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用检测甲胎蛋白的定性ELISA试剂作定量测定的尝试

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上海医学检验杂志 2002年第4期17卷 254-256页

作者：章秀兰上海市徐汇区永嘉路地段医院上海200031

目的　尝试将酶标定性检测甲胎蛋白 (AFP)技术改为定量测定。方法　以Murax Coda系统测定的病人血清结果为准 ,在原定性系统上建立AFP定量测定的校准曲线 ;确定在该系统上的定量报告的最小限值(功能灵敏度 ) ;与原Murax Coda系统作方法... 详细信息

目的　尝试将酶标定性检测甲胎蛋白 (AFP)技术改为定量测定。方法　以Murax Coda系统测定的病人血清结果为准 ,在原定性系统上建立AFP定量测定的校准曲线 ;确定在该系统上的定量报告的最小限值(功能灵敏度 ) ;与原Murax Coda系统作方法学比较 ,观察准确度。结果　建立的定量测定系统的可报告定量低限为 2 0 μg/L ;可报告范围为 2 0～ 30 0 μg/L ;与原定量系统的方法学比较 :n =4 0 ,^Y =1.139X - 6 .85 ,r =0 .976。结论　改良后的原定性AFP酶标检测系统 ,可以对含量在 2 0～ 30 0 μg/L的AFP结果作定量报告。

关键词：检测甲胎蛋白定性ELISA试剂定量测定原发性肝癌诊断

基于高分辨质谱技术对兴奋剂生长激素泛素化修饰的探究

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基于高分辨质谱技术对兴奋剂生长激素泛素化修饰的探究

作者：章秀兰上海体育学院

学位级别：硕士

研究目的:生长激素(Growth hormone,GH)及其类似物作为内源性肽类禁用物质,因其滥用程度高,检测难度大而受到持续关注。目前,生长激素兴奋剂的检测方法包括直接检测法和间接检测法。直接检测法是基于人体内GH不同亚型比例变化超过一定阈... 详细信息

研究目的:生长激素(Growth hormone,GH)及其类似物作为内源性肽类禁用物质,因其滥用程度高,检测难度大而受到持续关注。目前,生长激素兴奋剂的检测方法包括直接检测法和间接检测法。直接检测法是基于人体内GH不同亚型比例变化超过一定阈值,进而判断GH的摄入。该检测方法灵敏度高,但是检测窗口期短,仅能在24 h内判出阳性结果。间接检测法则通过两个生物标志物浓度的异常升高判定阳性结果。该方法检测窗口期长,但是阈值较高,存在一定的漏检率。在兴奋剂领域,关于GH的检测目前都是基于人在注射GH后,GH的刺激导致人体“异常”的反馈,进而判断GH的摄入,但是这都是基于人群得到的“正常范围”,不能排除个体化差异导致的异常结果。本研究从GH被认作兴奋剂的本质出发,人体在生理状态下可以分泌GH,而运动员检测GH的本质是外源性GH,即非自身产生的GH。基于此,本研究从重组人生长激素(recombinant human Growth Hormone,rhGH)药物出发,探究rhGH药物的结构与人体内源性GH的本质区别,由于外源性GH与内源性22 kD-GH的氨基酸序列一致,因此本研究从翻译后修饰入手,探究rhGH药物的翻译后修饰,判断其成为阳性指标的可能性。研究方法:本论文由两个研究组成,其中健康受试者人体实验部分,已通过上海体育学院伦理道德委员会审批。研究一:rhGH泛素化修饰的探索基于高分辨质谱技术,通过还原烷基化、溶液内酶解的方式得到不同的肽段,“从下而上”鉴定蛋白。使用不同的软件探索、匹配rhGH药物的翻译后修饰并用标准品确认。通过文献检索初步得到内源性GH翻译后修饰的结果。研究二:多种生理状态下人体内源性GH的泛素化情况探究通过样本量计算,纳入24名健康受试者,在完成规定的实验要求(熟睡、跑步6 km)前后进行采血,得到血清样本,摸索方法检测血清内泛素化的GH,确认多种生理状态下人体内源性泛素化的GH的存在。研究结果:研究一,将质谱结果通过不同的软件匹配以及标准品比对,检出不同品牌的rhGH药物含有相同的2个位点的泛素化修饰。通过文献检索,人体血清内含有泛素化修饰的GH,单纯通过人体内有泛素化的GH不能判断为兴奋剂GH阳性。研究二,将多种生理状态的下的人血清样本的质谱结果与不同的软件匹配以及标准品比对,确认人体内含有泛素化的GH,与rhGH药物有相同的泛素修饰位点。研究结论:(1)基于“自下而上”的高分辨质谱蛋白检测技术,首次在已上市两种rhGH药物中发现了多位点的泛素化修饰,其中K96位点泛素化修饰同时存在于两种rhGH药物中。(2)多种生理状态下人血清中的内源性GH也可检出低比例的泛素化修饰。(3)GH泛素化普遍存在于内源性GH和rhGH药物中,后续可尝试通过评估其浓度变化规律考察其用于兴奋剂筛查工作的可能性。

