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棕榈酸诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡的研究

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中华糖尿病杂志 2022年第5期14卷 490-497页

作者：秦璐黄逸婷李雨潇秦瑶石毓雯许馨予陈恒张梅南京医科大学第一附属医院内分泌科南京210029

目的探讨棕榈酸(PA)是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。方法将小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分为正常对照组、PA组(1.0 mmol/L)、PA+凋亡抑制剂(Z-VAD-FMK)组(5μmol/L)、PA+铁死亡抑制剂(Fer-1)组(5μmol/L)、PA+坏死抑制剂(N... 详细信息

目的探讨棕榈酸(PA)是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。方法将小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分为正常对照组、PA组(1.0 mmol/L)、PA+凋亡抑制剂(Z-VAD-FMK)组(5μmol/L)、PA+铁死亡抑制剂(Fer-1)组(5μmol/L)、PA+坏死抑制剂(Nec-1)组(5μmol/L),每组设置3个平行组。采用CCK8法检测细胞存活率,电镜观察细胞超微结构改变,FerroOrange试剂盒检测细胞内Fe^(2+)水平,丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA水平,流式法检测活性氧(ROS)水平,实时荧光定量PCR法检测凋亡基因半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)、坏死基因受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3(RIPK3)、铁死亡相关基因长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)、前列腺素内过氧化物合酶2(Ptgs2)、铁蛋白重链(FTH)、铁蛋白轻链(FTL)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA表达水平,Western blotting法检测活化型caspase3(cleaved caspase3)、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白表达水平。两组间比较采用t检验。结果与PA组相比,PA+Z-VAD-FMK组、PA+Fer-1组和PA+Nec-1组MIN6的存活率均更高(P<0.01)。PA组MIN6细胞电镜下可见凋亡、坏死、及铁死亡相关的形态学特征。与对照组相比,PA组MIN6细胞内Fe^(2+)相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更高;caspase3、RIPK3、ACSL4、Ptgs2、ALOX15的mRNA相对表达量均更高,FTH和GPX4的mRNA相对表达量均更低;cleaved caspase3、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更高(均P<0.01)。与PA组相比,PA+Fer-1组Fe^(2+)相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更低;ACSL4、Ptgs2、ALOX15的mRNA相对表达量均更低,FTH和GPX4的mRNA相对表达量均更高;ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更低(均P<0.01)。结论PA可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。

关键词：棕榈酸铁死亡 MIN6细胞

人锌转运体8嵌合抗原受体表达载体的构建与初步应用

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南京医科大学学报（自然科学版） 2020年第7期40卷 945-949,974页

作者：石毓雯王星张玲玉胡启桢秦瑶高威张梅南京医科大学第一附属医院内分泌科江苏南京210029 南通市第一人民医院内分泌科江苏南通226001 南京医科大学细胞生物学系江苏南京211166

目的:构建人锌转运体8(zinc transporter 8,ZnT8)嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)的慢病毒表达载体,为研究抗原特异性调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)在1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)自身免疫中的调节作用提供实验基础。方法:通过分子克隆及基因重组技术构建PLVX-EGFP-ZnT8 scfv慢病毒表达载体质粒,并制备ZnT8 scfvCAR慢病毒;利用ZnT8 scfv-CAR慢病毒感染Tregs,流式细胞术检测绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达确定慢病毒感染效率;细胞计数评估Tregs细胞增殖能力;流式细胞术检测增殖细胞中CD4、CD25、Foxp3和Helios的表达。结果:酶切鉴定和基因测序结果显示PLVX-EGFP-ZnT8 scfv慢病毒表达载体构建成功;质粒共转染293T细胞后制备浓缩慢病毒滴度为2.4×10^8TU/μL;ZnT8 scfv-CAR慢病毒转染Tregs后GFP表达率为43.2%±4.1%;体外培养14 d后ZnT8特异性Tregs增殖(634.3±92.5)倍,且高表达Foxp3(60.4%±3.5%)和Helios(64.3%±4.8%)。结论:成功构建了包含CAR结构的PLVX-EGFP-ZnT8 scfv慢病毒载体并包被ZnT8 scfv-CAR慢病毒;慢病毒转染后的CAR-Tregs体外扩增14 d仍能够维持ZnT8-CAR结构表达;CARTregs为一群CD4^+CD25^+细胞且高表达Foxp3和Helios。

