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黄芩-黄连通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路稳定动脉粥样硬化的易损斑块

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 28-36页

作者：纪凌云吴俏兰陈泽涛葛春蕾陈维达宋婷山东中医药大学济南250014 山东中医药大学附属医院济南250011 临沂市中医医院山东临沂276600

目的:观察黄芩-黄连对动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块稳定性的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:10只正常C57BL/6J小鼠作为正常组,同品系的载脂蛋白E基因敲除(... 详细信息

目的:观察黄芩-黄连对动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块稳定性的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:10只正常C57BL/6J小鼠作为正常组,同品系的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠高脂饲料喂养12周构建动脉粥样硬化模型,随机分为5组,即模型组、阿托伐他汀组、黄芩-黄连低、中、高剂量组,每组10只。正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,黄芩-黄连低、中、高剂量组分别给予1.95、3.9、7.8 g·kg^(-1)药物灌胃8周。观察小鼠一般状态;苏木素-伊红(HE)染色观测主动脉根部斑块病理情况并计算斑块面积百分比;马松(Masson)染色、油红O染色联合F4/80、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化检测主动脉根部斑块组分并计算斑块易损指数;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠主动脉组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测MMP-2、MMP-9、TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA表达水平。结果:与模型组比较,各用药组小鼠一般状态改善,未见明显不良反应;与模型组比较,黄芩-黄连中、高剂量组AS小鼠主动脉根部斑块面积百分比明显降低(P<0.05);黄芩-黄连高剂量组斑块中胶原纤维及平滑肌细胞含量显著增多(P<0.01),脂质及巨噬细胞含量明显减少(P<0.05),黄芩-黄连各剂量组斑块易损指数明显降低,其中黄芩-黄连中、高剂量组显著降低(P<0.01);黄芩-黄连中、高剂量组主动脉组织中MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05);黄芩-黄连中、高剂量组AS小鼠血清中TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05);黄芩-黄连中、高剂量组主动脉组织中TLR4、MyD88蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05),其NF-κB p65磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论:黄芩-黄连可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路发挥抗炎稳斑的作用。

关键词：黄芩-黄连动脉粥样硬化炎症反应易损斑块 Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB) 作用机制

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基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路介导的巨噬细胞焦亡探讨黄芩黄连药对治疗动脉粥样硬化的作用机制

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2266-2272页

作者：纪凌云陈维达葛春蕾吴俏兰陈泽涛宋婷山东中医药大学济南250355 山东中医药大学附属医院济南250011 临沂市中医医院临沂276600

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路介导的巨噬细胞焦亡探讨黄芩黄连药对(芩连药对)治疗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:体外培养J774A.1细胞,SD大鼠灌胃芩连药对后制备含药血清,MTT法筛... 详细信息

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路介导的巨噬细胞焦亡探讨黄芩黄连药对(芩连药对)治疗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:体外培养J774A.1细胞,SD大鼠灌胃芩连药对后制备含药血清,MTT法筛选芩连药对含药血清最佳干预浓度。采用不同浓度的含药血清预处理J774A.1细胞后,给予脂多糖(LPS)+三磷酸腺苷(ATP)诱导焦亡。光学显微镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)释放法及Hoechst 33342/碘化丙锭(PI)染色用于检测细胞的损伤情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-18的水平。Western Blot法检测通路及焦亡相关蛋白TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65、NLRP3、ASC、Caspase-1、Cleave-Caspase-1、GSDMD、GSDMD-NT的表达。TLR4基因过表达后,检测通路相关蛋白表达水平及细胞焦亡情况。结果:芩连药对含药血清可改善造模后J774A.1的形态;提高造模后J774A.1细胞的活力、降低LDH释放率及PI细胞阳性率(P<0.05);降低细胞上清液中IL-1β及IL-18的水平(P<0.05);显著下调TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及焦亡相关蛋白的表达(P<0.05);同时过表达TLR4可逆转芩连药对对J774A.1细胞焦亡的保护作用(P<0.05)。结论:芩连药对可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路降低巨噬细胞焦亡水平,从而发挥抗AS的作用。

