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吐鲁番 2018年第4期 F0003-F0003页

作者：程新凯吐鲁番市书协

rbm46通过选择性剪接影响斑马鱼性腺发育的作用研究

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rbm46通过选择性剪接影响斑马鱼性腺发育的作用研究

作者：程新凯西南大学

学位级别：硕士

性别决定和性腺发育广泛存在于动物体中,这对于有性繁殖物种的生存和繁衍至关重要。调控性别决定和性腺发育的机制涉及到复杂的基因调控网络。探究高度多样化的调控系统是如何保证和实现生殖系统健康和遗传物质成功传递的,对于我们解析... 详细信息

性别决定和性腺发育广泛存在于动物体中,这对于有性繁殖物种的生存和繁衍至关重要。调控性别决定和性腺发育的机制涉及到复杂的基因调控网络。探究高度多样化的调控系统是如何保证和实现生殖系统健康和遗传物质成功传递的,对于我们解析性腺发育以及性别决定具有重要意义。斑马鱼与哺乳动物相比,具有高度相似的基因组水平,且组织器官发育的调控机制也具有一定保守性,因此斑马鱼成为研究血液细胞发育、神经系统发育、器官再生和疾病模型的理想模式生物。但迄今为止,斑马鱼性腺发育领域的研究还不够全面,部分原因是由于斑马鱼缺少性染色体,其性腺发育由多个基因共同调控,性别决定这一过程受到诸如水温、密度等环境因素的影响。近年来,斑马鱼中广泛应用的基因编辑技术(TALEN和CRISPR/Cas9等)和单细胞RNA-seq技术为解决这个问题提供了可能。斑马鱼RNA结合蛋白46(Rbm46)属于核内不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hn RNP)R/Q家族,包含两个RNA识别基序(RNA Recognition Motifs,RRMs),一个退化的RRM和一个C端双链RNA结合基序(Double-Stranded RNA Binding Motif,DND1-DSRM)结构域,到目前为止关于rbm46在体内的表达和功能研究还鲜有报道。在本研究中,我们首先通过RT-PCR确定了rbm46的转录本存在母源性表达,且两个转录本rbm46-201和rbm46-202在斑马鱼性腺中特异表达。我们根据最新的基因组组装结果,发现两个转录本均包含六个外显子,位于第一号染色体的同一基因座位置。通过整体原位杂交和切片原位杂交证实rbm46在发育中的性腺中高表达。为了研究rbm46在性腺发育中的功能,我们利用TALEN技术成功构建并筛选得到两个rbm46突变品系,分别于rbm46第3号外显子缺失11和16个bp,命名为rbm46△△和rbm46△△。两个突变品系均为终止密码子提前引入,分别终止于第55和51号氨基酸处,且两突变品系均可以正常存活。通过组织学和解剖学观察发现,rbm46纯合突变系全部为雄性,且无法和野生型雌鱼自由交配产生后代。我们将tp53突变引入rbm46突变系获得rbm46/tp53双突变品系,发现不能挽救rbm46突变系全雄的表型,说明这种表型的发生不是由经典的tp53介导的斑马鱼性腺分化机制调控的。接下来我们通过Western Blot和免疫荧光实验发现,在性别决定的关键时期,rbm46突变体中减数分裂进程严重受损,其中联会复合体蛋白3(sycp3)在rbm46突变体中不表达,减数分裂所需的关键酶也被显著下调,由此我们推测突变体之所以全雄不可育是因为rbm46基因的缺失引起了与减数分裂相关的关键因子受损,造成减数分裂异常。为了探究rbm46突变体全部发育为雄性且精巢组织无法成功进行减数分裂产生功能性精子的内在原因,我们进行了早期生殖细胞的增殖和凋亡水平检测,结果显示rbm46突变体中的早期生殖细胞增殖和凋亡正常。hn RNP家族成员hn RNP C的功能与m RNA的剪接和稳定性密切相关,随后,我们通过Western Blot检测发现hn RNP C的表达量在突变体中显著升高,这提示我们rbm46突变体中m RNA的剪接可能会受到损坏。为了筛选出rbm46基因缺失引起的关键受损因子,我们选择斑马鱼性别决定早期即30dpf为时间点,进行全长转录组测序,我们发现在突变体组中的选择性剪接事件和野生型相比发生了明显变化。IGV软件分析得到一些重要的与性腺发育相关功能基因发生了异常剪接,如DAZ家族成员dazl、DEAD-box解旋酶ddx5、细胞色素450家族成员cyp11a1和cyp19a1a、多能干细胞标记pou5f3、剪接相关基因rbm5和rbm10。同时,我们通过RT-PCR和q RT-PCR证实了上述多个与斑马鱼性别决定、减数分裂以及多能干细胞分化相关的关键基因发生的异常剪接本。我们对异常的基因剪接本进行分子克隆和体外细胞转染实验,结果表明这些异常的剪接体多数都出现翻译错误。由此,我们推测在正常机体中,rbm46在调控性腺发育相关基因的m RNA正常剪接过程中,扮演着重要的“指导”角色。总之,我们的研究表明,在斑马鱼中缺失rbm46会导致其性腺生殖细胞分化异常,并且这种异常可能是由于与斑马鱼性别决定、减数分裂以及干细胞分化相关的关键基因选择性剪接失控所导致的。更为重要的是,人类RBM46在睾丸组织中高表达,但其是否参与睾丸发育过程未见报道,这意味着我们的研究不仅可以丰富斑马鱼的性别决定调控网络,也可为人类或其他哺乳动物的生殖系统发育研究提供一定的参考。