关键词：锌转运体8 嵌合抗原受体 1型糖尿病抗原特异性调节性T细胞

中药补肾调冲方对雷公藤致DOR大鼠卵巢功能和生殖功能的影响

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中药补肾调冲方对雷公藤致DOR大鼠卵巢功能和生殖功能的影响

作者：石祺雯承德医学院

学位级别：硕士

目的:通过观察中药补肾调冲方对雷公藤致卵巢储备功能减退（DOR）模型大鼠卵巢功能和生殖功能及细胞PI3K、AKT蛋白表达的影响,探讨该方药治疗卵巢储备功能减退（DOR）的作用机制,为临床治疗提供依据。方法:筛选有正常动情周期的SD雌性... 详细信息

目的:通过观察中药补肾调冲方对雷公藤致卵巢储备功能减退（DOR）模型大鼠卵巢功能和生殖功能及细胞PI3K、AKT蛋白表达的影响,探讨该方药治疗卵巢储备功能减退（DOR）的作用机制,为临床治疗提供依据。方法:筛选有正常动情周期的SD雌性大鼠共84只,随机分为空白组、模型组、中药补肾调冲方高、中、低剂量组、坤泰胶囊组及结合雌激素片组各12只,每组再次随机均分为药效小组和生殖小组各6只。空白组正常喂养,其余各组大鼠采用雷公藤多苷片（中草药雷公藤经制药厂制造后的药品名称,本文简称:雷公藤）(50mg/kg*14d)灌胃建立DOR模型。造模结束后,模型组予超纯水（2ml/kg*36d）灌胃;中药高、中、低剂量组分别予补肾调冲方不同剂量（24g/kg*36d、12g/kg*36d、6g/kg*36d）灌胃;坤泰胶囊组与结合雌激素片组分别予坤泰胶囊（0.6g/kg*36d）、结合雌激素片（0.075mg/kg*36d）灌胃治疗。实验期间观察大鼠一般情况和动情周期。给药结束后,药效小组大鼠均取材,观察卵巢组织形态学变化,计数各级卵泡,ELISA法检测血清AMH、FSH、LH、E2、P等激素水平,免疫荧光和Western Blot法检测卵巢组织中PI3K、AKT蛋白表达情况。给药结束后,生殖小组大鼠进行雌雄合笼,观察妊娠、产仔情况。结果:1.大鼠一般情况:实验期间,空白组大鼠一般情况好,体重稳定增长。与空白组相比,其余各组大鼠在造模后多出现食水减少和毛发暗淡蓬乱、脱落的症状,少数大鼠表现明显的喜蜷卧,反应速度减慢,大便溏,体重均明显降低（P0.05）。3.大鼠血清激素水平:与空白组比较,模型组大鼠血清AMH、E2水平明显降低,FSH和LH则明显升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,中药高、中、低剂量组AMH、E2水平升高（P<0.05）,FSH、LH降低（P<0.05）。与坤泰胶囊组对比:高剂量组AMH水平明显升高（P<0.05）,FSH水平降低（P<0.05）;低剂量组AMH水平较低（P<0.05）,FSH水平升高（P<0.05）。与结合雌激素片组比较:中药高剂量组的AMH水平明显更高（P<0.05）;中药中剂量组的AMH水平升高（P<0.05）,LH水平降低（P<0.05）;中药低剂量组的FSH水平升高,E2水平降低（P<0.05）。4.大鼠卵巢组织形态学:与空白组相比,模型组大鼠始基卵泡、窦前卵泡、窦卵泡和黄体数目明显减少（P<0.05）,闭锁卵泡数则显著上升（P<0.05）。与模型组对比:治疗后中药高、中剂量组大鼠卵巢中各级卵泡数均显著增多（P<0.05）,闭锁卵泡数则减少（P<0.05）;中药低剂量组的始基、窦前和窦卵泡数均增加,闭锁卵泡数减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。与坤泰胶囊组对比:中药中剂量组闭锁卵泡数目偏多（P<0.05）;中药低剂量组始基和窦前卵泡数目较少,闭锁卵泡数较多,差异均有统计学意义（P<0.05）。与结合雌激素片组相比,中药高剂量组窦卵泡和黄体数明显增多（P<0.05）。5.大鼠卵巢组织中PI3K、AKT蛋白表达:免疫荧光法检测结果示:与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织内PI3K、AKT蛋白表达显著下调（P<0.05）。与模型组相比,中药高、中、低剂量组PI3K、AKT蛋白表达均明显上调（P<0.05）。与坤泰胶囊组相比:中药高剂量组PI3K、AKT蛋白表达较多（P<0.05）;中药低剂量组PI3K蛋白表达较少（P<0.05）。与结合雌激素片组对比,中药高、中剂量组PI3K、AKT蛋白表达均明显上调（P<0.05）。Western Blot法检测结果示:与空白组相比,模型组p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT蛋白表达显著下调（P<0.05）。与模型组对比:中药高、中、低剂量组的各蛋白表达均上调,差异有统计学意义（P<0.05）。与坤泰胶囊组相比:中药低剂量组p-PI