关键词：黄芩黄连药对 J774A.1细胞焦亡含药血清 TLR4/MyD88/NF-κB信号通路动脉粥样硬化

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图像识别在凝血试验自动审核方案中的应用

国际检验医学杂志 2024年第11期45卷 1368-1374页

作者：董争华佐玉琴赵晓明纪凌云杨冀同济大学附属东方医院南院检验科上海200123 上海市浦东新区中医医院检验科上海201205

目的建立带有图像识别功能的凝血试验自动审核方案,评价方案的正确性和有效性。方法使用人工智能软件与硬件联合建立对标本性状、标本血量、血细胞比容可以自动判定结果的图像识别系统,与目测法比较标本性状判定结果的正确性,与手工测... 详细信息

目的建立带有图像识别功能的凝血试验自动审核方案,评价方案的正确性和有效性。方法使用人工智能软件与硬件联合建立对标本性状、标本血量、血细胞比容可以自动判定结果的图像识别系统,与目测法比较标本性状判定结果的正确性,与手工测量法比较标本血量判定结果的正确性,与血细胞分析仪比较血细胞比容判定结果的正确性。根据流程图、参考区间、医学决定水平、危急值范围、相关文献、工作经验及历史数据制订出凝血试验自动审核规则。对制订的规则进行人工验证,分别计算自动审核通过率、真阳性率、真阴性率、假阳性率、假阴性率。评估自动审核方案实施后实验室内周转时间的变化情况。结果图像识别系统标本性状判定正确率为96.72%,将溶血、黄疸、脂血标本判定为正常标本的假阴性率为0.04%。图像识别系统与手工测量的两组标本血量数据进行比较,P=0.4881,图像识别方法不劣于手工测量方法。图像识别系统与血细胞分析仪的两组血细胞比容数据进行比较,P=0.1130,图像识别系统不劣于血细胞分析仪。该研究建立凝血试验自动审核规则61条,包括数值异常、逻辑异常、Delta Check、标本质量异常、反应曲线异常等,自动审核通过率为76.19%,真阳性率为23.77%,真阴性率为76.19%,假阳性率为0.04%,假阴性率为0.00%。实施自动审核方案后各分位数标本周转时间均缩短,平均缩短13.66 min。结论图像识别技术应用到凝血试验自动审核中,使自动审核功能更加自动化、更具科学性,将标本质量判定标准化,提升检验结果的准确性,有效提高工作效率和节省人力。

关键词：人工智能图像识别凝血试验自动审核实验室信息系统

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血常规联合心肌标志物检测对冠心病的诊断价值分析

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国际检验医学杂志 2024年第S01期45卷 140-143页

作者：张晓飞纪凌云黄兆杰李志军杨冀同济大学附属东方医院检验科上海200123

目的探讨血常规与心肌标志物检测在冠心病中的诊断效果及价值。方法选取2022年5月至2023年5月该院收治的100例冠心病患者纳入观察组,并选取同期100例健康体检者纳入对照组,对两组入选对象血常规指标与心肌标志物指标进行检测,观察对比... 详细信息

目的探讨血常规与心肌标志物检测在冠心病中的诊断效果及价值。方法选取2022年5月至2023年5月该院收治的100例冠心病患者纳入观察组,并选取同期100例健康体检者纳入对照组,对两组入选对象血常规指标与心肌标志物指标进行检测,观察对比入选对象的血常规相关指标水平以及心肌标志物相关指标水平。结果观察组红细胞体积分布宽度(RDW)指标水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组超敏心肌肌钙蛋白(hs-cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnl)、心肌肌钙蛋白(cTnT)以及肌醇激酶同工酶(CK-MB)等指标水平均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);重度狭窄组患者RDW、cTnl、cTnT以及CK-MB等指标水平均显著高于中度狭窄组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者血常规中的RDW指标水平具有明显的升高现象,且心肌标志物指标在冠心病患者中均会发生异常变化,因此血常规检测联合心肌标志物检测在诊断冠心病中具有较高的应用价值。

关键词：冠心病血常规心肌标志物检测诊断价值

新文科背景下地方应用型高校古代汉语课程教学改革实践

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科教导刊（电子版） 2023年第32期 76-78页

作者：纪凌云北京联合大学师范学院北京 100191

新文科是相对传统文科而言的,旨在突破传统文科的思维模式.以往古代汉语课程教学中存在问题导向不突出、需求导向不明确、对现代信息技术吸收和运用不充分等问题.基于对新文科的理解,在遵循笔者所在学校人才培养定位的基础上,古代汉语... 详细信息

新文科是相对传统文科而言的,旨在突破传统文科的思维模式.以往古代汉语课程教学中存在问题导向不突出、需求导向不明确、对现代信息技术吸收和运用不充分等问题.基于对新文科的理解,在遵循笔者所在学校人才培养定位的基础上,古代汉语课程教改的基本思路确定为"互联网+"和"+应用".具体的教改措施包括:创建"线上+线下"混合式教学模式;优化"知识+应用"的课程体系和内容;构建"语言+专业"跨学科课程实践体系;建设"传统+现代"相结合的现代课程.