关键词：斑马鱼 rbm46 性腺减数分裂选择性剪接

强化高效管理优化便捷措施全力打造社会保险公共服务优质平台 B04

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鞍山日报

作者：程新凯

习近平总书记在党的十九大报告中指出:“保障和改善民生要抓住人民最关心最直接最现实的利益问题”。社会保险是人民最关心、与人民利益最直接、是人民最现实的民生工程。深化“放管服”改革,要以党的十九大精神为指导,把社会保险工作...

习近平总书记在党的十九大报告中指出:“保障和改善民生要抓住人民最关心最直接最现实的利益问题”。社会保险是人民最关心、与人民利益最直接、是人民最现实的民生工程。深化“放管服”改革,要以党的十九大精神为指导,把社会保险工作便捷化建设融入到全面振兴钢都全链条工作部

关键词：

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低温对四川华鳊卵巢发育的影响及调控

水产学报 2022年第8期46卷 1389-1402页

作者：刘楠楠程新凯杨洋刘娟辜浩然王志坚西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室水产科学重庆市重点实验室

为探究低温对四川华鳊卵巢发育的影响及调控方式，实验对其产卵后雌鱼进行了11°C的低温饲养(LT组)，为期2周，并与26°C条件下(OT组)其卵巢发育状况进行对比。通过形态学和组织学观察发现，LT组卵巢发育被抑制，发生退化，卵母细胞明... 详细信息

为探究低温对四川华鳊卵巢发育的影响及调控方式，实验对其产卵后雌鱼进行了11°C的低温饲养(LT组)，为期2周，并与26°C条件下(OT组)其卵巢发育状况进行对比。通过形态学和组织学观察发现，LT组卵巢发育被抑制，发生退化，卵母细胞明显发育不良，出现典型闭锁卵泡的特征。对雌鱼血清中的激素水平及卵巢中相应受体基因的表达水平进行测定，发现低温使FSH和DHP水平显著下降，并严重抑制激素受体基因fshr、lhcgr、pgr、esr1和ar的表达。通过转录组测序和分析发现，在低温处理过程中，类固醇激素合成、细胞生长增殖以及凋亡和自噬相关通路被显著富集，与低温的影响显著相关。低温使类固醇激素合成和卵母细胞发育相关基因(StAR、cyp17a1、hsd3b、cyp19a2、hsd17b1、vtg1、zp4、mmp9和mmp15)，以及细胞生长增殖和抗凋亡相关基因(ccni、cdk16、igf1r、egfr、nobox和bcl2)的表达下调，促凋亡基因(bax、tnf和tp53)的表达上调。研究表明，低温之所以导致四川华鳊卵泡闭锁，一方面可能是由于低温抑制生殖激素的合成和受体基因的表达，使卵巢发育和卵母细胞生长增殖受限；另一方面，可能是由于低温促使卵泡发生自噬凋亡，最终导致卵泡发生退化闭锁。此研究为四川华鳊的保护生物学研究和人工繁殖提供了理论基础。

