聊城市人民医院干细胞与再生医学实验室 252000

目的探讨补肾祛瘀方联合克龄蒙对肾阳虚血瘀型卵巢早衰(POF)患者中医证候、性激素及卵巢体积的影响。方法将60例肾阳虚血瘀型卵巢早衰患者按随机数字表法分为对照组(克龄蒙治疗)和观察组(补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗),比较两组临床疗效及... 详细信息

目的探讨补肾祛瘀方联合克龄蒙对肾阳虚血瘀型卵巢早衰(POF)患者中医证候、性激素及卵巢体积的影响。方法将60例肾阳虚血瘀型卵巢早衰患者按随机数字表法分为对照组(克龄蒙治疗)和观察组(补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗),比较两组临床疗效及安全性。结果观察组总有效率显著高于对照组(P 0. 05)。结论补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗肾阳虚血瘀型卵巢早衰能够改善临床症状,调节性激素水平,增加子宫内膜厚度,促进月经来潮,具有临床推广价值。

关键词：补肾药活血祛瘀药复方合剂雌二醇乙酸环丙孕酮卵巢功能早衰肾阳虚血瘀

左归丸加减方联合激素治疗卵巢早衰的Meta分析

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中国医师杂志 2019年第7期21卷 1002-1006页

作者：焦存芦现杰山东省聊城市人民医院中医科 252000 山东省聊城市人民医院干细胞与再生医学实验室 252000

目的系统评价左归丸加减方联合激素治疗卵巢早衰(POF)的有效性和安全性。方法计算机检索中英文各数据库,检索时间为各数据库建库至2018年6月,纳入左归丸加减方联合激素治疗POF的随机对照研究(RCT),对纳入文献进行方法学质量评价,采用Rev... 详细信息

目的系统评价左归丸加减方联合激素治疗卵巢早衰(POF)的有效性和安全性。方法计算机检索中英文各数据库,检索时间为各数据库建库至2018年6月,纳入左归丸加减方联合激素治疗POF的随机对照研究(RCT),对纳入文献进行方法学质量评价,采用Rev Man 5. 3软件进行Meta分析。结果共纳入11个RCT,包括1 004例POF患者。Meta分析结果显示:左归丸加减方联合激素治疗POF在总有效率(OR=4. 44,95%CI:3. 10~6. 36,P <0. 000 01),中医证候(头晕、耳鸣、潮热盗汗、五心烦热、腰膝酸软),血清卵泡刺激素(FSH)水平(SMD=0. 54,95%CI:0. 13~0. 95,P=0. 01),黄体生成素(LH)水平(SMD=0. 90,95%CI:0. 45~1. 36,P <0. 000 1),雌二醇(E_2)水平(SMD=1. 26,95%CI:0. 12~2. 40,P=0. 03),子宫内膜厚度(WMD=2. 03,95%CI:0. 07~3. 99,P=0. 04)改善和不良反应发生率(OR=0. 34,95%CI:0. 12~0. 95,P=0. 04)方面均优于单纯激素治疗。结论左归丸加减方联合激素治疗POF的疗效及安全性均优于单纯激素治疗。

关键词：原发性卵巢功能不全左归丸激素替代疗法 Meta分析

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真菌对唑类药物耐药机制研究进展

世界临床药物 2012年第6期33卷 363-368页

作者：芦现杰郑玉果周斌中国医药工业研究总院上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室上海200040

临床唑类药物耐药率逐渐升高,严重影响抗真菌感染的治疗效果。本文从分子水平分析常见致病菌的相关耐药基因,综述相关耐药机制的研究进展,旨在为合理利用唑类药物和新型抗真菌药物的研发提供理论依据。

关键词：真菌唑类药物耐药机制

人皮肤成纤维细胞和脐带间充质干细胞分泌蛋白差异比较研究

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中国细胞生物学学报 2020年第7期42卷 1155-1162页

作者：段婧王琰王伟芦现杰刘延明王晓兵庞保军韩发彬聊城市人民医院/聊城大学组织工程与再生医学研究所聊城252000 聊城市人民医院/聊城大学妇产科聊城252000 聊城市人民医院检验科聊城252000 山东大学第二医院转化医学研究所济南250013

该文探讨人皮肤成纤维细胞(NCF)和脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)分泌蛋白的差异,从而初步阐明脐带间充质干细胞分泌蛋白对于治疗退行性疾病的可能分子机理。基于串联质谱(LC-MS/MS)的方法,收集用无血清培养基培养48 h的NCF和hUC-MSCs上清... 详细信息

