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小鼠诱导性多潜能干细胞向内耳毛细胞和螺旋神经元诱导分化的体外实验研究

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小鼠诱导性多潜能干细胞向内耳毛细胞和螺旋神经元诱导分化的体外...

作者：管利娜南昌大学

学位级别：硕士

研究背景：感音神经性耳聋是耳鼻咽喉科常见疾病，研究证实其病理变化主要是耳蜗毛细胞及与其相连的螺旋神经元的缺失。同时也有研究显示哺乳动物耳蜗毛细胞及螺旋神经元受损后再生十分困难。如果能够找到某种方法修复缺失的毛细胞或... 详细信息

研究背景：感音神经性耳聋是耳鼻咽喉科常见疾病，研究证实其病理变化主要是耳蜗毛细胞及与其相连的螺旋神经元的缺失。同时也有研究显示哺乳动物耳蜗毛细胞及螺旋神经元受损后再生十分困难。如果能够找到某种方法修复缺失的毛细胞或螺旋神经节细胞，就有希望治愈感音神经性耳聋。2006年，日本科学家Shinya Yamanaka等通过导入Oct3/4，Sox2，c-Myc，Klf4四个外源基因将小鼠体细胞重编程为诱导性多能干细胞(iPSCs)。多项研究证实，iPSCs具有与胚胎干细胞(ESCs)类似的分化能力，却可以避免ESCs的免疫排斥及伦理道德问题，因此我们将iPSCs在体外诱导分化为耳蜗毛细胞及螺旋神经元，为感音神经性耳聋的治疗的开辟新的道路。研究内容和方法： ***的培养与鉴定：取小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层，iPSCs接种于饲养层上胰酶消化传代，倒置显微镜下观察iPSCs生长状态，观察拟胚体(EB)形成能力，RT-PCR检测iPSCs多能性基因Oct4, Nanog, Sox2的表达情况。 2. iPSCs与耳蜗Corti氏器共培养及其分化细胞的鉴定：分离小鼠耳蜗Corti氏器，将iPSCs与耳蜗Corti氏器共培养。对分化细胞用毛细胞的标志物（MyosinVIIA，Math1，Calretinin，Espin）进行免疫组化鉴定。 ***与耳蜗蜗轴共培养及其分化细胞的鉴定：分离小鼠耳蜗蜗轴，将iPSCs与耳蜗蜗轴共培养，对分化细胞用神经元的标志物(Nestin、Neurofilament-M、β-Ⅲ Tubulin，Vesicular glutamate transporter1(VGluT1))进行免疫组化鉴定。结果： 1.成功建立稳定的iPSCs培养体系，iPSCs体外培养可形成EB。 RT-PCR显示iPSCs表达多能性基因Oct4, Nanog, Sox2。 ***与耳蜗Corti氏器共培养18天后可得到表达毛细胞标志蛋白MyosinVIIA，Math1，Calretinin，Espin的细胞。 ***与耳蜗蜗轴共培养18天后可得到表达神经元标志蛋白Nestin、Neurofilament-M、β-Ⅲ Tubulin，VGluT1的细胞。结论：本实验成功建立稳定的小鼠iPSCs培养体系;共培养方法可成功将iPSCs诱导分化为耳蜗毛细胞样及螺旋神经元样细胞。

关键词：诱导性多潜能干细胞毛细胞螺旋神经元细胞分化

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参数化可满足性问题的研究

参数化可满足性问题的研究

作者：管利娜中南大学

学位级别：硕士

可满足性问题(Satisfiability Problem,简称SAT Problem)是众多NP完全问题的“种子”,它是一类问题的难度标准,很多NP完全问题最终都可以转化为可满足性问题的求解。参数化的可满足性问题是重要的NP难问题,人们对其各类约束子问题包括... 详细信息

