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芽胞杆菌芽胞外壁蛋白exp基因敲除突变株的构建与特性分析

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芽胞杆菌芽胞外壁蛋白exp基因敲除突变株的构建与特性分析

作者：肖水华福建农林大学

学位级别：硕士

在芽胞杆菌属中,蜡样芽胞杆菌群如炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌等能够在营养缺乏的不良环境中产生高度抗逆性的芽胞。芽胞最外层包裹着一层宽大、膨松的芽胞外壁,它对芽胞粘附、致病菌传播、靶标锚定及萌发调控起着一定... 详细信息

在芽胞杆菌属中,蜡样芽胞杆菌群如炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌等能够在营养缺乏的不良环境中产生高度抗逆性的芽胞。芽胞最外层包裹着一层宽大、膨松的芽胞外壁,它对芽胞粘附、致病菌传播、靶标锚定及萌发调控起着一定作用。诸多研究曾致力于鉴定芽胞外壁蛋白质,但目前为止只有少数被鉴定出,且它们在决定芽胞结构和功能中的作用还知之甚少。本研究以无晶体苏云金芽胞杆菌8010为出发菌株,选用温敏载体pRN5101,通过酶切、连接和PCR,构建了含芽胞外壁蛋白exp基因上游序列、卡纳基因、exp基因下游序列的基因敲除载体pRN-ExpK。采用同源重组技术敲除了无晶体苏云金芽胞杆菌8010芽胞外壁蛋白exp基因,成功获得exp基因缺失突变株。通过测定生长曲线、芽胞抗逆性、疏水性、芽胞萌发及电子显微镜观察等方法分析突变株与出发菌株的表型及性质差异。结果表明,突变株生长速率低于出发菌株,芽胞热抗性、溶菌酶及化学药品抗性也有所下降。但疏水性实验表明,Exp蛋白对芽胞外壁表面的疏水性和吸附特性影响不大。芽胞外壁除了具有防御功能外还可能有助于营养生长的恢复。为此,利用萌发剂L-丙氨酸、肌苷等诱导芽胞萌发结果表明,突变株芽胞萌发速率加快。此外,电子显微镜下突变株芽胞干瘪褶皱,胞子仅松弛地结合在易碎的芽胞外壁上,部分芽胞外壁甚至完全脱离,呈碎片状散落。这些结果证明芽胞外壁蛋白Exp作为芽胞外壁的组成成分,起到增强芽胞抗性、阻止芽胞过早萌发的作用,对形成强健的芽胞外壁具有重要意义。本研究初步探讨了芽胞理化特性和芽胞外壁蛋白基因的功能,有助于阐明蜡样芽胞杆菌芽胞形成及萌发调控机制,为进一步研究产晶体苏云金芽胞杆菌中芽胞和伴胞晶体形成机制奠定了基础。

关键词：芽胞杆菌芽胞外壁蛋白基因敲除芽胞特性

地下室钢筋混凝土外墙板非荷载作用裂缝控制研究

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地下室钢筋混凝土外墙板非荷载作用裂缝控制研究

作者：肖水华湖南大学

学位级别：硕士

本文旨在研究地下室外墙板裂缝控制，其模型实质是对受基础约束墙板裂缝控制的研究。首先研究了基础对墙板的约束程度，通过大量数值计算，回归拟合得到了不同长高比、不同长度的钢筋混凝土墙板在发生非荷载变形时受基础的约束程度。回... 详细信息

本文旨在研究地下室外墙板裂缝控制，其模型实质是对受基础约束墙板裂缝控制的研究。首先研究了基础对墙板的约束程度，通过大量数值计算，回归拟合得到了不同长高比、不同长度的钢筋混凝土墙板在发生非荷载变形时受基础的约束程度。回归公式表明，墙板上不同点所受基础的约束程度不仅与墙板的长高比有关，而且还与墙板的长度、高度两个单项因素有关。本文的计算结果与ANSYS计算结果对比表明，拟合公式能较好地反映墙板上各点受基础约束程度，使约束程度的计算公式具有连续性和通用性。有了这一拟合公式后，计算墙板控制截面、控制点上的各非荷载变形引起的非荷载应力将变得较为简单。利用非荷载应力简化计算方法，对各种非荷载应力进行了计算分析。分析研究表明气候变化引起的温度应力、混凝土的收缩应力和水化温升引起的温度应力是引起墙板开裂的主要因素。最后编制了综合非荷载应力计算程序和裂缝控制设计流程，供裂缝控制设计和抗裂分析使用。对构造配筋、设置应力释放带和使用微膨胀混凝土等控制裂缝的有效措施进行了讨论。分析墙板受基础约束程度的变化规律，可知构造配筋的作用效果可以直接按照仅两端受固支约束的构件进行讨论，讨论结果表明通过构造配筋可以提高外墙墙板的抗开裂能力和有效控制墙板开裂之后的裂缝宽度发展，并提出了混凝土应力应变与配筋率之间的关系、合理的配筋率、裂缝宽度与配筋率之间的关系、裂缝宽度与裂缝数量之间的定量关系等，可以作为设计控制的理论依据。对设置应力释放带的地下室外墙板进行了非荷载应力对比计算。通过分析可知，设置释放带宜短些，否则失去作用。在此基础上推导了微膨胀混凝土的极限伸缩缝长度计算实用公式。本文取湖南省的最不利气候条件，讨论了在使用微膨胀混凝土时如何通过温度控制进行裂缝控制。定量计算的结果可以用于指导实际工程设计。

