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膜生物反应器对白斑综合症病毒的去除研究

环境科学 2008年第3期29卷 650-654页

作者：潘忠诚赵方波何建国翁少萍温青哈尔滨工程大学材料科学与化学工程学院环境工程系哈尔滨150001 中山大学生命科学院广州510275

研究了不同孔径的膜生物反应器对游离白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的截留效果,对不同膜生物反应器的进水、上清液、出水进行荧光定量PCR检测.结果表明,0.45μm孔径的膜组件对磷酸缓冲液中WSSV的去除量仅0.6 lg;0.22... 详细信息

研究了不同孔径的膜生物反应器对游离白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的截留效果,对不同膜生物反应器的进水、上清液、出水进行荧光定量PCR检测.结果表明,0.45μm孔径的膜组件对磷酸缓冲液中WSSV的去除量仅0.6 lg;0.22μm孔径的膜对WSSV病毒的去除量为1.18 lg;0.1μm孔径的膜对WSSV的去除量为5.5 lg.进一步研究表明,在养殖废水中添加游离的WSSV时,随着时间的延长,膜组件的生物样物质对WSSV去除起了重要的作用;孔径为0.45μm的膜生物反应器,对WSSV的去除量也达到5.35 lg;3种不同孔径膜生物反应器中运行12h后,对WSSV的去除率并没有显著差异.

关键词：膜生物反应器养殖废水定量PCR 白斑综合症

三种酚类内分泌干扰物在珠江口不同水体中质量浓度分布的研究

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安全与环境学报 2010年第2期10卷 96-101页

作者：李向丽邹世春栾天罡翁少萍林里中山大学生命科学学院水产品安全教育部重点实验室广州510275 中山火炬职业技术学院生物医药系广东中山528436 中山大学海洋学院广州510275

应用固相微萃取衍生化与气相色谱质谱联用技术,对珠江口地区不同水体中3种酚类内分泌干扰物(pEDCs):辛基酚(OP)、壬基酚(NP)和双酚A(BPA)的质量浓度分布进行了调查。结果表明,淡水水体中3种pEDCs质量浓度为:饮用水水源最低,水产养殖鱼... 详细信息

应用固相微萃取衍生化与气相色谱质谱联用技术,对珠江口地区不同水体中3种酚类内分泌干扰物(pEDCs):辛基酚(OP)、壬基酚(NP)和双酚A(BPA)的质量浓度分布进行了调查。结果表明,淡水水体中3种pEDCs质量浓度为:饮用水水源最低,水产养殖鱼塘次之,其后依次是珠江河段(广州和中山河段)和污水处理厂,而垃圾渗沥液处理厂的质量浓度最高。垃圾渗沥液中OP、NP和BPA的质量浓度分别为1.58～4.35μg·L^(-1)、79.0～276μg·L^(-1)和862～18 891 μg·L^(-1)。咸淡水水体中,深圳福田自然保护区NP质量浓度高于香港米埔自然保护区,平均值分别为0.88 μg·L^(-1)和0.39 μg·L^(-1)。两个保护区内BPA的质量浓度明显高于OP和NP的质量浓度。海洋水体中pEDCs质量浓度与部分淡水和咸淡水相当,其中东莞近海水域中NP的质量浓度比中山和深圳近海水域偏高(分别为0.76～1.12μg·L^(-1)和0.26～0.73μg·L^(-1))。垃圾渗沥液中pEDCs的污染严重,可能是周围环境水体受pEDCs污染的主要来源之一,直接排放到周围水体,对生物具有潜在的生态风险。

关键词：环境学酚类内分泌干扰物珠江口水体环境污染

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磁场和磁化水对观赏鱼孵化、生长的作用

动物学杂志 1989年第2期24卷 9-11页

作者：章之蓉谢瑞生翁少萍肖丽莹中国科学院南海海洋研究所

磁作用于水(包括水中杂质)影响生物的特性,已引起生物学各领域研究人员的注意。本文报道了磁场和磁化水对观赏鱼孵化的作用,提高孵化率15—30％并缩短了孵化时间。磁场和磁化水可促进生长,平均增重30—40％,增强抵抗力,少疾病。此外,文... 详细信息

磁作用于水(包括水中杂质)影响生物的特性,已引起生物学各领域研究人员的注意。本文报道了磁场和磁化水对观赏鱼孵化的作用,提高孵化率15—30％并缩短了孵化时间。磁场和磁化水可促进生长,平均增重30—40％,增强抵抗力,少疾病。此外,文中对机理进行了初步的讨论。

关键词：观赏鱼磁场磁化水孵化

鳜传染性脾肾坏死病毒ICR489基因序列分析

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中山大学学报（自然科学版） 2002年第1期41卷 64-67页