关键词：兴奋剂生长激素泛素化高分辨质谱技术

新公共管理视野下我国服务型政府的实现路径研究

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新公共管理视野下我国服务型政府的实现路径研究

作者：章秀兰中南大学

学位级别：硕士

20世纪80年代以来,西方国家开始了“重塑政府”的新公共管理运动,受这股世界改革浪潮的影响,我国也开始了对政府管理创新的探索。许多学者在对西方国家公共管理经验总结的基础上,进行了一系列的实践和理论探讨,取得了丰硕成果,但这种探... 详细信息

20世纪80年代以来,西方国家开始了“重塑政府”的新公共管理运动,受这股世界改革浪潮的影响,我国也开始了对政府管理创新的探索。许多学者在对西方国家公共管理经验总结的基础上,进行了一系列的实践和理论探讨,取得了丰硕成果,但这种探讨活动还亟待深入。有鉴于此,作者对新公共管理及其在西方发达国家的实践进行了详尽分析与研究,力求为新时期我国服务型政府建设提供有益借鉴。本文首先概述了国内知名学者对服务型政府的定义,理清了一些相关的概念,明确了服务型政府的内涵及其显著特征。其次,归纳了新公共管理的主要理念,分析了新公共管理在英国、美国、新西兰、澳大利亚等国家的实践,总结出这些国家的成功经验对我国政府管理的借鉴意义,为我国的服务型政府建设提供了相应的理论参考。然后,引入新公共管理理念对我国的政府管理进行审视,找出了我国服务型政府建设中存在的种种问题,并对产生这些问题的原因进行了深入分析。在此基础上,根据新公共管理理念的要求,提出了一系列政策建议,包括重新界定政府角色,切实转变政府职能;转变公务员的观念,强化为民服务意识;完善绩效评估体系,健全政府行为约束机制;引入市场机制,提高公共服务的水平;健全政府回应机制,拓展公民参与渠道等,为提高政府管理水平,推动我国服务型政府建设进行了从理论到实践的有益探索。

关键词：新公共管理服务型政府路径

高血压病、冠心病及高血脂症患者血液粘度变化及血浆粘度与血脂的关系

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中国微循环 1994年第1期 17-19页

作者：章秀兰上海徐汇区永嘉地段医院 200031

高血压、冠心病与高血脂症都直接危害人民的健康,高血压病还是发生中风最重要的危险因素之一。如何提高治愈率,减少中风的发生,已成为当务之急。基于此点,本文对以上三病种463例患者的血液流变学及血脂的测定结果进行了分析。结果表明:... 详细信息

高血压、冠心病与高血脂症都直接危害人民的健康,高血压病还是发生中风最重要的危险因素之一。如何提高治愈率,减少中风的发生,已成为当务之急。基于此点,本文对以上三病种463例患者的血液流变学及血脂的测定结果进行了分析。结果表明:其血液流变学多项指标增高,与对照组相比有极显著性差异。三个病种的血脂也明显增高,含脂质高的血浆粘度也明显增高。提示临床在治疗上宜采用去脂,活血,降粘等综合治疗措施,预防与减少心肌梗塞与缺血性中风的发生。

关键词：血液流变学血脂中风

采用液相色谱-高分辨质谱检测血清兴奋剂生长激素

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采用液相色谱-高分辨质谱检测血清兴奋剂生长激素

第十三届全国体育科学大会

作者：章秀兰上海体育学院

研究目的:生长激素及其类似物是内源性肽类禁用物质,具有影响脂肪代谢和促进蛋白合成的作用,被世界反兴奋剂机构（World Anti-Doping Agency,WADA）列为S2（肽类激素、生长因子相关物及其类似物）类物质,赛内赛外均禁用。生长激素因为... 详细信息

