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空调系统军团菌的污染及其检测、预防研究进展

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中国人兽共患病杂志 2005年第11期21卷 1014-1016页

作者：练玉银刘志刚吉坤美深圳大学生命科学学院微生物基因工程重点实验室

军团菌(Legionella)是引起军团病的病原菌,是胞内寄生菌,广泛存在于天然淡水和人工水域环境中,如自来水、热水沐浴器、中央空调、冷却水塔等,或原生动物如阿米巴胞内寄生[1].

关键词：中央空调系统军团菌预防研究污染空调冷却塔水含菌气溶胶空气调节器呼吸系统传染病检测流行病学研究

以学生为中心的预防医学本科实习模式改革的实践与探索

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现代预防医学 2021年第10期48卷 1917-1920页

作者：赵晶练玉银杨巧媛广州医科大学公共卫生学院预防医学系

目的评价广州医科大学预防医学毕业实习改革模式的实施效果,为进一步修订实习方案提供依据。方法 2019年始,广州医科大学预防医学系实施了以学生为中心、深度沉浸式毕业实习新方案,并通过对2019届毕业生(旧方案)和2020届毕业生(新方案)... 详细信息

目的评价广州医科大学预防医学毕业实习改革模式的实施效果,为进一步修订实习方案提供依据。方法 2019年始,广州医科大学预防医学系实施了以学生为中心、深度沉浸式毕业实习新方案,并通过对2019届毕业生(旧方案)和2020届毕业生(新方案)线上满意度调查和访谈,对比两届学生的实习认知、实习管理情况、以及实习效果进行评价。结果两届毕业生的实习期望、实习态度以及对总体实习效果的评价无显著差异(P>0.05)。与2019届毕业生相比,2020届毕业生在实习中有更多机会进行现场调查、数据分析等专业性较强的工作(20.5%vs 41.7%,P0.05)。专题访谈中,2020届12位受访毕业生全都支持实施实习新模式。结论新冠疫情期间在线实习影响了总体实习效果。但是以学生为中心、深度沉浸式毕业实习模式,有助于深入学习和获得更多实践机会,培养高素质应用型人才。

关键词：预防医学以学生为中心本科实习模式改革

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早孕因子的研究进展

中国生物制品学杂志 2010年第12期23卷 1392-1396页

作者：吴晓亮练玉银王家骥广州医学院公共卫生与全科医学学院广州510182

早孕因子(Early pregnancy factor,EPF)是一种具有免疫抑制和生长因子特性的分泌性蛋白质,在受精后的孕血清及某些恶性肿瘤患者血清中均能检测到。EPF与伴侣素10(Chaperonin 10,Cpn10)是同源的。EPF首先通过玫瑰花结抑制试验在哺乳动物... 详细信息

早孕因子(Early pregnancy factor,EPF)是一种具有免疫抑制和生长因子特性的分泌性蛋白质,在受精后的孕血清及某些恶性肿瘤患者血清中均能检测到。EPF与伴侣素10(Chaperonin 10,Cpn10)是同源的。EPF首先通过玫瑰花结抑制试验在哺乳动物的孕血清中被发现。EPF单克隆抗体在妊娠诊断、肿瘤诊断和治疗等方面均有广阔的应用潜力。本文就EPF的来源、化学结构和生化特性、分离纯化及检测、作用及应用等研究进展作一综述。

关键词：早孕因子玫瑰花结抑制试验伴侣素

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早孕因子分离纯化方法的优化

免疫学杂志 2012年第12期28卷 1073-1076页

作者：温志锋练玉银王家骥聂湘辉林燕棉广州医学院公共卫生学院 510182

目的对正常早孕妇女血清中早孕因子(EPF)的分离纯化过程进行优化,以提高EPF的回收率。方法依次采用DEAEFast Flow离子交换色谱和Heparin Fast Flow亲和色谱,从妊娠12周内的正常早孕妇女混合血清中提纯EPF,采用活性玫瑰花结抑制试验(Ea-R... 详细信息

