小鼠诱导性多潜能干细胞向内耳毛细胞和螺旋神经节细胞分化的体外研究

作     者：管利娜 陈燕红 朱恒涛 陈静 江红群 Guan Lina;Chen Yanhong;Zhu Hengtao;Chen Jing;Jiang Hongqun

作者机构：南昌大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科南昌330006 九江市第三人民医院耳鼻咽喉科 

出 版 物：《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 (Chinese Journal of Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery)

年 卷 期：2014年第49卷第8期

页      面：680-686页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100213[医学-耳鼻咽喉科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81160126) 

主　　题：诱导性多潜能干细胞 Corti器 毛细胞 螺旋神经节 细胞分化 小鼠 

摘      要：目的 探讨体外定向诱导小鼠诱导性多潜能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）向耳蜗毛细胞及螺旋神经节细胞分化的可行性.方法 建立小鼠iPSC培养体系并对iPSC加以鉴定.分离出生3d小鼠的耳蜗Corti器,将小鼠iPSC与耳蜗Corti器共培养.对产生的分化细胞用毛细胞标志物肌球蛋白Ⅶa（Myosin Ⅶa）,Math1（碱性螺旋-环-螺旋转录因子家族成员）,钙视网膜蛋白（Calretinin）,Espin（F肌动蛋白的结合蛋白）进行免疫细胞化学鉴定.分离出生3d小鼠的耳蜗蜗轴,将小鼠iPSC与耳蜗蜗轴共培养,对分化细胞用神经元的标志物神经上皮干细胞蛋白（Nestin）、中等分子量神经丝蛋白（Neurofilament-M）、β-Ⅲ微管蛋白（β-ⅢTubulin）,Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体（vesicular glutamate transporter 1,VGluT1）进行免疫细胞化学鉴定.结果 免疫细胞化学染色结果显示,小鼠iPSC与耳蜗Corti器共培养18 d后可得到表达毛细胞标志蛋白MyosinⅦa、Math1、Calretinin 及Espin的细胞;小鼠iPSC与耳蜗蜗轴共培养18 d后可得到表达神经元标志蛋白Nestin、Neurofilament-M、β-ⅢTubulin,VGluT1的细胞.结论 共培养方法可成功将小鼠iPSC诱导分化为表达毛细胞及螺旋神经节细胞分子标志物的细胞.