关键词：四川华鳊低温卵泡闭锁生殖激素凋亡和自噬

国家残疾人高山滑雪站姿运动员备战期生理生化机能监控与评价研究

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国家残疾人高山滑雪站姿运动员备战期生理生化机能监控与评价研究

海上风力发电用静态密封双定子高温超导发电机的样机研制与测试

第十二届全国体育科学大会

作者：程媛媛于新凯上海体育学院

研究目的:残疾人高山滑雪运动在我国起步较晚,运动员机能监控方面研究存在空缺,本研究为国家残疾人高山滑雪站姿组运动员在备战2022年北京-张家口冬季残疾人奥林匹克运动会期间进行身体机能监控与评价,分析在备战期运动员身体机能的状态... 详细信息

研究目的:残疾人高山滑雪运动在我国起步较晚,运动员机能监控方面研究存在空缺,本研究为国家残疾人高山滑雪站姿组运动员在备战2022年北京-张家口冬季残疾人奥林匹克运动会期间进行身体机能监控与评价,分析在备战期运动员身体机能的状态,协助教练实施科学化训练,对备战期训练过程进行跟踪反馈,提供真实科学的监控评价结果,为备战2022年北京冬残奥会提供科技保障。研究方法:本研究以残疾人高山滑雪国家队站姿组运动员的以残疾人高山滑雪国家队站姿组运动员为研究对象。本测试从2019年10月起至2020年10月结束,根据运动队赛程以及训练的安排,共进行了5次血液指标的检测。分别对运动员的红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、肌酸激酶（CK）、血睾酮（T）、皮质醇（C）、血睾酮与皮质醇比值（T/C）六项指标进行检测;使用功率自行车对运动员进行递增负荷实验,进行最大摄氧量O2max)测试。使用SPSS 20.0统计软件对所得数据进行处理分析,用Kolmogorov–Smirnov检验对数据进行正态性检验,对血液指标使用单因素方差分析与配对t检验,对不同训练阶段运动员的相关指标进行分析。以P＜0.05为标准判断是否具有统计学显著性。研究结果:1.运动员红细胞计数平均值在4.8-5.1×1012/L之间,血红蛋白浓度均值在145-160g/L之间,红细胞、血红蛋白水平较稳定,组间不存在显著差异（p RBC=0.724,p Hb=0.332）。第二次测试血红蛋白浓度（158.5±5.07g/L）高于第一次（146.78±9.59g/L）,两组组间的差异具有统计学上的显著性（P＜0.05）。2.运动员肌酸激酶水平波动较大,在组间不具有显著差异,其平均值在第一、三、四次测试时,即在力量训练期间较高超过了300U/L。3.男性运动员睾酮在组间存在差异（P＜0.05）,第三次测试睾酮浓度（11.74±0.19nmol/L）低于第一（18.79±1.9nmol/L）、二（20.47±4.9nmol/L）、四（24.78±2.45nmol/L）、五次（25.73±5.85nmol/L）,组间的差异具有统计学上的显著性。（P＜0.05）,第一次睾酮浓度低于第四、五次,组间的差异具有统计学上的显著性。（P＜0.05）;女性运动员睾酮浓度组间不存在差异（P=0.111）,其中第一次测试睾酮浓度（1.03±0.39nmol/L）低于第三次（1.86±0.11nmol/L）,组间的差异具有统计学上的显著性。（P＜0.05）。运动员皮质醇平均浓度以及男、女睾酮与皮质醇比值均存在组间差异（P＜0.05）,运动员第四次测试的皮质醇浓度（212.6±51.99nmol/L）低于第一（442.68±59.36nmol/L）、二（383.88±60.49nmol/L）、三（463.28±105.64nmol/L）、五次（445.44±113.74nmol/L）,组间的差异具有统计学上的显著性（P＜0.05）;男性运动员第四次测试睾酮与皮质醇比值（0.131±0.044）高于第一（0.044±0.008）、二（0.056±0.011）、三（0.03±0.011）、五次（0.071±0.023）,组间的差异具有统计学上的显著性（P＜0.05）,第三次测试睾酮与皮质醇比值低于第五次,组间的差异具有统计学上的显著性（P＜0.05）;女性运动员第四次测试睾酮与皮质醇比值（0.0075±0.0014）显著高于第一（0.0022±0.0006）、三（0.0035±0.0001）、五次（0.0025±0.0009）,组间的差异具有统计学上的显著性（P＜0.05）。4.男性运动员最大摄氧量平均值为54.82±5.86ml/kg/min,女性最大摄氧量平均值为43.32±3.80ml/kg/min,个体间差异较大。研究结论:1.运动员在备战期的运动员的氧运输功能正常,运动员的血红蛋白浓度整体较高,运动员有较好的携氧、利用氧气的能力,运动员能够适应各阶段训练。2.运动员在备战期,身体机能随着训练内容的改变出现适应性变化,在力量训练期间,训练负荷的强度较高,运动员的肌肉承受刺激较大,肌肉产生了应激,在力量训练后期,运动员的机能状态出现上升的现象。3.运动员的有氧耐力在个体间存在较大差异,整体有氧耐力能力良好。

