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以水疱性口炎病毒VSV为载体的新型寨卡病毒疫苗的研究

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以水疱性口炎病毒VSV为载体的新型寨卡病毒疫苗的研究

作者：石晓丹苏州大学

学位级别：硕士

寨卡病毒(ZIKV)与登革热病毒、西尼罗病毒、黄热病毒、日本脑炎病毒等同属于黄病毒属。该病毒于乌干达恒河猴体内首次分离得到,随后仅有零星报道。2015年ZIKV发生大规模爆发,随后疫情蔓延至美洲各国,相继有多个国家出现寨卡病毒感染病... 详细信息

寨卡病毒(ZIKV)与登革热病毒、西尼罗病毒、黄热病毒、日本脑炎病毒等同属于黄病毒属。该病毒于乌干达恒河猴体内首次分离得到,随后仅有零星报道。2015年ZIKV发生大规模爆发,随后疫情蔓延至美洲各国,相继有多个国家出现寨卡病毒感染病例。寨卡病毒引起的临床症状较轻,表现为乏力、发热、结膜炎、肌肉酸痛等,患者一般感染7天即可痊愈。然而,最近研究表明,寨卡病毒感染可引起新生儿的头小畸形症和成年的吉兰-巴雷综合症,因此受到广泛关注。寨卡病毒是一种蚊媒传播的单股正链RNA病毒,病毒呈二十面体结构,由囊膜蛋白(E)、膜蛋白(M)、核衣壳(C)和病毒基因组组成,其中E蛋白负责病毒与细胞受体结合及病毒的进入,其表面含有多种抗原表位,是疫苗研究的潜在靶点。水疱性口炎病毒VSV为弹状病毒科的单股负链RNA病毒,VSV载体疫苗由于具有操作简单、病毒滴度高、单次免疫即可产生免疫保护效果等优势,越来越多的被应用于疫苗的制备中。本文通过VSV反向遗传操作系统,构建表达ZIKV囊膜蛋白260-425氨基酸的重组病毒疫苗VSV-ZikaE260-425,并在小鼠体内对该疫苗诱导的免疫反应和保护性进行了检测。首先我们构建了编码E基因260-425氨基酸的质粒XN2-Zika E260-425,通过在BHK细胞共转辅助质粒pN、pL、pP包装产生重组病毒VSV-Zika E260-425。蛋白免疫印迹及间接荧光标记证明ZikaE260-425蛋白在感染细胞的表达。随后我们用此病毒通过滴鼻方式免疫小鼠,通过检测1、3、5周血清IgG及粪便IgA抗体水平,我们发现重组VSV-Zika E260-425能够在在免疫后一周可产生较高水平抗体IgA,第3周引起较高水平的抗体IgG,接着Brdu法检测表明,VSV-ZikaE260-425免疫组与对照组相比,可引起强烈的特异性淋巴细胞增值反应。T细胞IFN-γ染色的方法表明,VSV-ZikaE260-425组与对照组相比CD8T细胞IFN-γ的分泌增加。最后,我们通过腹腔注射寨卡病毒ZikaPRVABC59建立小鼠感染模型,Real-time结果表明寨卡病毒感染后在小鼠的脑、脊髓和睾丸组织中表达较高。接着,我们以ZikaPRVABC59腹腔注射免疫第五周的雄性BALB/c小鼠,取感染第4天脑、脊髓和睾丸组织,检测病毒复制量,结果表明VSV-ZikaE260-425可有效地降低ZIKV感染,起到特异性免疫保护作用。综上所述,我们成功制备了表达ZikaE260-425的重组病毒VSV-ZikaE260-425,并且该疫苗在小鼠体内成功的诱导了ZIKV特异性免疫应答,对感染小鼠能够起到保护作用,我们的研究为寨卡疫苗研发提供了一种新的策略。

关键词：寨卡病毒新生儿头小畸形症水疱性口炎病毒疫苗

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纳豆复合饮料的制备工艺及其品质的研究

纳豆复合饮料的制备工艺及其品质的研究

作者：石晓丹青岛科技大学

学位级别：硕士

近年来,人们对于纳豆及其相关产品的关注度只增不减,因其特有的纳豆激酶具有预防高血压、治疗血栓等多种医疗保健功效,具有重要的研究价值。本文以黄豆和脱脂奶粉为原材料,接种纳豆芽孢杆菌研制出一款新型纳豆复合饮料。通过对纳豆复合... 详细信息