关键词：卵巢储备功能减退中药补肾调冲方雷公藤磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B

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浅析社交媒体的使用对个体心理健康的影响

采写编 2024年第1期 95-97页

作者：欧阳毓雯青海师范大学

社交媒体是人们生活中不可或缺的一部分,越来越多的人在社交媒体上发表自己的意见和观点。这给人们带来了许多积极或消极的影响,其中也包括心理健康问题。本文主要研究社交媒体的使用对人们心理健康的各方面影响。

关键词：社交媒体社会认知心理健康焦虑情绪

1990—2021年全球视角下慢性阻塞性肺疾病负担特征及预测研究

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疾病监测 2024年

作者：辛雯艳石正扬刘冬徐丽娜何小双石河子大学第一附属医院呼吸与危重症医学科石河子大学医学院预防医学系

目的本研究旨在描述全球慢性阻塞性肺疾病（COPD）的负担，为COPD的防治提供依据。方法基于全球疾病负担（GBD）2021数据定量描述1990—2021年分别处在不同等温线上的3组国家（中国和美国、南非和澳大利亚、伊拉克和葡萄牙）在归因于... 详细信息

目的本研究旨在描述全球慢性阻塞性肺疾病（COPD）的负担，为COPD的防治提供依据。方法基于全球疾病负担（GBD）2021数据定量描述1990—2021年分别处在不同等温线上的3组国家（中国和美国、南非和澳大利亚、伊拉克和葡萄牙）在归因于非适宜温度的COPD早死所致寿命损失年（YLL）率，并比较了6个国家的变化趋势。基于贝叶斯年龄-时期-队列模型预测这6个国家2022—2036年YLL率趋势。使用来自21个GBD地区的数据，通过限制性立方样条和分位数回归分析社会人口指数（SDI）与YLL率的关系。结果中国、美国、澳大利亚、伊拉克、葡萄牙、南非6个国家2021年非适宜温度导致COPD的年龄标准化YLL率分别为124.91/10万、63.57/10万、31.94/10万、31.38/10万、35.3/10万、72.31/10万。低温比高温对COPD负担的影响更大。6个国家中男性的YLL率均高于女性。预测2022—2036年澳大利亚、葡萄牙和南非的ASYR呈上升趋势，其余国家呈下降趋势。归因于非适宜温度COPD的YLL率较高的地区主要集中在SDI为0.39～0.70的地区。YLL率与SDI拟合的分位数回归有意义是P25、P75。结论在归因于非适宜温度的COPD疾病负担中，低温造成的负担更高，同时受性别和SDI的影响。2022—2036年，除澳大利亚、葡萄牙和南非外其余国家由于非适宜温度导致COPD的YLL率呈下降趋势。

