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作者：胡笑宇西南交通大学

学位级别：硕士

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)起源于Cajal间质细胞及其祖细胞,是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤,可分为c-KIT基因突变型、PDGFRA型及wt-GIST。其中c-KIT基因突变型最常见,约占总病例数的80%,免疫组化表现为CD117阳性。... 详细信息

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)起源于Cajal间质细胞及其祖细胞,是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤,可分为c-KIT基因突变型、PDGFRA型及wt-GIST。其中c-KIT基因突变型最常见,约占总病例数的80%,免疫组化表现为CD117阳性。GIST治疗首选R0切除,切缘距肿瘤2～3 cm。对于不能切除的局限性GIST,可在术前行分子靶向药物治疗缩小瘤体后再进行手术治疗。小分子选择性酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(imatinib,IM)是GIST治疗的一线药物,可以和c-KIT及PDGFRA靶向结合,通过抑制酪氨酸激酶阻止其下游致癌基因启动。既可以作为高风险病例手术的辅助,也是GIST转移性疾病的主要治疗方法。c-KIT11号外显子突变的GIST对IM治疗敏感,9号外显子突变者少见,后者与PDGFRA基因D842V突变及wt-GIST患者常在一线治疗半年内产生原发耐药。即使早期对IM治疗敏感,半数患者2年内可观察到继发性IM耐药,并伴随疾病进展。这可能与c-KIT基因外显子13或17的新突变有关。二线药物舒尼替尼除可靶向结合c-KIT和PDGFRA受体外还可抑制VEGFR,对c-KIT基因9号外显子突变的GIST治疗效果极佳。但对于c-KIT 11号外显子及PDGFRA基因突变型GIST患者,一线治疗失败后,增加IM剂量或者改用舒尼替尼均无法获得满意效果。多靶点激酶抑制剂瑞戈非尼可抑制PDGFRA、KIT、VEGFR、TIE-2、RET、FGFR等,是伊马替尼与舒尼替尼失败后的GIST三线治疗药物,可用于c-KIT外显子17突变的三线治疗。除此之外,尼罗替尼、索拉非尼等可作为一、二线耐药后的替代选择,但不做常规推荐。尽管上述靶向药物的使用在GIST治疗中起初步效果,但耐药问题的发生不可避免,昂贵的药价也给患者经济带来沉重负担。因此,本实验期望寻找一种廉价、高效的药物可替代昂贵的进口分子靶向药物应用于临床治疗。从川楝树中提出的四环三萜类化合物川楝素(Toosendanin,TSN)最早应用于寄生虫病的治疗。已被证实对多种人类肿瘤细胞的生长起抑制作用,如白血病、胶质母细胞瘤、肝癌、胰腺癌、尤文氏肉瘤、骨肉瘤、大肠癌等。TSN的广谱抗癌能力作用机制涉及广泛,然而TSN对GIST细胞生存是否有影响,国内外文献检索,均未见相关研究。因此,本研究选定GIST-T1细胞系作为研究对象,采用CCK-8、Hoechst 33342/PI染色、流式细胞学、qRT-PCR及Western Blot等实验技术,旨在探讨TSN对胃肠间质瘤细胞生长、凋亡的影响,并对其机制进行初步探索。第一部分:TSN对GIST-T1细胞增殖及凋亡的影响目的:探究TSN对GIST-T1细胞增殖及凋亡的影响。方法:设置实验分组为0、15、17、20、22、25、30 nmol/L的TSN,37℃、5%CO条件下培养48h后,CCK-8测定各组450 nm波长处的光密度值,并计算细胞增殖抑制率。选择SPSS 20.0计算其半抑制浓度IC。同样的方法检测72h细胞增殖抑制率,浓度设定为0、5、7、10、14、16、18、20 nmol/L。根据48h CCK-8结果将后续实验分为0、15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L伊马替尼作为阳性对照。通过流式细胞学及Hoechst 33342/PI荧光双染检测48h TSN对GIST-T1细胞凋亡及细胞周期的影响。结果:无论是48h或72h,与对照组比,TSN抑制了GIST-T1细胞增殖,当在一定浓度范围内增加TSN剂量时,GIST-T1细胞增殖抑制情况也加强。用SPSS计算其48h IC为18.75 nmol/L;72h IC为17.93 nmol/L。流式细胞学结果显示,与对照组相比,药物组均导致细胞凋亡水平增加,但15、30 nmol/L TSN、50 nmol/L IM 3组之间差异无统计学意义。Hoechst 33342/PI荧光双染佐证了这一结果,TSN与IM组镜下可见染色质固缩、呈强蓝色荧光的早期凋亡细胞。细胞周期结果显示,与对照组相比,15nmol/L TSN组S期细胞增多,但差异无统计学意义;30 nmol/L TSN可使细胞周期发生S期阻滞。结论:TSN可抑制GIST-T1细胞增殖并促进其凋亡。第二部分:TSN对GIST-T1细胞c-KIT表达的影响目的:探索TSN对GIST-T1细胞c-KIT表达的影响。方法:用0、15、30 nmol/L TSN、50 nmol/L IM体外干预GIST-T1细胞48h后,采用qRT-PCR及Western Blot实验检测c-KIT mRNA及其相关蛋白表达的影响。结果:qRT-PCR结果显示,TSN可下调c-KI

