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分子改造提高谷氨酰胺转胺酶热稳定性

分子改造提高谷氨酰胺转胺酶热稳定性

作者：童理明江南大学

学位级别：硕士

谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase,EC 2.***.2.13,TGase),是一种能催化蛋白质交联的酰胺转移酶。由于催化活性不依赖于Ca2+,来源于链霉菌的TGase广泛应用于食品、纺织、皮革及生物医药领域。但较低的TGase的热稳定性,使链霉菌TGase作为优... 详细信息

谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase,EC 2.***.2.13,TGase),是一种能催化蛋白质交联的酰胺转移酶。由于催化活性不依赖于Ca2+,来源于链霉菌的TGase广泛应用于食品、纺织、皮革及生物医药领域。但较低的TGase的热稳定性,使链霉菌TGase作为优良的催化剂在工业中的应用受到严重的限制。本研究以来源于吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)WSH03-13的TGase为研究对象,应用定点突变、短肽融合及两者组合的策略提高TGase的热稳定性,主要研究结果如下:(1)定点突变提高谷氨酰胺转胺酶热稳定性通过PoPMusic-2.1预测了降低TGase分子折叠能的氨基酸位点P132和分子结构模拟选中来源于吸水链霉菌的TGase基因中的W388号位点,并构建了相应的突变体。酶学分析表明,突变体P132I在50℃水浴下的半衰期达到5 min,较野生TGase提高31%;P132号位点其他的突变体较野生酶提高2-13.7%。对W388号位点的饱和突变则未能得到热稳定性提高的突变体。此外,P132I和P132G比酶活亦分别较野生酶提高24%和12.4%,其它突变体比酶活变化不明显。作用力分析发现,突变体P132I中较野生TGase增加两个氢键。上述结果表明,基于蛋白质折叠自由能分析的定点突变能有效提高TGase的热稳定和催化活性,氢键的增加可能是P132I热稳定性提高的原因之一。(2)融合双亲短肽提高谷氨酰胺转胺酶热稳定性将来源于Saccharomy cescerevisiae Zuotion蛋白的双亲短肽SAP1融合至TGase前导肽C端、成熟酶N端及C端,分别得到TGase融合酶QC-SAP1、N-SAP1和C-SAP1;将N端loop作为linker连接成熟酶的C端与双亲短肽SAP1得到融合C-L-SAP1。与野生酶相比,突变体N-SAP1在50℃下的半衰期提高78.9%,其它三个突变体则提高5-24%;各突变体比酶活下降4-30.3%。结构分析显示,N-SAP1蛋白颗粒较野生酶显著增大,且各突变体与野生酶的二级结构基本一致。上述结果表明,末端融合双亲短肽SAP1能有效的提高TGase的热稳定性,酶蛋白聚合有可能是突变体热稳定性提高的重要原因。(3)复合突变提高谷氨酰胺转胺酶热稳定性为进一步提高TGase的热稳定性,将N-SAP1中的P132分别突变为异亮氨酸、甘氨酸、蛋氨酸和谷氨酰胺,构建得到TGase复合突变体N-P132I、N-P132G、P132M以及P132Q。酶学分析表明,突变体N-P132I较野生TGase相比在50℃下的半衰期提高105%,其他的突变体较野生TGase提高68.4-100%。复合突变后,4个突变体的比酶活相比野生TGase下降6.5-14.5%,其中突变体N-P132I的比酶活下降了14.5%。上述结果说明,结合两种改造策略能有效提高TGase的热稳定性,同时保证较高的催化活性。

关键词：谷氨酰胺转胺酶热稳定性折叠自由能定点突变双亲短肽

劲性骨架拱桥外包混凝土工作面及各浇注段长度研究

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劲性骨架拱桥外包混凝土工作面及各浇注段长度研究

作者：童加明广西大学

学位级别：硕士

劲性骨架法施工大幅提升了混凝土拱桥的跨越能力,我国采用此方法修建了多座大跨混凝土拱桥,而劲性骨架混凝土拱桥发展的核心问题是如何利用较弱的劲性骨架安全形成混凝土拱圈。我国多采用分环多工作面的方式浇注外包混凝土形成主拱圈,... 详细信息