目的对正常早孕妇女血清中早孕因子(EPF)的分离纯化过程进行优化,以提高EPF的回收率。方法依次采用DEAEFast Flow离子交换色谱和Heparin Fast Flow亲和色谱,从妊娠12周内的正常早孕妇女混合血清中提纯EPF,采用活性玫瑰花结抑制试验(Ea-RIT)检测各阶段产物的EPF活性,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳鉴定纯化物并测定其相对分子质量,用Western blot鉴定其特异性。结果经Ea-RIT检测后,DEAE Fast Flow离子交换色谱所现2峰中DE-Ⅰ峰为EPF活性峰,HeparinFast Flow亲和色谱所现2峰中H-Ⅱ峰为EPF活性峰。H-Ⅱ峰收集液经SDS-PAGE电泳,结果显示为1条相对分子质量为38 100的蛋白带,Western blot分析表明抗体与抗原匹配性良好。经检测其蛋白含量为0.615 mg,回收率为0.034%,与传统分离纯化四步法的回收率相比明显提高。结论本优化方法对于提纯孕血清中的EPF是可行的,大大提高了纯化效率。

关键词：早孕因子分离纯化优化

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重组早孕因子(EPF)的表达、纯化及鉴定

生殖与避孕 2012年第3期32卷 156-160页

作者：练玉银王家骥广州医学院公共卫生学院广州510182

目的:获取大量具有良好生物活性的早孕因子(EPF)重组蛋白。方法:从HeLa细胞中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增EPF cDNA,将该cDNA插入载体pGEX-5X-1,获得重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF,将重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF转化大肠杆菌BL21后通过I... 详细信息

目的:获取大量具有良好生物活性的早孕因子(EPF)重组蛋白。方法:从HeLa细胞中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增EPF cDNA,将该cDNA插入载体pGEX-5X-1,获得重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF,将重组表达质粒pGEX-5X-1/EPF转化大肠杆菌BL21后通过IPTG进行诱导表达,然后用谷胱甘肽-琼脂糖球珠亲和层析方法,分离纯化得到纯重组GST-EPF融合蛋白(rEPF)。再用Xa酶切GST,得到纯化的EPF重组蛋白。用SDS-PAGE鉴定其纯度,用Western blotting鉴定其特异性,用玫瑰花环抑制试验(RIT)检测其生物学活性。结果:HeLa细胞总RNA中有效扩增出EPF cDNA。EPF cDNA以正确的阅读框架插入表达载体pGEX-5X-1,经IPTG诱导后高效表达EPF重组蛋白。Western blotting表明其与抗EPF抗体有特异性结合,RIT检测结果显示目的蛋白具有良好的EPF生物学特性。结论:成功构建了EPF的原核表达载体,并纯化获得了具有生物学特性的重组蛋白,为进一步开展EPF蛋白的相关研究奠定了基础。

关键词：早孕因子(EPF) 表达纯化特性鉴定

慢性肝炎,肝硬化,肝癌患者的一氧化氮水平变化及相互关系

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肇庆医药 2000年第1期 73-75页

作者：练玉银肇庆市端州区人民医院检验科

目的：通过检测慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者中一氧化氮（ＮＯ）浓度水平变化。了解ＮＯ与三者的关系。方法：参照Ｇｒｉｅｓｓ法并稍加改进，测定慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者（各４０例）血清中ＮＯ浓度。结果：４０例健康正常人ＮＯ为... 详细信息

目的：通过检测慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者中一氧化氮（ＮＯ）浓度水平变化。了解ＮＯ与三者的关系。方法：参照Ｇｒｉｅｓｓ法并稍加改进，测定慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者（各４０例）血清中ＮＯ浓度。结果：４０例健康正常人ＮＯ为２０．１５±４．９０μｍｏｌ／ｌ。慢性肝炎组ＮＯ较正常高，且随转氨酶的升高而升高，呈正相关，肝硬化及肝癌组与正常组呈极度显著性差异。提示：ＮＯ与慢性肝炎、肝硬化、肝癌的发生和发展相关，

关键词：一氧化氮慢性肝炎肝硬化肝癌

双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测粉尘螨2组变应原方法的建立

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中华检验医学杂志 2006年第8期29卷 702-703页