近年来,人们对于纳豆及其相关产品的关注度只增不减,因其特有的纳豆激酶具有预防高血压、治疗血栓等多种医疗保健功效,具有重要的研究价值。本文以黄豆和脱脂奶粉为原材料,接种纳豆芽孢杆菌研制出一款新型纳豆复合饮料。通过对纳豆复合饮料的制备工艺及其品质进行探究,不仅改善了口感、提升纳豆激酶活力,更进一步开拓了纳豆产品多元化的市场,填补了纳豆复合饮料的市场空白。主要研究内容如下:(1)本文章从黑精灵纳豆、山大美味纳豆、燕京纳豆、滨梨纳豆四种畅销市售纳豆中提取纳豆芽孢杆菌,并进行筛选。利用酪蛋白培养基对目的菌株进行筛选,发现菌株BN-1-2活性最高,对其进行各项生理生化及分子生物学鉴定,各项实验结果表明菌株BN-1-2的特征符合枯草芽孢杆菌的特征表现,因此选用菌株BN-1-2作为后续研究所需菌株。(2)纳豆复合饮料的制备以黄豆和脱脂奶粉为原料,使用本实验筛选出的高活性纳豆芽孢杆菌BN-1-2进行发酵,并严格控制工艺条件。以纳豆激酶的纤溶活力及感官评分为指标进行判断,从单因素实验中得出,对纳豆复合饮料的影响较为显著的因素是发酵底物配比、纳豆芽孢杆菌接种量、发酵温度以及发酵时间,而初始p H对最终产品品质的影响可以忽略。采用响应面优化对纳豆复合饮料的发酵工艺进行优化,得到最佳工艺条件为:豆奶体积为1:1、纳豆芽孢杆菌接种量2%、37℃发酵16 h。优化后的饮品风味良好且纳豆激酶酶活高达205.46 U/m L,感官评分44.31分。(3)为提升纳豆复合饮料的稳定性,本实验以离心沉淀率为指标对单一稳定剂进行筛选,并通过测定静置分层率进行评价,发现黄原胶、魔芋胶和羧甲基纤维素钠对纳豆复合饮料的稳定效果明显,然后研究了不同稳定剂之间的相互协同作用,通过复配实验,得出最佳稳定剂添加组合:添加羧甲基纤维素钠0.20%、魔芋胶添加量0.15%、黄原胶添加量0.05%。按此比例进行调配后的复合饮料稳定性强且有效期内不会出现分层现象。最后对纳豆复合饮料进行了储藏实验,发现在4℃下保存复合饮料品质更佳,一个月内饮用为宜。(4)对发酵前后的纳豆复合饮料进行了一系列品质测定。纳豆复合饮料外观色泽呈乳白色,质地均匀无沉淀,有豆奶香气,口感滑润、细腻。饮料中发酵后多肽含量增多,更有利于人体吸收,活性物质含量增加,黄酮含量达3.29 mg/m L,多酚5.45 mg/m L,并且富含多种人体必需氨基酸,其中甜味和鲜味氨基酸含量在发酵后有所增加。复合饮料主要挥发性风味物质有25种,醇类物质、酯类物质及酮类物质为产品风味特征的主要贡献者。最后,对纳豆复合饮料的微生物指标按照国家食品安全标准进行了测定,符合GB 19302-2010中对发酵乳微生物指标的要求。

关键词：纳豆复合饮料发酵工艺纳豆激酶稳定性

基于WLAN组网技术的分布式测试网络的设计

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基于WLAN组网技术的分布式测试网络的设计

作者：石晓丹中北大学

学位级别：硕士

随着无线通信技术的迅猛发展,WLAN无线传输具有组网便捷、扩展性强、灵活性高的显著优势,被广泛应用于各大运营商、大型测试系统、工业现场、军事靶场中等领域。因此,对WLAN组网规划设计的研究具有重要的意义。本文结合WLAN组网技术的特... 详细信息