劲性骨架法施工大幅提升了混凝土拱桥的跨越能力,我国采用此方法修建了多座大跨混凝土拱桥,而劲性骨架混凝土拱桥发展的核心问题是如何利用较弱的劲性骨架安全形成混凝土拱圈。我国多采用分环多工作面的方式浇注外包混凝土形成主拱圈,对劲性骨架的受力与变形有较好的调载效果。本文以已建成的南盘江特大桥及在建的天峨龙滩特大桥为工程背景,对外包混凝土浇注过程中,工作面个数及工作面各浇注段长度对骨架受力及变形的影响开展了研究,具体内容如下:(1)整理劲性骨架混凝土拱桥在国内外的发展概况。查阅相关文献,介绍了浇注外包混凝土过程中的四种调载方法及相关实例,对比分析了其优劣,总结出多工作面浇注是大跨径钢管混凝土劲性骨架拱桥外包混凝土施工的主要方法。(2)论述了工作面各浇注段长度划分的理论依据。着重介绍了分环多工作面浇注方法,并引入应力影响线叠加原理,以拱脚上弦管内混凝土拉应力为控制目标,计算出合理的工作面各浇注段长度。(3)以南盘江特大桥为例,对比分析本文采用的划分工作面各浇注段长度方法的合理性与准确性。对比分析不同工作面下、不同竖向浇注顺序下劲性骨架受力,得出了不同工作面下劲性骨架手里面变化规律及更优的竖向浇注顺序;引入应力影响线叠加思想,以拱脚上弦管内混凝土受力为控制目标,计算出工作面各小段浇注长度,解决了浇注过程中拱脚上弦管内混凝土存在的拉应力,并和原方案、实测值进行受力、变形、稳定性对比分析,证明模型的可靠与优化效果。(4)研究天峨龙滩特大桥外包混凝土的浇注方案。利用南盘江特大桥研究经验和总结规律,分析不同工作面下劲性骨架受力及变形规律,得出六工作面方案较优,并根据本文提出的方法得出了工作面各小段的浇注长度,保证了浇注过程中拱脚上弦管内混凝土并未出现拉应力,推荐出较合理的外包混凝土浇注方案。本文通过上述两座桥梁的数值模拟分析,理论研究了多工作面浇注下,劲性骨架瞬时应力与永存应力的变化规律,并提供了确定工作面各浇注段长度的适用方法。

关键词：劲性骨架拱桥外包混凝土多工作面浇注应力影响线叠加

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关于洞庭湖治理研究的建议

中国地质 1997年第11期24卷 20-20,23页

作者：童潜明湖南地质研究所

对洞庭湖的治理,是湖南省的一件大事,我从地学角度提出治理研究建议。 1.已有的工作认为洞庭湖的演化趋向是“由大变小,走向消亡”,其主要原因是长江来沙,其次是围湖造田。因此对洞庭湖的治理。

关键词：洞庭湖环境保护治理研究

中职篮国内后卫进攻能力评价指标体系构建研究

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中职篮国内后卫进攻能力评价指标体系构建研究

作者：童枭明曲阜师范大学

学位级别：硕士

随着篮球运动的发展,快节奏、强对抗和高命中率的趋势对后卫球员进攻能力的要求越来越高。为挖掘中职篮国内后卫进攻方面的问题;全面评价中职篮国内后卫进攻能力;为中职篮后卫进攻能力分析提供借鉴。以中职篮国内后卫进攻能力评价指标... 详细信息