作者：练玉银刘志刚吉坤美王广伟刘晓宇广州医学院公共卫生与全科医学学院 510182 深圳大学生命科学学院基因工程重点实验室

尘螨是最常见、最主要的过敏性疾病变应原。螨体中最主要的致敏成分是1组和2组变应原（Der1、Der2）。酶联免疫吸附测定（ELISA）是检测尘螨变应原含量应用最广泛的方法．但国内定量检测尘螨变应原的方法学研究鲜见报道。本研究用重组... 详细信息

尘螨是最常见、最主要的过敏性疾病变应原。螨体中最主要的致敏成分是1组和2组变应原（Der1、Der2）。酶联免疫吸附测定（ELISA）是检测尘螨变应原含量应用最广泛的方法．但国内定量检测尘螨变应原的方法学研究鲜见报道。本研究用重组粉尘螨2组Der f 2（rDer f 2）．制备免疫血清，建立一种以辣根过氧化物酶系统为基础的双抗体夹心ELISA，以快速检测Der f2．现报告如下。

关键词：双抗体夹心酶联免疫吸附试验螨变应原定量检测粉尘螨双抗体夹心ELISA 酶联免疫吸附测定过氧化物酶系统原方

双抗体夹心ELISA检测屋尘螨2组变应原方法的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第11期27卷 1061-1062页

作者：练玉银刘志刚吉坤美王广伟刘晓宇广州医学院公共卫生与全科医学学院 510182 深圳大学生命科学学院 510860

过敏性疾病是临床上的多发病和常见病，尘螨是最常见的过敏原。业已清楚尘螨最主要的致敏成分是Der1、Der2变应原，近年文献报道发现Der2变应原比Der1变应原更稳定及耐降解，Der2与Der1的含量一样高，从而引起了对Der2的更深入的研究，... 详细信息

过敏性疾病是临床上的多发病和常见病，尘螨是最常见的过敏原。业已清楚尘螨最主要的致敏成分是Der1、Der2变应原，近年文献报道发现Der2变应原比Der1变应原更稳定及耐降解，Der2与Der1的含量一样高，从而引起了对Der2的更深入的研究，并认为对环境中尘螨含量的监测及评价回避措施有效性等方面用Der2含量更合适。我们建立一种快速、准确、价廉、实用性强的检测屋尘螨2组（Derp2）变应原的以辣根过氧化物酶系统为基础的双抗体夹心ELISA方法。现将结果报道如下。

关键词： ELISA检测双抗体夹心屋尘螨变应原夹心ELISA方法过氧化物酶系统原方过敏性疾病

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鲤鱼主要变应原的分离、鉴定与纯化

中国公共卫生 2006年第8期22卷 947-949页

作者：练玉银刘志刚温岸玲深圳大学生命科学学院

目的对常见的食物过敏原鲤鱼进行特异性抗原成分的分离、鉴定和纯化,为临床诊断及治疗鲤鱼过敏症提供理论依据。方法通过磷酸盐缓冲溶液进行提取、用十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离出多种蛋白组分并测定其分子量;采用... 详细信息

目的对常见的食物过敏原鲤鱼进行特异性抗原成分的分离、鉴定和纯化,为临床诊断及治疗鲤鱼过敏症提供理论依据。方法通过磷酸盐缓冲溶液进行提取、用十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离出多种蛋白组分并测定其分子量;采用蛋白印迹技术(Western-blotting)鉴定其变应原并通过DE52离子交换层析对鲤鱼变应原进行初步纯化,进一步经凝胶过滤层析对变应原混合组分进行纯化。结果SDS-PAGE分离出14种蛋白组分,其中主带有9条,分子量分别为5,46,36,34,26,25,23,20,16 kDa。Western-blitting结果显示,鲤鱼的主要变应原及次要变应原的分子量是42,36 kDa的变应原组分。结论鲤鱼主要特异性变应原为42和36 kDa的蛋白质,为临床诊断和治疗鱼类过敏性疾病提供标准化的应原奠定了基础。

关键词：鲤鱼变应原十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 蛋白印迹纯化