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奶牛早孕因子重组蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

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中国畜牧兽医 2015年第4期42卷 877-882页

作者：刘云贾斌石峰李鑫李洪涛张永生宁梦影纪俊明秦炳燕石河子大学动物科技学院石河子832003 石河子大学生命科学学院石河子832003 石河子大学医学院石河子832003

本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体。本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用W... 详细信息

本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体。本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对重组蛋白及抗体进行检测。结果显示,成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,重组蛋白分子质量约37ku,表达量约占菌体总蛋白的48.6%,纯化后目的蛋白纯度可达93%,重组蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1∶12 800。结果表明,本研究成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,为研究奶牛早孕诊断奠定基础。

关键词：早孕因子原核表达 SDS-PAGE Western blotting ELISA

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高效siRNA的设计分析

黑龙江畜牧兽医 2017年第1期 109-113,294页

作者：秦炳燕张永生纪俊明李超程席继峰王香祖贾斌石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

RNA干扰(RNAi)介导的基因沉默已成为基因功能分析的高效工具,设计出高效的siRNA是RNA干扰(RNAi)成功的关键,但现有的siRNA设计规则存在许多不一致性,使得高效siRNA设计困难重重。为了对这些设计规则进行进一步的验证并探讨不同设计规则... 详细信息

RNA干扰(RNAi)介导的基因沉默已成为基因功能分析的高效工具,设计出高效的siRNA是RNA干扰(RNAi)成功的关键,但现有的siRNA设计规则存在许多不一致性,使得高效siRNA设计困难重重。为了对这些设计规则进行进一步的验证并探讨不同设计规则在高效siRNA设计中的价值,研究设计了9条靶向zfy基因(zfy-1、zfy-2、zfy-3、zfy-4、zfy-5、zfy-6、zfy-7、zfy-8、zfy-9)和4条靶向zfx基因(zfx-1、zfx-2、zfx-3、zfx-4)的siRNA并构建了重组载体,转染28~32日龄仔猪睾丸组织分离的猪生精细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测zfy和zfx基因mRNA的表达。结果表明:每个siRNA对靶基因的下调水平不同,zfy-9的沉默效率最高,为89%,zfy-1、zfy-2、zfy-3、zfx-1对靶基因的表达没有沉默作用。通过对13个siRNA序列特征进行分析表明,在siRNA设计中符合越多的碱基偏好性准则,沉默效率越好;但是不同的准则重要性不同,siRNA反义链中第10位的U和第13位的A/U对高效siRNA设计更有作用,应优先考虑;靶位点的选择对高效siRNA的设计也有重要作用。

关键词： RNA干扰(RNAi) siRNA设计 zfy zfx 实时荧光定量PCR

猪Zfy基因干扰载体的构建及性控效果的验证

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畜牧与兽医 2016年第12期48卷 53-57页

作者：秦炳燕孙丽荣张永生李超程席继峰王香祖贾斌石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 内蒙古通辽市农畜产品质量安全中心内蒙古通辽028000

为了探究Zfy基因在性别控制中的作用,试验运用RNAi技术,设计并合成了2对靶向猪Zfy基因的shRNA序列,构建了重组质粒(shRNA-a,shRNA-b),将其转染到体外培养的猪生精细胞中,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测生精细胞中Zfy基因mRNA的表达,然后... 详细信息

为了探究Zfy基因在性别控制中的作用,试验运用RNAi技术,设计并合成了2对靶向猪Zfy基因的shRNA序列,构建了重组质粒(shRNA-a,shRNA-b),将其转染到体外培养的猪生精细胞中,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测生精细胞中Zfy基因mRNA的表达,然后选取4头健康公猪进行体内干扰试验,分为A组和B组,每组2头,将重组质粒注射到猪睾丸中,A组注射shRNA-a,B组注射shRNA-b,对照组为试验猪场不进行注射的公猪,观察子一代性别比例。结果显示,qRT-PCR检测shRNA-a和shRNA-b对生精细胞中Zfy基因的抑制效率分别为33%(P0.05)。本试验成功构建干扰猪Zfy基因的重组质粒,并应用于动物试验,证实Zfy基因可以影响后代的性别比例,在动物性别控制中发挥一定的作用,但导致体内干扰试验结果与预期结果相反的原因仍需进一步验证。