随着篮球运动的发展,快节奏、强对抗和高命中率的趋势对后卫球员进攻能力的要求越来越高。为挖掘中职篮国内后卫进攻方面的问题;全面评价中职篮国内后卫进攻能力;为中职篮后卫进攻能力分析提供借鉴。以中职篮国内后卫进攻能力评价指标体系为研究对象,筛选2019-2020赛季中职篮联赛19名国内后卫的360场比赛数据为统计对象。运用文献资料法、专家访谈法、问卷调查法、录像观察法、数理统计法、结构方程模型法,首先将初步设计的指标进行专家筛选,然后通过正态分布检验、非参数检验进一步筛选出显著体现后卫进攻能力差异性的指标并建立评价指标体系理论模型。在使用验证性因子分析验证模型合理性后,构建了中职篮国内后卫进攻能力评价指标体系并进行合理性检验。得出以下结论:1.通过文献梳理与专家调查问卷,将后卫进攻能力分为个人进攻能力和战术配合能力,并进一步划分为得分能力、突破能力、进攻篮板能力等多项指标,为本研究评价指标体系的确定提供依据。2.形成了中职篮国内后卫进攻能力评价指标体系理论模型。初步确定了能够反应中职篮国内后卫进攻能力的理论模型性,其中包括二级指标5项,分别是得分能力（A1）、突破能力（A2）、被侵能力（A4）、传接球能力（B1）、基础配合能力（B2）,三级指标17项。3.构建了中职篮国内后卫球员进攻能力评价指标体系。依据中职篮国内后卫进攻能力评价指标体系理论模型,借助AMOS 22.0软件,建立国内后卫进攻能力结构方程模型。通过计算验证性因子分析中各指标间的共变系数与载荷系数得到各指标权重。二级指标的权重依次为得分能力（0.26）、突破能力（0.23）、被侵能力（0.13）、传接球能力（0.19）、基础配合能力（0.19）。4.制定中职篮国内后卫球员进攻能力评价标准,根据各指标权重与球员的指标数据制定了中职篮国内后卫进攻能力单项指标评价标准。通过综合排名与效率值（PER）的相关性分析以及专家访谈的方式进一步验证了评价标准的合理性与有效性。

关键词：国内后卫进攻能力验证性因子分析(CFA) 评价指标

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高边墩连续梁桥施工控制技术研究

高边墩连续梁桥施工控制技术研究

作者：童益明中南大学

学位级别：硕士

摘要：由于高边墩连续梁桥有其特殊性,对其施工控制技术提出了更加严格的要求。本文以沪昆客专塘溪连续梁桥为研究背景,结合其施工过程,以理论计算结果为基础,应用了神经网络的基本理论及其他手段,对高边墩连续梁桥的施工控制技术进行... 详细信息

摘要：由于高边墩连续梁桥有其特殊性,对其施工控制技术提出了更加严格的要求。本文以沪昆客专塘溪连续梁桥为研究背景,结合其施工过程,以理论计算结果为基础,应用了神经网络的基本理论及其他手段,对高边墩连续梁桥的施工控制技术进行了研究,主要工作和成果如下：1、总结了桥梁施工控制理论和方法,并对这些方法和理论进行了对比研究。2、研究了不同的施工方法对塘溪连续梁桥成桥过程中的线形及内力状态产生的影响,据此确定了该桥的最优施工方案。3、结合沪昆客专塘溪连续梁桥的设计资料,对该桥的施工全过程进行了仿真计算与分析研究,并将计算结果运用于该桥的施工控制。4、应用人工神经网络法对沪昆客专塘溪连续梁桥进行了施工控制,结果表明该方法对该桥的施工控制能够满足工程精度要求。

关键词：高边墩连续梁桥施工控制技术研究

Sm改性的锰(铈)钛基催化剂的制备及其NH3-SCR性能研究

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Sm改性的锰(铈)钛基催化剂的制备及其NH3-SCR性能研究

