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c-myc基因沉默对PM2.5染毒L02肝细胞癌基因和凋亡基因表达的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2020年第9期38卷 657-663页

作者：秦双建王冰玉李柏茹郑凯蔡颖李闰冰曾明肖芳徐新云中南大学湘雅公共卫生学院长沙410078 深圳市疾病预防控制中心环境与健康所 518055 南华大学公共卫生学院衡阳421001

目的构建c-myc基因沉默肝细胞株,研究c-myc基因沉默对PM2.5染毒L02肝细胞凋亡基因和癌基因表达的影响。方法根据GenBank提供的c-myc基因mRNA序列,设计合成3条干扰序列,将重组慢病毒载体转染L02肝细胞。利用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋... 详细信息

目的构建c-myc基因沉默肝细胞株,研究c-myc基因沉默对PM2.5染毒L02肝细胞凋亡基因和癌基因表达的影响。方法根据GenBank提供的c-myc基因mRNA序列,设计合成3条干扰序列,将重组慢病毒载体转染L02肝细胞。利用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blotting)对c-myc基因沉默效果进行鉴定。用L02肝细胞、c-myc基因沉默细胞作为试验对象,用浓度为50μg/ml的PM2.5水溶物和10μmol/L阳性对照Cr^6+染毒24 h即PM2.5组、Cr^6+组,同时设立空白对照组;荧光定量PCR检测癌基因(c-myc、c-fos、k-ras、p53)和凋亡基因[半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、Caspase-9]的mRNA相对表达水平;Western blotting检测癌基因和凋亡基因的蛋白质表达水平。结果与正常L02肝细胞比较,c-myc基因沉默细胞的c-myc基因表达明显受到抑制,其mRNA表达量下降81%。c-myc蛋白表达下降70%(P<0.01)。与正常L02肝细胞比较,PM2.5水溶物染毒组c-myc、c-fos、k-ras表达水平分别下降84.1%、45.4%、54.6%,p53表达升高192.9%、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达分别下降24.4%、36.1%、60.9%(P<0.05)。Cr^6+阳性对照组c-myc、c-fos、k-ras表达分别下降72.1%、82.2%、54.0%,p53表达升高250.0%,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达分别下降34.6%、36.0%、68.9%(P<0.05)。与正常L02肝细胞比较,PM2.5染毒组c-myc和c-fos蛋白表达量升高,p53蛋白表达量下降,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达升高(P<0.05);与c-myc基因沉默细胞比较,PM2.5染毒组c-myc和c-fos蛋白表达量下降,p53蛋白表达量上升(P<0.05)。结论PM2.5可引起L02肝细胞癌基因和凋亡基因表达水平明显升高,c-myc基因沉默在一定程度上能抑制PM2.5对凋亡基因和癌基因的激活作用。

关键词：颗粒物细颗粒物肝细胞基因沉默癌基因凋亡基因

p38MAPK基因沉默对PM2.5染毒肝细胞后癌基因和凋亡基因表达的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2020年第10期38卷 721-725页

作者：王冰玉秦双建李闰冰李柏茹蔡颖郑凯徐新云谢红卫深圳市疾病预防控制中心环境与健康所 518055 南华大学公共卫生学院衡阳421001 中南大学湘雅公共卫生学院长沙410078

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因沉默对大气细颗粒物(PM2.5)染毒肝细胞(L02细胞)相关基因表达的影响。方法于2019年6至9月,根据GenBank提供的p38MAPK基因序列,设计合成3条干扰序列,退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中,将重组慢病... 详细信息

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因沉默对大气细颗粒物(PM2.5)染毒肝细胞(L02细胞)相关基因表达的影响。方法于2019年6至9月,根据GenBank提供的p38MAPK基因序列,设计合成3条干扰序列,退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中,将重组慢病毒载体转染L02细胞。用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)法对p38MAPK基因沉默效果进行鉴定。用浓度为50μg/ml的PM2.5水溶物和10μmol/L阳性对照Cr^6+分别染毒L02细胞、p38MAPK基因沉默细胞24 h,同时设立空白对照组。用荧光定量PCR检测癌基因(c-fos、c-myc、k-ras)、抑癌基因(p53)和凋亡基因(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)的相对表达水平。结果p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK基因和蛋白表达水平较正常L02细胞明显下降(P建成功。与空白对照组比较,PM2.5染毒L02细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平升高,抑癌基因p53表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与PM2.5染毒L02细胞组比较,PM2.5染毒p38MAPK基因沉默细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平下降,抑癌基因p53表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PM2.5对L02细胞癌基因、抑癌基因和凋亡基因表达有明显影响,而p38MAPK基因沉默可抑制PM2.5对L02细胞的影响。