作者：邓敏何建国翁少萍吕玲何华虹中山大学生命科学学院广州510275

报道了鳜鱼传染性脾肾坏死病毒 (ISKNV)的ICR489基因结构及其序列分析。对ISKNVDNAKpnⅠB酶切片段的序列分析结果发现该序列中含有完整的ICR489基因。ISKNVICR489基因完整读码框为 10 11bp ,GC含量为 5 6 97% ,等电点为 6 82 ,编码一... 详细信息

报道了鳜鱼传染性脾肾坏死病毒 (ISKNV)的ICR489基因结构及其序列分析。对ISKNVDNAKpnⅠB酶切片段的序列分析结果发现该序列中含有完整的ICR489基因。ISKNVICR489基因完整读码框为 10 11bp ,GC含量为 5 6 97% ,等电点为 6 82 ,编码一个长为 337aa、相对分子质量为 382 70的推定蛋白。结构分析发现该基因起始密码子上游具有启动子元件TATAbox,有反向重复序列可形成茎环 ,并有一段回文序列。ISKNV与其它 3种虹彩病毒 (FV3、RRV和LCDV_1)的ICR489基因氨基酸序列具有一定的同源性 ,但ISKNV与它们的同源性不高。

关键词：虹彩病毒传染性脾肾坏死病毒 ICR489基因序列分析系统进化鳜鱼基因结构

TaqMan MGB实时荧光PCR对转基因大豆定量检测的研究

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中山大学学报（自然科学版） 2008年第3期47卷 140-142页

作者：黄东东翁少萍吕玲常迪何建国中山大学生命科学学院广东广州510275

利用实时荧光定量PCR技术,根据转基因大豆(Roundup ReadyTM)的外源基因35S启动子序列设计引物和TaqMan MGB探针,对大豆粉中Roundup ReadyTM大豆含量进行了定量检测,根据这个检测体系建立了35S启动子Ct值与样品中转基因成分数量之间的标... 详细信息

利用实时荧光定量PCR技术,根据转基因大豆(Roundup ReadyTM)的外源基因35S启动子序列设计引物和TaqMan MGB探针,对大豆粉中Roundup ReadyTM大豆含量进行了定量检测,根据这个检测体系建立了35S启动子Ct值与样品中转基因成分数量之间的标准曲线和线性回归方程(相关系数r2:0.9942)。本研究设计的方法还可以应用到多组分的食品、饲料等加工产品,检测转基因成分的含量,并可作为转基因食品常规PCR定性检测方法。

关键词：转基因大豆实时定量PCR TaqMan MGB探针基因生物技术食品技术

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对感染白斑综合症病毒的亲虾子代的跟踪检测

中山大学学报（自然科学版） 2003年第1期42卷 66-69页

作者：江世贵翁少萍吕玲苏天风何建国中山大学生命科学学院广东广州510275 中国水产科学研究院南海水产研究所广东广州510300

感染白斑综合症病毒 (whitespotsyndromevirus,WSSV)的斑节对虾Penaeusmonodon亲虾能产出携带WSSV的卵子 ,这些卵子可完成胚胎发育过程、孵化出无节幼体 ,并可以培育出状幼体、糠虾幼体和仔虾。在确认只有亲虾作为WSSV传染源的情况下 ... 详细信息

感染白斑综合症病毒 (whitespotsyndromevirus,WSSV)的斑节对虾Penaeusmonodon亲虾能产出携带WSSV的卵子 ,这些卵子可完成胚胎发育过程、孵化出无节幼体 ,并可以培育出状幼体、糠虾幼体和仔虾。在确认只有亲虾作为WSSV传染源的情况下 ,培育出的部分幼体和部分仔虾携带WSSV ;在相同的条件下 ,不带WSSV的亲虾产出的卵及幼体、仔虾未检测到WSSV。

关键词：白斑综合症病毒 white spot syndrome virus,WSSV 斑节对虾PenaeusMonodon 检测子代亲虾

赤点石斑鱼神经坏死病毒外壳蛋白全基因克隆与序列分析

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水产学报 2005年第3期29卷 429-432页

作者：黄剑南林蠡翁少萍何建国中国水产科学研究院南海水产研究所广东广州510300 广东广州510275 广东广州510275 广东广州510275 中山大学生命科学学院生物防治国家重点实验室中山大学生命科学学院生物防治国家重点实验室中山大学生命科学学院生物防治国家重点实验室中山大学生命科学学院生物防治国家重点实验室广东广州510275

