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人前列腺特异性膜抗原胞外区基因重组腺病毒的构建

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武汉大学学报（医学版） 2010年第2期31卷 255-258页

作者：匡幼林刘修恒祝恒成翁小东陈志远江波涛陈晖刘东山沈昊武汉大学人民医院泌尿外科湖北武汉430060

目的:体外构建和表达人前列腺特异性膜抗原胞外区(tPSMA)基因重组腺病毒。方法:首先设计一对含BglⅡ和HindⅢ酶切位点的tPSMA引物,以质粒pCR3.1-Uni-hPSMA为模板,通过PCR扩增tPSMA并克隆到腺病毒穿梭质粒中,获得pAdTrack-CMV-tPSMA质粒... 详细信息

目的:体外构建和表达人前列腺特异性膜抗原胞外区(tPSMA)基因重组腺病毒。方法:首先设计一对含BglⅡ和HindⅢ酶切位点的tPSMA引物,以质粒pCR3.1-Uni-hPSMA为模板,通过PCR扩增tPSMA并克隆到腺病毒穿梭质粒中,获得pAdTrack-CMV-tPSMA质粒,将其与含有pAdeasy-1的BJ5183菌电转化,筛选阳性克隆,重组子经线性化后转染HEK293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达、RT-PCR、Western blot法检测目的基因tPSMA的表达。结果:成功构建了含tPSMA的重组腺病毒载体Ad-tPSMA,病毒滴度为2.0×1011pfu/L。结论:该重组腺病毒的构建为下一步研究用其制备树突状细胞疫苗基因治疗提供基础。

关键词：前列腺特异性膜抗原基因表达腺病毒

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输尿管镜并发输尿管粘膜撕脱的紧急处理

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第十六届全国泌尿外科学术会议

作者：刘修恒程帆祝恒成钱辉军吴天鹏武汉大学人民医院泌尿外科

目的:探讨输尿管镜并发输尿管粘膜撕脱的紧急处理方法。方法:输尿管镜并发输尿管粘膜撕脱9例,输尿管下段粘膜撕脱3例,中段4例,上段2例,粘膜撕脱长度为2—25cm,其中5cm以内2例,5—10cm 3例,10—15cm

关键词：

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后腹腔镜治疗重复肾输尿管畸形

后腹腔镜治疗重复肾输尿管畸形

粉防己碱对大鼠膀胱胶原纤维增生及相关形态学改变的影响

第十七届全国泌尿外科学术会议

作者：刘修恒匡幼林翁小东陈志远祝恒成武汉大学人民医院泌尿外科

目的探讨后腹腔镜下治疗重复肾输尿管畸形的方法和疗效。方法回顾性分析18例重复肾输尿管患者经后腹腔镜切除术后的的临床资料,统计手术时间、术中出血量、术后住院时间、术中和术后并发症及随访情况。

关键词：后腹腔镜重复肾输尿管畸形

来源： cnki会议评论

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中华泌尿外科杂志 1999年第12期20卷 746-748页

作者：祝恒成鲁功成肖传国熊希凯同济医科大学附属协和医院泌尿外科武汉430022 同济医科大学人体解剖教研室

目的　探讨粉防己碱（Ｔｅｔ）对膀胱出口梗阻（ＢＯＯ）大鼠膀胱胶原纤维增生及相关形态学改变的影响。　方法　将３０只ＳＤ大鼠分为假手术组、ＢＯＯ组、Ｔｅｔ组，术后６周分别观察其膀胱组织学、超微结构的变化并计算胶原纤... 详细信息

目的　探讨粉防己碱（Ｔｅｔ）对膀胱出口梗阻（ＢＯＯ）大鼠膀胱胶原纤维增生及相关形态学改变的影响。　方法　将３０只ＳＤ大鼠分为假手术组、ＢＯＯ组、Ｔｅｔ组，术后６周分别观察其膀胱组织学、超微结构的变化并计算胶原纤维含量。　结果　Ｔｅｔ组较ＢＯＯ组膀胱胶原纤维明显减少，平滑肌束及肌细胞间隙变窄，中间连接破坏减少。　结论　Ｔｅｔ能抑制膀胱胶原纤维增生。