随着无线通信技术的迅猛发展,WLAN无线传输具有组网便捷、扩展性强、灵活性高的显著优势,被广泛应用于各大运营商、大型测试系统、工业现场、军事靶场中等领域。因此,对WLAN组网规划设计的研究具有重要的意义。本文结合WLAN组网技术的特点,研究了一套规范的WLAN组网设计规划标准,并应用于恶劣测试环境下场信号的采集与控制,搭建了一个采用集中式组网技术的分布式测试网络。本文首先研究了WLAN组网技术的发展与建设意义,分析对比了分布式组网技术与集中式组网技术的网络结构与优缺点。论文对WLAN组网的设计规划进行了深入探讨,重点标准化了组网方式与覆盖方式的选择、地址分配的规则、频率规划与干扰规避、损耗分析与预算,以及容量规划的计算方法。进一步将WLAN组网方案应用于压力场信号的无线测试中,搭建的分布式测试WLAN主要分为目标覆盖区域的分布式无线传输与中继无线传输。对控制中心、AP、测试节点的无线模块、天线进行了选择与设计。最后,对整体网络进行了性能测试,包括目标覆盖区域的有效覆盖范围、无线模块的挂载与断电重连、点对多点通信质量等指标的测试,以及中继无线传输的可靠传输距离的测试。经过实验验证,网络传输速率快、信号准确可靠,能够很好满足测试需求。

关键词： WLAN组网技术无线传输分布式测试

利福平耐药基因突变位点的分析及M-ARMS-PCR检测方法的建立

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利福平耐药基因突变位点的分析及M-ARMS-PCR检测方法的建立

作者：石晓丹第四军医大学

学位级别：硕士

背景研究结核性脑膜炎由结核杆菌引起的中枢神经系统感染是最严重的肺外结核。虽然结核菌的耐药率在结核性脑膜炎患者中明显低于肺部感染患者，但是多耐药结核性脑膜炎的患者会遗留更严重的神经系统后遗症或者直接死亡，给社会和家庭... 详细信息

背景研究结核性脑膜炎由结核杆菌引起的中枢神经系统感染是最严重的肺外结核。虽然结核菌的耐药率在结核性脑膜炎患者中明显低于肺部感染患者，但是多耐药结核性脑膜炎的患者会遗留更严重的神经系统后遗症或者直接死亡，给社会和家庭造成了严重的负担。患者常会缺乏快速准确的诊断和药物敏感性检测，而延误治疗，最终导致严重后遗症、产生多耐药结核或使多耐药结核杆菌更进一步发展成为广泛性耐药，使得结核控制产生了更严峻的挑战。WHO推荐结核杆菌感染患者需要早期接受正规，足量治疗，并且每个患者需接受药物敏感性检测性，并根据其耐药诊断，选择合理的药物治疗。规范的治疗在肺结核治疗中降低致残率和致死率并且提高预后和控制多耐药结核的发生率等方面都起到了明显的作用。但是目前结核性脑膜炎治疗中，由于没有明确的诊断和治疗指南，往往是根据肺结核的诊治方法及经验用药。且由于血脑屏障等因素，往往用药剂量和时程均大于肺结核，例如在结核性脑膜炎的经验治疗中利福平用药比肺结核治疗时，剂量大，时间长，没有规范治疗和用药则更有可能导致利福平耐药。但是由于结核性脑膜炎病例很难收集，脑脊液结核杆菌数量少，很难培养成功等现状，针对结核性脑膜炎患者的耐利福平结核分枝杆菌基因突变等机制研究及结核性脑膜炎耐药检测方法研究并不充分，更无法做到询证医学。所以多耐药结核性脑膜炎检测及机制还有需要更多的研究支持。目的鉴于肺结核与结核性脑膜炎治疗中利福平用药剂量及治疗时间上的差异，探究这两种患者中的利福平耐药的突变位点是否存在差异;建立一个快速，简单，高通量，低成本的检测方法可以检测结核分枝杆菌耐药突变基因，并用于结核性脑膜炎的诊断。方法通过测序的方法比较导致结核性脑膜炎的结核分枝杆菌利福平耐药基因突变机制与致肺结核结核分支杆菌耐药基因突变位点有无差别，并根据结核耐药数据库给予的结果，选取高度确信耐药位点，通过NCBI的GENE数据库获得rpoB基因（Rv0667），根据M-ARMS-PCR原理进行设计引物，设计五对引物分别为1037OF-1048OR;511IF-1478OR;516IF-1478OR;526IF-1478OR;531IF-1478OR，其中5个单独的上游引物，均与下游1478OR组成4对引物，分别形成半巢式PCR，产物大小分别：442bp、227bp、214bp、183bp、166bp。选取135例培养阳性并通过药敏检测的结核分支杆菌菌株，进行M-ARMS-PCR扩增，并应用QIAxcel仪器进行检测分析。同时针对这135例菌株的耐药决定区域进行DNA测序。应用药敏结果和测序结果对M-ARMS-PCR方法进行评价。结果本次研究通过测序的方法对比导致结核性脑膜炎利福平耐药的结核分枝杆菌与导致肺结核结核分枝杆菌利福平耐药rpoB基因突变的分布情况，102株利福平耐药的结核分枝杆菌的rpoB基因测序发现，63株导致肺结核的结核分枝杆菌的rpoB基因突变常见位点为：531（53.97%），526（20.63%），516（6.45%）。39株导致结核性脑脑膜炎的rpoB基因突变最常见位点为：531（61.54%），526（20.51%），533（7.69%）。建立了基于QIAxcel检测平台的利福平耐药基因rpoB检测的M-ARMS-PCR检测方法。这种方法能够单管5重选择性PCR扩增rpoB基因高度确信耐药四个密码子511、516、526、531的野生型基因，不扩增突变型。M-ARMS-PCR结果中，131例样品与DNA测序结果一致。用DNA测序方法评价M-ARMS-PCR方法的敏感度为94.2%，特异性为100%。药敏检测方法评价M-ARMS-PCR的方法的敏感度为86.57%，特异性为89.71%。结论通过本次试验了解了导致结核性脑膜炎的结核分支杆菌利福平耐药rpoB基因最常见的突变区域为531-533区域。其中531位密码子的Ser-Leu突变率占明显优势。建立的基于QIAxcel检测平台的M-ARMS-PCR的检测方法检测利福平耐药基因突变，可以在6个小时能完成96个样品检测达到了预期实验目的。具有便捷，快速，准确，早期，廉价的优点，适宜应用于贫困，医疗水平相对落后的地区。