Viral nervous necrosis (VNN) is a worldwide disease among teleost fish. In the mainland of China, VNN was first identified in 2 species of hatchery-reared groupers, Epinephelus akaara and E. coioides. In the present study, samples were collected from larvae of E. akaara with signs of VNN in Dayawan bay which is located in southern China. The complete viral coat protein gene was amplified using extracted total RNA as template. The reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) amplification was performed using primers containing a heterologous restriction site for NotI. PCR products were cloned into pcDNA3 vector and sequenced. The results indicated that the coat protein gene of Dayawan isolate (RG-CN) was 1056 bases in length and contained a single open reading frame (ORF) of 1017 bases encoding a protein of 338 amino acids. The sequence similarities between the coat protein gene of RG-CN and other 8 isolates of NNV from Dayawan, Taiwan, Japan, Singapore and France were 79.1%-99.5% at the nucleotide level and 83.7%-100% at the amino acid level, respectively.The homology between RG-CN and the other 5 isolates from groupers was high and relatively lower between RG-CN and guppy nervous necrosis virus (GNNV), sea bass nervous necrosis virus (DIEV), but more divergences existed between RG-CN and striped jack nevous necrosis virus (SJNNV). Compared with SJNNV, RG-CN and the other 7 isolates all lacked 6 nucleotides and 2 amino acids in the same positions. Based on the result of molecular phylogenetic analysis, Dayawan isolate belongs to red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV) genotype.

关键词：赤点石斑鱼神经坏死病毒外壳蛋白基因克隆序列分析

拟穴青蟹Cactus基因的cDNA克隆、序列及生物学功能

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水产学报 2020年第1期44卷 21-32页

作者：胡蕾邓恒为李晶晶刘姗姗何建国李海云翁少萍华南农业大学动物科学学院中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室

为获取拟穴青蟹Cactus基因cDNA全长、分析基本生物学信息,并初步探索其在病原物刺激下的免疫反应,实验采用RACE技术获得了拟穴青蟹Cactus(SpCactus)基因的cDNA全长序列,其cDNA全长为2 035 bp,开放阅读框(ORF)1 311 bp,编码436个氨基酸,... 详细信息

为获取拟穴青蟹Cactus基因cDNA全长、分析基本生物学信息,并初步探索其在病原物刺激下的免疫反应,实验采用RACE技术获得了拟穴青蟹Cactus(SpCactus)基因的cDNA全长序列,其cDNA全长为2 035 bp,开放阅读框(ORF)1 311 bp,编码436个氨基酸,分子量为46.01 ku。对蛋白理化性质进行预测发现,SpCactus为亲水性蛋白,等电点pI为4.91。经预测,SpCactus与其他物种的IκB蛋白具有相似的功能结构域。同源性比对结果显示,SpCactus与凡纳滨对虾和中国明对虾的Cactus蛋白同源性均高达62%,相似度为73%。系统进化树分析显示,SpCactus与甲壳动物聚为一支,与无脊椎动物聚为一大支。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测发现,SpCactus基因在拟穴青蟹不同组织中均有表达,肌肉中的表达量最高,其次为心脏、眼柄、血液和鳃,肝胰腺中的表达量最低。LPS和金黄色葡萄球菌刺激均能显著诱导SpCactus基因的表达。本实验成功扩增了SpCactus基因全长,并进行了生物信息学分析、理化性质预测,初步探讨了其生物学功能,为进一步研究其在免疫反应中的生物学功能提供参考依据。

关键词：拟穴青蟹 Cactus 基因克隆组织分布表达分析

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基因工程疫苗在鳖病害防治中的应用

淡水渔业 2000年第5期30卷 30-32页

作者：李春枝张邦杰李本旺叶巧真何建国翁少萍广东省东莞市水产研究所 523001 中山大学生命科学学院广州510275

基因工程疫苗是以基因工程为手段或称作DNA重组技术产生的疫苗.国内对鳖(Trionyx sinensis)疫苗的研究也有一些报道,但多集中于灭活菌苗的研制.由于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(A.sobria)等存在多种血清型,限制... 详细信息

基因工程疫苗是以基因工程为手段或称作DNA重组技术产生的疫苗.国内对鳖(Trionyx sinensis)疫苗的研究也有一些报道,但多集中于灭活菌苗的研制.由于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(A.sobria)等存在多种血清型,限制了一般疫苗的有效使用范围,商用疫苗的开发至今仍未成功.我们在一般菌细胞苗和化学成份疫苗研究的基础上,从菌体共同保护性抗原着手,以分子生物学方法为手段,研制了鳖的基因工程疫苗.本文报道该疫苗在大田应用的中试情况.

关键词：基因工程疫苗鳖病防治免疫保护力气单胞苗