关键词：残疾人运动员高山滑雪血液指标最大摄氧量机能监控

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中国电机工程学报 2021年第23期41卷 8148-8158页

作者：王玉彬朱新凯程明中国石油大学(华东)新能源学院山东省青岛市266580 东南大学电气工程学院江苏省南京市210096

海上风力发电是可再生能源的重要发展方向之一,为了降低发电成本,海上风力发电机组的单机容量越来越大,目标是10MW及以上级别。而高温超导直驱发电机具有体积小、重量轻的优势,是大型海上风电机组中最具有竞争力的方案之一。然而基于电... 详细信息

海上风力发电是可再生能源的重要发展方向之一,为了降低发电成本,海上风力发电机组的单机容量越来越大,目标是10MW及以上级别。而高温超导直驱发电机具有体积小、重量轻的优势,是大型海上风电机组中最具有竞争力的方案之一。然而基于电励磁同步电机拓扑结构研发的超导励磁直驱风力发电机面临着冷却液旋转密封、电流传输有刷、力矩管设计困难等技术难题。为解决上述难题,基于电机气隙磁场调制理论提出一种静态密封双定子高温超导风力发电机,可实现冷却液的静态密封和电流无刷传输,还可降低力矩管的设计难度。重点介绍该静态密封双定子高温超导发电机的拓扑结构、工作原理以及一台10kW样机的电磁性能、制造过程、实验平台与测试研究。该样机的成功制造与测试,验证了静态密封双定子高温超导发电机原理的可行性,总结了一整套制造与实验方法,为该型超导电机未来的工程应用提供参考。

关键词：高温超导发电机静态密封双定子磁场调制高温超导电机测试

双定子场调制超导电机超导磁体电磁特性的分析与计算

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中国电机工程学报 2022年第16期42卷 6064-6072页

作者：宁新福程明朱新凯王玉彬许利通东南大学电气工程学院江苏省南京市210096 中国石油大学(华东)新能源学院山东省青岛市266580

双定子场调制高温超导电机(double-stator field-modulated high temperature superconducting machine,DSFM-HTSM)是一种新型超导电机,其使用高温超导(hightemperature superconducting,HTS)磁体励磁,且实现HTS磁体的静态密封冷却与电机的无刷化。针对10kW DSFM-HTSM样机使用的100匝BSCCO双饼线圈,结合超导临界态模型和麦克斯韦方程建立其二维电磁场有限元计算模型,对HTS线圈的自场通流过程进行数值模拟,得到线圈电流的分布与变化特征,并求得线圈临界电流;采用边界替换法,对电机额定运行下的HTS线圈进行快速的电磁场有限元计算,求得HTS线圈的交流损耗;最后进行HTS磁体的制造和实验测试,在液氮冷却下线圈临界电流达70A,与理论计算值相符;样机稳定运行,HTS磁体满足设计要求,验证所提分析计算方法的正确性和有效性。