关键词：膀胱出口梗阻粉防已碱胶原纤维增生

经尿道同期电切膀胱移行细胞癌合并前列腺增生的回顾性分析

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临床外科杂志 2008年第9期16卷 624-626页

作者：高瑞辉祝恒成刘修恒李壮志陶涛匡幼林武汉大学人民医院泌尿外科 430060

目的评价膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma,TCC)合并前列腺增生采取同期经尿道电切治疗的疗效。方法将患者分为A、B两组,A组25例实施单纯经尿道电切膀胱移行细胞癌,B组20例实施经尿道同期电切膀胱移行细胞癌及增生的前列腺,... 详细信息

目的评价膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma,TCC)合并前列腺增生采取同期经尿道电切治疗的疗效。方法将患者分为A、B两组,A组25例实施单纯经尿道电切膀胱移行细胞癌,B组20例实施经尿道同期电切膀胱移行细胞癌及增生的前列腺,比较术后A、B两组间复发率、进展率、复发时间、膀胱颈部及前列腺窝复发率的差异。结论所有患者随访12～48个月,平均随访25.4个月。A、B两组术后肿瘤复发率、复发时间、进展率、膀胱颈部及前列腺窝复发率的比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论膀胱移行细胞癌合并前列腺增生实施同期经尿道电切术是可行的,与单纯电切膀胱移行细胞癌相比并不增加肿瘤的复发。

关键词：膀胱移行细胞癌良性前列腺增生经尿道电切术复发

CpG寡聚脱氧核苷酸增强树突状细胞疫苗诱导的特异性抗前列腺癌作用

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中华实验外科杂志 2011年第6期28卷 873-876页

作者：胡建新匡幼林翁小东陈志远祝恒成江波涛刘修恒武汉大学人民医院泌尿外科 430060

目的观察CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）对截短的人前列腺特异性膜抗原（tPSMA）基因修饰的树突状细胞（DCs）诱导的抗前列腺癌效应。方法利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统，通过基因重组技术构建Ad—tPSMA及Ad—eGFP。将Ad-tPSMA和Ad．... 详细信息

目的观察CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）对截短的人前列腺特异性膜抗原（tPSMA）基因修饰的树突状细胞（DCs）诱导的抗前列腺癌效应。方法利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统，通过基因重组技术构建Ad—tPSMA及Ad—eGFP。将Ad-tPSMA和Ad．eGFP感染鼠源性DCs，用含10μg／L粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素（IL）-4和含10％胎牛血清（FCS）的RPMI1640培养基诱导培养6d后，然后再添加1mg／L的CpG—ODN体外培养1d，最后添加1mg／L的脂多糖（LPS）继续培养1d，使其成熟。流式细胞仪检测DCs细胞表型，CCK-8法检测混合淋巴细胞反应T细胞增殖能力，酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测T细胞分泌细胞因子[IL-2、干扰素（INF）-γ]的影响，CCK-8试剂检测T细胞特性杀伤靶细胞活性。结果CpG．ODN促进Ad—tPSMA感染的DCs（CpG／DCs-Ad—tPSMA）高表达MHCII（83．8±3．7）％、CD80（79．8±5．6）％和CD86（78．3±2．8）％，且刺激同种异体T细胞增殖能力明显高于DCs—Ad—tPSMA组、DCs—Ad—eGFP组和未转染的DCs组（P〈0．05）；培养上清中细胞因子IL-2（179．64±2．72）ng／L和INF．1（1581．75±28．61）ng／L，表达水平均明显高于DCs—Ad—tPSMA组、DCs．Ad．eGFP组和未转染的DCs组（P〈0．05）；CpG／DCs—Ad—tPSMA组诱导RM-1-tPSMA细胞特异性杀伤率为（55．3±1．2）％，明显高于DCs—Ad—tPSMA组（40．7±1．4）％、DCs—Ad—eGFP组（12．7±1．2）％和未转染的DCs组（10．8±1．7）％（P〈0．05）。结论CpG—ODN能增强PSMA基因修饰的DCs疫苗诱导的特异性抗前列腺癌效应。

关键词：前列腺癌树突状细胞 CpG寡聚脱氧核苷酸