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外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡促进神经元轴突的伸长

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4924-4930页

作者：孙海涛任春朋杨永涛黄永辉秦入结李震连云港市第一人民医院江苏省连云港市222000 江苏大学附属医院江苏省镇江市212000

背景:神经元轴突损伤可致神经功能障碍,促进轴突伸长有望在神经系统疾病治疗中发挥重要作用。目的:探究外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡(ectomesenchymal stem cells-derived extracellular vesicles,EMSC-EVs)能否促进神经元轴突伸... 详细信息

背景:神经元轴突损伤可致神经功能障碍,促进轴突伸长有望在神经系统疾病治疗中发挥重要作用。目的:探究外胚层间充质干细胞来源细胞外囊泡(ectomesenchymal stem cells-derived extracellular vesicles,EMSC-EVs)能否促进神经元轴突伸长。方法:(1)组织贴壁法获取鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,免疫荧光鉴定特异性标志物;超速离心法获取EMSC-EVs并进行鉴定;(2)EMSC-EVs(0,0.5,1.0,1.5 mg/mL)与PC12细胞共孵育72 h,CCK-8分析EMSC-EVs对PC12细胞的细胞毒性及增殖作用;(3)EMSC-EVs(1.0 mg/mL)与PC12细胞或神经元共孵育72 h,显微镜下观察轴突长度变化,实时荧光定量PCR及Western blot分析轴突相关标志物微管蛋白β3(早期)、生长相关蛋白43(中期)和神经丝蛋白200(成熟)表达变化,以探究EMSC-EVs是否能够促进PC12细胞或神经元轴突伸长。结果与结论:(1)所获取外胚层间充质干细胞大部分呈长梭形,少数呈不规则形,高表达间充质干细胞特异性标记物Nestin、CD44及Vimentin;所获取EMSC-EVs符合细胞外囊泡的生物学标准;(2)在0.5-1.5 mg/mL质量浓度范围内,EMSC-EVs促进PC12细胞增殖,且随浓度增加而增强;(3)EMSC-EVs促进PC12细胞及神经元轴突长度增加,促进轴突相关标志物微管蛋白β3、生长相关蛋白43和神经丝蛋白200的表达。这些结果说明,EMSC-EVs能够促进神经元轴突伸长。

关键词：间充质干细胞神经元 PC12细胞细胞外囊泡轴突伸长微管蛋白β3 生长相关蛋白43 神经丝蛋白200

淫羊藿苷含药血清促进3种细胞共培养体系中软骨细胞增殖和干细胞成软骨分化

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1371-1379页

作者：刘琪李林臻李玉生焦泓焯杨程张君涛天津中医药大学第一附属医院天津市300381 国家中医针灸临床医学研究中心天津市300381

背景:关节软骨损伤修复能力十分有限,组织工程技术为修复受损软骨提供了新的治疗方案,其中软骨细胞、骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞之间的相互影响和诱导作用是自体软骨损伤愈合的基础。目的:构建软骨细胞-骨髓间充质干细胞-滑膜... 详细信息