关键词：新文科古代汉语课程 "互联网+" "+应用"

来源：博看期刊评论

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主题化结构

语言教学与研究 1999年第4期 69-79页

作者：方立纪凌云北京语言文化大学外语学院 100083

基于p53/AMPK/mTOR信号通路调控细胞自噬探讨益气扶正解毒汤抑制Lewis肺癌小鼠皮下肿瘤生长的作用机制

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中药新药与临床药理 2022年第5期33卷 565-573页

作者：吴俏兰宋婷纪凌云郭睿张佳宁陈维达山东中医药大学第一临床医学院山东济南250014 山东中医药大学附属医院山东济南250014 山东中医药大学中医学院山东济南250014

目的观察益气扶正解毒汤(YQT,黄芪、麦冬、黄芩等)对Lewis肺癌小鼠皮下肿瘤生长的影响,并基于p53/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控细胞自噬探讨其可能的作用机制。方法采用Lewis肺癌细胞构建C57BL/... 详细信息

目的观察益气扶正解毒汤(YQT,黄芪、麦冬、黄芩等)对Lewis肺癌小鼠皮下肿瘤生长的影响,并基于p53/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控细胞自噬探讨其可能的作用机制。方法采用Lewis肺癌细胞构建C57BL/6小鼠皮下肿瘤模型,随机分为模型组、顺铂组(3 mg·kg^(-1))及YQT低、中、高(8.7、17.4、34.8 g·kg^(-1))剂量组,每组8只。造模后第7天开始,YQT组予以相应剂量灌胃给药,每日1次,连续21 d。采用HE染色法观察肿瘤组织的病理变化;免疫组化法检测肿瘤组织Ki67的表达;透射电镜检测肿瘤组织自噬小体数量;RT-PCR法检测肿瘤组织自噬相关蛋白LC3、Beclin-1、Atg5、Atg7 mRNA表达水平;Western Blot法检测LC3、Beclin-1、p62、Atg5、Atg7和p53/AMPK/mTOR通路蛋白表达水平。结果与顺铂组比较,YQT高剂量组的抑瘤率无明显差异(P>0.05)。与模型组比较,YQT各剂量组小鼠皮下肿瘤的体积明显缩小(P<0.05),肿瘤质量均明显降低(P<0.05),病理切片显示肿瘤组织有较多的坏死区域,肿瘤组织中的自噬小体数量明显增加,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Atg5蛋白表达明显上调(P<0.05);YQT中、高剂量组小鼠肿瘤组织中Ki67蛋白表达明显下调(P<0.05),Atg7、p53、磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK蛋白表达明显上调(P<0.05),p62、磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR蛋白表达明显下调(P<0.05);YQT高剂量组小鼠肿瘤组织的LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Atg5、Atg7 mRNA表达明显上调(P<0.05)。结论YQT可能通过p53/AMPK/mTOR信号通路上调细胞自噬水平,抑制Lewis肺癌小鼠皮下肿瘤生长及肿瘤细胞增殖。

关键词：益气扶正解毒汤 Lewis肺癌自噬 p53/AMPK/mTOR信号通路小鼠

活动性结核病血浆代谢性生物标志物筛选及诊断效能评价

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中华检验医学杂志 2022年第3期45卷 275-281页

作者：周爱萍纪凌云郭建倪丽君王东江吕莉胡靓吴文娟同济大学附属东方医院南院医学检验科上海200123

目的应用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,筛选对结核病诊断有辅助意义的代谢性生物标志物。方法回顾性病例对照的临床研究。随机选取2017年1月至2018年1月就诊于上海市肺科医院和上海市东方医院的102例结核... 详细信息