关键词：结核性脑膜炎多耐药性结核利福平耐药基因 M-ARMS-PCR

释意理论视域下的第三届中国—东盟高等教育合作论坛汉英交替传译实践报告

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释意理论视域下的第三届中国—东盟高等教育合作论坛汉英交替传译...

作者：石晓丹广西民族大学

学位级别：硕士

本文是一篇关于第三届中国-东盟高等教育合作论坛的汉英交替传译实践报告。笔者和笔者的老师在此次论坛上负责汉英交替传译。报告拟从塞莱斯科维奇的释意理论视角对本次汉英交传实践进行分析讨论,探讨所选取翻译策略的有效性。释意理论... 详细信息

本文是一篇关于第三届中国-东盟高等教育合作论坛的汉英交替传译实践报告。笔者和笔者的老师在此次论坛上负责汉英交替传译。报告拟从塞莱斯科维奇的释意理论视角对本次汉英交传实践进行分析讨论,探讨所选取翻译策略的有效性。释意理论提出翻译的三角模式:即理解、脱离语言外壳和重新表达,强调译者应该准确传达发言者的意思和情感,而不是照搬语言的形式。在此次翻译实践中,笔者需要根据现场情况对发言人的信息做出有效筛选和整合,并运用了省译、意译、句式重组、增译等口译策略确保任务顺利完成。因此作者在译后分析选用释意理论指导分析过程,希望在口译策略选取方面给未来类似的交传项目提供一些可借鉴做法。本报告总共分四章,第一章是简介,第二章是翻译过程描述,第三章将在释意理论的视角下对案例进行分析。作为本实践报告的主体,本章先介绍了释意理论的主要内容,然后在释意理论的视角下,对笔者翻译过程中的案例进行分析。第四章是总结与反思,笔者在本章分析了此次翻译实践中存在的问题、发现和局限,并对日后的口译学习提出一些建议。基于实践和分析,笔者认为汉英交传中,省译、意译、句式重组和增译都是可选取的有效策略。通过对释意理论在汉英交传中的应用的初步探讨,笔者期待未来更多学者或译员对此进行更深入的研究,并希望本报告对日后的汉英口译交传实践有所帮助。