背景:关节软骨损伤修复能力十分有限,组织工程技术为修复受损软骨提供了新的治疗方案,其中软骨细胞、骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞之间的相互影响和诱导作用是自体软骨损伤愈合的基础。目的:构建软骨细胞-骨髓间充质干细胞-滑膜间充质干细胞共培养体系用以模拟软骨细胞体内微环境,并探究其最佳细胞接种比例,同时观察淫羊藿苷含药血清对该体系中软骨细胞增殖和干细胞成软骨分化的影响。方法:提取、培养、鉴定大鼠膝关节软骨细胞、骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞,按不同细胞接种比例构建软骨细胞-骨髓间充质干细胞-滑膜间充质干细胞非接触共培养体系,共培养72 h后观察软骨细胞增殖活性和表型能力,选择综合效应最佳的共培养体系;用淫羊藿苷溶液(0.25 mg/m L)灌胃新西兰大白兔制备淫羊藿苷含药血清,对照组共培养体系用含体积分数为10%胎牛血清、1%双抗的高糖DMEM培养液培养,实验组共培养体系在此基础之上加入体积分数为10%淫羊藿苷含药血清进行干预,24,48 h后检测两组软骨细胞增殖活性和Ⅱ型胶原表达,14 d后采用免疫荧光染色检测骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞成软骨分化情况。结果与结论:(1)3种细胞以不同比例共培养时均可正常贴壁生长,当软骨细胞、骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞接种比例为2∶1∶1时,共培养体系中软骨细胞表现出最佳增殖活性和表型能力;(2)与对照组相比,实验组培养24 h后软骨细胞增殖活性和Ⅱ型胶原表达显著升高(P<0.01),48 h后两组仍有差异(P<0.05),培养14 d后两组骨髓间充质干细胞和滑膜间充质干细胞出现明显的软骨分化,部分细胞呈现圆形或椭圆形,胞浆Ⅱ型胶原免疫荧光染色为阳性,实验组荧光强度明显高于对照组(P<0.01);(3)结果表明,以非接触共培养方法可以成功建立软骨细胞-骨髓间充质干细胞-滑膜间充质干细胞共培养体系且细胞比例为2∶1∶1时软骨细胞增殖活性和表型能力最佳;同时淫羊藿苷含药血清具有促进该体系中软骨细胞增殖及骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞成软骨分化的作用。

关键词：淫羊藿苷含药血清软骨细胞骨髓间充质干细胞滑膜间充质干细胞共培养细胞增殖 Ⅱ型胶原成软骨分化

PCR-SSCP法检测大肠癌APC基因MCR区段基因突变

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中国肿瘤临床 1997年第3期24卷 193-196页

作者：汝涛朱理玮李克敏天津市肿瘤医院腹科天津市300060 天津医科大学总医院普外科

以PCR-SSCP方法，分析30例大肠癌原发灶和15例正常粘膜组织的APC基因MCR区段的突变，发现60％（18／30）的大肠癌原发灶中存在APC基因MCR区段的突变。其突变率与肿瘤发生部位、临床病理分期、组织分化程度及淋巴结转移情况无关。结果表... 详细信息

以PCR-SSCP方法，分析30例大肠癌原发灶和15例正常粘膜组织的APC基因MCR区段的突变，发现60％（18／30）的大肠癌原发灶中存在APC基因MCR区段的突变。其突变率与肿瘤发生部位、临床病理分期、组织分化程度及淋巴结转移情况无关。结果表明：APC基因突变是大肠癌发生的早期改变，可见于不典型增生的粘膜。检测APC基因突变能预测腺瘤的癌变倾向，有助于早期发现大肠癌。

关键词：大肠肿瘤 ACP基因基因突变 PCR-SSCP法

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面向非结构化道路的可行驶区域语义分割

天津理工大学学报 2025年第2期41卷 105-112页

作者：朱俊涛刘佳琦杨璐天津理工大学天津市先进机电系统设计与智能控制重点实验室天津理工大学机电工程国家级实验教学示范中心

准确识别非结构化道路可行驶区域可为军用智能车辆无人作战局部自主决策及路径规划提供理论依据。针对非结构化道路边缘模糊、特征相似等特点，现有的分割算法难以满足军用智能车辆对其准确性识别的问题，文中提出了一种面向非结构化道... 详细信息

准确识别非结构化道路可行驶区域可为军用智能车辆无人作战局部自主决策及路径规划提供理论依据。针对非结构化道路边缘模糊、特征相似等特点，现有的分割算法难以满足军用智能车辆对其准确性识别的问题，文中提出了一种面向非结构化道路的可行驶区域语义分割算法(attention Transformer DeepLabv3+,ATD)。在编码特征提取中级联了卷积注意力(convolutional block attention module, CBAM)模块，在不损失语义分割识别精度的前提下，增强了语义信息在不同通道和空间维度的自适应像素权重，强化了复杂环境下的特征编码能力。在解码中引入了Transformer多头注意力(multi-head attention),加强了空间位置信息的关联性，实现了非结构化道路边缘的细粒度化推理。基于自建的约6 000张非结构化道路数据集进行对比实验，实验结果表明，较对比网络模型准确率平均提高了5.65%,交并比平均提高了4.20%。

