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新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 108-118页

作者：周巧刘健万磊朱艳齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230012

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502... 详细信息

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。

关键词： miR-502-5p 骨关节炎新风胶囊炎症细胞外基质

黄芩清热除痹胶囊调控p53/p21信号通路延缓骨关节炎大鼠软骨细胞衰老的机制研究

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3330-3339页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍万磊黄旦郭锦晨齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院安徽中医药大学安徽中医药大学第一附属医院

探讨黄芩清热除痹胶囊（HQC）调控肿瘤抑制蛋白53（tumor protein p53,p53）/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21）通路延缓骨关节炎（OA）大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠（MIA）联合外界风... 详细信息

探讨黄芩清热除痹胶囊（HQC）调控肿瘤抑制蛋白53（tumor protein p53,p53）/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21）通路延缓骨关节炎（OA）大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠（MIA）联合外界风湿热环境刺激，诱导OA大鼠风湿热痹模型，分为正常（Con）组，OA模型（MIA）组，OA模型+风湿热刺激模型（MIA-M）组，MIA-M+HQC低（MIA-M+HQC-L）、中（MIA-M+HQC-M）、高（MIA-M+HQC-H）剂量组，MIA-M+氨基葡萄糖（MIA-M+GS）组，模型制备后灌胃30 d,苏木素-伊红（HE）和番红O固绿（SO）染色观察软骨病理变化，酶联免疫吸附（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-1β和IL-6的表达，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡和周期，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测基质降解酶13（MMP13）、聚蛋白多糖酶5（ADAMTS-5）、Ⅱ型胶原（COLⅡ）和转化生长因子-β（TGF-β）mRNA的表达，蛋白免疫印迹（WB）检测p53/p21通路、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A（p16）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）蛋白的表达。Con组大鼠关节软骨表面光滑平整，潮线光滑平整；MIA组和MIA-M组软骨层破坏明显，软骨基质减少，MIA-M组情况更严重。HQC高剂量组和MIA-M+GS组软骨表面基本完整，分层清晰。与MIA-M+HQC-H组相比，低、中剂量Mankin′s评分较高，MIA-M+GS组变化不明显。与Con组相比，MIA和MIA-M组软骨细胞G1的比例升高，S期、G2期比例下降，细胞凋亡率增加；与MIA-M组相比，HQC各剂量组以浓度依赖的方式抑制细胞凋亡，促进增殖；与MIA-M+HQC-H组相比，高剂量较中、低剂量作用更显著，与MIA-M+GS组相比差异无统计学意义。与Con组相比，MIA和MIA-M组IL-1β和IL-6升高，MMP13和ADAMTS-5 mRNA水平升高，p53、p21、p16和Bax蛋白升高，COLⅡ、TGF-β mRNA水平下降；与MIA-M组相比，HQC和GS药物干预后IL-1β和IL-6下降，MMP13和ADAMTS-5 mRNA、p53、p21、Bax和p16蛋白水平下降，Bcl-2升高；与MIA-M+HQC-H组相比，这些指标改善优于HQC低、中剂量组，与MIA-M+GS组差异不明显。HQC延缓MIA诱导的OA大鼠软骨细胞衰老，抑制炎症反应和细胞外基质（ECM）降解，其机制可能与抑制p53/p21通路有关。

关键词：黄芩清热除痹胶囊骨关节炎风湿热模型细胞衰老 p53/p21

基于文献计量学分析过去十年强直性脊柱炎研究的全球趋势

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中华临床免疫和变态反应杂志 2024年第3期18卷 258-264页

作者：从承志刘健黄旦李洋陈一鸣胡月迪周巧齐亚军安徽中医药大学第一附属医院现代中医内科应用基础与开发研究安徽省重点实验室合肥230031 安徽中医药大学第一临床医学院合肥230022

目的强直性脊柱炎(AS)是脊柱关节病的一种,属于自身免疫性疾病。在过去几十年中,关于AS的研究总体上呈上升趋势。通过文献计量学的方法,揭示AS研究领域的关注热点。方法基于检索Web of Science Core Collection(WoSCC)的科学引文索引扩... 详细信息