该文探讨人皮肤成纤维细胞(NCF)和脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)分泌蛋白的差异,从而初步阐明脐带间充质干细胞分泌蛋白对于治疗退行性疾病的可能分子机理。基于串联质谱(LC-MS/MS)的方法,收集用无血清培养基培养48 h的NCF和hUC-MSCs上清样品,进行TMT(tandem mass tags for relative and absolute quantitation)检测,从而对蛋白质酶解之后的肽段进行同位素标记,之后对分泌蛋白的表达差异进行精确的鉴定和定量。通过生物信息学分析,建立NCF和hUC-MSCs分泌蛋白谱图,并通过GO(gene ontology)对这些分泌蛋白进行功能分析,对于在蛋白分子互作图中处于中心位置的CCL2、COL4A1、TGFβ1、SERPINE1、SEMA7A我们进行了Real-time PCR定量分析。通过TMT以及生物信息学分析,该文鉴定出1000多种共有蛋白,其中有704种蛋白在hUC-MSCs中的表达量比NCF中高。通过Real-time PCR,我们证实了CCL2、COL4A1在hUC-MSCs中的分泌量的确高于其在NCF中的分泌量,且差异具有显著性。通过检索文献以及Uniprot的相应数据库数据,该文发现,这两种分子在炎症的消除方面起到十分重要的作用,而炎症反应在帕金森病等退行性疾病的发生与发展过程中起到重要作用。通过对NCF和hUC-MSCs培养基中分泌的蛋白进行检测分析,该研究为探讨脐带间充质干细胞分泌蛋白治疗神经退行性疾病的可能分子机制提供启示。

关键词：人皮肤成纤维细胞脐带间充质干细胞 TMT标记定量蛋白质组学技术分泌蛋白

左归丸靶向C-X-C趋化因子受体4对人脐带间充质干细胞体外迁移的影响

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世界中医药 2023年第19期18卷 2746-2751页

作者：焦存杨丽晓张艳王哲李亦晗芦现杰山东省聊城市人民医院聊城252000 山东大学附属聊城人民医院聊城252000 山东中医药大学济南250355

目的:探讨左归丸通过靶向调控C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外迁移的影响。方法:采用组织块法分离培养hUC-MSCs并进行流式鉴定。利用CCK-8检测不同浓度左归丸对hUC-MSCs增殖的影响,细胞划痕和Transwel... 详细信息

目的:探讨左归丸通过靶向调控C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外迁移的影响。方法:采用组织块法分离培养hUC-MSCs并进行流式鉴定。利用CCK-8检测不同浓度左归丸对hUC-MSCs增殖的影响,细胞划痕和Transwell实验分析左归丸对hUC-MSCs体外迁移的影响,实时聚合酶链反应(PCR)、蛋白印迹法和流式细胞术分析hUC-MSCs中CXCR4表达变化。结果:流式细胞术结果显示,hUC-MSCs表面高表达CD73和CD90,极低表达CD34和CD45。CCK-8结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸均能明显促进hUC-MSCs增殖(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸能明显促进hUC-MSCs迁移,最佳浓度为0.2 mg/mL,CXCR4拮抗剂普乐沙福则能抑制其促迁移作用(P<0.05)。实时PCR、蛋白印迹法和流式细胞术结果显示,左归丸能上调hUC-MSCs中CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,并促进CXCR4蛋白在细胞膜表达(P<0.05)。结论:左归丸通过上调CXCR4表达促进hUC-MSCs的体外迁移。

关键词：左归丸人脐带间充质干细胞体外迁移 C-X-C趋化因子受体4 基质细胞衍生因子-1/C-X-C趋化因子受体4 普乐沙福增殖卵巢早衰

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坤泰胶囊治疗卵巢早衰的Meta分析

世界中医药 2021年第10期16卷 1552-1556页

作者：焦存芦现杰尹俊艳张梅红谷万里山东省聊城市人民医院聊城252000

目的:系统评价坤泰胶囊治疗卵巢早衰(POF)的有效性和安全性。方法:检索Cochrane图书馆、PubMed、Medline、中国期刊全文数据库、万方医学数据库、中文科技期刊数据库和SinoMed数据库,检索时限为建库至2019年12月,纳入坤泰胶囊治疗POF的... 详细信息

目的:系统评价坤泰胶囊治疗卵巢早衰(POF)的有效性和安全性。方法:检索Cochrane图书馆、PubMed、Medline、中国期刊全文数据库、万方医学数据库、中文科技期刊数据库和SinoMed数据库,检索时限为建库至2019年12月,纳入坤泰胶囊治疗POF的随机对照试验(RCTs),对纳入文献进行质量评价,并采用RevMan 5.3软件进行数据分析。结果:共纳入8项RCTs,包括659例患者。Meta分析结果显示,观察组(坤泰胶囊治疗)与对照组(激素治疗)比较,在总有效率,血清卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌激素(E_2)水平改善方面,差异无统计学意义(P>0.05);观察组不良反应发生率低于对照组(RR=0.25,95%Cl为0.15~0.42,P<0.000 01)。结论:坤泰胶囊治疗POF的临床疗效与激素治疗相当,安全性优于激素治疗。