关键词：非结构化道路语义分割卷积注意力 Transformer DeepLabv3+

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声波与雾化水滴联合作用增强燃煤PM_(2.5)脱除的实验研究

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中国电机工程学报 2009年第2期29卷 35-40页

作者：陈厚涛赵兵章汝心曹金祥沈湘林东南大学能源与环境学院江苏省南京市210096

基于声波夹带理论和重力沉降理论,建立了燃煤PM2.5在声波与雾化水滴联合作用下团聚清除的实验装置,对烟气中细颗粒物的团聚清除进行了实验研究。通过电称低压冲击器(electrical low pressure impactor,ELPI)在线实时测量烟气中颗粒浓度... 详细信息

基于声波夹带理论和重力沉降理论,建立了燃煤PM2.5在声波与雾化水滴联合作用下团聚清除的实验装置,对烟气中细颗粒物的团聚清除进行了实验研究。通过电称低压冲击器(electrical low pressure impactor,ELPI)在线实时测量烟气中颗粒浓度在外加作用前后的变化,得到了不同条件下细颗粒的团聚清除效果。结果表明,在声波单独作用及与外加雾化水滴联合作用下,系统对于燃煤烟气中颗粒数目浓度峰值粒径约为0.1μm的超细颗粒物均有很好的清除效果,且联合作用下的清除效率高于声波单独作用。当声场强度达到158.5dB时,联合作用下颗粒数目浓度清除效率达到了68%,比声波单独作用增加了21%。实验结果表明声波与外加种子颗粒联合作用能有效提高燃煤PM2.5的脱除效果。

关键词：声波团聚 PM2.5 种子颗粒联合作用

柞蚕EcR、USP和HK基因的克隆及表达研究

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柞蚕EcR、USP和HK基因的克隆及表达研究

作者：汝玉涛沈阳农业大学

学位级别：硕士

滞育(Diapause)是昆虫受到外界环境条件的刺激,通过稳定的遗传方式进行的一种预定静止的休眠方式,对昆虫应对不良环境,保障种群及个体生存有着重要的意义。柞蚕Antheraea pernyi是以蛹滞育的完全变态昆虫,具有较高的营养、药用及纺织价... 详细信息