关键词：汉英交替传译口译策略释意理论三角模式

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中学历史课情感教育的实践与探索

中学历史课情感教育的实践与探索

作者：石晓丹东北师范大学

学位级别：硕士

二十一世纪是高科技、高速信息生成和传递的新时代。如何更有效地培养一代新人,以适应这一时代节奏和未来社会的需要已成为现代教育所面临的更严峻的新挑战。如何培养学生学习历史的兴趣,形成正确的情感态度价值观,促进学生的全面发展,... 详细信息

二十一世纪是高科技、高速信息生成和传递的新时代。如何更有效地培养一代新人,以适应这一时代节奏和未来社会的需要已成为现代教育所面临的更严峻的新挑战。如何培养学生学习历史的兴趣,形成正确的情感态度价值观,促进学生的全面发展,是值得我们每一位历史教师思考和研究的问题。情感教育是一种理念,是针对目前教育中重视认知、理性,忽视情感的状况而提出来的。它是教育的一部分,而不是一种特殊的、独立的教育形式。2001年7月国家教育部颁布了《基础教育课程改革纲要(试行)》,我国基础教育改革开始了。它的颁布和实施对我国基础教育的改革与发展带来了极为深远的影响,《历史课程标准》也随之问世。《历史课程标准》从各个层面给人耳目一新的感觉,特别是在课程标准的设置上,更是站在当今知识经济时代和学习化社会已形成的高度上,一切以强调学生全面发展的素质教育为本,确立了“知识与能力”、“过程与方法”、“情感态度与价值观”三个极具创新精神又具有操作可行性的教育目标,并将培养学生树立正确的“情感态度与价值观”定位为历史教学的核心价值。其中“情感态度与价值观”取代传统的政治思想教育,更具有理论的科学性与实践的可行性意义,也是落实新课程标准的难点。课程标准中的情感、态度和价值观是以情感为中心、以塑造学生完善的人格为目的的教学目标。然而对于许多任课教师来说,历史教学中情感态度和价值观教育是一门全新的目标,容易仁者见仁智者见智。“情感态度与价值观”既是情感教育的内容,又是情感教育的终极目标。本文从理论上进一步探索情感教育的内涵、原则及其作用,并结合多年的教学实践经验,强调了历史课实施情感教育的必要性和可行性,进一步研究了历史课实施情感教育的有效策略,包括树立情感意识,进行情感教学水平的分类及课节的制定,选择师生感情的交汇点,创建情感教育的新型师生关系,运用恰当的教学方法实施情感教育。通过理论与实践相结合,形成新的研究成果,旨在为推动中学历史课课堂教学改革、促进学生全面发展献出一份微薄之力。

关键词：历史课情感教育实践与探索

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A中小房地产企业内部控制优化研究

A中小房地产企业内部控制优化研究

作者：石晓丹南京信息工程大学

学位级别：硕士

二十大报告中,习近平总书记强调了“房子是用来住的、不是用来炒的”这一重要定位。当前,许多中小房地产企业仍旧“轻管理、重业务”,忽略了内部控制的重要性。评估中小房地产企业内部控制情况并提出改进策略,有助于降低经营风险,推动... 详细信息

二十大报告中,习近平总书记强调了“房子是用来住的、不是用来炒的”这一重要定位。当前,许多中小房地产企业仍旧“轻管理、重业务”,忽略了内部控制的重要性。评估中小房地产企业内部控制情况并提出改进策略,有助于降低经营风险,推动经济高质量发展。本研究以A中小房地产企业为例,共七个部分:第一部分介绍研究背景与意义;第二部分探讨了相关理论基础、文献综述、研究方法思路,总结了中小房地产企业的特点及其开发流程及内部控制存在的问题。第三部分通过梳理A企业内部控制管理现状,并开展定性评估。第四部分运用层次分析法确定A企业内部控制指标,运用综合模糊评价法对A企业内部控制现状开展定量评价。第五部分,将第三章定性评估结果与定量评价相结合,开展A企业内部控制评价。第六部分,结合A企业内部控制评价结果制定出符合实际情况的内部控制策略。第七部分是本研究的结论与展望。本研究的研究结论:本研究通过对A企业开发流程中立项、准备、建设、验收阶段的内控现状与问题开展定性分析,并基于内部控制的五大要素开展定量评估及解释。本研究发现,在内部控制体系中,“人”的角色至关重要。每位员工作为内部控制的关键参与者,其意识和参与度的提升对于企业有效地预防各种风险、增强业务效益以及保障员工利益具有极其重要的意义。本研究还发现A企业存在以下关键问题:一是企业治理结构尚待优化和完善;二是缺乏系统风险评估机制;三是内控活动执行力度不足;四是部门间协同与沟通机制不健全;五是缺乏专门的内审部门。为改善以上问题,本文针对性提出几点改进建议:一是在企业文化和制度层面强化内部环境建设;二是建立规范化的风险评估流程;三是加强对内部控制活动的执行力;四是构建完善的信息沟通渠道平台;五是建立健全内部审计部门。本文预期贡献,一是理论与实践的创新结合:本文借鉴了当前最权威的内部控制框架,并根据中小房地产项目的管理特点,使构建的内部控制评价指标体系更贴近中小房地产项目实际运作过程,有助于提高评价的适用性和精准度。二是量化方法的应用:采用模糊综合评价法对中小房地产企业内部控制评价指标进行模糊量化处理,并为我国中小房地产企业的内部控制理论与实践研究贡献参考和借鉴。