关键词：胃肠间质瘤川楝素伊马替尼增殖凋亡

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川楝素通过下调c-kit表达抑制GIST-T1细胞增殖并促进其凋亡

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第三军医大学学报 2021年第13期43卷 1235-1242页

作者：胡笑宇杨文生康政宇彭正伟李玲刘希陈诣佳张林西南交通大学医学院成都610031 中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区成都610083 西南医科大学临床医学院四川泸州646000

目的研究川楝素(toosendanin,TSN)对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响,并对其相关机制进行初步探索。方法不同浓度TSN体外干预GIST-T1细胞,采用CCK-8检测TSN对GIST-T1细胞增殖的影响;根据结果进一步选择实验浓度,分为0、15、30 nmol/L TS... 详细信息

目的研究川楝素(toosendanin,TSN)对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响,并对其相关机制进行初步探索。方法不同浓度TSN体外干预GIST-T1细胞,采用CCK-8检测TSN对GIST-T1细胞增殖的影响;根据结果进一步选择实验浓度,分为0、15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L伊马替尼(imatinib,IM)作为阳性对照;流式细胞仪及Hoechst 33342/PI荧光双染检测细胞凋亡及细胞周期;qRT-PCR及Western blot检测c-KIT/PI3K/AKT/mTOR mRNA及相关蛋白表达。结果 TSN可抑制GIST-T1细胞增殖(P<0.01),其48 h IC_(50)为18.75 nmol/L,72 h IC_(50)为17.93 nmol/L。与对照组相比,15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L IM均可引起不同程度细胞凋亡(P<0.01),但各药物组间凋亡率差异无统计学意义。30 nmol/L TSN可使细胞周期发生S期阻滞(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示:15 nmol/L TSN即可下调GIST-T1细胞c-KIT、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果也证实:15 nmol/L TSN同样抑制了c-KIT、PI3K、AKT、mTOR及其磷酸化蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 TSN通过下调c-KIT表达,抑制GIST-T1细胞增殖并促进凋亡,可能是通过PI3K/AKT/mTOR通路发挥作用。

关键词：胃肠间质瘤川楝素伊马替尼细胞增殖细胞凋亡

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纳米炭吸附碘克沙醇术前、术中双重示踪直肠癌侧方淋巴结的实验研究

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重庆医科大学学报 2021年第1期46卷 34-39页

作者：刘希杨文生康政宇陈诣佳胡笑宇黄伟何升东张林西南医科大学临床医学院泸州646000 中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区成都610083 中国人民解放军西部战区总医院烧伤整形科成都610083

目的:初步探讨碘克沙醇-纳米炭混悬液通过术前CT淋巴造影(CT lymphography,CT-LG)联合术中染色法双重示踪淋巴结的可行性及诊断价值。方法:采用人结直肠癌细胞悬液注射于裸鼠直肠黏膜下建立直肠癌原位移植淋巴转移模型。将30只模型鼠随... 详细信息