目的应用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,筛选对结核病诊断有辅助意义的代谢性生物标志物。方法回顾性病例对照的临床研究。随机选取2017年1月至2018年1月就诊于上海市肺科医院和上海市东方医院的102例结核病患者[男49例,女53例,年龄为40.0(24.0,48.5)岁]、100例就诊于上海市东方医院经结核分枝杆菌γ干扰素释放试验(TB-IGRA)检测为阳性者[男55例,女45例,年龄为44.0(37.0,52.0)岁]和96名健康体检者[男55例,女41例,年龄为43.0(32.2,52.8)岁]。采用UPLC-Q-TOF/MS技术分别检测其血浆中的小分子代谢物,结合多元统计方法变量投影重要性(Variable Importance Projection,VIP)及单变量统计分析t检验方法筛选活动性结核病患者血浆中主要的差异代谢物,并对代谢差异物进行单变量受试者工作特性(ROC)曲线分析,计算曲线下面积值及用于结核病诊断的特异度和敏感度。结果所有样本检测得到10266个变量,经人类代谢组数据库检索定性,初步鉴定出1153种物质。3组样本两两比较后,将同时满足VIP>1和P<0.05的差异代谢物绘制韦恩图,得到的交集中含有38种主要差异代谢物。ROC曲线评估38个主要差异代谢物对活动性结核病的诊断效能,发现乳酸、多巴胺、9-十五碳烯酸及12,13-二羟基亚油酸在诊断活动性结核病时,其曲线下面积分别是0.92、0.98、0.94和0.94,特异度均大于90%,敏感度均大于80%,4种代谢标志物联合诊断活动性结核病的特异度和敏感度均为94%。结论筛选出的4种代谢标志物乳酸、多巴胺、9-十五碳烯酸及12,13-二羟基亚油酸对结核病的诊断具有良好的诊断效能。

关键词：结核病代谢组学生物标志物诊断效能评价

国家专利中药复方治疗非重型再生障碍性贫血的用药规律分析

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中药新药与临床药理 2023年第10期34卷 1470-1477页

作者：纪凌云宋婷吴俏兰葛春蕾陈泽涛陈维达山东中医药大学山东济南250355 山东中医药大学附属医院山东济南250011 临沂市中医医院山东临沂276600

目的基于数据挖掘探讨国家专利中药复方治疗非重型再生障碍性贫血(Aplastic anemia,AA)的用药规律。方法通过计算机检索中华人民共和国国家知识产权局网站的专利数据库,获得中药复方治疗非重型AA的专利数据。运用Microsoft Office Excel... 详细信息

目的基于数据挖掘探讨国家专利中药复方治疗非重型再生障碍性贫血(Aplastic anemia,AA)的用药规律。方法通过计算机检索中华人民共和国国家知识产权局网站的专利数据库,获得中药复方治疗非重型AA的专利数据。运用Microsoft Office Excel 2019软件建立专利组方数据库,并进行数据标准化处理。运用IBM SPSS Modeler 18.0软件建模后进行Apriori关联规则分析;通过Cytoscape 3.7.2软件构建中药核心复杂共现网络;采用Microsoft Office Excel 2019及IBM SPSS Statistics 25.0软件进行药物频数统计、系统聚类及因子分析。结果共纳入1994年12月至2021年11月治疗非重型AA的中药复方专利共265项,涉及中药560味,用药总频次3399次。分析出高频(频数≥30次)中药28味,其中用药频次最高的为当归。对使用频次≥5次的中药进行分析,以补虚药使用最多,性味以温、甘为主,多归肾、肝二经;得到常用对药为“何首乌-黄芪”,置信度较高的角药组合有“何首乌-阿胶-黄芪”“何首乌-熟地黄-黄芪”“茯苓-熟地黄-当归”等;聚类分析得到新处方4首;因子分析提取到8个公因子;潜在药物组合有“芡实-络石藤-金龙胆草-侧柏叶”及“伏龙肝-皂矾-百草霜-墨-核桃仁”。结论国家专利中药复方治疗非重型AA以益精填髓、补气养血为主,兼以温肾助阳、滋阴润燥、健脾益气、化瘀通络,体现了非重型AA的中医临床治疗原则。

关键词：国家专利中药复方非重型再生障碍性贫血数据挖掘用药规律益精填髓补气养血