可满足性问题(Satisfiability Problem,简称SAT Problem)是众多NP完全问题的“种子”,它是一类问题的难度标准,很多NP完全问题最终都可以转化为可满足性问题的求解。参数化的可满足性问题是重要的NP难问题,人们对其各类约束子问题包括参数化MAX-SAT问题做了大量的研究,并对一直被列为开放性难题的参数化Almost2-SAT问题(简称2-ASAT)提出了固定参数可解(Fixed ParameterizedTractable,简称FPT)的参数算法。本文首先对可满足性问题及其各类约束子问题的主要算法进行综述以对算法利用的主要技术和研究现状有一个系统的了解。最近提出的参数化2-ASAT问题的固定参数可解算法证明了该问题是FPT的,算法主要运用迭代压缩和分支技术进行求解。本文通过对给定的2-CNF表达式F中同一路由上的相邻子句进行组合分析,细化分支处理,对参数化的带单个字符的2-ASAT问题(2-ASLASAT问题)提出了一个运行时间为O(5)的确定型参数算法,从而可用于参数化Almost 2-SAT问题的求解。参数化的具有完美匹配的图上的点覆盖问题(简称VC-PM问题)和参数化Almost 2-SAT问题是FPT等价的。本文通过分析给定图G中的完美匹配和点覆盖集的关系将问题转化为求解图G的一个至多包含k个匹配点对的点覆盖,提出了一个确定型参数算法,且当k=0时,如果图G存在一个大小等于|G|/2的点覆盖,本文给出了一个多项式时间的求解算法。本文最后对参数化Almost 2-SAT问题和参数化VC-PM问题算法的研究工作进行了总结,并阐述了将来对该问题进一步研究的一些工作。

关键词： Almost 2-SAT问题 VC-PM问题参数化算法

小鼠诱导性多潜能干细胞向内耳毛细胞和螺旋神经节细胞分化的体外研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2014年第8期49卷 680-686页

作者：管利娜陈燕红朱恒涛陈静江红群南昌大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科南昌330006 九江市第三人民医院耳鼻咽喉科

目的探讨体外定向诱导小鼠诱导性多潜能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）向耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞分化的可行性.方法建立小鼠iPSC培养体系并对iPSC加以鉴定.分离出生3d小鼠的耳蜗Corti器,将小鼠iPSC与耳蜗Corti器... 详细信息

目的探讨体外定向诱导小鼠诱导性多潜能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）向耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞分化的可行性.方法建立小鼠iPSC培养体系并对iPSC加以鉴定.分离出生3d小鼠的耳蜗Corti器,将小鼠iPSC与耳蜗Corti器共培养.对产生的分化细胞用毛细胞标志物肌球蛋白Ⅶa（Myosin Ⅶa）,Math1（碱性螺旋-环-螺旋转录因子家族成员）,钙视网膜蛋白（Calretinin）,Espin（F肌动蛋白的结合蛋白）进行免疫细胞化学鉴定.分离出生3d小鼠的耳蜗蜗轴,将小鼠iPSC与耳蜗蜗轴共培养,对分化细胞用神经元的标志物神经上皮干细胞蛋白（Nestin）、中等分子量神经丝蛋白（Neurofilament-M）、β-Ⅲ微管蛋白（β-ⅢTubulin）,Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体（vesicular glutamate transporter 1,VGluT1）进行免疫细胞化学鉴定.结果免疫细胞化学染色结果显示,小鼠iPSC与耳蜗Corti器共培养18 d后可得到表达毛细胞标志蛋白MyosinⅦa、Math1、Calretinin 及Espin的细胞;小鼠iPSC与耳蜗蜗轴共培养18 d后可得到表达神经元标志蛋白Nestin、Neurofilament-M、β-ⅢTubulin,VGluT1的细胞.结论共培养方法可成功将小鼠iPSC诱导分化为表达毛细胞及螺旋神经节细胞分子标志物的细胞.