作者：童永明黑龙江大学

学位级别：硕士

随着经济的发展,NO的排放量急剧增大,对环境和人类健康带来了一系列问题。氨选择性催化还原(NH-SCR)是一种有效的消除NO的方法。尽管当前VO-WO(MoO)/TiO催化剂已经应用在一些固定源的脱硝中,但自身的操作温窗较窄(300-400 ℃),矾的生物... 详细信息

随着经济的发展,NO的排放量急剧增大,对环境和人类健康带来了一系列问题。氨选择性催化还原(NH-SCR)是一种有效的消除NO的方法。尽管当前VO-WO(MoO)/TiO催化剂已经应用在一些固定源的脱硝中,但自身的操作温窗较窄(300-400 ℃),矾的生物毒性和高温时易受SO影响等不足仍然限制了其大规模应用。因此,仍需开发非矾基又具有良好低温消除NO性能的催化剂来满足当前固定源脱硝的需求。本文采用Sm改性Mn和Ce催化剂的氧化还原性和表面性质,提高了其低温NH-SCR消除NO的能力,并开展了如下的研究内容:分别采用溶胶凝胶法制备了SmMnTiO(y=0,0.1,0.2,0.3,0.4)、SmCeTiO(b=0,0.1,0.2,0.3,0.4)和共沉淀法制备了SmMn NiTiO(a=0,0.1,0.2,0.3,0.4)三个系列催化剂,并且分别探讨了Sm掺杂以后对其脱硝性能的影响。利用XRD,H-TPR,NH-TPD,XPS和DRIFTS等技术对催化剂进行表征。活性测试结果表明SmMnTiO,SmMn NiTiO和SmCeTiO催化剂在各自系列催化剂中具有较好的低温NH-SCR活性。各种表征结果说明Sm的加入能够提高催化剂的表面酸性和比表面积,调变催化剂的氧化还原性,从而拓宽催化剂NH-SCR活性温度窗口。并且利用原位漫反射红外光谱研究了催化剂的NH-SCR脱硝机理。

关键词： NOx Sm掺杂选择性催化还原氧化物 DRIFTS

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多重随机等效平面桁架模型在混凝土中的应用

多重随机等效平面桁架模型在混凝土中的应用

作者：童中明天津大学

学位级别：硕士

混凝土是一种具有复杂力学性质的非均匀准脆性材料。以往的研究大多将混凝土受力后变形和断裂过程的非线性归结为弹塑性,用宏观上的弹塑性理论来表述,然而,这种基于经典力学理论的力学模型忽略了混凝土内部细观结构的非均匀性,不足于表... 详细信息

混凝土是一种具有复杂力学性质的非均匀准脆性材料。以往的研究大多将混凝土受力后变形和断裂过程的非线性归结为弹塑性,用宏观上的弹塑性理论来表述,然而,这种基于经典力学理论的力学模型忽略了混凝土内部细观结构的非均匀性,不足于表现混凝土变形过程的复杂性。细观力学是从细观层次上来分析混凝土的内部结构,把混凝土看作是由粗骨料、硬化水泥砂浆及两者之间的过渡层组成的非均匀三相复合材料来进行研究。本文从混凝土的非均匀特性出发,基于自动格子机理论提出了一种新的数值方法—多重随机等效平面桁架模型。该模型与细观力学模型相比有其独特优点:(1)模型构造相对简单;(2)计算速度更快;(3)更容易实现并行计算;(4)能够应用于大型结构计算。本文介绍了混凝土多重随机等效平面桁架模型的基本理论,在模型建立过程中采用了简单的弹性本构关系,同时也制定了多重随机等效平面桁架模型的破坏准则。在计算方面,本文引入元胞单元法来实现其计算部分,使计算效率明显提高。本文针对工程中常用的C20混凝土,用多重随机等效平面桁架模型生成了相应的数值试样,对它进行了单轴载荷下的抗拉、抗压数值模拟。数值模拟结果与实验结果表现出较好的一致性,证明了本模型的合理性和有效性。根据得到的单轴拉压应力一应变曲线和裂纹演化图,分析了混凝土的损伤断裂过程,得出以下结论:在数值模拟中,只要模型能够充分反映混凝土非均匀性的特点,即使使用较为简单的本构关系也能够反映混凝土在单轴荷载作用下,从变形非线性到最后破坏的全过程。本文对混凝土的尺寸效应进行了数值模拟,结果表明随着试样尺寸的增大,抗压强度反而降低。对C1550混凝土的数值模拟表明,随着混凝土强度的提高,其压拉比越来越大。通过双中心裂纹(DCN)剪切试样的数值模拟还得出试样的整个断裂过程还是由于拉伸损伤引起的。总之,本论文为混凝土力学性能的数值模拟提供了新的研究途径,是进行混凝土在多轴受力情况下的数值模拟的基础性工作。