研究目的:生长激素及其类似物是内源性肽类禁用物质,具有影响脂肪代谢和促进蛋白合成的作用,被世界反兴奋剂机构（World Anti-Doping Agency,WADA）列为S2（肽类激素、生长因子相关物及其类似物）类物质,赛内赛外均禁用。生长激素因为滥用程度高,检测难度大而受到持续关注。目前,WADA认可的生长激素检测方法包括直接检测法和间接检测法,直接检测法是采用免疫试剂盒直接检测22 kDa亚型的生长激素和非22 kDa亚型的生长激素,通过生长激素不同亚型的比例变化超过一定的阈值,判断兴奋剂生长激素阳性。由于抗原抗体存在交叉反应,准确度仍需进一步加强。间接检测法则是检测生长激素摄入后人体内升高的两个生物标志物IGF-I和P-III-NP,使用质谱方法或者免疫方法检测,代入公式计算相应数值,超过阈值判断兴奋剂生长激素阳性。本研究旨在使用准确度更高的质谱技术直接检测兴奋剂生长激素,提高检测方法的准确度,为兴奋剂生长激素的直接检测提供方法选择。研究方法:1)样本制备:使用黄色帽真空管取坐位采集生理状态下的受试者和生长激素注射后4小时的受试者血液,4oC,3500 rpm离心15分钟,取上清,获得200μL/管的血清样本,剩余样本存放在-80oC冰箱。2)拧去BioRAD低丰度蛋白富集试剂盒内小柱的帽子和底塞,1000g离心1分钟,弃去流出液。3)活化小柱:向小柱内加200μL wash buffer,旋转5分钟,1 000g离心1分钟,弃去流出液,重复该步骤一次。4)将200μL血清样品加入到小柱内,室温旋转孵育2小时,1 000g离心1分钟,弃去流出液。5)清洗小柱:向小柱内加200μL wash buffer,旋转5 min,1 000g离心1分钟,弃去流出液,重复该步骤两次。6)清洗小柱:向小柱内加200μL DI water,旋转5分钟,1 000g离心1分钟,弃去流出液。7)收集样本:向小柱内加40μL rehydrated elution reagent,多次涡旋、旋转,时长超15分钟,1 000g离心1分钟,取干净EP管收集流出液,重复该步骤两次。8)溶液置换:将样本加入到10 K超滤管内,加入50 mM碳酸氢铵至超滤管口,14 000g高速离心20分钟,弃去流出液,重复该步骤三次。9)收集样本:将10 K超滤管倒扣在新的EP管内,3000 g离心,收集流出液。10)加入三（2-羧乙基）膦盐酸盐,使其工作浓度为10 mM,加入氯乙酰胺,使其工作浓度为40 mM,56oC避光反应50分钟。11)使用Implen NanoPhotometer?N120蛋白定量,吸光度A=280纳米。12)以蛋白:胰酶=50:1（质量比）加入胰酶,37oC 600 rpm孵育4小时。13)以蛋白:胰酶=50:1（质量比）加入胰酶,37oC 600 rpm孵育12小时。14)使用Spin Mono C18小柱脱盐:加200μL 100%乙腈活化小柱,室温3 000g离心1分钟,弃去流出液;加200μL 50%乙腈活化小柱,室温5 000g离心1分钟,弃去流出液;加200μL 0.1%三氟乙酸平衡小柱,室温5 000g离心1分钟,弃去流出液;将样品真空抽干,使用80μL 0.1%三氟乙酸复溶,加入20%三氟乙酸调节,使得样品PH<3。将样品加到小柱内,室温3 000g离心1分钟,重复2次,弃去流出液;加300μL 0.1%三氟乙酸到小柱内清洗杂质,室温5 000g离心2分钟,弃去流出液;加100μL含20%乙腈0.1%三氟乙酸水溶液到小柱内洗脱,室温3 000g离心1分钟,重复1次,收集流出液。加100μL含50%乙腈0.1%三氟乙酸水溶液到小柱内洗脱,室温3 000g离心1分钟,重复1次,收集流出液。加100μL含80%乙腈0.1%三氟乙酸水溶液到小柱内洗脱,室温3 000g离心1分钟,重复1次,收集流出液。15)真空抽干,将烘干的肽段用80μL流动相A（2%乙腈加入氨水,PH=10.0）复溶,取至塑料进样小瓶,上样量为70μL,使用装有ACQUITY UPLC?BEH·C18色谱柱（1.7·μm,2.1·mm×150·mm）的超高效液相色谱仪（Vanquish·Flex,USA）按梯度进行分级。色谱梯度:0-2分钟流动相B为0%,2-18分钟流动相B为3.8%,18-35分钟流动相B为24%,35-38分钟流动相B为30%,38-39分钟流动相B为43%,39-45分钟流动相B为100%,45-66分钟流动相B为0%,流速为0.2 mL/min,流动相B为80%乙腈加入氨水,PH=10.0,自动进样器和柱温分别设置为10℃和35℃,从19分钟开始,每分钟收集1管流出液,至45分钟停止收集,共25管液体。16)氮气吹干,使用2%乙腈0.1