关键词：慢阻肺非适宜温度等温线疾病负担预测

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管式无人机折叠机翼展开机构设计和仿真分析

火炮发射与控制学报 2024年

作者：贺小杰王惠方袁毓雯周晋祎岳嘉为西北机电工程研究所

针对管式无人机折叠机翼的展开过程，设计了一种以扭簧为驱动源的机翼展开机构。根据其结构和工作原理，建立了折叠机翼展开过程的运动学微分方程，并使用RecurDyn多体动力学软件建立动力学仿真模型，对机翼的展开和锁紧过程进行分析，... 详细信息

针对管式无人机折叠机翼的展开过程，设计了一种以扭簧为驱动源的机翼展开机构。根据其结构和工作原理，建立了折叠机翼展开过程的运动学微分方程，并使用RecurDyn多体动力学软件建立动力学仿真模型，对机翼的展开和锁紧过程进行分析，最终得到了机翼展开过程中的展开时间、展开角度、展开角速度、展开到位时的冲击载荷以及锁紧机构的位移和受力曲线。仿真结果表明，展开机构可以正常工作，机翼可以迅速展开到位，准确定位，锁紧机构能够锁定机翼不发生回弹，在保证展开时间的前提下，减小机翼展开到位时的速度，减小冲击力。

关键词：无人机折叠翼展开机构动力学仿真 RecurDyn

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基于人工智能的CT肺结节评估的研究进展

临床放射学杂志 2024年第3期43卷 476-479页

作者：石逸秋沈雨雯(综述) 刘可夫(审校) 南京医科大学附属苏州医院南京医科大学姑苏学院苏州市立医院苏州215008

肺癌是最常见的肺部原发性肿瘤,是严重威胁人类健康与生命的恶性肿瘤之一,是全球癌症相关死亡最主要的原因^([1])。由于人工智能对肺结节识别越来越准确、对肺结节分类也越来越细化,人工智能在肺结节诊疗过程中发挥着越来越大的价值。... 详细信息

肺癌是最常见的肺部原发性肿瘤,是严重威胁人类健康与生命的恶性肿瘤之一,是全球癌症相关死亡最主要的原因^([1])。由于人工智能对肺结节识别越来越准确、对肺结节分类也越来越细化,人工智能在肺结节诊疗过程中发挥着越来越大的价值。近年来,人工智能关于肺结节的研究已不局限于肺结节的检出和肺结节良恶性鉴别,最近的研究热点包括通过优化模型提高检出正确率、评估肺结节病理类型和分期、评估肺癌的基因突变情况、预测肺结节发展趋势等方面。

关键词：人工智能肺结节基因突变恶性肿瘤诊疗过程肺部原发性肿瘤病理类型肺癌

短穗兔耳草中3个化合物对大鼠慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎的作用及其机制研究

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中药新药与临床药理 2024年第6期35卷 822-831页

作者：朱继孝周琳张初玲熊雯雯程虹毓江西中医药大学中药资源与民族药研究中心江西南昌330004 江西中医药大学公共卫生教育与健康服务中心江西南昌330004

目的通过建立大鼠慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎模型,研究槲皮素、松果菊苷和芹菜素对p38MAPK/JNK、TLR4/MyD88/NF-κB和NLRP3信号通路的影响,探讨短穗兔耳草中单体化合物抗慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎的作用机制。方法将80... 详细信息