关键词：诱导性多潜能干细胞 Corti器毛细胞螺旋神经节细胞分化小鼠

小切口去脂及连续埋线重睑成形术治疗不对称双眼皮的效果观察

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感染．炎症．修复 2020年第2期21卷 111-112,122页

作者：管利娜河南省濮阳市人民医院烧伤整形科河南濮阳457000

我们采用小切口去脂及连续埋线重睑成形术治疗不对称双眼皮,效果良好,报告如下。1病例与方法1.1病例2016年8月—2018年3月我院收治的不对称双眼皮患者96例,采用简单随机化的方法分为对照组和观察组,每组48例。对照组男8例,女40例;年龄16... 详细信息

我们采用小切口去脂及连续埋线重睑成形术治疗不对称双眼皮,效果良好,报告如下。1病例与方法1.1病例2016年8月—2018年3月我院收治的不对称双眼皮患者96例,采用简单随机化的方法分为对照组和观察组,每组48例。对照组男8例,女40例;年龄16~47岁,平均(28.37±5.04)岁;36例双眼皮不对称,12例单眼肿眼泡。观察组男7例,女41例;年龄17~46岁,平均(27.61±4.52)岁;35例双眼皮不对称,13例单眼肿眼泡。两组一般资料比较差异无显著性(P>0.05),有可比性。本研究经我院伦理委员会审批通过。

关键词：重睑成形术整形埋线

皮下组织蒂菱形皮瓣成形术与游离皮片移植术在烧伤后瘢痕挛缩患者中的效果比较

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河南医学研究 2020年第30期29卷 5609-5611页

作者：管利娜濮阳市人民医院烧伤整形科河南濮阳457000

目的比较皮下组织蒂菱形皮瓣成形术与游离皮片移植术在烧伤后瘢痕挛缩患者中的应用效果。方法选取2016年10月至2018年10月濮阳市人民医院收治的84例烧伤后瘢痕挛缩患者,依照手术方案分为游离皮片移植组和菱形皮瓣成形组,各42例。术后均... 详细信息

目的比较皮下组织蒂菱形皮瓣成形术与游离皮片移植术在烧伤后瘢痕挛缩患者中的应用效果。方法选取2016年10月至2018年10月濮阳市人民医院收治的84例烧伤后瘢痕挛缩患者,依照手术方案分为游离皮片移植组和菱形皮瓣成形组,各42例。术后均随访6个月,统计比较两组瘢痕挛缩复发率、皮瓣成活率、患者满意度及术前、术后6个月生活质量[生活质量综合评定问卷(GQOLI-74)评分]。结果两组皮瓣成活率均为100%,菱形皮瓣成形组瘢痕挛缩复发率(2.38%)较游离皮片移植组(19.05%)低(P<0.05);菱形皮瓣成形组患者满意度(92.86%)较游离皮片移植组(76.19%)高(P<0.05);术后6个月,游离皮片移植组和菱形皮瓣成形组GQOLI-74各项评分较术前升高,且菱形皮瓣成形组GQOLI-74各项评分高于游离皮片移植组(P<0.05)。结论皮下组织蒂菱形皮瓣成形术瘢痕挛缩复发率低于游离皮片移植术,患者满意度及生活质量高于游离皮片移植术。

关键词：烧伤后瘢痕挛缩游离皮片移植术皮下组织蒂菱形皮瓣成形术

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我国高新技术产业灰色关联发展评价研究

科技促进发展 2019年第9期15卷 988-996页

作者：吕微管利娜中北大学经济与管理学院太原030051

高技术产业对我国GDP的贡献越来越大。但是,我国各省市高科技发展的差异性所带来的高技术创新发展不平衡的问题也逐渐显现。本文从产业、企业、省域、区域等多视角出发,从高科技产业发展的"差异性"入手,结合灰色关联系统,通过构建灰色... 详细信息

高技术产业对我国GDP的贡献越来越大。但是,我国各省市高科技发展的差异性所带来的高技术创新发展不平衡的问题也逐渐显现。本文从产业、企业、省域、区域等多视角出发,从高科技产业发展的"差异性"入手,结合灰色关联系统,通过构建灰色关联模型,对我国高技术产业发展进行了综合评价,有助于准确判断我国高技术产业的发展态势,为我国高技术产业发展提供了政策支撑。