目的强直性脊柱炎(AS)是脊柱关节病的一种,属于自身免疫性疾病。在过去几十年中,关于AS的研究总体上呈上升趋势。通过文献计量学的方法,揭示AS研究领域的关注热点。方法基于检索Web of Science Core Collection(WoSCC)的科学引文索引扩展版(SCI-Expanded)中的出版物,记录了2013年至2023年期间发表的信息。通过使用VOSviewer、CiteSpace以及Excel软件对年度产出、领先国家、活跃机构、期刊、作者、共引参考文献和关键词的爆发等进行了可视化分析。结果通过检索和筛查,共获得了1193篇文章纳入分析。在最近十年中,与AS相关的研究数量呈增长态势。美国是该领域最高产的国家。最高产的机构是加拿大的多伦多大学。发文量排名前十的期刊中,《风湿病学年鉴》Annals of the rheumatic diseases获得了最高的引用量。来自德国的学者Poddubnyy发文量表现最为突出。“th 17 cells”、“antitumor necrosis factor”是该研究领域较为突出的关键词。结论本研究阐明了AS研究领域的研究现状及前沿热点,为该领域的下一步研究方向提供了科学性的数据支持。

关键词：强直性脊柱炎文献计量学可视化分析全球趋势

芪白平肺胶囊含药血清通过调节自噬抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的机制研究

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芪白平肺胶囊含药血清通过调节自噬抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的机...

作者：胡月迪安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的阐明芪白平肺胶囊含药血清（以下简称QBPF）改善低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的作用特点,探究芪白平肺胶囊含药血清介导PI3K/AKT信号通路在肺血管重构中的作用机制。方法1.QBPF制备:雄性SD大鼠按1.0g/kg/d药物剂量连续灌胃1... 详细信息

目的阐明芪白平肺胶囊含药血清（以下简称QBPF）改善低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的作用特点,探究芪白平肺胶囊含药血清介导PI3K/AKT信号通路在肺血管重构中的作用机制。方法1.QBPF制备:雄性SD大鼠按1.0g/kg/d药物剂量连续灌胃10天,腹主动脉取血。2.大鼠PASMCs的分离培养:采用组织块贴壁法剥离大鼠肺动脉并小心去除内皮和外膜,尽量高纯度分离出中膜平滑肌,免疫荧光化学鉴定PASMCs,取3-6代PASMCs用于后续实验研究。3.MTT法筛选最佳低氧时间及最佳QBPF浓度:设置低氧4h、6h、12h、24h、48h组,以常氧24h组作为对照,计算各组细胞增值率,得出最佳低氧时间Xh;设置低氧Xh+5%QBPF组、低氧Xh+10%QBPF组、低氧Xh+20%QBPF组,以低氧Xh组作为对照,计算各组细胞抑制率,得出最佳含药血清组。4.Ed U法测细胞增殖:分为常氧组,低氧组,20%QBPF组。细胞经造模或加药处理后,加入稀释好的Ed U标记细胞,固定和透化,加入Click-i T反应物,荧光显微镜下摄片。5.TEM法观察细胞超微结构:收集细胞后进行摄片前处理,数码相机摄片,观察并比较各组自噬小体数目;6.RT-q PCR测各组细胞Becline1、p62 m RNA表达;7.WB法测各组细胞PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT、LC3B、Becline-1、p62蛋白表达。结果1.荧光显微镜下PASMCs呈“峰-谷”状结构,免疫荧光化学鉴定α-SMA呈阳性条带状分布的绿色荧光,细胞核呈卵圆形的蓝色荧光。2.MTT法筛选后分组:（1）常氧组;（2）低氧24h组,（3）低氧24h+20%QBPF组。3.Ed U检测显示低氧24h组细胞增殖明显,加入20%QBPF后细胞增殖减弱。4.TEM显示低氧使自噬小体数量增多,加入20%QBPF后自噬小体数量减少。5.RT-q PCR检测表明低氧下Becline-1 m RNA表达量增加,p62的m RNA表达量下降,加入20%QBPF后Becline-1 m RNA表达量下降,p62的蛋白表达量上升。6.WB检测表明低氧下pPI3K、p-AKT、LC3-II/LC3-I、Becline-1蛋白表达量增加,p-62的蛋白表达量下降,加入20%QBPF后p-PI3K、p-AKT、LC3-II/LC3-I、Becline-1蛋白表达量减少,p62的蛋白表达量升高。7.WB检测显示加入自噬抑制剂3-MA后,与20%QBPF组比,20%QBPF+3-MA（25m M）组LC3-II/LC3-I蛋白表达量下降。结论1.QBPF能抑制PASMCs增殖,抑制自噬小体形成,下调自噬相关分子LC3-II/LC3-I、Becline-1表达,上调p62表达,表明QBPF抑制增殖可能与抑制细胞自噬水平相关。2.QBPF能下调通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT表达,并且自噬抑制剂3-MA与QBPF呈协同作用关系,表明QBPF可能通过介导PI3K/AKT信号通路抑制自噬水平来减少PASMCs增殖。