关键词： Zfy基因性别控制 RNAi 精子发生

甘草酸单克隆抗体的制备及竞争ELISA法的建立

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石河子大学学报（自然科学版） 2016年第3期34卷 286-290页

作者：孙培培贾斌石峰郑江伟张永升席继峰王绪海秦炳燕石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 石河子大学生命科学学院新疆石河子832003

目前针对甘草酸的检测方法存在成本高、效率低的缺点,本研究通过碳二亚胺法合成甘草酸免疫原并制备出高效价高灵敏度的单克隆抗体,以建立一种基于间接竞争法的酶联免疫检测技术。本研究对常见甘草类型进行甘草酸含量测定并用HPLC法验证... 详细信息

目前针对甘草酸的检测方法存在成本高、效率低的缺点,本研究通过碳二亚胺法合成甘草酸免疫原并制备出高效价高灵敏度的单克隆抗体,以建立一种基于间接竞争法的酶联免疫检测技术。本研究对常见甘草类型进行甘草酸含量测定并用HPLC法验证。结果表明:抗体效价>5×104,纯化抗体的蛋白浓度为10.03 mg/m L。竞争ELISA法的最小检测极限为1.62 ng/m L,检测范围为1.62-200 ng/m L。ELISA方法测定的数据与HPLC方法测定的数据有很好的相关性。该方法具有简单快速,效率高,成本低的特点,对甘草酸的含量测定有重要意义。

关键词：甘草甘草酸单克隆抗体竞争法酶联免疫吸附测定

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五味子水提物和阿米卡星诱导细菌耐药性试验

中兽医医药杂志 2018年第4期37卷 42-44页

作者：林树乾秦炳燕冯敏燕杨世发李桂明赵增成黄中利傅剑山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023 山东昊泰科技药业有限公司山东济南250023

采用微量肉汤稀释法检测分别在阿米卡星及五味子水提物的选择压力下传至100代的大肠杆菌及沙门氏菌的MIC,结果显示,两种细菌在传代过程中皆对阿米卡星产生严重的耐药性,直至第100代的两种细菌则均未对五味子水提物产生耐药性。与化学抗... 详细信息

采用微量肉汤稀释法检测分别在阿米卡星及五味子水提物的选择压力下传至100代的大肠杆菌及沙门氏菌的MIC,结果显示,两种细菌在传代过程中皆对阿米卡星产生严重的耐药性,直至第100代的两种细菌则均未对五味子水提物产生耐药性。与化学抗菌药物相比,细菌可能对中药不易产生耐受性。

关键词：耐药性阿米卡星五味子药用植物最小抑菌浓度

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鸭疫里默氏杆菌向大肠杆菌传递抗药性的研究

山东农业科学 2018年第7期50卷 27-31,41页

作者：林树乾秦炳燕冯敏燕李桂明杨世发赵增成傅剑黄中利山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023 山东昊泰科技药业有限公司山东济南250023

为了解细菌抗药性的种间传递,本试验将抗药的鸭疫里默氏杆菌RA P3菌株和不抗药的大肠杆菌标准株8099混合传代培养,筛选传代培养后出现的大肠杆菌抗药菌株,之后对获得的抗药大肠杆菌菌株K-8099和大肠杆菌标准株8099及鸭疫里默氏杆菌RA P... 详细信息

为了解细菌抗药性的种间传递,本试验将抗药的鸭疫里默氏杆菌RA P3菌株和不抗药的大肠杆菌标准株8099混合传代培养,筛选传代培养后出现的大肠杆菌抗药菌株,之后对获得的抗药大肠杆菌菌株K-8099和大肠杆菌标准株8099及鸭疫里默氏杆菌RA P3菌株进行药敏试验和抗药基因检测。结果表明鸭疫里默氏杆菌RA P3的抗药基因传递给了不抗药的大肠杆菌标准株8099,且大肠杆菌抗药株K-8099的抗药水平显著提高。说明在混合感染过程中,鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的的抗药性确实可以发生种间传递。

关键词：鸭疫里默氏杆菌大肠杆菌混合传代培养抗药性传递

Interplay between topology and localization on superconducting circuits

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Chinese Physics B 2024年第6期33卷 240-246页