关键词：生长激素兴奋剂大分子蛋白靶标检测高分辨质谱

来源： cnki会议评论

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论行政道德的政府行为调控功能

湖南社会科学 2007年第3期 30-31页

作者：章秀兰中南大学政治学与行政管理学院

行政道德本身所含的强烈政治属性、较高原则性、内在责任性、明显示范性,彰显其主要的调控功能。通过对行政主体及其工作人员进行“行政道德立法”、健全行政道德监督机制、开展行政道德教育、建立行政道德调控的弹性机制等一系列措施,... 详细信息

行政道德本身所含的强烈政治属性、较高原则性、内在责任性、明显示范性,彰显其主要的调控功能。通过对行政主体及其工作人员进行“行政道德立法”、健全行政道德监督机制、开展行政道德教育、建立行政道德调控的弹性机制等一系列措施,可以促进行政道德的养成,最终发挥行政道德的调控功能。

关键词：行政道德政府行为调控功能

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浅谈当班主任的艺术

浅谈当班主任的艺术

第四届中国教育家大会

作者：章秀兰江西省南城县上唐中学

随着素质教育的发展,班主任的工作不仅要细致,而且更需要一定的艺术性。在我10年的教学生涯中,我已担任了三届班主任。下面把我的一些经验和体会与大家共勉。我认为应从以下几方面去开展班主任工作。一、在批评方面的艺术在班集体中,学...

随着素质教育的发展,班主任的工作不仅要细致,而且更需要一定的艺术性。在我10年的教学生涯中,我已担任了三届班主任。下面把我的一些经验和体会与大家共勉。我认为应从以下几方面去开展班主任工作。一、在批评方面的艺术在班集体中,学生各有千秋,性格不同。当学生做错事

关键词：

来源： cnki会议评论

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简易血糖仪使用前培训的重要性

检验医学 2004年第4期19卷 327-329页

作者：章秀兰上海市永嘉路地段医院检验科上海200031

目的　了解非检验专业人员应用简易血糖仪检测血糖的质量状况 ,并提出改进意见。方法　 (1 )以自动分析葡萄糖氧化酶法与血糖仪作对比检测 ;(2 )专业人员与未经培训和经培训的非专业人员使用血糖仪检测结果进行比较。结果　自动分析与... 详细信息

目的　了解非检验专业人员应用简易血糖仪检测血糖的质量状况 ,并提出改进意见。方法　 (1 )以自动分析葡萄糖氧化酶法与血糖仪作对比检测 ;(2 )专业人员与未经培训和经培训的非专业人员使用血糖仪检测结果进行比较。结果　自动分析与血糖仪检测低、中和高血糖标本结果差异均无显著性。专业人员和非专业人员血糖仪检测结果间差异明显。非专业人员结果的不准确度偏倚大 ,重复性差 ;非专业人员间的结果不一致性显著。经培训后的非专业人员检测结果的精密度和准确度均明显提高。结论　必须对使用血糖仪的非专业人员进行规范培训 ,加强日常血糖检测质量管理 ,正确使用血糖仪。

关键词：血糖仪床边检查糖尿病 POCT 检测报告

嗜铬细胞瘤并发心血管系统损害患者的护理体会

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中西医结合心血管病电子杂志 2016年第13期4卷 99-100页

作者：章秀兰合肥市第二人民医院心血管内科

目的分析嗜铬细胞瘤并发心血管系统损害的护理方法。方法选取本院2013年1月;015年12月收治的嗜铬细胞瘤合并心血管系统损害患者14例为研究对象,随机分为实验组和对照组,各7例。分别给予护理干预及常规护理,观察护理结果。结果实验组渡... 详细信息

目的分析嗜铬细胞瘤并发心血管系统损害的护理方法。方法选取本院2013年1月;015年12月收治的嗜铬细胞瘤合并心血管系统损害患者14例为研究对象,随机分为实验组和对照组,各7例。分别给予护理干预及常规护理,观察护理结果。结果实验组渡过危险期时间、术后住院时间低于对照组,痊愈率、满意率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论嗜铬细胞瘤并发心血管系统损害病情严重,需要在治疗期间给予患者严密的护理,促进患者康复,减少病死率。

关键词：嗜铬细胞瘤心血管系统损害护理