目的通过建立大鼠慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎模型,研究槲皮素、松果菊苷和芹菜素对p38MAPK/JNK、TLR4/MyD88/NF-κB和NLRP3信号通路的影响,探讨短穗兔耳草中单体化合物抗慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎的作用机制。方法将80只大鼠随机分为正常组,模型组,联苯双酯组(100 mg·kg^(-1)),秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1))及槲皮素(50、25 mg·kg^(-1))、松果菊苷(50、25 mg·kg^(-1))、芹菜素(50、25 mg·kg^(-1))各剂量组。每日上午按10 mL·kg^(-1)给药,下午以4 mL·kg^(-1)开始梯度给56度红星二锅头,每周增加2 mL·kg^(-1),直至10 mL·kg^(-1)保持,连续灌胃8周。于灌胃第53天复制痛风性关节炎模型,检测各时间段足趾容积。第8周末次给药后取血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β);蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肝脏和滑膜中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组各时间段大鼠足肿胀度均明显升高(P<0.05,P<0.01);血清中ALT、AST、ALP、TC、TG、IL-1β水平均明显升高(P<0.01);肝组织和滑膜组织中p-p38MAPK、p-JNK、MyD88、p-NF-κB、TLR4、NLRP3蛋白表达水平均有不同程度升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组在24 h足肿胀度呈现明显下降趋势(P<0.01);各给药组ALT、TC水平有不同程度下降(P<0.05,P<0.01);除松果菊苷低剂量组外,各给药组AST、ALP水平有不同程度下降(P<0.01);除槲皮素高剂量组外,各给药组TG水平有不同程度下降(P<0.01);各组大鼠肝脏组织及滑膜组织中p-p38MAPK、p-JNK、MyD88、p-NF-κB、TLR4、NLRP3蛋白表达量均下调(P<0.05,P<0.01)。结论短穗兔耳草中单体对慢性酒精性肝损伤合并痛风性关节炎大鼠模型表现出一定的异病同治的治疗效果,其可能是基于p38MAPK/JNK、TLR4/MyD88/NF-κB和NLRP3信号通路发挥治疗作用的。

关键词：短穗兔耳草槲皮素松果菊苷芹菜素慢性酒精性肝损伤痛风性关节炎 p38MAPK/JNK TLR4/MyD88/NF-κB NLRP3 大鼠

CT定量参数预测肺磨玻璃结节病理类型的价值

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中国肺癌杂志 2024年第2期27卷 118-125页

作者：石逸秋沈雨雯陈劼闫婉莹刘可夫南京医科大学附属苏州医院苏州市立医院放射科苏州215008 推想医疗科技股份有限公司北京100020

背景与目的肺磨玻璃结节(ground glass nodules,GGNs)的病理类型对临床治疗方案的选择具有十分重要的意义,本研究旨在探讨主观计算机断层扫描(computed tomography,CT)影像学征象及人工智能定量参数在预测GGNs病理类型中的价值。方法回... 详细信息

背景与目的肺磨玻璃结节(ground glass nodules,GGNs)的病理类型对临床治疗方案的选择具有十分重要的意义,本研究旨在探讨主观计算机断层扫描(computed tomography,CT)影像学征象及人工智能定量参数在预测GGNs病理类型中的价值。方法回顾性分析389例病理明确诊断的GGNs,其中,前驱腺体病变[包括非典型瘤样增生(atypical adenomatous hyperplasia,AAH)、原位腺癌(adenocarcinoma in situ,AIS)]138例,微浸润腺癌(microinvasive adenocarcinoma,MIA)109例,浸润性腺癌(invasive adenocarcinoma,IAC)142例。对结节的影像形态学特征进行主观评价,并利用肺结节人工智能系统自动获得定量参数。结果在主观CT影像学征象中,AAH+AIS、MIA和IAC组间结节最大径及毛刺征、分叶征、胸膜牵拉征出现的频率随病理级别增高而增加;在人工智能定量参数中,结节大小相关参数、CT值相关参数、实性占比、能量及熵随病理级别增高而增加。通过多因素Logistic逐步回归分析,人工智能定量参数在区分GGNs的病理类型中不亚于主观CT影像学征象。结论人工智能定量参数对区分GGNs的病理类型有一定的价值。

关键词：肺肿瘤磨玻璃结节病理类型计算机断层扫描