作者：关欣霍炳燕陈刚 Department of Materials and Chemical Engineering Taiyuan UniversityTaiyuan 030032China State Key Laboratory of Quantum Optics and Quantum Optics Devices Institute of Laser SpectroscopyShanxi UniversityTaiyuan 030006China Collaborative Innovation Center of Extreme Optics Shanxi UniversityTaiyuan 030006China School of Physics Zhengzhou UniversityZhengzhou 450001China

Topological insulators occupy a prominent position in the realm of condensed matter physics. Nevertheless, the presence of strong disorder has the potential to disrupt the integrity of topological states, leading to the localization of all *** study delves into the intricate interplay between topology and localization within the one-dimensional Su–Schrieffer–Heeger(SSH) model, which incorporates controllable off-diagonal quasi-periodic modulations on superconducting *** the application of external alternating current(ac) magnetic fluxes, each transmon undergoes controlled driving,enabling independent tuning of all coupling strengths. Within a framework of this model, we construct comprehensive phase diagrams delineating regions characterized by extended topologically nontrivial states, critical localization, and coexisting topological and critical localization phases. The paper also addresses the dynamics of qubit excitations, elucidating distinct quantum state transfers resulting from the intricate interplay between topology and localization. Additionally, we propose a method for detecting diverse quantum phases utilizing existing experimental setups.

关键词： topology localization superconducting circuits

新疆额尔齐斯河北极茴鱼形态性状与纯重的通径分析及基于COI基因序列的系统进化

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水生态学杂志 2024年

作者：毛秦钟馨单阳王思格朱子妍郭焱杨天燕浙江海洋大学水产学院新疆额尔齐斯河流域开发工程建设管理局新疆维吾尔自治区水产科学研究所

探明北极茴鱼与同属近缘种间的系统进化关系，明确其分类学地位，可为制定资源保护管理方案及开展增殖放流工作提供参考资料。对93尾采自新疆额尔齐斯河北极茴鱼（Thymallus arcticus）样本31个形态性状和纯重进行通径分析，采用PCR技... 详细信息

探明北极茴鱼与同属近缘种间的系统进化关系，明确其分类学地位，可为制定资源保护管理方案及开展增殖放流工作提供参考资料。对93尾采自新疆额尔齐斯河北极茴鱼（Thymallus arcticus）样本31个形态性状和纯重进行通径分析，采用PCR技术扩增了线粒体DNA COI基因序列，结合GenBank数据库中下载的茴鱼属鱼类进行系统发育探讨，结果表明，全长(X1)、枕骨后末端至腹鳍起点距离(X14)、臀鳍起点至背鳍基部末端距离(X21)3个指标对鱼体纯重影响最大，可以作为辅助选育的最优表型；COI基因序列分析共得到26种单倍型，单倍型基因多样性(Hd)为0.984，核苷酸多样性(Pi)为0.0386，平均核苷酸差异（k）为20.7718，显示出较高的遗传多样性水平；系统发育树显示黑龙江茴鱼、欧洲茴鱼和北美茴鱼各自形成完整的进化枝，北极茴鱼可能存在不同的进化单元，新疆分布的北极茴鱼与短头茴鱼和蒙古茴鱼亲缘关系较近。

关键词：北极茴鱼形态特征通径分析 COI基因系统发育额尔齐斯河

“三新”背景下高中政治课堂教学的应用策略研究

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进展 2024年第10期 29-31页

作者：秦淑燕福建省漳浦第一中学福建漳州363000

本研究旨在深入探讨“三新”背景下高中政治课堂教学的应用策略,以满足当代政治教育的要求,“三新”政策对高中政治课堂教学产生了深刻影响。研究发现,“三新”背景下的高中思想政治课堂教学仍存在学生主体地位缺失、教师专业素养失衡... 详细信息

本研究旨在深入探讨“三新”背景下高中政治课堂教学的应用策略,以满足当代政治教育的要求,“三新”政策对高中政治课堂教学产生了深刻影响。研究发现,“三新”背景下的高中思想政治课堂教学仍存在学生主体地位缺失、教师专业素养失衡、德育功能被忽视和课堂教学评价单一等问题。基于此,为解决这些问题,本研究提出了一系列高中思想政治课堂教学优化策略,以期全面推进高中思想政治教育的发展。

关键词： “三新”背景高中政治课堂教学研究分析