关键词：卵巢早衰早发性卵巢功能不全坤泰胶囊激素替代疗法随机对照试验系统评价 Meta分析循证医学

电场方向对一维断裂纳米通道连接处水桥结构的影响

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物理学报 2024年第9期73卷 70-77页

作者：孟现文中国矿业大学材料与物理学院徐州221116

电场影响纳米通道内的水分子的电偶极矩取向,进而影响纳米通道内的水分子的传输.为了有效发掘水分子在纳米通道内的传输特点,必须研究更复杂的纳米通道结构.最新一种构造复杂纳米通道的方式是构造断裂纳米通道.在研究断裂纳米通道内的... 详细信息

电场影响纳米通道内的水分子的电偶极矩取向,进而影响纳米通道内的水分子的传输.为了有效发掘水分子在纳米通道内的传输特点,必须研究更复杂的纳米通道结构.最新一种构造复杂纳米通道的方式是构造断裂纳米通道.在研究断裂纳米通道内的水分子的动力学特点时,通常是在零电场或单一电场方向下进行的,电场方向对断裂纳米通道内的水分子的影响机理尚不明确,这制约了部分场控分子器件的设计.为了探究该问题,本文采用分子动力学模拟方法,系统研究了电场方向从0°变化到180°的过程中,电场方向对完整纳米通道以及断裂长度分别为0.2和0.4 nm的断裂纳米通道内的水分子的占据数、传输、水桥、电偶极矩偏向等性质的影响.结果表明,在1 V/nm的电场强度作用下,这三种纳米通道内的水分子的占据数、传输等差别主要集中在电场方向与管轴夹角为90°时,此时完整纳米通道内能形成稳定的水链,断裂长度为0.2 nm的纳米通道的连接处能形成不稳定的水桥,而断裂长度为0.4 nm的纳米通道的连接处不能形成水桥.此外,模拟发现当电场极化方向与管轴夹角为90°时,增大电场的强度,断裂纳米通道连接处的水桥更容易断裂.

关键词：电场断裂纳米通道方向

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脐带血单个核细胞对大鼠帕金森病的治疗效果观察

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2017年第2期7卷 71-76页

作者：陈超段婧申爱芳王伟宋昊芦现杰王晓兵韩忠朝韩发彬聊城市人民医院泰山医学院聊城临床学院干细胞与再生医学实验室252000 聊城市人民医院妇产科 252000 中国医学科学院协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 国家干细胞工程技术研究中心天津300020

目的探讨人体脐带血单个核细胞(HUCB-MNC)对大鼠帕金森病(PD)的治疗效果和作用机制。方法 6-OHDA诱导产生大鼠PD模型,随机分为两组,一组移植从新生儿脐带血中分离HUCB-MNC细胞,另一组移植PBS作为对照,根据运动转圈数和转棒实验评估大鼠... 详细信息

目的探讨人体脐带血单个核细胞(HUCB-MNC)对大鼠帕金森病(PD)的治疗效果和作用机制。方法 6-OHDA诱导产生大鼠PD模型,随机分为两组,一组移植从新生儿脐带血中分离HUCB-MNC细胞,另一组移植PBS作为对照,根据运动转圈数和转棒实验评估大鼠在细胞移植后不同时间的运动行为情况,移植16周后取出大脑进行冰冻切片,免疫荧光染色确定移植的细胞分化情况。动物行为采用Two-way ANOVA统计方法分析。结果转圈实验显示,PD大鼠移植HUCB-MNC细胞4、8、12、16周后,注射阿朴吗啡产生的转圈比率分别为0.529±0.121、0.457±0.096、0.369±0.089、0.264±0.091,而对照组4、8、12、16周转圈比率分别为0.843±0.158、0.812±0.156、0.736±0.103、0.714±0.160,与对照组相比,移植细胞组转圈数明显减少,差异有统计学意义(t=4.377,5.561,6.835,6.071,P均现移植物HNuc、Tuj1、TH染色阳性。结论 HUCB-MNC细胞可以分化为神经元和多巴胺神经元,减少PD大鼠阿朴吗啡诱导的转圈数,延长大鼠在转棒上的持续时间,改善PD大鼠模型的运动缺陷。

关键词：脐血干细胞移植单核细胞帕金森病细胞分化多巴胺神经元