关键词：肝细胞基因沉默细颗粒物雾霾凋亡基因癌基因

大气PM_( 2.5)对支气管上皮细胞凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响

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环境与健康杂志 2021年第3期39卷 189-192页

作者：王冰玉李闰冰蔡颖徐新云郑凯秦双建李柏茹深圳市疾病预防控制中心环境与健康所广东深圳518055 南华大学公共卫生学院中南大学湘雅公共卫生学院

目的探讨深圳地区大气PM_(2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响。方法分别以0、10、50μg/ml PM_(2.5)悬液染毒HBE细胞,并设阳性对照组(10μmol/L Cr^(6+)),以实时荧光定... 详细信息

目的探讨深圳地区大气PM_(2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响。方法分别以0、10、50μg/ml PM_(2.5)悬液染毒HBE细胞,并设阳性对照组(10μmol/L Cr^(6+)),以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、Bcl-2和DNA损伤修复基因hOGG1、h MTH1的mRNA表达水平变化,以Western blot法检测目的蛋白质的表达变化。结果与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、hOGG1、hMTH1基因表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2基因表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot实验结果显示,与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组的caspase-3、caspase-8、caspase-9、hOGG1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bax和hMTH1蛋白在50μg/ml染毒组及阳性对照组表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);Bcl-2蛋白在10、50μg/ml染毒组及阳性对照组则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PM_(2.5)染毒引起HBE细胞中凋亡基因、DNA损伤修复基因表达升高,抑凋亡基因表达降低,提示PM_(2.5)对凋亡基因和DNA损伤基因表达具有明显影响。

关键词： PM_(2.5) 人支气管上皮细胞凋亡基因 DNA损伤基因表达

南北两城市大气PM_(2.5)中金属元素和阴阳离子分布特征

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环境与健康杂志 2020年第4期37卷 344-346页

作者：马起山李闰冰蔡颖秦双建李柏茹秦逍云徐新云深圳市疾病预防控制中心健康教育所广东深圳518055 南华大学公共卫生学院中南大学湘雅公共卫生学院

目的分析南北两城市PM_(2.5)样品金属元素和阴阳离子含量水平与地区差异。方法2017—2018年在深圳市和太原市设立监测点,每天采样24 h,应用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定PM_(2.5)样品中金属元素,应用离子色谱法检测PM_(2.5)样品... 详细信息

目的分析南北两城市PM_(2.5)样品金属元素和阴阳离子含量水平与地区差异。方法2017—2018年在深圳市和太原市设立监测点,每天采样24 h,应用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定PM_(2.5)样品中金属元素,应用离子色谱法检测PM_(2.5)样品阴、阳离子。结果深圳市和太原市PM_(2.5)中金属元素含量排序有所不同,深圳市2017—2018年合并PM_(2.5)中金属元素排序前10位:Al>Pb>Mn>Cr>Cu>V>Ce>As>Ni>La。太原市2017—2018年合并PM_(2.5)中金属元素排序前10位:Al>Mn>Pb>Cr>Cu>As>Ni>Ce>V>Cd。太原市PM_(2.5)中Pb、Al、As、Ni、Mn含量明显高于深圳市PM_(2.5),差异有统计学意义(PMg^(2+)>NH4^(+)>K^(+)>Ca^(2+),太原市PM_(2.5)中阳离子浓度排序是Na^(+)>NH_(4)^(+)>Mg^(2+)>K^(+)>Ca^(2+),两个城市PM_(2.5)中阴离子浓度排序相同,均为SO_(4)^(2-)>NO_(3)^(-)>Cl^(-)>PO_(4)^(3-)。比较2017—2018合并的检测结果发现,太原市NH4+浓度高于深圳,而深圳市Na^(+)、NO_(3)^(-)、Cl^(-)和PO_(4)^(3-)浓度高于太原,差异有统计学意义(P<0.05)。结论深圳市和太原市PM_(2.5)含有危害人体健康的多种金属元素;太原市的大气污染情况比深圳严重,应进一步加强大气污染防控。