目的:初步探讨碘克沙醇-纳米炭混悬液通过术前CT淋巴造影(CT lymphography,CT-LG)联合术中染色法双重示踪淋巴结的可行性及诊断价值。方法:采用人结直肠癌细胞悬液注射于裸鼠直肠黏膜下建立直肠癌原位移植淋巴转移模型。将30只模型鼠随机分为2组,碘克沙醇组9只,双重示踪组21只。碘克沙醇组在直肠黏膜下注射碘克沙醇溶液,双重示踪组则注射碘克沙醇-纳米炭混悬液,分别进行间质淋巴造影,然后进行组织学检查。结果:碘克沙醇组在5 min、30 min观察到强化淋巴结。双重示踪组在2 h、3 h、5 h观察到强化淋巴结,3 h可获得最佳造影效果。间接CT-LG检测到41枚强化淋巴结,其中碘克沙醇组18枚,双重示踪组23枚,与淋巴结活检的位置一致。用密度不均匀、形态不规则、有充盈缺损作为淋巴结转移诊断标准时,2组肠系膜根部淋巴结(caudal mesenteric lymph node,CLN)转移的灵敏度和阳性预测值均为100%;双重示踪组和碘克沙醇组淋巴结转移的敏感性为78.6%vs. 81.8%,特异性为77.8%vs. 85.7%,准确性为78.3%vs. 83.3%。结论:碘克沙醇-纳米炭混悬液间接CT-LG既可用于术前定位淋巴结和评估转移情况,又可黑染淋巴结协助术中活检或清扫淋巴结。

关键词：直肠癌淋巴结转移纳米炭碘克沙醇淋巴造影术

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电离辐射对胃肠道间质瘤细胞增殖以及Ano1蛋白表达的影响

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西南军医 2021年第3期23卷 219-224页

作者：陈诣佳胡笑宇刘希杨文生康政宇何升东张林西南交通大学医学院四川成都610031 中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区四川成都610083 中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心烧伤整形科四川成都610083 西南医科大学临床医学院四川泸州646000

目的探究电离辐射后胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumor,GIST)细胞增殖活性和凋亡以及电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。方法实验细胞为人胃肠道间质瘤细胞株(GIST-T1),实验分组为未照射组、2 Gy照射组、5 Gy照射组... 详细信息

目的探究电离辐射后胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumor,GIST)细胞增殖活性和凋亡以及电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。方法实验细胞为人胃肠道间质瘤细胞株(GIST-T1),实验分组为未照射组、2 Gy照射组、5 Gy照射组、7 Gy照射组,观察时间点分别为照射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d。通过CCK8法和流式细胞仪检测电离辐射后GIST细胞增殖活性和凋亡,以RT-PCR和Western Blot方法检测电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。结果GIST细胞在接受不同剂量的电离辐射急性照射后,生长受到抑制,且有凋亡表现,Ano1蛋白的表达出现了先下降、后回升的变化。随着照射剂量增加,Ano1表达下降的程度越大、到达谷值时间越短,且Ano1的表达恢复速度越慢。结论GIST细胞增殖活性的抑制程度和细胞凋亡率与照射剂量和照射后时间呈依赖关系,Ano1蛋白的表达出现了先下降、后回升的变化。提示Ano1可能是GIST的放疗靶点。

关键词：胃肠道间质瘤放疗电离辐射 Ano1蛋白

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可视化人结直肠癌细胞裸鼠直肠原位移植淋巴转移模型的建立

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中国普外基础与临床杂志 2020年第6期27卷 679-684页

作者：刘希杨文生康政宇陈诣佳胡笑宇黄伟何升东张林中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区成都610083 西南医科大学临床医学院四川泸州646000 西南交通大学临床医学院成都610031 中国人民解放军西部战区总医院烧伤整形科成都610083

目的建立可以动态观察直肠癌生长及淋巴转移的原位移植模型,初步探讨活体成像系统观察直肠癌生长和转移的可行性。方法采用裸鼠直肠黏膜下注射红色荧光蛋白标记的人结直肠腺癌细胞HCT 116建立原位移植模型,借助活体成像系统在不同时间... 详细信息

目的建立可以动态观察直肠癌生长及淋巴转移的原位移植模型,初步探讨活体成像系统观察直肠癌生长和转移的可行性。方法采用裸鼠直肠黏膜下注射红色荧光蛋白标记的人结直肠腺癌细胞HCT 116建立原位移植模型,借助活体成像系统在不同时间点采集荧光信号图像,实时观察癌细胞在裸鼠直肠的生长和转移情况,应用病理学方法对原位移植淋巴转移模型进行验证。结果50只可视化裸鼠直肠原位移植淋巴结转移均成功构建。在原位移植后2~7周,所有裸鼠在活体成像系统中观察到了肿瘤荧光蛋白表达。原位移植后随着时间的延长,移植瘤体积的增大,积分光密度值逐渐增大。裸鼠直肠系膜根部淋巴结转移、主动脉旁淋巴结转移、肝转移和肺转移成时间依赖性增长。组织学检查与依靠淋巴结表达荧光蛋白来判断转移情况的结果一致。结论可视化裸鼠直肠原位移植及淋巴转移模型技术可靠可行。活体成像系统对可视化裸鼠直肠原位移植瘤生长进行实时、无创及动态观测和淋巴转移的观察简便有效。