关键词：混凝土多重随机等效平面桁架模型数值模拟自动格子机

.NET下设备管理与计划优化系统的组件化开发

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.NET下设备管理与计划优化系统的组件化开发

作者：童合明东南大学

学位级别：硕士

本文主要分两部分内容,分别介绍了在.NET平台下基于组件的设备管理子系统开发和job-shop环境下生产计划与调度集成优化的研究。论文首先分析了.NET框架及其组件技术,比较了.NET组件与传统COM组件、基于组件开发与基于面向对象开发的区... 详细信息

本文主要分两部分内容,分别介绍了在.NET平台下基于组件的设备管理子系统开发和job-shop环境下生产计划与调度集成优化的研究。论文首先分析了.NET框架及其组件技术,比较了.NET组件与传统COM组件、基于组件开发与基于面向对象开发的区别。接着在剖析了设备管理子系统现状和存在问题的基础上,论证了对原先系统进行业务流程改进和进行组件化升级的可行性及必要性,同时也对组件的开发思想和开发流程进行了阐述。在设备管理子系统的具体实现过程中,首先设计了一个灵活的多层系统体系结构,并以此出发,分别介绍了各层结构的具体开发过程,最后还给出了组件的部署方式和分布式系统的搭建。在生产计划与调度集成优化的研究中,首先给出并分析了原先的求效益最大的递阶随机生产计划模型和求成本最低的递阶随机生产计划模型以及基于扩展随机高级判断Petri网的调度仿真模型,并以此为基础建立了计划与调度的集成优化模型。之后详细的分析了Tabu搜索思想以及用于集成优化的具体算法过程,设计和开发了具体的集成优化程序,通过配置不同的参数来运行得到多组实例。最后分析这些实例,总结出Tabu搜索算法在集成优化中的效果与特点。论文最后对整个论文的内容进行了总结,并对下一步的工作进行了展望。

关键词：组件化开发 .NET 设备管理 petri网 Tabu搜索生产计划与调度集成优化

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成煤大地构造学研究

地球科学进展 1999年第3期14卷 312-316页

作者：童玉明中国科学院长沙大地构造研究所

将大地构造学和煤地质学相结合，提出了一门新的边缘学科——成煤大地构造学（即煤成矿学）。首先对它的定义、范围、方法、手段和特色作了详细阐述，把全球构造聚煤区分为域、带、盆三级。然后以中国为例，对成煤大地构造问题进行了讨... 详细信息

将大地构造学和煤地质学相结合，提出了一门新的边缘学科——成煤大地构造学（即煤成矿学）。首先对它的定义、范围、方法、手段和特色作了详细阐述，把全球构造聚煤区分为域、带、盆三级。然后以中国为例，对成煤大地构造问题进行了讨论，主要是聚煤盆地和含煤建造分类、古构造对聚煤作用的制约和成煤大地构造与聚煤盆地的时空演化，海域构造聚煤带，深部构造对中、新生代煤盆地的控制作用，成煤构造地球化学，与成煤构造环境有关若干问题如灾变论，成煤大地构造理论对煤盆地的预测和找煤评价。

关键词：大地构造学煤地质学成煤大地构造学煤矿床