关键词：中小房地产企业内部控制优化研究综合模糊评价法

苏州平原河网区浅水湖泊冬夏季浮游植物群落与环境因子的典范对应分析

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环境科学 2008年第11期29卷 2999-3008页

作者：石晓丹阮晓红邢雅囡焦涛吴芸赵振华倪利晓河海大学环境科学与工程学院南京210098 南京大学地球科学与工程学院水科学系南京210093

2005年12月和2006年6月对苏州平原河网区57个浅水湖泊的浮游植物群落进行了调查,共检出浮游植物8门62属73种,浮游植物主要由绿藻、硅藻和蓝藻组成.冬季浮游植物平均丰度为254.88×104cells.L-1,硅藻门丰度占总丰度的62.3%;夏季浮游植物... 详细信息

2005年12月和2006年6月对苏州平原河网区57个浅水湖泊的浮游植物群落进行了调查,共检出浮游植物8门62属73种,浮游植物主要由绿藻、硅藻和蓝藻组成.冬季浮游植物平均丰度为254.88×104cells.L-1,硅藻门丰度占总丰度的62.3%;夏季浮游植物平均丰度为2704.28×104cells.L-1,蓝藻门丰度达93.5%.运用典范对应分析(canonical correspondence analysis,CCA)对调查范围内的57个样点62属浮游植物与11个环境因子关系进行研究.结果表明,水温、高锰酸盐指数、NO3--N和TN是影响苏州平原河网区浅水湖泊浮游植物群落分布的主要环境因子,在冬季,pH、NH4+-N及TP也是主要的影响因子;浮游植物中硅藻对环境变化具有较强的适应性,绿藻能耐受较高的高锰酸盐指数、氮磷营养盐和TOC浓度,而蓝藻对环境因子的响应有待进一步的研究.

关键词：浮游植物环境因子典范对应分析浅水湖泊平原河网区绿藻硅藻蓝藻

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基于Rete规则推理的告警关联性分析

北京邮电大学学报 2020年第2期43卷 23-28页

作者：杨杨石晓丹宋双霍永华陈连栋北京邮电大学网络与交换技术国家重点实验室北京100876 中国电子科技集团公司第五十四研究所石家庄050000 国网河北省电力有限公司信息通信分公司石家庄050022

针对现有规则推理算法无法实现在当前大规模复杂多变的网络环境中准确、实时地推理告警规则的问题,提出了一种改进的规则推理算法Im_Rete.该算法结合网络告警数据的特点,采用面向告警缺失的模糊推理策略和基于概率关联模型的事实传播策... 详细信息

针对现有规则推理算法无法实现在当前大规模复杂多变的网络环境中准确、实时地推理告警规则的问题,提出了一种改进的规则推理算法Im_Rete.该算法结合网络告警数据的特点,采用面向告警缺失的模糊推理策略和基于概率关联模型的事实传播策略,在提高推理准确性的同时平衡推理速度,能够更加有效地对告警进行关联分析.通过仿真实验进行对比分析,结果表明Im_Rete算法在推理速度和准确性方面均具有较好的性能.

关键词：告警关联性规则推理模糊逻辑