关键词：高温超导电机高温超导磁体临界电流交流损耗超导电磁场数值计算

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医疗质量指标统计及质量控制思考

现代医院 2022年第10期22卷 1534-1536页

作者：陈新程凯璇郑州大学第一附属医院河南郑州451162

本文以某省级医院的医疗数据统计为例,分析目前存在的问题及原因,通过思考分析和提出改进措施,从而提升医疗质量管理水平。应建立完善的医疗数据指标体系,选择关键、优先级改进指标,统一统计口径,保证数据来源的准确性;学会利用决策支... 详细信息

本文以某省级医院的医疗数据统计为例,分析目前存在的问题及原因,通过思考分析和提出改进措施,从而提升医疗质量管理水平。应建立完善的医疗数据指标体系,选择关键、优先级改进指标,统一统计口径,保证数据来源的准确性;学会利用决策支持平台,利用信息化手段统计管理质量指标,采用多种指标表现形式、提高数据分析能力,用于医疗质量控制管理及持续改进。

关键词：医疗质量指标统计质量控制

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金属有机框架材料催化氧化脱硫研究进展

应用化工 2022年第1期51卷 241-245页

作者：陈明燕冯新凯刘宇程西南石油大学化学化工学院四川成都610500 西南石油大学工业危废处置与资源化利用研究院四川成都610500

金属有机框架(MOFs)由于其高比表面积、结构多样且孔径可调节等性能被应用于反应催化剂。研究表明,不同的制备方法和反应条件对金属有机框架材料性能有重要影响。针对不同MOFs本体以及MOFs改性材料的催化氧化脱硫性能进行了比较,探讨了... 详细信息

金属有机框架(MOFs)由于其高比表面积、结构多样且孔径可调节等性能被应用于反应催化剂。研究表明,不同的制备方法和反应条件对金属有机框架材料性能有重要影响。针对不同MOFs本体以及MOFs改性材料的催化氧化脱硫性能进行了比较,探讨了影响MOFs材料性能的因素,发现材料结构中的缺陷以及复合材料中的协同作用对催化氧化脱硫性能具有重要影响。

关键词：金属有机框架催化氧化燃料油脱硫多相催化

地铁钢弹簧浮置板阻尼参数试验及其对行车的影响研究

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铁道标准设计 2022年第4期66卷 36-41,48页

作者：程曜彦方宏凯李新国同济大学教育部道路与交通工程重点试验室上海201804

钢弹簧隔振器阻尼比是影响钢弹簧浮置板轨道结构减振降噪作用效果的重要参数之一,钢弹簧隔振器阻尼比在设计、制造及日常维养中如何精确测量是行业关注的焦点。结合锤击试验及刚柔耦合数值分析,研究浮置板轨道振动传递特性及阻尼参数对... 详细信息

钢弹簧隔振器阻尼比是影响钢弹簧浮置板轨道结构减振降噪作用效果的重要参数之一,钢弹簧隔振器阻尼比在设计、制造及日常维养中如何精确测量是行业关注的焦点。结合锤击试验及刚柔耦合数值分析,研究浮置板轨道振动传递特性及阻尼参数对地铁行车的影响。结果表明:(1)锤击力在2~4档是其合适范围,计算自由衰减振动的钢弹簧阻尼比时合适的波形峰值间隔周期为3和4;(2)在简谐激振为1~500 Hz内、钢弹簧阻尼分别为10,30,50 kN·s/m时,钢弹簧浮置板轨道结构在第一共振峰处浮置板垂向位移导纳幅值分别为11.05×10^(-8),6.12×10^(-8),4.19×10^(-8),表明钢弹簧浮置板轨道结构在第一共振峰处的振动响应随着钢弹簧阻尼的增大显著减小;(3)钢弹簧阻尼对地铁列车行车影响的分析表明随着钢弹簧的阻尼增大,地铁列车行车的安全性及舒适度也相应提高,钢弹簧阻尼设置不宜超过50 kN·s/m。

关键词：地铁钢弹簧浮置板隔振试验阻尼比传递特性车桥耦合