关键词：直肠肿瘤原位移植模型淋巴转移活体成像

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101例胃肠道间质瘤术前外周血NLR、PLR和SII与其临床病理特征及预后的相关性研究

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中国普外基础与临床杂志 2022年第6期29卷 731-737页

作者：康政宇彭正伟李玲胡笑宇杨文生聂瑚玮陈瑷玲张林西南医科大学临床医学院四川泸州646000 中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区成都610083 西南交通大学医学院成都610031

目的探究胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)患者术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophils to lymphocytes ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet to lymphocyte ratio,PLR)和系统免疫炎症指数(systemic immune inflammation index,SII)与其临床病理特征及预后的相关性。方法回顾性收集中国人民解放军西部战区总医院2014年12月至2018年12月期间经手术治疗的101例GIST患者的临床病理资料及血常规结果,计算NLR、PLR和SII,并通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线计算NLR、PLR和SII最佳截断值。采用卡方检验或t检验分析NLR、PLR和SII与GIST临床病理特征之间的关系。应用Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验进行单因素分析,明确GIST患者无复发生存时间(recurrence-free survival,RFS)的影响因素。应用Cox回归模型进行多因素分析,以明确GIST患者RFS的独立影响因素。结果GIST患者术前的NLR、PLR和SII与肿瘤部位、肿瘤直径及NIH危险程度分级具有相关性(P0.05)。Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验单因素分析结果表明:NLR、PLR、SII、手术方式、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤细胞核分裂象和NIH危险程度分级是GIST患者RFS的影响因素。Cox回归多因素分析结果表明:术后是否接受规律的伊马替尼辅助治疗(HR=32.876,P<0.001)、NIH危险程度分级(HR=129.182,P<0.001)和PLR(HR=5.719,P=0.028)是GIST患者RFS的独立影响因素。结论GIST患者术前的NLR、PLR和SII与GIST患者的肿瘤部位、肿瘤直径和NIH危险程度分级相关,是患者术后RFS的影响因素。PLR是GIST患者RFS的独立影响因素。

关键词：胃肠道间质瘤中性粒细胞与淋巴细胞比值血小板与淋巴细胞比值系统免疫炎症指数临床病理特征无复发生存时间

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3孔法与5孔法腹腔镜辅助中高位直肠癌根治术的近期疗效比较

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中国普外基础与临床杂志 2021年第1期28卷 43-47页

作者：杨文生刘希何升东康政宇陈诣佳胡笑宇黄伟张林西南医科大学临床医学院四川泸州646000 中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区成都610083 中国人民解放军西部战区总医院烧伤整形科成都610083 西南交通大学临床医学院成都610083

目的比较3孔法和5孔法腹腔镜手术在中高位直肠癌中的近期疗效。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月期间于中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区行手术治疗的67例直肠癌患者的临床资料,按照手术方式分为3孔组(33例)和5孔... 详细信息

目的比较3孔法和5孔法腹腔镜手术在中高位直肠癌中的近期疗效。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月期间于中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区行手术治疗的67例直肠癌患者的临床资料,按照手术方式分为3孔组(33例)和5孔组(34例)。对比分析2组患者的手术、病理、术后近期相关指标以及随访情况。结果3孔组的手术切口总长度和术后第3天视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)疼痛评分均优于5孔组(P0.05)。3孔组获访30例,随访时间12~24个月,中位时间为19个月;5孔组获访29例,随访时间12~24个月,中位时间为19.5个月。2组患者的肠梗阻发生率、局部复发率、远处转移率和死亡率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与常规5孔法腹腔镜手术相比,3孔法腹腔镜手术能够缩短切口总长度,减少手术创伤,安全有效。

关键词：中高位直肠癌 3孔 5孔腹腔镜手术近期疗效

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论数字政府中人工智能的法律地位与规范体系——以人工智能立法为背景

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行政法学研究 2025年第01期 38-52页

作者：刘绍宇浙江大学光华法学院

随着人工智能技术及产业的发展和数字政府建设的不断推进，人工智能在数字政府中的应用越来越频繁，程度越来越深，但在提升行政效能和行政质量的同时，也给民主、法治和基本权利保护等公法价值带来极大的冲击。为了解决这一问题，将人... 详细信息