滞育(Diapause)是昆虫受到外界环境条件的刺激,通过稳定的遗传方式进行的一种预定静止的休眠方式,对昆虫应对不良环境,保障种群及个体生存有着重要的意义。柞蚕Antheraea pernyi是以蛹滞育的完全变态昆虫,具有较高的营养、药用及纺织价值。因地理环境的不同而致使化性发生变化,分为一化性和二化性。柞蚕蛹的滞育有利于种茧保存,而滞育的解除控制着柞蚕生产的起始,因此柞蚕滞育解除机制的研究不仅对于柞蚕生产具有着十分重要的意义,而且对于阐明蛹滞育昆虫滞育机制也具有重要意义,并为防治蛹滞育昆虫提供新的思路。本研究以柞蚕为材料,采用分子生物学的研究方法,研究了柞蚕滞育激素调控中的蜕皮激素受体基因、超气门结合蛋白基因以及糖代谢调控中的己糖激酶基因在解除滞育及发育过程中发挥的作用,结果如下:1.柞蚕蜕皮激素受体和超气门结合蛋白基因的克隆及表达研究根据柞蚕转录组数据库设计引物,克隆了柞蚕蜕皮激素受体和超气门结合蛋白基因,分别命名为ApEcRB1(GenBanK登录号:KY411159)和ApUSP1(GenBank登录号:KY411160)。2个基因的ORF序列全长分别为1 758 bp、1 401 bp,编码585个、466个氨基酸。半定量RT-PCR检测这2个基因在精/卵巢、丝腺和脂肪体等组织中表达,其中在丝腺和脂肪体中表达量较高。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析2个基因在幼虫蜕皮前及化蛹前后呈现大幅度上调表达的规律。注射20-羟基蜕皮甾酮(20E)诱导启动滞育蛹发育,结果滞育蛹诱导组经过17 d羽化,比对照组滞育蛹提早羽化。滞育蛹中2个基因的表达量在注射20E后均明显下降,其中ApEcRB1在蛹发育后期的12 d内一直处于较低水平,但羽化前期其表达量急剧上升,蛹发育16 d(羽化前1 d)达到最高;ApUSP1基因的表达量从注射后8 d开始升高,至16 d时达到最高。以上结果表明蜕皮激素能够通过介导昆虫蜕皮激素受体和超气门结合蛋白基因的表达变化来控制柞蚕的生长、发育、变态。2.柞蚕滞育蛹解除滞育过程中己糖激酶基因的克隆及表达研究昆虫能够将消化吸收的葡萄糖在脂肪体中转化为海藻糖或作为糖原储存,当机体需要能量时,海藻糖再转化为葡萄糖进入糖酵解途径,己糖激酶(hexokinase,HK)在此转化过程中起着重要的作用。为研究柞蚕蛹解除滞育及发育过程中的糖类代谢规律,克隆了柞蚕2个己糖激酶同工酶基因,分别命名为ApHK1和ApHK2(GenBank登录号:KY624592,KY624593)。2个基因的ORF全长分别为1 455 bp、1 362 bp,编码484个、453个氨基酸。系统进化分析发现柞蚕HK1和HK2蛋白分布于2个不同的进化分支上,不同种类昆虫的同一类型的HK具有更高的同源性。柞蚕5龄幼虫各组织中,2个HK基因在脂肪体中的表达水平都较高,ApHK2在各组织中均有表达,分布比ApHK1更广,且在中肠、肌肉内也有较高表达。以一化性柞蚕滞育蛹脂肪体组织为材料,采用qRT-PCR分析长光照(17 h/d)处理柞蚕蛹滞育解除及发育过程中HK基因的表达规律,结果表明:2个HK基因的表达量在处理后21 d明显升高,其中ApHK2的表达量升高了3.1倍;化蛹后42 d,ApHK1的表达量升高了2.8倍,而ApHK2的表达量无显著变化。以上研究结果表明ApHK1和ApHK2在柞蚕光照解除滞育及发育过程中发挥着重要的作用,并且2个基因的调控功能因组织糖代谢途径的不同而有所不同。3.柞蚕滞育解除过程中己糖激酶活性及葡萄糖含量变化研究采用紫外分光光度计法测定了柞蚕蛹滞育及滞育解除过程中葡萄糖含量及酶活性变化,结果表明蛹脂肪体中己糖激酶的活性在长光照处理下高于对照组,前期呈现上升趋势,处理后28 d达到最高值,此后逐渐下降并于处理后35 d趋于稳定,而蛹血淋巴中葡萄糖含量呈先下降后上升的趋势,这与脂肪体中己糖激酶的活性具有相关性。研究结果显示在蛹发育中期己糖激酶酶活力及葡萄糖含量之间呈现出互补关系,即己糖激酶的活性增强,血淋巴中葡萄糖的含量减少。

关键词：柞蚕滞育蜕皮激素受体超气门结合蛋白己糖激酶基因表达

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基于阻抗变换的非接触电压测量自校准方法

仪器仪表学报 2023年第3期44卷 137-145页

作者：黄汝金索春光张文斌朱俊宇邹湘祁昆明理工大学理学院昆明650504 昆明理工大学机电工程学院昆明650504

电容耦合式非接触电压测量在实际测量中,探头-导线之间的耦合电容受导线线径、绝缘材质、相对位置偏差的影响,造成分压关系难以确定从而无法准确重构电压。本文提出一种基于阻抗变换的非接触电压测量自校准方法,以实现在实际测量中传感... 详细信息

电容耦合式非接触电压测量在实际测量中,探头-导线之间的耦合电容受导线线径、绝缘材质、相对位置偏差的影响,造成分压关系难以确定从而无法准确重构电压。本文提出一种基于阻抗变换的非接触电压测量自校准方法,以实现在实际测量中传感器增益的自标定。首先介绍电容耦合电压测量的基本原理,从中凝练存在的问题并提出基于阻抗变换的自校准方法,随后通过仿真对系统参数进行校准精度影响分析并给出参数选取原则。在此基础上,开发传感器探头及电路拓扑。最后进行传感器样机精度测试、抗干扰能力测试、场景适应性测试,精度测试显示电压幅值最大相对误差为0.59%,相位相对误差为0.76%,抗干扰能力测试表明同轴探头对周围耦合电场具有良好的屏蔽作用。场景适应性测试显示在进行不同类型线路的测试中,最大相对误差为1.24%。