关键词： PM_(2.5) 金属元素阴离子阳离子大气污染

基于RBL-2H3细胞脱颗粒抑制作用的体外抗过敏活性益生菌的筛选及鉴定

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食品科学 2024年第6期45卷 55-63页

作者：马丁秦双霞郝慧超邓放明赵玲艳湖南农业大学食品科学技术学院湖南长沙410128 湖南农业大学长沙现代食品创新研究院湖南长沙410128

为探究乳酸菌的抗过敏活性,本研究采用传统分离技术从发酵蔬菜中获得乳酸菌,并进行益生菌体外评价,结合RBL-2H3细胞脱颗粒抑制实验筛选具有抗过敏活性的益生菌。结果表明,从发酵蔬菜中分离的4株菌株表现出良好的益生特性和安全性;所选4... 详细信息

为探究乳酸菌的抗过敏活性,本研究采用传统分离技术从发酵蔬菜中获得乳酸菌,并进行益生菌体外评价,结合RBL-2H3细胞脱颗粒抑制实验筛选具有抗过敏活性的益生菌。结果表明,从发酵蔬菜中分离的4株菌株表现出良好的益生特性和安全性;所选4株乳酸菌对RBL-2H3细胞脱颗粒释放β-己糖胺酶均具有较高的抑制作用,并对RBL-2H3细胞脱颗粒释放组胺、肿瘤坏死因子-α和白介素-4均有明显的下调作用,具有作为抗过敏活性益生菌的可能性。4株菌株经16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌2株、发酵乳杆菌和副干酪乳杆菌各1株。

关键词：乳酸菌 RBL-2H3细胞益生特性脱颗粒抗过敏活性

哈萨克族马具装饰纹样设计因子提取及其在皮革制品中的应用研究

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皮革科学与工程 2024年第6期 96-103页

作者：李韶君邓富泉许杰婷秦双怡叶安乐陕西科技大学设计与艺术学院

哈萨克族马具装饰纹样是哈萨克族文化中不可或缺的重要组成部分，蕴含独特的民族特色和艺术魅力。文章以哈萨克族马具装饰纹样为研究对象，系统分析其艺术特征，并运用用户感性语义评价实验提取典型纹样因子和色彩因子，分析消费者对哈... 详细信息

哈萨克族马具装饰纹样是哈萨克族文化中不可或缺的重要组成部分，蕴含独特的民族特色和艺术魅力。文章以哈萨克族马具装饰纹样为研究对象，系统分析其艺术特征，并运用用户感性语义评价实验提取典型纹样因子和色彩因子，分析消费者对哈萨克族马具装饰纹样的情感偏好所具有的共性和特性。将创新衍生图案应用于现代皮革制品设计中，使产品符合现代审美认知，同时具有民族特色与文化内涵，不仅有利于哈萨克族纹样的传承与创新，也为其他民族纹样在皮革制品领域的创新应用提供了研究思路和实践方法。

关键词：皮革制品马具装饰纹样用户感知因子分析哈萨克族

同方期刊数据库

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财务管理在建筑施工项目成本控制中的应用

中文科技期刊数据库（全文版）经济管理 2024年第3期 0104-0107页

作者：秦双中交二航局第四工程有限公司安徽芜湖241000

近年来,随着社会经济的不断发展,建筑施工项目在我国各地如雨后春笋般涌现。然而,由于建筑施工项目规模庞大、周期长、成本高等特点,对项目财务管理提出了更高的要求。财务管理在建筑施工项目中的应用,成为了确保项目顺利进行和控制成... 详细信息