随着人工智能技术及产业的发展和数字政府建设的不断推进，人工智能在数字政府中的应用越来越频繁，程度越来越深，但在提升行政效能和行政质量的同时，也给民主、法治和基本权利保护等公法价值带来极大的冲击。为了解决这一问题，将人工智能在法律定位上视为数字时代的行政助手，公共任务民营化的教义学框架便可用于解决上述公法价值的协调问题。一方面，行政助手具有一定独立性和自主性，符合目前人工智能向高阶甚至超级人工智能发展的趋势。另一方面，公共任务尽管交给了作为行政助手的人工智能，但是其不可逃逸出包括民主原则、法治原则和基本权利保护原则等公法义务的约束，国家仍负有保障其合法有效运行的责任。公共部门人工智能的规范体系尽管与私人部门相比存在相似之处，但是背后的价值理念和推导逻辑截然不同，应在公法原则指引下建构。未来在人工智能立法中，应对公共部门人工智能的应用予以专门规范，突出与私人部门的不同，对透明原则、公平原则和人工干预原则予以明文规定。

关键词：强人工智能数字政府公法行政助手

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数字出版的历史定位、技术路径和新质生产力

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中国编辑 2025年第1期 43-52页

作者：訾宇彤龙杰西安交通大学新闻与新媒体学院高等教育出版社

数字出版业态与媒介技术演进紧密交织，多样化的媒介技术极大丰富了数字出版的业态，但亦带来了数字化概念的泛滥与模糊。数字出版新质生产力的构建不仅依赖于技术工具革新，更需要从业者对技术工具的清晰认知和科学选择。为此，本文从... 详细信息

数字出版业态与媒介技术演进紧密交织，多样化的媒介技术极大丰富了数字出版的业态，但亦带来了数字化概念的泛滥与模糊。数字出版新质生产力的构建不仅依赖于技术工具革新，更需要从业者对技术工具的清晰认知和科学选择。为此，本文从技术逻辑视域出发，梳理数字出版从电子书、网络阅读平台、虚拟现实出版到出版大模型的技术路径，剖析其底层技术特征及其最佳应用场景，探索数字技术与出版行业形态发展的深层关系，形成了以建构企业战略管理能力为顶层设计、以强化人才培养为基础工程、以重塑管理模式为核心驱动、以升级产品形态及价值链为直接抓手的新质生产力构建路径。

关键词：数字出版出版技术出版深度融合出版管理新质生产力

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不同月龄豚鼠自发膝骨关节炎过程中全膝关节的病理变化

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2218-2224页

作者：胡笑燊李惠菁吕君玲肖显俊李涓李享刘凌金荣疆成都中医药大学养生康复学院四川省成都市610075 成都中医药大学临床医学院四川省成都市610075 成都中医药大学针灸推拿学院四川省成都市610075 八一骨科医院四川省成都市610075

背景:豚鼠因具有与人类相似的膝关节结构和接近的组织病理学特征,被认为是最有助于评估人类原发性骨关节炎的自发模型。目的:通过对1-18月龄豚鼠的全膝关节组织病理学分析,探讨豚鼠自发膝骨关节炎的病理过程。方法:选取健康1,6,10,14,16... 详细信息

背景:豚鼠因具有与人类相似的膝关节结构和接近的组织病理学特征,被认为是最有助于评估人类原发性骨关节炎的自发模型。目的:通过对1-18月龄豚鼠的全膝关节组织病理学分析,探讨豚鼠自发膝骨关节炎的病理过程。方法:选取健康1,6,10,14,16,18月龄Hartley雌性豚鼠各8只,将股四头肌进行苏木精-伊红染色,整体膝关节进行苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色,在光镜下观察软骨、软骨下骨、滑膜、半月板、肌肉的组织病理学情况,进行关节软骨Mankin评分和滑膜炎评分,并进行二者的相关性分析。结果与结论:(1)随着豚鼠月龄的增长,关节软骨Mankin评分越高(P<0.05),滑膜炎病理评分也逐渐增高(P<0.05),且二者之间存在显著正相关(r=0.641,P<0.001);(2)18月龄豚鼠软骨下骨骨髓病变发病率达50%,半月板损伤发生率达37.5%;且出现不同程度的骨赘和关节间隙变窄等病变,仅有少数豚鼠出现股四头肌肉炎症;(3)结果说明豚鼠随着年龄增长,出现明显的软骨缺损、滑膜炎症、软骨下骨病变、半月板损伤、骨赘形成和关节间隙变窄等,均与人类原发性膝骨关节炎的病理过程相似,是理想的自发性膝骨关节炎模型。

关键词：膝骨关节炎豚鼠病理软骨损伤滑膜炎骨髓损伤

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