关键词：高技术产业灰色关联评价政策支撑

干细胞向耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞诱导分化研究

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国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013年第3期37卷 130-134页

作者：管利娜江红群南昌大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科 330006

随着干细胞研究的深入，世界各国科学家已证明多种干细胞可向耳蜗毛细胞及螺旋神经节诱导分化，采用的方法也不尽相同。本文从细胞种类及诱导方法两方面就干细胞向耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞诱导分化的研究做一综述。

关键词：干细胞(Stem Cells) 毛细胞(Hair Cells) 螺旋神经节(Spiral Ganglion) 细胞分化(Cell Differentiation)

雌激素水平和血清钙及磷代谢与良性阵发性位置性眩晕关系的研究

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2019年第6期33卷 497-500页

作者：陈亚琴陈静管利娜曹星亮李朝霞江红群南昌大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科南昌333000

目的:探讨雌激素水平和血清钙、磷代谢与良性阵发性位置性眩晕(BPPV)的临床关系。方法:以特发性BPPV患者84例为实验组(其中未绝经女性32例,绝经女性24例;男性28例),同期无眩晕及前庭疾病的健康人83例为对照组(其中未绝经女性32例,绝经女... 详细信息

目的:探讨雌激素水平和血清钙、磷代谢与良性阵发性位置性眩晕(BPPV)的临床关系。方法:以特发性BPPV患者84例为实验组(其中未绝经女性32例,绝经女性24例;男性28例),同期无眩晕及前庭疾病的健康人83例为对照组(其中未绝经女性32例,绝经女性24例;男性27例),检测2组体内雌二醇水平、血清钙及血清无机磷浓度,采用t检验分析其差异。结果:实验组与对照组的总人数、年龄分布及性别组成基本相同,年龄差异无统计学意义(P=0.71);实验组雌二醇水平较对照组降低(P<0.01),其中实验组未绝经女性、绝经女性及男性雌二醇水平均较对照组降低(均P<0.01);实验组血清钙及血清无机磷浓度与对照组比较差异无统计学意义(P=0.55、0.11)。结论:雌激素水平下降可能是特发性BPPV的危险因素,血清钙及血清无机磷浓度与BPPV的关系有待进一步研究。

关键词：眩晕雌激素血清钙血清无机磷

血必净注射液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗Ⅱ、Ⅲ度烧伤患者的疗效及对免疫功能的影响

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中国合理用药探索 2020年第9期17卷 44-46页

作者：刘合胜安彦川管利娜河南省濮阳市人民医院烧伤整形科濮阳457000

目的:探讨血必净注射液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)治疗Ⅱ、Ⅲ度烧伤患者的疗效及对免疫功能的影响。方法:选取本院2018年3月~2019年3月收治的80例烧伤患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组给予rbFGF... 详细信息

目的:探讨血必净注射液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)治疗Ⅱ、Ⅲ度烧伤患者的疗效及对免疫功能的影响。方法:选取本院2018年3月~2019年3月收治的80例烧伤患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组给予rbFGF,观察组在对照组的基础上加用血必净注射液,两组均连续治疗14天。观察两组治疗前后的免疫功能指标,并评定疗效。结果:治疗后,观察组主要症状积分为(16.08±2.95)分,低于对照组[(21.41±3.99)分,P<0.05];观察组创面愈合时间为(24.32±1.98)天,短于对照组[(28.34±2.50)天,P<0.05];观察组免疫功能指标CD 3、CD 4、CD 4/CD 8水平均高于对照组(P<0.05);观察组总有效率(95.00%)高于对照组(77.50%,P<0.05)。结论:血必净注射液联合rbFGF治疗Ⅱ、Ⅲ度烧伤患者,能够加快创面愈合,改善患者的临床症状,并可提高人体免疫力,具有较好的疗效,值得借鉴。

关键词：烧伤血必净注射液重组牛碱性成纤维细胞生长因子免疫功能疗效