关键词：地下室外墙基础约束程度裂缝控制温度应力收缩应力应力分析

基于时变可靠度的RC梁正截面承载力可靠性评估

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湖南大学学报（自然科学版） 2004年第1期31卷 52-55页

作者：吴方伯肖水华湖南大学土木工程学院湖南长沙410082

简要论述了时变可靠度的计算方法,选用其中的直接积分法,在一些合理假定基础上得出了时变可靠度计算的实用公式.利用该公式,以实际工程为背景,对一无设计依据的钢筋混凝土梁的正截面承载力可靠度进行了评估,最后对用直接积分法和实用公... 详细信息

简要论述了时变可靠度的计算方法,选用其中的直接积分法,在一些合理假定基础上得出了时变可靠度计算的实用公式.利用该公式,以实际工程为背景,对一无设计依据的钢筋混凝土梁的正截面承载力可靠度进行了评估,最后对用直接积分法和实用公式两种计算方法的结果进行了对比分析研究.

关键词：可靠性评估钢筋混凝土梁时变可靠度结构鉴定

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小学道德与法治教学中寓言故事的价值探析

福建教育学院学报 2023年第5期24卷 7-9,F0003页

作者：肖水华将乐县光明中心校福建将乐353300

寓言故事运用于小学道德与法治教学具有重要价值,它丰富了教学素材,扩充了教学资源,又以其简短生动的内容提高学生的学习兴趣。在教学中,教师可以通过寓言引路,增强教材内容的可读性;寓言分析,深化知识的学习理解;寓言思辨,涵养学生的... 详细信息

寓言故事运用于小学道德与法治教学具有重要价值,它丰富了教学素材,扩充了教学资源,又以其简短生动的内容提高学生的学习兴趣。在教学中,教师可以通过寓言引路,增强教材内容的可读性;寓言分析,深化知识的学习理解;寓言思辨,涵养学生的理性思维。

关键词：小学道法寓言故事教学方法价值

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白降丹液纱条治疗颈淋巴结核的换药护理

中华今日医学杂志 2003年第7期3卷 82-83页

作者：肖水华江苏省南通市中医院226001

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基础对地下室钢筋混凝土墙板约束的研究

工业建筑 2006年第8期36卷 39-41页

作者：李知兵段祺成肖水华湖南建材高等专科学校衡阳421008

根据对墙板受基础约束进行的分析,建立了简化的理论模型,得出了墙板受基础约束程度的计算公式,并且验证了公式的正确性。

关键词：墙板约束地下室

参建积极有为共建走在前列──西部边疆地区组织部队民兵创建精神文明的实践与思考

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传承 2002年第1期 35-37页

作者：肖水华

西部边疆地区由于地理位置和历史的原因,交通不便,人流不畅,信息闭塞,发展滞后.改革开放以来,沿海发达地区和有优势自然条件及交通方便的地区普遍进入了小康社会,在地广人稀的边境地区,特别是连片的石山贫困地区,通过国家"八七"扶贫攻坚... 详细信息

西部边疆地区由于地理位置和历史的原因,交通不便,人流不畅,信息闭塞,发展滞后.改革开放以来,沿海发达地区和有优势自然条件及交通方便的地区普遍进入了小康社会,在地广人稀的边境地区,特别是连片的石山贫困地区,通过国家"八七"扶贫攻坚,在党和政府的关怀帮助下,刚刚摆脱贫困解决温饱.文化教育仍然滞后,不少人文化素质偏低,特别是广大基层群众精神文化生活的贫困问题更加突出,影响着西部边疆地区社会的进步与发展.

关键词：西部边疆地区精神文明建设积极有为走在前列民兵《公民道德建设实施纲要》部队基层社会主义文明文明创建活动西部大开发

不利地质环境下水上作业钻孔灌注桩施工措施分析

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建筑技术开发 2009年第9期36卷 54-55页

作者：刘志彤肖水华浙江水利水电专科学校杭州310018 中国联合工程公司

对不良地质环境中的钻孔灌注桩所需要搭设的栈桥、钢平台、钢护简的设计、施工进行了分析,提出了解决的施工方案。

关键词：栈桥钢平台钢护简钻孔灌注桩

苏云金芽孢杆菌NAD(P)H:醌氧化还原酶基因的克隆和敲除载体的构建

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福建农林大学学报（自然科学版） 2012年第5期41卷 508-512页

作者：李今煜肖水华黄天培福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室福建福州350002

以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis ***)8010为研究材料,通过PCR技术获得Bt 8010菌株NAD(P)H:醌氧化还原酶基因上下游2个片段,以含有卡那霉素抗性基因的pDG780质粒为中间载体,通过酶切、连接和PCR,构建含待敲除NAD(P... 详细信息

以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis ***)8010为研究材料,通过PCR技术获得Bt 8010菌株NAD(P)H:醌氧化还原酶基因上下游2个片段,以含有卡那霉素抗性基因的pDG780质粒为中间载体,通过酶切、连接和PCR,构建含待敲除NAD(P)H:醌氧化还原酶基因上下游片段、卡那霉素抗性基因的重组质粒pRN5101DKU,为后续Bt8010菌株NAD(P)H:醌氧化还原酶基因的敲除做准备.

关键词：苏云金芽孢杆菌 NAD(P)H:醌氧化还原酶基因基因敲除载体