猪Zfy基因干扰载体的构建及性控效果的验证

作     者：秦炳燕 孙丽荣 张永生 李超程 席继峰 王香祖 贾斌 

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 内蒙古通辽市农畜产品质量安全中心内蒙古通辽028000 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第48卷第12期

页      面：53-57页

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：新疆生产建设兵团科技型中小企业技术创新基金项目(2014AB012) 

主　　题：Zfy基因 性别控制 RNAi 精子发生 

摘      要：为了探究Zfy基因在性别控制中的作用,试验运用RNAi技术,设计并合成了2对靶向猪Zfy基因的shRNA序列,构建了重组质粒(shRNA-a,shRNA-b),将其转染到体外培养的猪生精细胞中,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测生精细胞中Zfy基因mRNA的表达,然后选取4头健康公猪进行体内干扰试验,分为A组和B组,每组2头,将重组质粒注射到猪睾丸中,A组注射shRNA-a,B组注射shRNA-b,对照组为试验猪场不进行注射的公猪,观察子一代性别比例。结果显示,qRT-PCR检测shRNA-a和shRNA-b对生精细胞中Zfy基因的抑制效率分别为33%(P0.05)。本试验成功构建干扰猪Zfy基因的重组质粒,并应用于动物试验,证实Zfy基因可以影响后代的性别比例,在动物性别控制中发挥一定的作用,但导致体内干扰试验结果与预期结果相反的原因仍需进一步验证。