关键词：芪白平肺胶囊肺动脉平滑肌细胞增殖自噬 PI3K/AKT信号通路

GEO数据库联合机器学习策略识别骨关节炎特征性lncRNA分子标志物及实验验证

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四川大学学报:医学版 2023年第5期54卷 899-907页

作者：周巧刘健忻凌方妍妍齐亚军胡月迪安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 安徽中医药大学第二附属医院合肥230061 安徽省中医药科学院风湿病研究所合肥230031 安徽中医药大学合肥230012

目的利用GEO(Gene Expression Omnibus)数据库联合机器学习筛选骨关节炎(osteoarthritis,OA)特征性的长链非编码RNA(lncRNA)分子标志物。方法纳入185例OA及76例正常健康人样本,GEO数据库筛选数据集得出差异表达lncRNA,通过随机森林(rand... 详细信息

目的利用GEO(Gene Expression Omnibus)数据库联合机器学习筛选骨关节炎(osteoarthritis,OA)特征性的长链非编码RNA(lncRNA)分子标志物。方法纳入185例OA及76例正常健康人样本,GEO数据库筛选数据集得出差异表达lncRNA,通过随机森林(randomforest,RF)、最小绝对收缩和选择算子(LASSO)逻辑回归、支持向量机递归特征消除(SVM-RFE)3种算法筛选候选的lncRNA模型,绘制受试者操作特征曲线评价模型。收集临床OA患者30例和正常对照15例的外周血,测定免疫炎症指标,RT-PCR定量分析外周血单核细胞lncRNA分子标志物的表达,Pearson分析lncRNA与免疫炎症指标的相关性。结果LASSO得出14个关键标志物,SVM-RFE算法确定6个基因,RF算法确定24个基因。Venn图筛选得出3种算法的重叠基因,包括HOTAIR、H19、MIR155HG和NKILA。受试者工作特征曲线显示这4个lncRNA的曲线下面积均大于0.7。RT-PCR法发现与正常对照组相比,HOTAIR、H19、MIR155HG在OA患者外周血单核细胞中相对表达量升高,NKILA表达量下降(均P<0.01),结果与生物信息学预测结果相一致。Pearson相关性分析表明选定的lncRNA与临床免疫炎症指标相关。结论HOTAIR、H19、MIR155HG和NKILA可作为OA临床诊断分子标志物,且与临床免疫炎症指标相关。

关键词：骨关节炎长链非编码RNA 机器学习策略诊断标志物免疫炎症

中医药与降低强直性脊柱炎湿热证患者再入院风险相关:一项回顾性队列研究

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中国中药杂志 2023年第20期48卷 5651-5658页

作者：从承志刘健胡月迪李洋陈一鸣黄旦安徽省中医院安徽合肥230031 安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230022

该研究旨在分析中药对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)湿热证患者再入院风险的影响。对1 295例住院的AS患者进行了电话随访,通过筛查和排除,最终纳入1 044例随访成功的患者。基于倾向评分匹配(PSM)进行回顾性队列研究,使用Cox... 详细信息