近年来,随着社会经济的不断发展,建筑施工项目在我国各地如雨后春笋般涌现。然而,由于建筑施工项目规模庞大、周期长、成本高等特点,对项目财务管理提出了更高的要求。财务管理在建筑施工项目中的应用,成为了确保项目顺利进行和控制成本的重要手段。本文首先对当前财务管理在建筑工程项目成本控制中的重要作用进行分析,探究财务管理在我国建筑施工项目成本控制应用中存在的问题,并提出加强财务管理在建筑施工成本控制中应用的对策,以期能够为相关研究提供借鉴。

关键词：财务管理建筑工程成本控制

PM2.5染毒HBE细胞前后差异表达的microRNAs及其生物信息学分析

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癌变．畸变．突变 2020年第5期32卷 355-362页

作者：蔡颖李闰冰郑凯秦双建李柏茹张朝晖徐新云深圳市疾病预防控制中心广东深圳518055 南华大学公共卫生学院湖南衡阳421001 中南大学湘雅公共卫生学院湖南长沙410078

目的:采用microRNA(miRNA)测序和生物信息学方法,分析大气细颗粒物(PM2.5)染毒人支气管上皮HBE细胞前后差异表达的miRNAs,预测差异miRNAs的生物学功能和信号转导途径。方法:用50μg/mL的PM2.5混悬液染毒HBE细胞,以未染毒组作为对照组,处... 详细信息

目的:采用microRNA(miRNA)测序和生物信息学方法,分析大气细颗粒物(PM2.5)染毒人支气管上皮HBE细胞前后差异表达的miRNAs,预测差异miRNAs的生物学功能和信号转导途径。方法:用50μg/mL的PM2.5混悬液染毒HBE细胞,以未染毒组作为对照组,处理24 h后提取总RNA样品,Small RNA样品预处理试剂盒构建文库,并利用illumina HiSeq^TM 2500/MiSeq测序平台进行高通量测序。以调整后P建相互作用网络图,鉴定了miR-371b-3p、miR-371a-5p、miR-27a-3p、miR-7-5p、miR-372-3p等相互作用数量前11位的核心miRNAs,以及3个核心靶基因(VEGFA、MAPK3、CCR5)。结论:PM2.5染毒HBE细胞后引起了27个miRNAs的差异表达,涉及PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路及MAPK信号通路等与癌症发生发展相关的重要信号通路,其中筛选了11个核心miRNAs和3个核心基因,为深入研究PM2.5致癌毒理作用机制提供了实验依据。

关键词：大气细颗粒物人支气管上皮细胞 microRNA 生物信息学信号通路

p38M APK基因对PM_(2.5)染毒HK-2细胞部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响

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癌变．畸变．突变 2021年第2期33卷 129-135,142页

作者：李柏茹秦双建李闰冰蔡颖郑凯曾明肖芳徐新云中南大学湘雅公共卫生学院湖南长沙410078 深圳市疾病预防控制中心广东深圳518055 南华大学公共卫生学院湖南衡阳421001

目的:探讨p38MAPK基因对PM_(2.5)染毒人肾上皮细胞(HK-2)部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法:根据GenBank提供的p38MAPK mRNA序列,设计合成干扰序列,将重组慢病毒载体转染HK-2细胞,构建p38MAPK基因沉默细胞株。分别采用实时荧光... 详细信息

目的:探讨p38MAPK基因对PM_(2.5)染毒人肾上皮细胞(HK-2)部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法:根据GenBank提供的p38MAPK mRNA序列,设计合成干扰序列,将重组慢病毒载体转染HK-2细胞,构建p38MAPK基因沉默细胞株。分别采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot法检测p38MAPK mRNA和蛋白的表达水平鉴定沉默效果。用50μg/mL的PM_(2.5)混悬液分别染毒正常HK-2细胞和p38MAPK基因沉默细胞24 h,利用荧光定量PCR和Western blot检测癌基因c-myc,c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果:qPCR和Western blot检测结果显示,与正常HK2细胞比较,p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK mRNA的表达下降了58.50%,p38MAPK蛋白表达水平下降了51.33%(P建了p38MAPK基因沉默细胞株,PM_(2.5)可引起HK-2细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平升高,p38MAPK基因可能参与PM_(2.5)对HK-2细胞的毒性作用过程。

关键词： p38MAPK 大气细颗粒物人肾上皮细胞基因沉默癌基因凋亡相关基因