关键词：阻抗变换非接触自校准电压测量电容耦合

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文物修复与保护的探索与思考

有色金属（冶炼部分） 2025年第1期 I0001-I0001页

作者：薛宏涛南京博物院

当今社会,文物作为不可复制的文化遗产,具有深厚的历史和文化价值。而通过文物的修复与保护工作,能够有效防止文物因时间、环境、使用等因素的损坏,确保其长期保存,使后代能够从中汲取历史智慧和文化精髓。因此,文物修复与保护不仅仅是... 详细信息

当今社会,文物作为不可复制的文化遗产,具有深厚的历史和文化价值。而通过文物的修复与保护工作,能够有效防止文物因时间、环境、使用等因素的损坏,确保其长期保存,使后代能够从中汲取历史智慧和文化精髓。因此,文物修复与保护不仅仅是对物品的修复,更是对文化传承与历史记忆的守护。《中国文物保护与修复技术》一书正是通过对不同领域的文物进行分析,展示了与其相关的部分文物,揭示这些文物所包含的知识,确保文化遗产得以有效传承与保护。结合本书可以更好的分析文物修复与保护的探索,为文物保护提供科学依据和技术支持。

关键词：文物修复与保护文化遗产历史智慧文物保护历史记忆文化传承传承与保护文化精髓

无线局域网（802.11b）监测系统驱动程序设计和实现及若干技术研究

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无线局域网（802.11b）监测系统驱动程序设计和实现及若干技术研究

作者：祁利涛北京邮电大学

学位级别：硕士

无线局域网是计算机网络与无线通信技术相结合的产物，网络处理器是下一代网络的关键技术。本文介绍了作者在研究生学习期间就无线局域网监测系统和Intel网络处理器所做的研发工作，主要包括两个部分的内容，分别是：无线局域网(802.11b... 详细信息

无线局域网是计算机网络与无线通信技术相结合的产物，网络处理器是下一代网络的关键技术。本文介绍了作者在研究生学习期间就无线局域网监测系统和Intel网络处理器所做的研发工作，主要包括两个部分的内容，分别是：无线局域网(802.11b)监测系统驱动程序设计和实现，基于IXP2400的防火墙中网络地址转换子系统的设计和实现。全文也是按照这两部分内容组织安排的，这两部分内容介绍如下：第一部分无线局域网(802.11b)监测系统驱动程序设计和实现，首先介绍了课题背景、无线局域网和802.11b协议等基本理论，然后介绍了本监测系统框架结构和驱动程序功能，接着分别阐述了驱动程序在Windows系统和Linux系统下不同类型的驱动程序开发过程和功能实现。在此部分中，本人主要完成如下工作：针对Windows操作系统中网络驱动接口规范NDIS体系特点，开发完成基于网络驱动接口规范NDIS的协议层驱动程序，可以实现用于本项目的Linksys公司的无线网卡和接入点(AP)数据包的正确采集，在上层模块的工作下，能实现文件的重组和显示。并进一步研究了Miniport驱动程序的设计。基于Linux操作系统开放源代码的特点，利用netfilter框架，在本网卡设备的部分固件(firmware)代码和Linux内核修改的基础上，实现了针对本无线网卡的802.11b数据包的捕获。第二部分基于IXP2400的防火墙中网络地址转换子系统的设计和实现，首先介绍了网络处理器基础理论和防火墙关键技术，然后详细阐述了基于网络处理器的防火墙中网络地址转换(NAT)子系统的软件设计与实现。在此部分中本人主要学习了网络处理器、防火墙系统和网络地址转换(NAT)理论知识，掌握了intel公司的IXP2400网络处理器的操作和软件开发过程，参入并完成了网络地址转换(NAT)子系统的框架设计和多个数据表的功能实现。

关键词：无线局域网 802.11b 驱动程序网络处理器 IXP2400 防火墙网络地址转换(NAT)