该研究旨在分析中药对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)湿热证患者再入院风险的影响。对1 295例住院的AS患者进行了电话随访,通过筛查和排除,最终纳入1 044例随访成功的患者。基于倾向评分匹配(PSM)进行回顾性队列研究,使用Cox比例风险模型评估各因素对AS湿热证患者再入院风险的影响,Kaplan-Meier生存曲线用于分析中药干预时间对再入院的影响。结果显示,AS患者湿热证发生率为51.3%。在1∶1 PSM后,385例AS湿热证和385例非湿热证患者纳入分析。湿热证再入院率高于非湿热证患者(P12个月)再入院风险大幅降低。结果表明,AS湿热证患者的再入院率高于非湿热证患者,中药是其再入院风险降低的保护性因素,而且中药干预时间越长再入院风险越低。

关键词：中药强直性脊柱炎湿热证电话随访队列研究

初中英语教师课堂反馈语对学生交际意愿影响的调查研究

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初中英语教师课堂反馈语对学生交际意愿影响的调查研究

作者：胡月重庆三峡学院

学位级别：硕士

善意性别偏见经历量表在中国女大学生中的信效度检验

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中国临床心理学杂志 2024年第1期32卷 107-111页

作者：杨泽垠胡月大连理工大学马克思主义学院大连116024 大连理工大学心理健康教育与咨询中心大连116024

目的:检验善意性别偏见经历量表(experiences with benevolent sexism scale,EBSS)在中国女大学生中的信度和效度。方法:使用中文版善意性别偏见经历量表对828名女大学生进行测量,以性别偏见事件量表(SSE)、善意性别偏见量表(BSI)、自... 详细信息

目的:检验善意性别偏见经历量表(experiences with benevolent sexism scale,EBSS)在中国女大学生中的信度和效度。方法:使用中文版善意性别偏见经历量表对828名女大学生进行测量,以性别偏见事件量表(SSE)、善意性别偏见量表(BSI)、自尊量表(SES)、流调中心抑郁量表(CES-D)作为效标问卷。4周后选取150名被试进行重测。结果:修订后的EBSS包含性别差异互补、家长式保护和异性亲密三个维度,共24个题目,具有良好的结构效度(χ^(2)/df=2.32,CFI=0.93,GFI=0.91,TLI=0.92,RMSEA=0.045)。EBSS各维度和总分的Cronbach’s α系数为0.81~0.89,重测信度为0.72~0.79。EBSS总分和各维度与性别偏见事件频率(r=0.28~0.63)、善意性别偏见态度感知(r=0.39~0.57)、自尊水平(r=-0.39~0.15)、抑郁症状(r=-0.12~0.36)均显著相关。结论:善意性别偏见经历量表具有良好的信效度,适用于中国女大学生群体。

关键词：善意性别偏见经历女大学生信度效度

数字化赋能制造企业服务创新的价值创造机理研究

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中国管理科学 2024年

作者：罗建强胡月明江苏大学管理学院江苏大学中国农业装备产业发展研究院

在既定产品技术生命周期内，制造企业存在着凭技术“卖产品”或凭创新“卖服务”的决策难题，尤其数字化情境下产品技术与服务创新关系日趋紧密，服务创新的价值创造机理成为亟需解决的议题。遵循服务主导逻辑，考虑了数字化对服务创新... 详细信息

在既定产品技术生命周期内，制造企业存在着凭技术“卖产品”或凭创新“卖服务”的决策难题，尤其数字化情境下产品技术与服务创新关系日趋紧密，服务创新的价值创造机理成为亟需解决的议题。遵循服务主导逻辑，考虑了数字化对服务创新的赋能作用，借助最优控制原理，构建了既定产品技术生命周期内制造企业服务创新的价值创造模型，揭示了数字化赋能制造企业服务创新的价值创造机理。研究表明：制造企业服务创新的价值创造是主动响应市场服务需求和关注产品技术对服务创新承载共同作用的结果；数字化赋能制造企业服务创新的价值创造存在临界值；数字化赋能下服务创新水平存在“超前性”的特征。

关键词：制造企业服务创新数字化产品技术生命周期价值创造